揮發(fā)脂肪酸含量的測定

揮發(fā)脂肪酸含量的測定A1試劑A1.1甘油:分析純。A1.250%（m/m）氫氧化鈉溶液：貯于密封的塑料瓶，使用時(shí)吸取清亮而沒有沉淀的上清液。A1.3硫酸溶液，c（1/2H2SO4）=1mol/LA1.4酚酞指示劑：取0.5g酚酞溶解于100mL95%（V/V）乙醇中。A1.595%（V/V）中性乙醇：使用前中和至酚酞?jiǎng)傦@粉紅色。A1.6氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液：c（NaOH）=0.1mol/L。A1.7沸石：將沸石粉碎過篩，取0.18mm-0.30mm大小的顆粒。A2儀器設(shè)備A2.1刻度量筒：100mL容量。A2.2吸量管：100mL和50mL容量。A2.3蒸餾儀：蒸餾儀的形狀和大小按圖A1所示，固定于蒸餾支架上。各組件的要求按A2.3.1-A2.3.6的說明。A2.3.1蒸餾頭：蒸餾頭的開關(guān)和大小見圖A2。蒸餾頭的管壁厚1.25mm±0.25mm。其長臂的球泡下部通過橡膠塞連接于蒸餾瓶。蒸餾頭側(cè)孔中心以上10mm處有較小的內(nèi)表面。A2.3.2平底蒸餾瓶：由硼硅玻璃制成。容量為310L±10mL。A2.3.3冷凝管：玻璃管型。內(nèi)管的外徑12mm±0.5mm，壁厚1.0mm±0.2mm；外套管的外徑30mm±2mm，壁厚1.25mm±0.25mm，冷凝管上端接口處的內(nèi)徑?20mm±1mm，壁厚為1.25mm±0.25mm。A2.3.4接收瓶：瓶的結(jié)構(gòu)類似容量瓶。瓶頸部標(biāo)有兩個(gè)刻度，一個(gè)為100mL，另一個(gè)為110mL。A2.3.5石棉板：直徑120mm，厚6mm，中心孔直徑約65mm。石棉板用于支持蒸餾瓶在加熱器上，防止火焰直接燒到石棉板以上的玻璃表面。蒸餾瓶的平底應(yīng)剛好接在石棉板的中心孔內(nèi)。A2.3.6電熱爐，2000W，熱力應(yīng)足夠大，能使蒸餾操作在規(guī)定時(shí)間內(nèi)完成。A2.4分液漏斗：250mL容量。A2.5滴定管：25mL容量，管的頂端連接裝有鈉石灰的保護(hù)管。A2.6中速濾紙：直徑為9cm。A3分析操作程序A3.1取樣，按GB/T5524進(jìn)行。A3.2稱取樣品：精確稱取樣品5.00g，精確至0.001g。送樣品入平底蒸餾瓶內(nèi)時(shí)，注意不要將樣品粘到瓶頸。平行稱取兩份樣品。A3.3樣品的制備A3.3.1皂化將20g甘油加入到稱取的樣品中，再用滴定管加入50%氫氧化鈉溶液2.0mL，滴定前應(yīng)注意抹去滴嘴處的碳酸鹽沉積物，放掉前幾滴氫氧化鈉溶液，之后才開始正式滴定。加入堿溶液以后即連續(xù)搖勻（包括使被粘附到瓶上部的所有油滴溶解），并在火焰上加熱使之完全皂化，液體變清亮。皂化完后用玻璃表面皿蓋好瓶口。皂化過程要注意避免過熱。7GB/T18009—××××將皂化液冷卻至90℃左右，用經(jīng)過沸騰了15min的沸水燙洗干凈的量筒，量取93mL同樣的沸水，立即例入皂化液中，注意要將量筒內(nèi)的沸水傾倒干凈。輕輕搖動(dòng)瓶內(nèi)的皂化液使之完全溶解。如果皂化液不清亮，表明皂化不完全。當(dāng)皂化液變黑而不是淺黃色時(shí)，表明加熱過度。遇到加熱過度這種情況時(shí)，要重新稱取樣品進(jìn)行新的皂化。在進(jìn)行以上操作的同時(shí)，用同樣數(shù)量的甘油代替油脂樣品進(jìn)行空白試驗(yàn)。具體操作同上。A3.3.2蒸餾取0.1g沸石加入裝有皂化液的蒸餾瓶中，再加入濃度為1.0mol/L的硫酸溶液50mL，然后立即將蒸餾瓶接到蒸餾儀上進(jìn)行加熱，使不溶于水的脂肪酸完全溶化，此時(shí)注意不要讓皂化液沸騰。然后加大火力，提高加熱速度，要求在19min-21min內(nèi)蒸餾出110mL蒸餾液。蒸餾過程要注意保持足夠快的冷卻水流，以保證流出的蒸餾液在18℃-21℃。收取到110mL蒸餾液后立即撤去熱源，取下接收瓶并用塞子塞好瓶口，小心不要搖動(dòng)瓶內(nèi)物。另用25mL量筒接收剩余的蒸餾液。將盛有蒸餾液的接收瓶置于15℃的水浴中冷卻10min，水浴的水面要與接收瓶的內(nèi)容物等高，液溫平衡后取出，擦干瓶外壁，慢慢倒轉(zhuǎn)瓶子，避免水不溶性脂肪酸粘附塞子。上下倒轉(zhuǎn)4-5次使瓶內(nèi)物混合均勻。混勻過程注意不要強(qiáng)烈振搖。8GB/T18009—××××A3.3.3過濾將干燥的中速濾紙緊密鋪貼于過濾漏斗上，將接收瓶中的全部溶液濾入干燥的分液漏斗內(nèi)，待水不溶性脂肪酸上浮到液體表面，小心放出下部的水層到干燥的250mL三角瓶中（要注意保證所有的不溶性脂肪酸均保留在分液漏斗內(nèi)），用塞子塞好。三角瓶中的水層溶液作為濾液1，供測定水溶性揮發(fā)脂肪酸值使用。取下蒸餾頭，用15mL冷水依次洗滌冷凝管的內(nèi)壁、接收剩余蒸餾液的量筒、接收瓶、濾器以及分液漏斗。該洗滌水再用濾紙過濾。濾器的大水應(yīng)能使15mL溶液正好充滿至濾器邊緣。重復(fù)以上洗滌過程兩次以上，每次的洗滌水都要完全濾干，保留濾紙，棄掉濾紙。為了完全溶解并收集水不溶性脂肪酸，取15mL中性乙醇代替以上的洗滌用冷水，重復(fù)以上的洗滌過程兩次以上。每次洗滌均經(jīng)冷凝管、量筒、接收瓶、濾器、分液漏斗，再濾紙。將每次乙醇濾液收集于干燥的250mL三角瓶中，塞好塞子。乙醇濾液作為濾液2，供測定水不溶性揮發(fā)脂肪酸值使用。A3.4樣品測定A3.4.1水溶性揮發(fā)脂肪酸值的測定：用吸量管吸取100mL濾液1于干燥的三角瓶中，加入0.2mL酚酞指示劑，用0.1mol/L的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至粉紅色，記錄耗用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液的毫升數(shù)。水溶性揮發(fā)脂肪酸值按式（A1）計(jì)算：水溶性揮發(fā)脂肪酸值=（V1-V2）×………（A1）式中：V1——滴定水溶性揮發(fā)脂肪酸值所消耗的0.1mol/L氫氧化鈉溶液毫升數(shù)，mL;V2——空白滴定所消耗的0.1mol/L氫氧化鈉溶液毫升數(shù)，mL;9GB/T18009—××××

——110mL接收液，經(jīng)處理過濾后，取100mL濾液供滴定時(shí)的校正值。A3.4.2水不溶性揮發(fā)脂肪酸值的測定：取全部濾液2（乙醇洗脫液），加入0.1mol/L的氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至粉紅色，記錄耗用標(biāo)準(zhǔn)氫氧化鈉溶液的毫升數(shù)，按式（A2）計(jì)算：水不溶性揮發(fā)脂肪酸值=（V3-V4）………（A1）式中：V3——滴定水不溶性揮發(fā)脂肪酸值所消耗的0.1mol/L氫氧化鈉溶液毫升數(shù)，mL;V4——空白滴定所消耗的0.1mol/L氫氧化鈉溶液毫升數(shù)，mL。如果在大氣