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文檔簡介
崗位演練白蛋白溶液透析法濃縮1任務(wù)二抗HER2單克隆抗體純化課前查閱資料,了解白蛋白及其性質(zhì)。查閱設(shè)計(jì)《白蛋白溶液透析法濃縮操作記錄》,在任務(wù)實(shí)施過程中同步填寫。使用透析濃縮技術(shù),將白蛋白溶液進(jìn)行10倍體積濃縮。設(shè)計(jì)實(shí)操設(shè)計(jì)(一)任務(wù)描述2(二)實(shí)訓(xùn)材料1.材料、試劑白蛋白溶液(采用紫外法測(cè)定蛋白濃度)、聚乙二醇(PEG)6000、透析袋(500~1000)2.儀器設(shè)備分析天平(感量0.01g)、磁力攪拌器、移液槍等3(三)實(shí)訓(xùn)操作4步驟一配制透析液配制35%濃度的聚乙二醇(PEG)6000溶液。步驟二制備濃縮蛋白液(1)透析袋的前處理。戴好PE手套,剪取適當(dāng)長度的透析袋(確保樣品裝入1/2體積即可)。先用50%乙醇煮30min,再用2%碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA(pH8.0)煮沸10min。用50℃蒸餾水洗沖2~5min,然后置于4℃蒸餾水中待用。若長時(shí)間不用,可入20%乙醇中,以防長菌。(三)實(shí)訓(xùn)操作5步驟二制備濃縮蛋白液(2)透析組裝裝置透析組裝裝置(三)實(shí)訓(xùn)操作6步驟二制備濃縮蛋白液(3)透析袋一端用透析袋夾夾緊,或用線繩扎緊。接下來對(duì)透析袋扎緊端進(jìn)行驗(yàn)漏。方法是,由開口端灌滿純化水,封閉開口端,用手指輕壓透析袋,檢查是否漏水。(4)取白蛋白溶液放入透析袋中,將開口同樣夾緊,放入盛有透析液的燒杯中。(5)每30min觀察透析袋中溶液減少情況。(6)當(dāng)透析帶內(nèi)溶液減少到約為原體積1/10時(shí),停止透析,用移液槍小心回收濃縮液。采用紫外法測(cè)定蛋白濃度。(7)用后的透析袋用生理鹽水浸泡以去掉蛋白,并用蒸餾水清洗干凈,然后置20%乙醇中保存。(四)任務(wù)分析與總結(jié)(1)離子層析和疏水層析有什么不同?(2)透析袋濃縮的原理是什么?(3)透析袋除了可以用作濃縮外,還可以用來脫鹽,請(qǐng)依據(jù)濃縮原理簡單設(shè)計(jì)一個(gè)脫鹽方案。(4)
的液流方向與超濾膜方向平行,阻塞物會(huì)被液流及時(shí)沖走,極大延緩了濾膜阻塞,是目前工業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用最廣泛的濃縮方法之一。(5)以下哪種技術(shù)可以用來去除溶液中的細(xì)菌()?
A.微孔過濾技術(shù)B.離心技術(shù)C.深層過濾技術(shù)7勿以惡小而為之,勿以善小而不為。惟
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