臨床醫(yī)學(xué)檢驗：分子生物學(xué)檢驗技術(shù)試題及答案預(yù)測題

臨床醫(yī)學(xué)檢驗：分子生物學(xué)檢驗技術(shù)試題及答案預(yù)測題1、單選

用下列方法進行重組體的篩選，哪項說明外源基因進行了表達()A．Southern印跡雜交B．Northern印跡雜交C．原位菌落雜交D．Western（江南博哥）印跡E．基因芯片技術(shù)正確答案：D2、名詞解釋

退火正確答案：指將溫度降至引物的TM值左右或以下，引物與DNA摸板互補區(qū)域結(jié)合形成雜交鏈。3、填空題

核酸分子雜交可分為：________________、________________、_____________________。正確答案：DNA與DNA雜交；DNA與RNA雜交；RNA與RNA雜交4、名詞解釋

細胞癌基因正確答案：存在于正常的細胞基因組中，與病毒癌基因有同源序列，具有促進正常細胞生長、增殖、分化和發(fā)育等生理功能。在正常細胞內(nèi)未激活的細胞癌基因叫原癌基因，當(dāng)其受到某些條件激活時，結(jié)構(gòu)和表達發(fā)生異常，能使細胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。5、判斷題

原位雜交常用來直接檢測細胞或組織中的DNA或RNA()正確答案：錯6、單選

基因異常表達檢測的技術(shù)是()A．熒光定量PCR技術(shù)B．western印跡技術(shù)C．Southern電泳技術(shù)D．原位雜交技術(shù)E．cDNA表達芯片技術(shù)正確答案：E7、問答題

描述HIV的復(fù)制過程。正確答案：HIV病毒屬于雙正鏈RNA病毒。其復(fù)制是一個特殊而復(fù)雜的過程。首先，HIV病毒體的包膜糖蛋白刺突先與細胞上的特異性受體結(jié)合，然后病毒包膜與細胞膜發(fā)生融合。其次，核衣殼進入細胞質(zhì)內(nèi)脫殼釋放其核心RNA以進行復(fù)制。病毒的逆轉(zhuǎn)錄酶以病毒RNA為模板，合成負鏈DNA，構(gòu)成RNA：DNA中間體，RNA鏈由RNA酶H水解去除，然后再由負鏈DNA合成正鏈DNA，并形成雙鏈DNA，此時基因組的兩端形成LT序列，并由細胞質(zhì)移行到細胞核內(nèi)。再次，在病毒整合酶的作用下，病毒基因組整合到宿主染色體中，這種整合了病毒雙鏈DNA稱為前病毒。當(dāng)病毒活化時在LTR作用下進行自身轉(zhuǎn)錄。最后，在宿主細胞的RNA多聚合酶作用下，病毒DNA轉(zhuǎn)錄形成RNA，再經(jīng)翻譯過程產(chǎn)生病毒多蛋白，最后裂解成各種結(jié)構(gòu)蛋白和調(diào)節(jié)蛋白，并組裝成病毒體釋放到細胞外。8、名詞解釋

Exon正確答案：是結(jié)構(gòu)基因中的編碼序列，往往被內(nèi)含子所間隔。9、名詞解釋

朊病毒正確答案：一種不同于病毒、類病毒、細菌、霉菌、寄生蟲的傳染性病原體，不含有核酸，單純由蛋白質(zhì)組成。10、填空題

復(fù)制叉上DNA雙螺旋的解旋作用由______________催化的，它利用來源于ATP水解產(chǎn)生的能量沿DNA鏈單向移動。正確答案：拓撲異構(gòu)酶11、單選

下列哪項不是濾膜結(jié)合法的應(yīng)用()A．前提是利用硝酸纖維素膜結(jié)合雙鏈DNAB．將與蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段與游離DNA片段分離C．從多種核酸混合液中篩選出含有特異結(jié)合位點的DNA片段D．分離與蛋白質(zhì)結(jié)合及游離的DNA片段E．進行常規(guī)的DNA結(jié)合作用的動力學(xué)研究正確答案：A12、問答題

簡述腫瘤發(fā)生學(xué)說中致癌的過程。正確答案：腫瘤的發(fā)生是由多種致癌因素綜合作用的結(jié)果。當(dāng)正常細胞受到物理因素、化學(xué)因素以及生物因素等致癌因子作用后，經(jīng)過多次打擊多階段變化便形成了腫瘤。(1)啟動階段在啟動因子的作用下，細胞的DNA分子已發(fā)生改變，但表型仍顯示正常。啟動因子以極低劑量與細胞接觸一次，既可啟動細胞癌變過程。(2)促癌階段表型正常而DNA已發(fā)生變化的癌前細胞，在啟動子和促癌因子的協(xié)同作用下，細胞的表型發(fā)生變化，表現(xiàn)出癌細胞的表型。促癌因子單獨無致癌作用，必須有啟動因子作用的基礎(chǔ)，才能促進細胞轉(zhuǎn)化。這類因子要與細胞反復(fù)接觸才能促進細胞的惡化。(3)轉(zhuǎn)化階段為細胞惡變的終末階段，即已惡化的細胞進入自主分裂增殖狀態(tài)。促癌階段形成的增生性病灶會進一步浸潤、轉(zhuǎn)移。13、問答題

簡述原位雜交的步驟。正確答案：原位雜交是應(yīng)用核酸探針與組織或細胞中的核酸按堿基配對原則進行特異性結(jié)合形成雜交體，然后應(yīng)用組織化學(xué)或免疫化學(xué)方法在顯微鏡下進行細胞內(nèi)定位或基因表達的檢測技術(shù)。操作步驟如下：(1)載片的清潔與處理載片的清潔很重要，特別不能有核酸酶的污染。為了在后續(xù)的雜交和沖洗等步驟中防止組織或細胞從載片上脫落，可以用多聚賴氨酸涂抹載片。(2)組織與細胞的固定進行原位雜交的細胞或組織必須經(jīng)過固定處理，常使用4%的多聚甲醛(3)探針對探針的設(shè)計與方法根據(jù)被測定的核苷酸序列來決定。同時為了探針的滲入，用于細胞與組織原位雜交的探針均比較短，而用于細胞染色體原位雜交，常使用較長的探針以增強雜交的信號。(4)濕盒原位雜交中每張標本所用的雜交液比較少，為防止雜交體系中的液體蒸發(fā)造成雜交液濃縮，甚至干燥，故應(yīng)該使用濕盒。(5)細胞組織雜交前處理原位雜交遵循核酸雜交的一般原則，但不同的是由于組織和細胞中的核酸都與細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)結(jié)合，以核酸蛋白復(fù)合體的形式存在，固定過程中固定液的交聯(lián)作用使生物分子形成網(wǎng)格，影響探針的穿透力，阻礙雜交體的形成，因此必須使用去污劑和/或蛋白酶對組織和細胞進行部分消化以除去核酸表面的蛋白質(zhì)，使探針獲得最大的穿透力。14、填空題

在DNA復(fù)制過程中，連續(xù)合成的子鏈稱____________________，另一條非連續(xù)合成的子鏈稱為______________________。正確答案：領(lǐng)頭鏈；隨從鏈15、單選

下列哪些基因組特性隨生物的復(fù)雜程度增加而上升()A．基因組大小B．基因數(shù)量C．基因組中基因的密度D．單個基因的平均大小E．基因間間隔距離正確答案：B16、名詞解釋

結(jié)構(gòu)基因正確答案：結(jié)構(gòu)基因是指基因組中能夠編碼蛋白質(zhì)的序列。17、問答題

簡要寫出HBVDNA結(jié)構(gòu)的特點。正確答案：HBV基因組存在負鏈上，包括S區(qū)段、C區(qū)段、多聚酶區(qū)段和X基因區(qū)段。S區(qū)段由S基因、前S1基因、前S2基因三部分組成。S區(qū)段編碼病毒顆粒的外膜蛋白。C區(qū)段編碼HBV核心抗原。多聚酶區(qū)段又稱P區(qū)段，具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性。X區(qū)段可能與肝癌的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。18、問答題

簡要敘述PCR-SSCP技術(shù)的原理。正確答案：聚合酶鏈式反應(yīng)一單鏈構(gòu)象多態(tài)性(PCR-SSCP)分析技術(shù)為分子生物學(xué)的研究提供了一個簡單、快捷、經(jīng)濟的手段。在該技術(shù)中，首先利用PCR技術(shù)擴增目的DNA，擴增時利用引物標記法或堿基摻入法使擴增的產(chǎn)物帶有標記，如熒光物質(zhì)、同位素、生物素等。然后將擴增產(chǎn)物變性并進行非變性聚丙烯酰胺凝膠電泳，區(qū)別擴增產(chǎn)物一定長度核苷酸的單鏈DNA的堿基變化。ssDNA因堿基序列的變異而導(dǎo)致構(gòu)象改變，其泳動速度必然發(fā)生改變，從而將變異的DNA與正常的DNA區(qū)分開來。該技術(shù)的優(yōu)點是無需經(jīng)特殊的限制性內(nèi)切酶作用，直接對PCR擴增產(chǎn)物或其他方法制備的DNA片段進行分離，測出單鏈的突變點。19、問答題

標出1號、2號分別為什么類型核苷酸，簡述這種雜交的影響因素。正確答案：1號為DNA核苷酸，2號為RNA類型核苷酸。DNA與RNA雜交的影響因素有：(1)核酸分子濃度與雜交速度；(2)核苷酸的堿基組成；(3)鹽濃度；(4)溫度；(5)錯配的核苷酸序列等。20、配伍題

蛋白質(zhì)不變性又不沉淀是由于加入了()蛋白質(zhì)變性但不沉淀是加入了()A．生理鹽水B．常溫乙醇C．加入2%醋酸后加熱D．高濃度硫酸銨E．加熱煮沸正確答案：A,C21、判斷題

DNA和RNA片段都是不帶電物質(zhì)()正確答案：錯22、判斷題

蛋白質(zhì)芯片技術(shù)的特點為假陽性率低，樣品用量少，無交叉雜交現(xiàn)象()正確答案：錯23、問答題

簡述癌基因的概念及分類。正確答案：癌基因是一類普遍存在于正常細胞內(nèi)調(diào)控細胞增殖和分化的重要基因，當(dāng)其經(jīng)過理化、病毒等生物因素作用而激活后，可使正常細胞轉(zhuǎn)化成癌細胞，病毒中的癌基因稱為病毒癌基因(v-onc)，細胞中的癌基因稱細胞癌基因(c-onc)。根據(jù)癌基因蛋白產(chǎn)物可將它們分為5類：(1)src家族：如src，abl，fee等，其蛋白產(chǎn)物是酪氨酸蛋白激酶。(2)ras家族：如N-ras，Ki-ras，Ha-ras等，其蛋白產(chǎn)物是GTP結(jié)合蛋白，它們是細胞信號傳遞途徑中的重要成員。(3)myc家族：如C-myc，N-myc，C-fog，C-jun等，其蛋白產(chǎn)物是細胞核內(nèi)的反式作用因子，參與基因表達的調(diào)節(jié)。(4)sis家族：如sis，int，nst等，其蛋白產(chǎn)物是生長因子或生長因子類似物。(5)erb家族：如erbA，erbB，mas等，其蛋白產(chǎn)物為生長因子受體或細胞骨架蛋白。24、問答?試寫出該質(zhì)粒載體的組成部分。正確答案：該質(zhì)粒載體由2686bp組成。含有4部分。(1)具有一個復(fù)制其始位點；(2)含有Ampr基因；(3)具有LacZ基因；(4)位于LacZ基因中靠近5’端有一段多克隆位點區(qū)段。25、判斷題

在提取基因組DNA時，RNAase對其污染可影響其提取質(zhì)量()正確答案：錯26、單選

變性DNA的特點，不正確的是()A．粘度下降B．沉降速度增加C．紫外線吸收增加D．Tm值降低E．DNA雙螺旋解開，形成線團狀正確答案：D27、多選

酚抽提法可用于基因組DNA的分離純化，所用試劑分別具有不同的功能，下列說法正確的是()A．SDS為生物陰離子去污劑，主要引起細胞膜的降解并能乳化脂質(zhì)和蛋白質(zhì)B．EDTA為二價金屬離子螯合劑，可抑制DNase的活性，同時降低細胞膜的穩(wěn)定性C．蛋白酶K有水解蛋白的作用，可消化DNase和細胞中的蛋白質(zhì)并裂解細胞D．酚可使蛋白質(zhì)變性沉淀，也可抑制DNase的活性E．pH8.0的Tris溶液能保證抽提后DNA進入水相，避免滯留在蛋白質(zhì)層正確答案：A,B,C,D,E28、判斷題

DNase足紋分析用于蛋白質(zhì)精確結(jié)合位點的研究方法()正確答案：對29、單選

轉(zhuǎn)錄圖與EST不具備的作用有哪些()A．估計人類基因的數(shù)目B．提供不同組織、不同發(fā)育階段的基因表達的數(shù)目及結(jié)構(gòu)C．提供基因診斷探針D．提供基因鑒定的探針E．基因定位正確答案：E30、單選

腫瘤的發(fā)生發(fā)展經(jīng)過不包括()A．激發(fā)階段B．浸潤階段C．促發(fā)階段D．轉(zhuǎn)移階段E．結(jié)束階段正確答案：E31、單選

既能在原核細胞中復(fù)制又能在真核細胞中表達復(fù)制的載體是()A．粘粒載體B．質(zhì)粒載體C．SV40載體D．M13噬菌體載體E．穿梭載體正確答案：E32、問答題

分子生物學(xué)檢驗技術(shù)在實驗診斷中的應(yīng)用包括哪些?試舉例說明。正確答案：分子生物學(xué)檢驗技術(shù)是以DNA、RNA或蛋白質(zhì)為診斷材料，通過分析基因的存在、變異或表達，從而為疾病診斷提供更直接、更科學(xué)的信息的一門診斷技術(shù)學(xué)科。其內(nèi)容包括：基因突變的檢測，如可以通過基因測序后與正常的圖譜進行比較，發(fā)覺是否有異常；另外也可通過PCR技術(shù)和DNA芯片技術(shù)進行相關(guān)研究。(1)基因定位，Southern雜交、原位雜交可應(yīng)用于正?；虍惓Ｈ旧w的基因定位、細胞或組織中基因表達位點的確定、病毒及其他病原體感染的檢測。(2)基因表達異常的檢測，如果基因結(jié)構(gòu)變異、基因表達過程失調(diào)，則由于其決定的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物mRNA與蛋白質(zhì)發(fā)生質(zhì)與量的改變。如應(yīng)用RT-PCR等進行mRNA定量。蛋白質(zhì)類物質(zhì)是相關(guān)基因表達的最終產(chǎn)物，可以通過對相關(guān)蛋白質(zhì)的測定，了解相關(guān)基因的情況。(3)感染微生物的檢測，應(yīng)用PCR技術(shù)直接擴增病原體基因的保守序列?？梢詫Υ蠖鄶?shù)病原體感染作出明確的診斷、分型、分類或判斷是否發(fā)生了基因整合。(4)法醫(yī)學(xué)檢測，因為人類基因組的特殊性，既存在人類共有的基因序列，可以進行種屬的鑒定；另一方面，人類又具有型特異性基因，表現(xiàn)為個體與個體間幾乎沒有共同點。應(yīng)用基因擴增技術(shù)，可以有效地進行個體間的區(qū)別。33、多選

以下哪些是真核生物細胞核基因組的特點()A．細胞核基因組的DNA與蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色體B．體細胞有兩份同源的基因組C．染色體中的DNA被高度壓縮D．染色體儲存于細胞核內(nèi)，是基因組遺傳信息的載體E．細胞核基因組中編碼區(qū)域大大少于不編碼區(qū)域正確答案：A,C,D,E34、填空題

遺傳病一般分為________________病和________________病兩大類。染色體病可按________________和______________分為兩大類。正確答案：基因；染色體；常染色體異常；性染色體異常35、判斷題

抑癌基因又稱抗癌基因，存在于正常細胞內(nèi)一類可抑制細胞生長的基因，并有潛在抑癌作用()正確答案：對36、單選

因研究重組DNA技術(shù)而獲得諾貝爾獎的科學(xué)家是()A．W.GilbertB．A.A.KkornbergC．P.BergD．B.McClintockE．K.Mullis正確答案：A37、名詞解釋

衛(wèi)星DNA正確答案：重復(fù)序列的重復(fù)單位一般由2～10bp組成，且成串排列，由于這類序列的堿基組成可用等密度離心法將其與主體DNA分開，因而稱為衛(wèi)星DNA。38、單選

有關(guān)限制性內(nèi)切酶，說法錯誤的是()A．是一類核酸水解酶，能識別和切割雙鏈DNA分子中的特定核苷酸序列B．該酶大多數(shù)來源于細菌C．臨床最常見使用的限制酶為Ⅲ型D．識別點以雙鏈DNA分子的4～8個特異性核苷酸順序多見E．該酶種類很多，來源不同，但反應(yīng)條件都很相似正確答案：C39、問答題

原癌基因激活機制表現(xiàn)在哪些方面?正確答案：原癌基因具有正常的生理功能，被激活時又具有致癌作用。原癌基因表現(xiàn)為致癌作用主要通過以下方式進行的。(1)原癌基因點突變，表現(xiàn)為由于核苷酸某個堿基突變，影響到它所決定的氨基酸變異，由一種氨基酸轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N氨基酸，如果出現(xiàn)某個特殊位置發(fā)生改變，必然出現(xiàn)蛋白質(zhì)功能的變化，從而表現(xiàn)出不同的蛋白質(zhì)功能。(2)獲得外源性啟動子而激活，表現(xiàn)為在原癌基因的上游插入外源性啟動子或增強子激活原癌基因，使表達產(chǎn)物增多。(3)DNA分子中的甲基化對抑制基因的轉(zhuǎn)錄具有重要的作用，如果甲基化水平降低，可激活原癌基因。(4)在細胞中出現(xiàn)了基因不同程度的擴增，表現(xiàn)為決定的蛋白質(zhì)大量表達，相應(yīng)的產(chǎn)物增加。(5)從基因內(nèi)部來講，如果出現(xiàn)基因易位或染色體出現(xiàn)重排，使得原癌基因轉(zhuǎn)移到某些較強的啟動子或增強字附近，因而被激活，使得相應(yīng)蛋白質(zhì)得到大量增加。40、名詞解釋

Plasmid正確答案：質(zhì)粒是獨立與細菌細胞染色體以外，能自主復(fù)制的共價閉合環(huán)狀DNA分子。41、填空題

PCR技術(shù)是一種選擇性體外擴增________________的方法。正確答案：DNA或RNA42、單選

凝膠滯后實驗的基本原理是()A．蛋白質(zhì)與末端標記的核酸探針特異性結(jié)合B．蛋白質(zhì)與末端標記的蛋白質(zhì)探針特異性結(jié)合C．蛋白質(zhì)與末端標記的單克隆抗體特異性結(jié)合D．蛋白質(zhì)與末端標記的某種酶特異性結(jié)合E．蛋白質(zhì)與末端標記的生物分子特異性結(jié)合正確答案：A43、填空題

任何mRNA序列能以三種__________________的形式被翻譯，而且每一種都對應(yīng)一種完全不同的多肽鏈。正確答案：核苷酸44、名詞解釋

調(diào)節(jié)基因正確答案：調(diào)節(jié)基因是指基因組中調(diào)控復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的序列。45、問答題

試述細胞破碎的方法及各有什么用途。正確答案：(1)機械方法指通過機械切力作用使組織破碎的方法：①勻漿法常使用于機體軟組織；②組織攪碎機方法常使用于動物韌性組織；③研磨常使用于細菌、酵母。(2)物理方法指通過各種物理因素使組織細胞破碎的方法：①超聲波常使用于細胞混懸液；②反復(fù)凍融法常使用于培養(yǎng)細胞；③冷熱交替法常使用于細菌、病毒；④低滲裂解法常使用于紅細胞。(3)化學(xué)方法：①有機溶劑常使用于細菌、酵母；②表面活性劑常使用于組織培養(yǎng)細胞；③酶解法常使用于細菌、酵母。46、名詞解釋

TapDNA聚合酶正確答案：一種耐熱的依賴于DNA的DNA聚合酶，最佳反應(yīng)溫度為75~80℃?？捎糜谕ㄟ^聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)對DNA分子的特定序列進行體外合成擴增，也可用于DNA測序。47、配伍題

是研究基因工程產(chǎn)品蛋白質(zhì)間相互作用的技術(shù)()是目前蛋白質(zhì)組研究中最有效的分離技術(shù)()是根據(jù)不同離子間的質(zhì)量、電荷比值差異來確定分子量的技術(shù)()A．二維凝膠電泳B．圖像分析技術(shù)C．同位素標記親和標簽法D．質(zhì)譜技術(shù)E．噬菌體展示正確答案：E,A,D48、單選

癌基因表達產(chǎn)物屬于信息傳遞分子的是()A．sisB．rasC．mycD．mybE．src正確答案：B49、填空題

進行HCV基因檢測時，常采用______________________________作為檢測的引物。正確答案：5'非編碼區(qū)50、單選

從大腸桿菌中第一個被發(fā)現(xiàn)的酶，又稱為Klenow片段的是()A．DNA聚合酶ⅠB．DNA聚合酶ⅡC．DNA聚合酶ⅢD．末端轉(zhuǎn)移酶E．TaqDNA聚合酶正確答案：A51、單選

有關(guān)朊病毒，述說錯誤的是()A．是一種不同于病毒、細菌、霉菌的傳染性病原體B．Prusiner因為對朊病毒研究有突出貢獻而獲得諾貝爾醫(yī)學(xué)獎C．朊病毒只對人類有致病作用D．朊病毒能對部分蛋白酶有抵抗作用E．朊病毒主要作用于腦部，直接破壞腦神經(jīng)細胞正確答案：C52、單選

人體基因組有多少堿基()A．10億B．20億C．30億D．40億E．50億正確答案：C53、名詞解釋

端粒正確答案：以線性染色體形式存在的真核基因組DNA末端都有一種特殊的結(jié)構(gòu)叫端粒。該結(jié)構(gòu)是一段DNA序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體，僅在真核細胞染色體末端存在。54、單選

下面關(guān)于松弛型質(zhì)粒(relaxedplasmid)性質(zhì)的描述中，不正確的是()A．質(zhì)粒的復(fù)制只受本身的遺傳結(jié)構(gòu)的控制，而不受染色體復(fù)制機制的制約，因而有較多的拷貝數(shù)B．在復(fù)制過程中，多使用DNA聚合酶IC．可以在氯霉素作用下進行擴增D．通常帶有抗藥性標記E．同嚴緊型質(zhì)粒融合后，雜合質(zhì)粒優(yōu)先使用松弛型質(zhì)粒的復(fù)制子正確答案：C55、單選

關(guān)于甲基化干擾試驗的有關(guān)描述，錯誤的是()A．利用蛋白質(zhì)與核酸結(jié)合的特性設(shè)計的B．主要用于檢測蛋白質(zhì)的結(jié)合位點C．常用DMS作為甲基化修飾劑D．甲基化修飾后的DNA片段才能與蛋白結(jié)合E．產(chǎn)物通過電泳分析可以了解蛋白質(zhì)和核酸定位的信息正確答案：D56、名詞解釋

多基因家族正確答案：指由某一祖先基因經(jīng)過重復(fù)和變異所產(chǎn)生的一組基因。57、問答題

概述PCR技術(shù)的基本原理及過程。正確答案：PCR技術(shù)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA片段的方法。其特異性是由兩條人工合成的引物序列決定的。所謂引物就是指與待擴增DNA片段兩翼互補的寡核苷酸(一般20～30個堿基)，其本質(zhì)是DNA片段。待擴增DNA模板加熱變性后，兩引物分別與兩條DNA的兩翼序列特異性結(jié)合，此時兩引物的3′端相對，5′端相背。在合適的條件下，DNATaq酶催化反應(yīng)體系中的游離單核苷酸沿著引物的3′端，按照堿基配對的原則延伸形成兩條與模板DNA互補的半保留復(fù)制鏈。重復(fù)上述變性→退火→延伸的過程可以獲得更多的復(fù)制鏈，如此反復(fù)進行，DNA可呈2n指數(shù)增加。按理論計算，一般DNA鏈經(jīng)過20～30次循環(huán)放大其拷貝數(shù)為百萬倍。但每次循環(huán)并不是每條DNA鏈都起到模板作用指導(dǎo)DNA的合成，盡管如此，在短時期內(nèi)即可合成大量的DNA產(chǎn)物。58、問答題

簡述隨機PCR實驗步驟。正確答案：(1)先進行寡核苷酸的設(shè)計與合成：隨機序列區(qū)，這是結(jié)合蛋白質(zhì)的區(qū)域，長度從幾個到幾十個堿基不等。隨機序列區(qū)兩側(cè)是確定序列區(qū)，長度一般為15-20個堿基。(2)合成后的寡核苷酸經(jīng)純化后進行標記，制備成含有隨機序列的寡核苷酸探針。(3)進行多次的凝膠滯后實驗，將隨機序列中能夠結(jié)合蛋白的特異性探針序列分離出來，即先經(jīng)凝膠滯后實驗純化探針，經(jīng)PCR擴增，再經(jīng)凝膠滯后實驗純化，PCR擴增，如此多次直到只有特異性探針為止，最后將純化的特異結(jié)合序列探針PCR擴增后，進行克隆和序列分析，序列測定后，列表統(tǒng)計隨機序列區(qū)各堿基出現(xiàn)的數(shù)量，計算每一個位置上各堿基出現(xiàn)的頻率，最終確定蛋白質(zhì)結(jié)合位點。59、單選?某女，29歲，由于感冒、發(fā)燒住院，實驗室檢查：免疫球蛋白降低，CD4分子數(shù)量減少。經(jīng)詢問，該病人有不潔性接觸史。進一步檢查應(yīng)做()A．梅毒抗體或抗原檢查B．泌尿生殖道感染C．HIV抗原檢測D．分子生物學(xué)檢查染色體E．不需要檢查，直接治療正確答案：C60、單選?女，45歲，由于低熱、盜汗、感冒、咳嗽并帶血絲入院。實驗室檢查：痰普通培養(yǎng)無致病菌生長；X片見肺紋理增粗，肺門有發(fā)光點狀物。初步考慮為()A．矽肺B．肺結(jié)核C．肺出血D．COPDE．肺炎正確答案：B61、判斷題

腫瘤的發(fā)生發(fā)展就細胞本身而言由于原癌基因的激活和抑癌基因的失活造成的()正確答案：對62、單選

以下哪種不是癌基因的產(chǎn)物()A．生長因子類似物B．化學(xué)致癌物質(zhì)C．反式作用因子D．蛋白激酶類E．結(jié)合GTP的蛋白質(zhì)正確答案：B63、判斷題

基因是遺傳的基本單位，其本質(zhì)RNA是片段()正確答案：錯64、填空題

Sanger法使用特異性引物與___________________模板退火，在DNA聚合酶作用下進行延伸反應(yīng)，并在_________________作用下進行堿基特異性的鏈終止，然后采用聚丙烯酰胺凝膠電泳區(qū)分長度相差_____________的單鏈DNA，從而完成的測序反應(yīng)方法。2’，3’-ddNTP與普通的dNTP不同之處在于_________________。正確答案：單鏈DNA雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)；一個核苷酸；在脫氧核糖的；3’位置缺少一個羥基65、填空題

重組DNA分子構(gòu)建目的基因或DNA片段可來源：____________________、__________________、________________。正確答案：基因組DNA；cDNA；人工合成的DNA66、單選?患者，男，31歲，頭暈，乏力。查體：呼吸17次/分鐘，血壓10.4/6.7kPa，心率123次/分鐘。實驗室檢查：血糖13.5mmol/L。該患者首先考慮診斷為()A．內(nèi)分泌失調(diào)B．垂體瘤C．肝炎D．糖尿病E．腎炎正確答案：D67、單選

在人類線粒體基因組中()A．幾乎所有的DNA都用于編碼基因產(chǎn)物B．幾乎所有編碼蛋白質(zhì)的基因都從不同的方向進行轉(zhuǎn)錄C．產(chǎn)生惟一一個大的轉(zhuǎn)錄物，然后剪接加工，釋放出各種RNA分子D．大多數(shù)編碼蛋白的基因被tRNA基因分隔開E．復(fù)制形式不屬于半保留復(fù)制正確答案：C68、單選

下面有關(guān)限制酶的敘述哪些是正確的()A．限制酶是外切酶而不是內(nèi)切酶B．限制酶在特異序列(識別位點)對DNA進行切割C．同一種限制酶切割DNA時留下的末端序列總是相同的D．一些限制酶在識別位點內(nèi)稍有不同的點切割雙鏈DNA，產(chǎn)生粘末端E．一些限制酶在識別位點內(nèi)相同的位置切割雙鏈DNA，產(chǎn)生平末端正確答案：B69、配伍題

病毒生物學(xué)性狀及感染的致病性主要取決于()決定病毒與宿主表面結(jié)合的是()A．病毒早期蛋白B．病毒表面糖蛋白C．病毒核酸D．病毒晚期蛋白E．病毒衣殼蛋白正確答案：C,B70、單選

p53()A．是抑癌基因B．是癌基因C．野生型p53是抑癌基因D．既不是癌基因又不是抑癌基因E．突變型p53是抑癌基因正確答案：C71、填空題

真核生物染色體末端具有端粒結(jié)構(gòu)，端粒的作用為__________________和________________。正確答案：維持染色體的穩(wěn)定性；防止染色體重組及末端被降解72、判斷題

使用瓊脂糖凝膠上溴化乙錠染色的DNA功能紫外分析儀來固定核酸，應(yīng)將濕潤的濾膜點樣面朝向紫外光()正確答案：對73、填空題

固相雜交包括：______________、______________、______________、______________和_______________________。正確答案：菌落雜交；Southern印跡雜交；Northern印跡雜交；點雜交；縫隙雜交74、名詞解釋

載體正確答案：在連接酶的作用下和外源DNA片段連接并運送DNA分子進入受體細胞的DNA分子。75、名詞解釋

DNA重組正確答案：不同來源的DNA分子，通過磷酸二酯鍵連接而重新組合的過程。76、填空題

質(zhì)粒DNA常用的提取方法有：__________、________________、________________。正確答案：堿裂解法；煮沸裂解法；SDS裂解法77、問答題

簡述Maxam-Gilert化學(xué)降解法測DNA序列的原理。正確答案：本法由Maxam-Gilert等于1977年提出。基本原理是，首先對待測DNA末端進行放射性標記，再通過5組(也可以是4組)相互獨立的化學(xué)反應(yīng)分別得到部分降解產(chǎn)物，其中每一組反應(yīng)特異性地針對某一種或某一類堿基進行切割。因此，產(chǎn)生5組(或4組)不同長度的放射性標記的DNA片段，每組中的每個片段都有放射性標記的共同起點，但長度取決于該組反應(yīng)針對的堿基在原樣品DNA分子上的位置。此后各組反應(yīng)物通過聚丙烯酰胺凝膠電泳進行分離，通過放射自顯影檢測末端標記的分子，并直接讀取待測DNA片段的核苷酸序列。78、單選?患者，男，31歲，頭暈，乏力。查體：呼吸17次/分鐘，血壓10.4/6.7kPa，心率123次/分鐘。實驗室檢查：血糖13.5mmol/L。下一步處理最需要做的是()A．腦電圖B．CTC．肝功能D．復(fù)查血糖并做糖耐量實驗E．腎功能正確答案：D79、單選

關(guān)于PCR的建立，最早是()A．1983年，美國人建立B．1985年，美國人建立C．1983年，英國人建立D．1985年，英國人建立E．1983年，德國人建立正確答案：A80、名詞解釋

基因組正確答案：細胞或生物體的一套完整單倍體的遺傳物質(zhì)的總和。81、填空題

如果兩個質(zhì)粒不能穩(wěn)定地共存于同一個寄主細胞中，則屬于__________________群，這是因為它們的__________________所致。正確答案：相同；DNA具有同源性82、名詞解釋

毛細管電泳正確答案：在細孔管或毛細管中進行電泳分離就是蛋白質(zhì)的毛細管電泳，特點是柱效高，分析時間短，所用樣品量及試劑消耗少，操作模式多，可進行在線檢測和自動化。83、配伍題

可檢測DNA結(jié)合蛋白和RNA結(jié)合蛋白()鑒定序列特異性蛋白質(zhì)結(jié)合位點的方法()A．凝膠滯后實驗B．原位雜交C．質(zhì)譜技術(shù)D．蛋白質(zhì)一核酸紫外交聯(lián)法E．隨機PCR正確答案：A,E84、名詞解釋

菌落雜交正確答案：用于重組細菌克隆篩選的固相雜交。85、配伍題

超基因?qū)儆?)Hinf家族屬于()在人類基因組中占約20%的重復(fù)序列是()A．短串聯(lián)重復(fù)序列B．長串聯(lián)重復(fù)序列C．低度重復(fù)序列D．長分散重復(fù)序列E．高度重復(fù)序列正確答案：D,A,E86、問答題

簡述質(zhì)粒的一般性質(zhì)。正確答案：(1)除酵母殺傷質(zhì)粒為RNA分子外，其它已知的質(zhì)粒都是環(huán)狀超螺旋DNA分子。分子量小，比較穩(wěn)定，不易受到物理因素的損傷。(2)分子量在2.5×107Da以上的質(zhì)?？梢詮墓w細胞把它的一個復(fù)本轉(zhuǎn)移到受體細胞。(3)質(zhì)粒只有在宿主細胞內(nèi)才能完成自我復(fù)制，一旦離開宿主細胞就無法復(fù)制和擴增。質(zhì)粒并不是細菌生長繁殖所必須的，但它所攜帶的遺傳信息卻能賦予細菌特定的遺傳性狀。(4)有些質(zhì)粒帶有抗藥性基因。(5)質(zhì)粒表現(xiàn)為不相容性，即同一群的不同質(zhì)粒常不能在同一菌株內(nèi)穩(wěn)定共存，當(dāng)細胞分裂時，就會分別進入不同的子代細胞。87、單選

使用有機溶劑沉淀法得到的核酸，往往含有少量共沉淀的鹽，可用多少濃度的乙醇洗滌去除()A．20%B．35%C．45%D．70%E．95%正確答案：D88、名詞解釋

逆轉(zhuǎn)錄PCR正確答案：以細胞內(nèi)總RNA或mRNA為材料進行體外擴增的技術(shù)。89、填空題

根據(jù)溶解度差異分離蛋白質(zhì)混合物的物理方法有：______________、______________、______________。正確答案：鹽析法；有機溶劑沉淀法；等電點法和結(jié)晶法90、單選?患者，男，55歲，因營養(yǎng)不良及智力發(fā)育遲鈍到醫(yī)院就診，檢查發(fā)現(xiàn)肝功能良好，腎功能輕度異常，尿檢查發(fā)現(xiàn)苯酮酸升高，達200mg/L。如需要確診，需要進一步檢查()A．遺傳史調(diào)查B．查12q24-1有無突變C．是否是發(fā)育不良D．檢查胰腺功能是否正常E．檢查大腦發(fā)育是否正常

正確答案：B91、單選

研究最多和最早的抗凋亡基因為()A．RbB．bcl1C．bcl2D．p53E．DCC正確答案：C92、問答題

簡述DNA病毒基因組的一般特點。正確答案：DNA多為雙鏈，少數(shù)為單鏈；可以表現(xiàn)為線形，也可以為環(huán)狀分子。(1)在轉(zhuǎn)錄中，如是雙鏈則兩條鏈都可以作為轉(zhuǎn)錄的模板。(2)在活宿主細胞核內(nèi)復(fù)制，且能利用宿主細胞的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄和翻譯系統(tǒng)。(3)較大的雙鏈DNA病毒往往具有比較復(fù)雜的生活周期；并可侵襲多種脊柱類動物，引起嚴重疾病。較小的DNA病毒則會更依賴宿主細胞來完成復(fù)制，這些病毒常常能反式激活復(fù)制系統(tǒng)，導(dǎo)致病毒和宿主都進行復(fù)制，故可能引發(fā)腫瘤。(4)有的不能直接通過DNA復(fù)制過程進行基因組的復(fù)制，必須先轉(zhuǎn)錄出一個RNA中間體，即前基因組，然后通過逆轉(zhuǎn)錄過程才能完成基因組復(fù)制。93、多選

下列哪些方法能將Glu和Lys分開()A．陰離子交換層析B．凝膠過濾C．陽離子交換層析D．低層析E．電泳正確答案：A,C,D,E94、問答題

描述原核生物基因組特點。正確答案：(1)通常僅有一個DNA分子組成，多數(shù)呈環(huán)狀，少數(shù)為線狀；一般為雙鏈，也有單鏈結(jié)構(gòu)。(2)基因組中只有一個復(fù)制起點，基因數(shù)目少，體積小。(3)具有類核結(jié)構(gòu)，類核存在于胞漿內(nèi)，無核膜，其中央部分由RNA和支架蛋白組成，外圍是雙鏈閉環(huán)的DNA超螺旋扭結(jié)成許多花瓣狀結(jié)構(gòu)。類核中80%為DNA，其余為RNA和蛋白質(zhì)。(4)具有操縱子結(jié)構(gòu)，所謂操作子即指數(shù)個功能上相關(guān)聯(lián)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起，構(gòu)成信息區(qū)，連同其上游的調(diào)控區(qū)以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號所構(gòu)成的基因表達單位。(5)結(jié)構(gòu)基因通常為單拷貝，表現(xiàn)為沒有內(nèi)含子。(6)無重疊基因現(xiàn)象。(7)具有編碼同工酶的基因，指一類結(jié)構(gòu)上不完全相同，而表達產(chǎn)物功能相同的基因。(8)編碼區(qū)在基因組中的比例約為50%，遠遠大于真核生物基因組，但又遠遠小于病毒基因組。(9)基因組中存在反向重復(fù)序列。(10)基因組中存在可移動的DNA序列，包括插入序列和轉(zhuǎn)座子，也包括質(zhì)粒。95、單選

下列哪些基因以典型的串聯(lián)形式存在于真核生物基因組()A．球蛋白基因B．組蛋白基因C．rRNA基因D．肌動蛋白基因E．線粒體基因正確答案：B96、單選

引起視網(wǎng)膜母細胞瘤的抑癌基因位于幾號染色體()A．17p13B．13p15C．12p13D．16q12E．13q14正確答案：E97、填空題

探針是一種________________，它帶有供反應(yīng)后檢測的合適的______________。正確答案：DNA(RNA)；分子標記物98、判斷題

細胞凋亡與細胞壞死沒有本質(zhì)區(qū)別()正確答案：錯99、問答題

試從細胞凋亡的角度簡述腫瘤發(fā)生的機制。正確答案：一般認為惡性轉(zhuǎn)化的腫瘤細胞，是因為獲得了失控的生長特性，過度增殖，形成腫瘤。從細胞凋亡理論的角度來看，則認為是腫瘤細胞的細胞凋亡機制受到抑制，不能正常地進行細胞死亡清除從而使細胞壽命延長，細胞數(shù)量增多，進而堆積形成腫瘤的結(jié)果。細胞中抑制基因的失活，如點突變、缺失及原癌基因的激活和腫瘤的發(fā)生發(fā)展之間有著極為密切的關(guān)系。原癌基因中，一類屬于生長因子家族，另一類則屬于生長因子的受體，這些基因由于各種因素的作用被激活與表達，直接刺激了腫瘤細胞的生長。研究表明，這些癌基因及其表達產(chǎn)物也是細胞凋亡的重要調(diào)節(jié)因子，許多種類的癌基因表達以后，即阻斷了腫瘤細胞的細胞凋亡過程，使腫瘤細胞數(shù)目增加，形成腫瘤。因此，從細胞凋亡的角度來理解腫瘤的形成機制，是由于腫瘤細胞的細胞凋亡機制受阻，腫瘤細胞凋亡減少而表現(xiàn)出腫瘤細胞“無限”增殖所致。100、單選

神經(jīng)纖維瘤病發(fā)生過程中，相對應(yīng)的特異的主要相關(guān)抑癌基因表達產(chǎn)物異常的是()A．BRCA1B．APCC．p16D．p53E．NF1正確答案：E101、多選

下列哪些是染色體以外的遺傳因子()A．病毒核酸B．真核生物的線粒體C．細菌的質(zhì)粒D．轉(zhuǎn)座子E．轉(zhuǎn)位因子正確答案：B,C,D,E102、多選

下列為可移動基因的是()A．插人序列B．轉(zhuǎn)座子C．染色體DNAD．質(zhì)粒E．可轉(zhuǎn)座噬菌體正確答案：A,B,D,E103、判斷題

端粒的主要作用維持染色體的穩(wěn)定性，防止染色體的重組及末端被降解()正確答案：對104、單選

生物芯片作用的原理是()A．分子雜交B．抗原抗體反應(yīng)C．生物分子間特異性相互作用D．熒光定量E．親和層析正確答案：C105、填空題

線粒體DNA是環(huán)狀的雙螺旋結(jié)構(gòu)，外鏈叫做重鏈；內(nèi)鏈叫__________________________________，均有__________________功能。正確答案：輕鏈；編碼106、名詞解釋

蛋白質(zhì)組正確答案：指一個細胞或一個組織或一個機體的基因所表達的全部蛋白質(zhì)。107、問答題

試述凝膠電泳檢測DNA的基本原理。正確答案：DNA片段屬于帶電質(zhì)點。在一定電場作用下，一定大小的DNA片段以不同的速度通過不同濃度的瓊脂糖凝膠，DNA的遷移率(μ)對數(shù)和凝膠濃度之間的線性關(guān)系遵循下列關(guān)系，即：lgμ0=lgμ-KrC，μ0的為自由電泳遷移率，Kr為滯留系數(shù)，是與凝膠性質(zhì)和遷移分子大小及形狀有關(guān)的常數(shù)。因此利用不同濃度的凝膠可以分辨不同大小的DNA片段。溴化乙錠(BB)是一種熒光染料，這種物質(zhì)含有插入DNA積疊堿基之間的平面結(jié)構(gòu)。這一結(jié)構(gòu)的位置固定，與堿基很接近，使染料與DNA緊密結(jié)合。在紫外線照射下，可產(chǎn)生較強的熒光，故可以使用該方法進行DNA的鑒別。108、單選

重疊群是一群克隆。在這個克隆群體中各個體()A．相互之間重疊B．都是來自不同生物的克隆C．插入片段位于不同染色體的不同區(qū)段D．位于同一染色體的不同區(qū)段E．目前這種現(xiàn)象還沒有得到解釋正確答案：D109、問答題

試述HBVDNA復(fù)制周期。正確答案：HBV顆粒吸附并進入肝細胞后，脫去衣殼，病毒DNA進入肝細胞核內(nèi)。病毒正鏈DNA在DNA聚合酶作用下，以負鏈DNA為模板，經(jīng)延長以修補裂解縫隙，使兩條鏈彼此互補，形成完整的開口環(huán)狀雙鏈DNA，繼而形成共價閉合的超螺旋環(huán)狀DNA。在細胞RNA聚合酶的作用下，以病毒負鏈DNA為模板轉(zhuǎn)錄出兩種RNA，一種是2.1kbRNA，翻譯病毒外殼蛋白；另一種是3.5kbRNA，翻譯病毒內(nèi)衣殼蛋白，同時還作為HBVDNA復(fù)制的模板，故稱前基因組。以前基因組RNA為模板在逆轉(zhuǎn)錄作用下，逆轉(zhuǎn)錄全長的HBV負鏈DNA，而前基因組RNA在合成過程中可被RNA酶逐漸降解。病毒以新合成的負鏈DNA為模板，復(fù)制互補的正鏈DNA。含有全部病毒基因組的病毒內(nèi)衣殼再包以外衣殼后構(gòu)成完整成熟的病毒顆粒，從被感染的細胞漿中釋放到細胞外。110、單選

以下哪些方法不可以直接用于基因點突變的檢測()A．原位雜交B．PCR-RFLP技術(shù)C．DNA芯片技術(shù)D．Southernblotting技術(shù)E．DNA測序正確答案：A111、判斷題

啟動子是反式作用因子()正確答案：錯112、判斷題

變性梯度凝膠電泳利用DNA分子被加熱至其融點溫度時雙鏈被打開，但不同的DNA有不同的融點溫度而設(shè)計的()正確答案：對113、填空題

凝膠滯后實驗的基本原理是________________可以與__________________特異性結(jié)合并進行電泳的實驗。常可用來檢測________________和_________________。正確答案：蛋白質(zhì)；末端標記的核苷酸探針；DNA結(jié)合蛋白；RNA結(jié)合蛋白114、單選

抑癌基因失活的常見方式是()A．點突變B．堿化C．甲基化程度降低D．插入E．染色體易位正確答案：A115、判斷題

Down綜合征主要體內(nèi)少了一條性染色體；Turner綜合征主要是由于體內(nèi)多了一條21號染色體()正確答案：錯116、單選

關(guān)于DnaseⅠ足紋分析原理，下列有關(guān)描述正確的是()A．DnaseⅠ可以隨機水解核苷酸中的磷酸二酯鍵，而結(jié)合有蛋白質(zhì)的DNA免于DnaseⅠ的水解B．DnaseⅠ可以水解蛋白質(zhì)中的肽鍵，通過電泳對產(chǎn)物進行分析C．核苷酸中的DnaseⅠ在一定條件下被酶水解而電泳，通過對產(chǎn)物進行分析的一種技術(shù)D．核苷酸和蛋白質(zhì)結(jié)合物被特殊性酶水解而得到的產(chǎn)物E．核苷酸和蛋白質(zhì)結(jié)合物被加熱處理而通過電泳，最后用DnaseⅠ處理得到的產(chǎn)物正確答案：A117、問答題

簡述核酸的分類和組成。正確答案：核酸是一種線性多聚體，基本結(jié)構(gòu)單元是核苷酸。核苷酸由堿基、戊糖和磷酸三部分組成。根據(jù)所含戊糖種類的不同，核酸可分為脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。118、問答題

試述基因診斷的臨床意義。正確答案：涉及到遺傳物質(zhì)改變的疾病均可以進行基因診斷。人類的疾病除外傷外，幾乎都與基因改變有關(guān)，因此基因診斷的對象已由原來所局限的遺傳病擴大到感染性疾病、腫瘤、心血管病、退行性疾病等領(lǐng)域。(1)在遺傳病中的應(yīng)用：①基因突變的直接檢測；③疾病的產(chǎn)前診斷。(2)在腫瘤中的應(yīng)用：①腫瘤相關(guān)基因診斷；②白血病基因診斷及微小殘留基因的檢測。(3)在感染性疾病中的應(yīng)用，如結(jié)核桿菌檢測。(4)多基因疾病的風(fēng)險性方法分析。(5)法醫(yī)學(xué)的應(yīng)用。119、多選

對核酸一蛋白質(zhì)雜交實驗的描述，正確的是()A．又稱為Southwestern雜交B．可鑒定蛋白質(zhì)與DNA的特異結(jié)合C．可以大概確定結(jié)合蛋白質(zhì)的分子量D．該技術(shù)最先由中國人應(yīng)用E．蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物經(jīng)紫外線照射后可分離正確答案：A,B,C120、名詞解釋

DNA芯片正確答案：DNA芯片技術(shù)是指在固相支持物上原位合成寡核苷酸或者直接將大量的DNA探針以顯微打印的方式有序地固化于支持物表面，然后與標記的樣品雜交，通過對雜交信號的檢測分析，即可獲得樣品的遺傳信息。由于常用計算機硅芯片作為固相支持物，所以稱為DNA芯片。121、問答題

試述端粒假說。正確答案：該假說首先由Olovnikov博士(1973年)端粒假說是闡明細胞分裂壽命的假說之一。細胞培養(yǎng)時，約分裂50次后就不能繼續(xù)進行分裂。細胞中有計數(shù)分裂次數(shù)的裝置，這一裝置由位于細胞核上的端?？刂?，這就是所謂的端粒假說。端粒是指染色體DNA兩端的部分，人類是ITAGGC這一序列250～2000次的重復(fù)。DNA進行復(fù)制時并不是完全復(fù)制，末端部分稍微變短，端粒部分每復(fù)制一次約減少50～200個堿基。這樣端粒部分大部分都失去的時候，也就是細胞分裂達到極限的時候。像干細胞那樣在機體一生中都進行分裂的細胞以及癌細胞當(dāng)中，存在一種端粒酶(端粒延伸酶)。在其作用下，每次DNA進行復(fù)制時端粒就會附加于染色體兩端，因此可以無限制地進行分裂。122、多選

下列對朊病毒生物學(xué)特性描述正確的是()A．病原體為蛋白質(zhì)B．朊病毒的復(fù)制類似于病毒的復(fù)制C．朊病毒蛋白的前體是一種正常無害的蛋白質(zhì)D．朊病毒主要破壞大腦神經(jīng)細胞E．朊病毒不具有熱穩(wěn)定性正確答案：A,C,D123、填空題

原核生物DNA修復(fù)包括3個步驟：________________酶對DNA鏈上不正常堿基的識別與切除，______________酶對已切除區(qū)域的重新合成，____________________酶對剩下切口的修補。正確答案：DNA聚合酶Ⅲ；DNA聚合酶Ⅲ；DNA聚合酶Ⅰ124、填空題

酚是蛋白變性劑，用酚抽提細胞DNA時，具有兩方面的作用：(1)________________________(2)______________________。正確答案：蛋白質(zhì)變性沉淀；抑制DNA酶活性125、單選?女，45歲，由于低熱、盜汗、感冒、咳嗽并帶血絲入院。實驗室檢查：痰普通培養(yǎng)無致病菌生長；X片見肺紋理增粗，肺門有發(fā)光點狀物。進一步確診需要檢查()A．CTB．彩超C．結(jié)核菌涂片D．支氣管插管檢查E．透光檢查正確答案：C126、單選

人類有些疾病患病率不低，有遺傳基礎(chǔ)，常表現(xiàn)為家族傾向性，這些疾病所具有的形狀是以基因數(shù)量形狀為基礎(chǔ)，即在正常數(shù)量基礎(chǔ)上的增加或減少()A．染色體病B．分子病C．線粒體遺傳病D．多基因遺傳病E．單基因遺傳病正確答案：D127、判斷題

蛋白質(zhì)直系同源簇數(shù)據(jù)庫根據(jù)系統(tǒng)進化關(guān)系分類構(gòu)建而成，主要提供系統(tǒng)進化信息()正確答案：對128、單選

人類腫瘤中最常被激活的癌基因是()A．sisB．rasC．mybD．mycE．erb正確答案：B129、單選

在HIV基因組中，編碼結(jié)構(gòu)蛋白的是()A．tatB．revC．vprD．gagE．vpu正確答案：D130、填空題

DNA序列測定的傳統(tǒng)方法有：____________________、________________________。正確答案：雙脫氧鏈終止法；化學(xué)降解法131、填空題

SDS是分離DNA時常用的一種陰離子除垢劑，它有三個作用：______________________、________________、________________。正確答案：細胞膜降解；乳化脂質(zhì)；乳化蛋白質(zhì)132、單選

以下哪項不是人類基因組計劃的基本任務(wù)()A．遺傳圖譜B．染色體定位C．物理圖譜D．基因圖譜E．序列圖譜正確答案：B133、單選?男，45歲，發(fā)現(xiàn)有動脈硬化癥狀。查體：見角膜有老年性色素環(huán)。查血：TC12.00mmol/L，TG2.6mmol/L。最可能的診斷是()A．混合性高脂血癥B．高甘油三酯血癥C．家族性高膽固醇血癥D．Ⅰ型高脂血癥E．Ⅱ型高脂血癥正確答案：C134、單選

原位雜交()A．是一種標記DNA與整個染色體雜交并且發(fā)生雜交的區(qū)域可通過顯微觀察的技術(shù)B．表明衛(wèi)星DNA散布于染色體的常染色質(zhì)區(qū)C．揭示衛(wèi)星DNA位于染色體著絲粒處D．表明人類可以對染色體上的所有基因都可用這種方法進行檢測E．原位雜交屬于固相雜交中的一種正確答案：A135、名詞解釋

PCD(細胞程序性死亡)正確答案：PCD又稱為細胞凋亡(apoptosis)或細胞自殺(cellsuicide)，是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞在一些誘導(dǎo)因素(如紫外線，生長因子缺失等)作用下，自主的有序性死亡。也有人認為PCD與細胞凋亡的含義不同，細胞凋亡僅為PCD的一種特殊形式。136、問答題

簡述斑點雜交的過程。正確答案：斑點雜交是一種DNA雜交法，它是將DNA待測樣品直接點加在硝酸纖維素膜上使其成為斑點，然后與特異DNA探針進行雜交，以分析DNA樣品之間的同源性。斑點雜交的過程是：(1)取硝酸纖維薄膜一張，鋪在一描有小方格的紙上，以確定點樣位點，每格中最多可點樣品DNA10μl。(2)加樣可分多次進行，待前一次樣品干燥后再加第二次，每次約1～2μl，這樣可避免斑點擴大。(3)待樣品干燥后，讓硝酸纖維素薄膜漂浮在0.5MNa0H、1.5MNaCl液面上，變性15min。(4)取出薄膜在濾紙上吸干。(5)再漂浮在0.5MTris-HCL(pH7.5)、1.5MNaCl液面上中和15min。在濾紙上晾干后，夾在兩張紙之間，80℃烘干2h，即可進行雜交。(6)同位素探針的雜交：①將雜交膜以6×SSP浸潤2min；②將濕潤的雜交膜裝人雜交袋，加人預(yù)雜交液，置42℃水浴2～6h；③將已標記的雙鏈DNA探針于95℃～100℃加熱5～10min后冰浴驟冷；④向雜交袋中加入已變性的標記探針，置42℃水浴搖床雜交6～12h；⑤小心取出雜交膜并洗膜；⑥干膜。137、多選?以下哪些項有利于RNA樣品的保存()A．RNA溶于0.3mol/L的醋酸鈉溶液或雙蒸水中置-70℃至～80℃保存B．DEPC水溶解RNA或在RNA溶液中加人Rnasin或VRC，通過抑制RNA酶對RNA的降解而延長保存時間C．將RNA沉淀溶于70%的乙醇溶液，可在-20℃長期保存D．將RNA沉淀溶于去離子甲酰胺溶液中，可在-20℃長期保存E．如加RNA抑制物可以暫時保存正確答案：A,B,C,D,E138、判斷題

PCR技術(shù)待擴增的靶基因在人工合成引物的誘導(dǎo)下，合成大量的核蛋白()正確答案：錯139、配伍題

表達產(chǎn)物為核內(nèi)DNA結(jié)合蛋白類或反式作用因子類的基因是()表達產(chǎn)物為蛋白激酶類的基因是()A．erb-A和masB．ras和srcC．C-myc和fosD．Rh和p53E．C-myc和c-sis正確答案：D,C140、名詞解釋

核酸分子雜交正確答案：單鏈的核酸分子在合適的溫度和離子強度下，通過堿基互補形成雙鏈雜交體的一類技術(shù)。141、判斷題

用血漿蛋白質(zhì)乙醇分段沉淀分離中，乙醇濃度低，pH呈現(xiàn)中性環(huán)境時最先分離的是纖維蛋白原()正確答案：對142、名詞解釋

R質(zhì)粒正確答案：R質(zhì)粒是指抗藥性質(zhì)?；蚰退幮再|(zhì)粒，可以使宿主菌獲得耐受相應(yīng)抗生素的能力。143、問答題

簡述生物芯片的原理。正確答案：生物芯片(Biochip)，又稱為基因芯片(Genechip)或DNA芯片(DNAchip)，是指利用大規(guī)模集成電路所控制的機器人在尼龍膜或硅片固相支持物表面，有規(guī)律地合成成千上萬個代表不同基因的寡核苷酸“探針”或液相合成探針后由陳列器或機器人點樣于固相支持表面。這些“探針”可與用放射標記物如32p、熒光物、熒光素、麗絲胺等標記的目的材料中的DNA或cDNA互補核酸序列相結(jié)合，對雜交結(jié)果進行計算機軟件處理分析，獲得雜交信號的強度及分布模式圖，以此反映目的材料中有關(guān)基因表達強弱的表達譜。該技術(shù)可以基因連鎖、連鎖不平衡、限制性長度多態(tài)性、可變串聯(lián)重復(fù)序列及單核苷酸多態(tài)性標記等基因定位方法為基礎(chǔ)，采用分子雜交等多種技術(shù)方法手段，進行遺傳作圖，對不同材料中的多個基因表達模式進行平行對比分析，是一種高產(chǎn)出的、新的基因分析方法。144、單選

真核生物復(fù)制子有下列特征，它們()A．比原核生物復(fù)制子要長，因為有較大的基因組B．比原核生物復(fù)制子要短，因為有末端序列的存在C．通常是雙向復(fù)制且能融合D．全部立即啟動，以確保染色體在S期完成復(fù)制E．不是全部立即啟動，在任何給定的時間只有大約15%是有活性的正確答案：E145、填空題

按復(fù)制機理可把質(zhì)粒分為：____________、______________。正確答案：嚴緊型質(zhì)粒；松弛性質(zhì)粒146、填空題

蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫有：_______________、__________________________和_______________。正確答案：蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)倉庫(PDB)；蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分類數(shù)據(jù)庫(SCOP)；PROSITE數(shù)據(jù)庫147、判斷題

粘粒載體具有λ噬菌體的特征但沒有普通質(zhì)粒的特征()正確答案：錯148、名詞解釋

受體正確答案：細胞膜上或細胞內(nèi)能特異識別生物活性分子并與之結(jié)合，進而發(fā)生生物學(xué)效應(yīng)的的特殊蛋白質(zhì)。149、單選

丙型肝炎病毒基因組中有ORF幾個()A．1個B．2個C．3個D．4個E．5個正確答案：A150、填空題

限制性內(nèi)切核酸酶是按屬名和種名相結(jié)合的原則命名的，第一個大寫字母取自______________，第二、三兩個字母取自__________________，第四個字母則表示________________，最后的羅馬數(shù)字表示同株內(nèi)發(fā)現(xiàn)和分離的先后順序。正確答案：宿主菌的屬名；種名縮寫；株或型151、單選

將A、B、C混合樣品經(jīng)過Sephadex-25凝膠柱分離，洗脫的先后順序是B、A、C，可以認為()A．C是糖類，親和力大B．C的分子量比A小C．C的分子量最大D．A的溶解度最小E．A的分子量比B大正確答案：B152、名詞解釋

基因正確答案：合成有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或RNA所必需的全部核酸序列(通常指DNA序列)，它不僅包括編碼蛋白質(zhì)肽鏈mRNA的核酸序列，還包括為保證轉(zhuǎn)錄所必須的調(diào)控序列，5′端不翻譯序列，內(nèi)含子以及3′端非翻譯序列等所有的核酸序列。153、名詞解釋

啟動子正確答案：RNA聚合酶特異性識別和結(jié)合的DNA序列。154、問答題

試述多基因病的概念并列舉幾種多基因病。正確答案：多基因病是一種異質(zhì)性疾病，是遺傳因子和環(huán)境因素相互作用的結(jié)果，因此也可稱為多因子病。多基因病的遺傳因子和環(huán)境因子的性質(zhì)相當(dāng)復(fù)雜，其中某些疾病僅僅是由單個基因座位與個別環(huán)境因子相互作用所致，而有些疾病則是多個基因座位的微小效應(yīng)疊加在一起相互作用引起的。如胰島素非依賴型糖尿病、原發(fā)性高血壓、冠心病、支氣管哮喘、原發(fā)性肝癌等。155、單選

用原位雜交法鑒定基因時，正確的是()A．需要基因的表達B．事實上是按照堿基配對原則進行的檢驗技術(shù)C．不能在正常細胞體中來進行D．應(yīng)該在液相中進行E．可以對組織細胞進行一邊培養(yǎng)一邊進行操作正確答案：B156、單選

基因工程中所用的質(zhì)粒載體大多是改造過的，真正的天然質(zhì)粒載體很少，在下列載體中只有被視為用作基因工程載體的天然質(zhì)粒載體()A．pBR322B．pSC101C．pUB110D．pUC18E．pUC28正確答案：B157、問答題

簡述HBV轉(zhuǎn)錄后四個ORF的特點及功能。正確答案：HBV基因組已經(jīng)確定在負鏈DNA核苷酸序列為模板轉(zhuǎn)錄的RNA上含有四個ORF，分別稱為S、C、P、X區(qū)。(1)S區(qū)段：由S基因、前S1基因、前S2基因三部分組成。S區(qū)段編碼病毒顆粒的外膜蛋白。外膜蛋白有三種，它們是外膜主蛋白，即S蛋白，含有226個氨基酸，由S基因編碼；外膜中蛋白，含281個氨基酸，由Pre-S2基因和S基因編碼，其中Pre-S2編碼55個氨基酸；外膜大蛋白由Pre-S1、Pre-S2和S基因編碼。(2)C區(qū)段：編碼HBV核心抗原。不同亞型的HBcAg長度不等，一般在183～214個氨基酸之間。HBcAg相對保守，不同亞型的HBcAg的變異率小于6%，而不同的前S和S基因氨基酸的變異率大約為20%和10%。在C基因前有一段短序列稱為前C。E抗原是由前C及C基因編碼，兩者共同轉(zhuǎn)譯后成為e抗原。(3)P區(qū)段：P區(qū)段最長，它與前S、S、C、X區(qū)段均有重疊。其編碼產(chǎn)物為依賴于RNA的DNA聚合酶，此酶既具有逆轉(zhuǎn)錄酶的活性，又能催化合成DNA的多聚酶功能。不同亞型的DNA聚合酶的大小為832～845個氨基酸，富含組氨酸。(4)X區(qū)段：位于C區(qū)段上游，編碼154個氨基酸。X基因編碼的蛋白稱為HBxAg，其功能尚未明確，有研究證明是一種反式激活因子，與病毒基因的表達有關(guān)。158、名詞解釋

Alu家族正確答案：是哺乳動物基因組中含量最豐富的一種中度重復(fù)序列家族，在單倍體人類基因組中重復(fù)次數(shù)達30萬～50萬次，約占人類基因組的3%～6%。159、名詞解釋

splitgene正確答案：真核細胞中的基因大多由不連續(xù)的幾個編碼序列所組成，稱斷裂基因。160、單選

點突變中的“轉(zhuǎn)換”是指()A．DNA分子上的一個嘧啶被另一個嘧啶替換或一個嘌呤被另一個嘌呤取代B．DNA分子上的一個嘧啶被一個嘌呤替換或一個嘌呤被一個嘧啶取代C．DNA分子上的堿基組成中增加或減少D．DNA分子攝取一段外源核苷酸E．紫外線引起堿基突變正確答案：A161、問答題

簡述真核細胞DNA的提取原理。正確答案：提取DNA的原理是將蛋白質(zhì)、脂類、糖類等物質(zhì)分離干凈，同時又要保持DNA分子的完整性。在提取DNA的反應(yīng)體系中，SDS可將細胞膜、核膜破壞，并將組蛋白從DNA分子上拉開，使核酸游離。EDTA可抑制細胞中DNA酶的活性，蛋白酶Κ可將所有的蛋白質(zhì)降解成小分子的肽或氨基酸。樣品在上述反應(yīng)體系中經(jīng)保溫處理后，用酚或氯仿抽提，可進一步使蛋白質(zhì)與核酸分離，再經(jīng)乙醇沉淀，即可得到目的基因DNA。162、單選

原發(fā)性肝癌與下列哪些因素?zé)o關(guān)()A．抑癌基因p53突變B．HBV感染C．HDV感染D．黃曲霉素攝入E．染色體突變正確答案：E163、判斷題

穿梭質(zhì)粒載體一類即能在原核細胞復(fù)制又能在真核細胞中復(fù)制的載體()正確答案：對164、名詞解釋

限制性內(nèi)切酶正確答案：是一類核酸水解酶，能識別和切割雙鏈DNA分子中的特定核苷酸序列。165、填空題

基因突變可引起腫瘤：常見的突變方式有：____________________、__________________、________________________。正確答案：點突變；基因易位；基因偶聯(lián)166、問答題

試述基因突變與基因進化。正確答案：基因突變是指由于基因發(fā)生變化而表現(xiàn)出不同的性狀。基因DNA的一個堿基變?yōu)榱硪粋€堿基時叫做點突變。由于線粒體DNANDI基因nt3316G→A突變，影響線粒體酶的活性，可導(dǎo)致Ⅱ型糖尿病。除此之外，還有些基因突變中DNA發(fā)生了很大的變化。例如，DNA的一部分缺失，DNA的一部分重復(fù)，DNA的一部分反向定位，DNA中插入某一長度的DNA，染色體的一部分向同一染色體或者其他染色體發(fā)生移動等等。當(dāng)由于基因突變，機體不能產(chǎn)生生存所必需的物質(zhì)時，機體在生長過程中將會死亡，這樣的突變稱為致死性基因突變。自然狀態(tài)下也會發(fā)生基因突變，放射線、紫外線、化學(xué)物質(zhì)等能增加其發(fā)生的頻率。生物進化是DNA基因突變積累的結(jié)果，但僅僅這些還不足以解釋生物的多樣性。現(xiàn)在認為有一些更高水平上的變化對進化有利。一種蛋白質(zhì)往往由不同的幾個片段組成，有時功能不同的蛋白質(zhì)會具有某些相同的片段。控制這些片段合成的堿基序列發(fā)生重復(fù)、倒置、缺失或連接，是進化過程中發(fā)生一些大變化的原因?；蚩蓪⑦@些發(fā)生的不同組合累積起來，形成新的基因，從而形成多樣件。在DNA中，有一部分能在染色體上滑動的序列，稱為移位基因(原核生物中叫做轉(zhuǎn)座子)。病毒中也有一些能將基因插人、移出宿主細胞染色體的物質(zhì)。所有這些都與基因進化有關(guān)。167、填空題

pBR322是一種改造型的質(zhì)粒，它的復(fù)制子來源于________________，它的四環(huán)素抗性基因來自于________________，它的氨芐青霉素抗性基因來自于__________________。正確答案：ColE1；psc101；Tn3168、判斷題

Kuru、CJD、GSS和FFI與朊病毒感染有關(guān)()正確答案：對169、填空題

影響酶切的主要因素之一是底物DNA，底物的影響包括__________________、______________________、______________________、______________________。正確答案：有機溶劑；EDTA；SDS；過量的鹽170、判斷題

提取DNA的原則要將DNA的雙鏈打開()正確答案：錯171、填空題

人類體細胞中有：______________________、__________________________為常染色體。正確答案：46條染色體；44條(22對)172、填空題

_______________酶能特異地識別和切割雙鏈DNA鏈中的堿基序列。正確答案：限制性核酸內(nèi)切173、單選

人類體細胞具有多少對染色體()A．1B．22C．23D．46E．92正確答案：C174、判斷題

蛋白質(zhì)的溶解度隨溫度的增高表現(xiàn)為增加()正確答案：錯175、名詞解釋

a衛(wèi)星DNA正確答案：是由較復(fù)雜的重復(fù)單位所組成的重復(fù)序列，這種重復(fù)序列為靈長類所獨有。176、單選

直接檢測細胞或組織中的DNA或RNA，常用的方法為()A．菌落印跡雜交B．斑點雜交C．原位雜交D．Southern印跡雜交E．Northern印跡雜交

正確答案：C177、單選

松弛型質(zhì)粒()A．在宿主細胞中拷貝數(shù)較多B．可用氯霉素擴增C．復(fù)制時受宿主染色體的控制D．一般沒有選擇標記E．上述A、B兩項正確正確答案：E178、配伍題

變性()退