生物工程設(shè)備動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

關(guān)于生物工程設(shè)備動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第2頁,共29頁，2024年2月25日，星期天

體外培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞根據(jù)它們?cè)谂囵B(yǎng)器皿是否能貼附于支持物上生長(zhǎng)特征，可分為貼附型生長(zhǎng)和懸浮型生長(zhǎng)兩大類。貼附型細(xì)胞在培養(yǎng)時(shí)能貼附在支技物表面生長(zhǎng)。大多數(shù)動(dòng)物細(xì)胞屬于貼壁型細(xì)胞，如Hela、Vero、BHK、CHO細(xì)胞系。懸浮型細(xì)胞在培養(yǎng)中懸浮生長(zhǎng)。來源于血液、淋巴組織的細(xì)胞，許多腫瘤細(xì)胞和某些轉(zhuǎn)化細(xì)胞。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法第3頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法

貼壁培養(yǎng)(單層細(xì)胞培養(yǎng))

分散的細(xì)胞懸浮在培養(yǎng)瓶中很快(幾十分鐘至幾小時(shí))就貼附在瓶壁上，

稱為細(xì)胞貼壁，

貼壁后的細(xì)胞形態(tài)形成多態(tài)性，

呈單層生長(zhǎng)，

所以此法又叫單層細(xì)胞培養(yǎng)。懸浮培養(yǎng)

細(xì)胞在培養(yǎng)器中自由懸浮生長(zhǎng)的過程，不貼壁，主要用于懸浮型細(xì)胞培養(yǎng)，如淋巴細(xì)和腫瘤細(xì)胞的培養(yǎng)。第4頁,共29頁，2024年2月25日，星期天

固定化培養(yǎng)一種包埋培養(yǎng)。對(duì)兩類細(xì)胞都適用，細(xì)胞生長(zhǎng)密度高，抗剪切力和抗污染能力強(qiáng)。懸浮型細(xì)胞常用海藻酸鈣包埋，貼壁型細(xì)胞常用膠原包埋。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)方法第5頁,共29頁，2024年2月25日，星期天

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可生產(chǎn)的生物制品1.病毒疫苗：口蹄疫(FMD)、狂犬疫苗等2.非抗體免疫調(diào)節(jié)劑：干擾素(IFN)、白介素(IL)等3.多肽生長(zhǎng)因子：神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(FGF)4.酶：組織血纖維溶酶原激活劑(t-PA)5.激素：紅細(xì)胞生成素(EPO)、促黃體生成素(LH)6.病毒殺蟲劑7.腫瘤特異性抗原：癌胚抗原(CEA)8.單克隆抗體9.皮膚重植10.細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用第6頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)生物制品工藝實(shí)例1.組織纖溶酶激活劑生產(chǎn)工藝流程細(xì)胞單層細(xì)胞懸液細(xì)胞培養(yǎng)物培養(yǎng)培養(yǎng)液提取液

層析液濃縮液層析液tPA成品分散分離提取層析純化濃縮層析精制凍干2.抗HBsAS的單克隆抗體生產(chǎn)工藝流程培養(yǎng)液雜種細(xì)胞混合物大鼠骨髓瘤＋免疫大鼠脾淋巴細(xì)胞融合融合混合物篩選克隆化雜交瘤克隆系種質(zhì)培養(yǎng)細(xì)胞種質(zhì)擴(kuò)大培養(yǎng)分離粗制McAb精制層析液超慮濃縮液凍干McAb精品第7頁,共29頁，2024年2月25日，星期天

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)1.細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，易受微生物污染，培養(yǎng)時(shí)需要抗生素；2.動(dòng)物細(xì)胞較微生物大得多，無細(xì)胞壁，機(jī)械強(qiáng)度低，適應(yīng)環(huán)境能力差；3.培養(yǎng)過程需氧量少，且不耐受強(qiáng)力通風(fēng)與攪拌；4.在機(jī)體中，細(xì)胞相互粘連以集群形式存在；5.培養(yǎng)過程產(chǎn)物分布于細(xì)胞內(nèi)外，成本高，產(chǎn)品價(jià)格昂貴；6.大規(guī)模培養(yǎng)時(shí)，不可套用微生物反應(yīng)的經(jīng)驗(yàn)；7.原代培養(yǎng)細(xì)胞一般繁殖50代即退化死亡。動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)第8頁,共29頁，2024年2月25日，星期天

無論是貼壁細(xì)胞還是懸浮細(xì)胞，深層培養(yǎng)的操作方式可分細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式分批式、流加式、半連續(xù)式、連續(xù)式和灌注式。

分批式操作操作簡(jiǎn)單、是最常用的操作方式。分批式培養(yǎng)過程中，細(xì)胞的生長(zhǎng)可分為延遲期、對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、減速期、平穩(wěn)期和衰退期分批式培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)曲線第9頁,共29頁，2024年2月25日，星期天

流加式操作

半連續(xù)式操作細(xì)胞培養(yǎng)的操作方式

能夠調(diào)節(jié)培養(yǎng)環(huán)境中營養(yǎng)物質(zhì)的濃度。

連續(xù)操作

能提高細(xì)胞密度，應(yīng)用于培養(yǎng)懸浮型細(xì)胞。

灌注培養(yǎng)

大大提高細(xì)胞密度，有助于產(chǎn)物的表達(dá)和純化。第10頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第11頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第12頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第13頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第14頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第15頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第16頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器通氣攪拌式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第17頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

氣升式細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器氣升式培養(yǎng)系統(tǒng)的優(yōu)點(diǎn)：

①?zèng)]有移動(dòng)部件；②完全密封；③便于無菌操作；④設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單；⑤便于放大生產(chǎn)；⑥氧的轉(zhuǎn)換率高。第18頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

細(xì)胞培養(yǎng)流程第19頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第20頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

中空纖維細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器優(yōu)點(diǎn)：

①培養(yǎng)體積小，細(xì)胞高密度生長(zhǎng)；②有濃縮產(chǎn)品的功能；③產(chǎn)物純度高；④自動(dòng)化程度高，細(xì)胞生長(zhǎng)周期長(zhǎng)。缺點(diǎn)：

中空纖維價(jià)格昂貴，生產(chǎn)成本高。第21頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

實(shí)驗(yàn)室水平的微囊細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器特點(diǎn)：①細(xì)胞密度大；②產(chǎn)物濃度高；③分離純化操作經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)單；④抗體活性、純度好第22頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

工業(yè)化水平的大載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器優(yōu)點(diǎn)：

①操作控制簡(jiǎn)單，可隨機(jī)取樣檢測(cè)；②人工增加附著細(xì)胞密度高；③消耗用品價(jià)格低廉，產(chǎn)物收率高；第23頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第24頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器懸浮培養(yǎng)瓶懸浮培養(yǎng)裝置第25頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第26頁,共29頁，2024年2月25日，星期天動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器

微載體細(xì)胞培養(yǎng)反應(yīng)器第27頁,共29頁，2024年2月25日，星期天微載體系統(tǒng)培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)：⑴比表面積大，單位體積培養(yǎng)培養(yǎng)基細(xì)胞產(chǎn)率高;⑵微載體懸浮于培養(yǎng)基中，細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境均一，簡(jiǎn)化了這些環(huán)境因素的檢測(cè)和控制;⑶培養(yǎng)基的利用