蛇床子素對實驗性腦缺血的神經(jīng)保護作用及其機制的初步探討的開題報告

蛇床子素對實驗性腦缺血的神經(jīng)保護作用及其機制的初步探討的開題報告研究背景腦缺血是指由于大腦供血不足或中斷引起的神經(jīng)細胞受損或死亡，是導(dǎo)致中風(fēng)的主要原因之一。腦缺血目前缺乏有效的治療方法，因此尋找新的治療手段具有重要的臨床意義。蛇床子素（TANS）是從葛根屬植物龍牙葛中提取的一種黃酮類化合物，已經(jīng)證實具有很強的抗氧化、抗炎和抗凋亡作用，對多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病具有保護作用。然而，蛇床子素對于實驗性腦缺血的神經(jīng)保護作用及其作用機制仍需進一步研究。研究目的本研究旨在探究蛇床子素在實驗性腦缺血中的神經(jīng)保護作用及其作用機制。研究內(nèi)容1.建立實驗性腦缺血模型：采用大鼠雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法（BCCAO）模型建立實驗性腦缺血模型。2.藥物處理：將大鼠隨機分為正常對照組、模型組和蛇床子素處理組，蛇床子素處理組給予TANS10mg/kg體重靜脈注射。3.觀察神經(jīng)行為學(xué)：運用Morris水迷宮檢測認知功能和旋轉(zhuǎn)試驗檢測神經(jīng)功能。4.檢測神經(jīng)元凋亡和炎癥因子：采用免疫熒光及Westernblot檢測海馬區(qū)神經(jīng)元凋亡和TNF-α、IL-1β、IL-6等炎癥因子的表達水平。研究意義本研究將從實驗角度探討蛇床子素對實驗性腦缺血的神經(jīng)保護作用及其機制，為臨床治療腦缺血提供新的藥物選擇。此外，對于認識蛇床子素的藥理學(xué)作用及其神經(jīng)保護機制也具有一定的科學(xué)意義。研究預(yù)期通過本次研究，我們預(yù)計能夠得到以下結(jié)論：1.蛇床子素可以減輕實驗性腦缺血大鼠的神經(jīng)行為學(xué)損傷；2.蛇床子素可以抑制實驗性腦缺血大鼠海馬區(qū)神經(jīng)元凋亡；3.蛇床子素可以降低實驗性腦缺血大鼠海馬區(qū)炎癥反應(yīng)。研究方法1.實驗動物：Wistar大鼠，雄性，體質(zhì)量250g±30g，由南京大學(xué)動物實驗中心提供。2.藥物制備：將蛇床子素粉末溶于注射用水中制備成10mg/ml的藥液。3.實驗操作：（1）手術(shù)操作大鼠取坐位，面向左，頸部放在麻醉桶內(nèi)，用去皮的小鋸骨鋸開右側(cè)頸側(cè)面，找到頸總動脈及其分支后頸動脈。結(jié)扎后頸動脈及其上頸總動脈。再在頸總動脈下端地方縫合止血。結(jié)扎過程中注意頸總動脈小動脈要避免損傷。（2）神經(jīng)行為學(xué)檢測Morris水迷宮檢測大鼠空間記憶功能，旋轉(zhuǎn)試驗檢測大鼠神經(jīng)系統(tǒng)損傷情況。（3）組織取樣取大鼠海馬組織，制備蛋白質(zhì)，Westernblot檢測神經(jīng)元凋亡和炎癥因子表達水平，免疫熒光染色檢測神經(jīng)元凋亡。4.數(shù)據(jù)處理：使用SPSS軟件進行數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)以均值±標準差表示，差異性采用ANOVA分析，P<0.05為顯著性差異。研究計劃本次研究計劃為期6個月，具體進度如下：第1-2個月：熟悉實驗動物的飼養(yǎng)、建立大鼠BCCAO模型；第3-4個月：分組、藥物處理以及相關(guān)的生物學(xué)檢測；第5-6個月：數(shù)據(jù)處理和分析，撰寫論文。參考文獻1.ZhangZ,SunB,GaoX,etal.TanshinoneIIAAttenuatesNeuroinflammationinExperimentalIschemicStrokeinthePC12CellLinebySuppressingNF-κBActivation[J].CellMolNeurobiol,2020,40(4):629-640.2.LeeHG,WonKJ,LimSW,etal.NeuroprotectiveEffectsofTanshinoneIIAonHypoxic-ischemicBrainInjuryinNeonatalRats[J].KoreanJPhysiolPharmacol,2012,16(4):255-262.3.DingY,ChenM,WangM,etal.TanshinoneIIAprotectsbrainmicrovascularendothelialcellsagainstoxygen-glucosedeprivation/reperfusion-inducedbarrierdysfun