劑與核酸藥物

關(guān)于劑與核酸藥物人體免疫及其功能免疫，又稱是免疫性或免疫力，是指機(jī)體在識(shí)別自我的基礎(chǔ)上，辨別、消滅和排除抗原性異物以維護(hù)機(jī)體的穩(wěn)定性和生理平衡的過(guò)程。對(duì)人體主要有以下三大功能

1、防疫功能：免疫能幫助機(jī)體消滅與消除入侵之“敵”—病原微生物及其抗原。

2、穩(wěn)定功能：免疫能幫助機(jī)體消除新陳代謝中損傷與衰老死亡的細(xì)胞，維持機(jī)體內(nèi)部的“治安”。

3、監(jiān)控功能：免疫能幫助機(jī)體抑制和消滅癌細(xì)胞持續(xù)性感染。如有的人患病癥沒用藥而自然痊愈，即是免疫的作用。第2頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫調(diào)節(jié)（Immunoregulation）免疫調(diào)節(jié) 主要是指在免疫應(yīng)答過(guò)程中，各種免疫細(xì)胞與免疫分子相互促進(jìn)和抑制，形成正負(fù)作用的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，并在基因的控制下，完成免疫系統(tǒng)對(duì)抗原的識(shí)別和應(yīng)答。第3頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天第4頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫調(diào)節(jié)（Immunoregulation）免疫分子的調(diào)節(jié)作用

1抗體封閉抗原作用（結(jié)合抗原表位，阻止識(shí)別，抑制體液免疫應(yīng)答）

2免疫復(fù)合物的調(diào)節(jié)作用（免疫復(fù)合物既可促進(jìn)免疫應(yīng)答，又可抑制免疫應(yīng)答）

3免疫細(xì)胞表面調(diào)節(jié)性受體的作用【激活受體（正調(diào)節(jié)），抑制性受體（負(fù)調(diào)節(jié)）】免疫細(xì)胞的調(diào)節(jié)作用

1T細(xì)胞調(diào)節(jié)

2B細(xì)胞調(diào)節(jié)

3NK細(xì)胞與巨噬細(xì)胞調(diào)節(jié)整體水平的調(diào)節(jié)作用

1神經(jīng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)

2免疫系統(tǒng)對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響第5頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天T細(xì)胞的調(diào)節(jié)T細(xì)胞在免疫調(diào)節(jié)中決定免疫應(yīng)答的類型，協(xié)調(diào)細(xì)胞免疫和體液免疫之間的關(guān)系。

Th細(xì)胞的調(diào)節(jié)分類：Th0細(xì)胞、Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞

Th0細(xì)胞為Th1細(xì)胞和Th2細(xì)胞的前體細(xì)胞；

Th1細(xì)胞輔助細(xì)胞免疫應(yīng)答；

Th2細(xì)胞輔助體液免疫應(yīng)答。第6頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天第7頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天第8頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天第9頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫調(diào)節(jié)劑對(duì)人體免疫系統(tǒng)具有抑制或增強(qiáng)作用的物質(zhì)稱為免疫調(diào)節(jié)劑免疫抑制劑:抑制免疫反應(yīng)（FK－506）免疫增強(qiáng)劑：增強(qiáng)人體的免疫功能（多糖）第10頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫抑制劑的研究作用機(jī)理篩選策略重要品種第11頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫抑制劑免疫抑制劑是指能夠抑制免疫反應(yīng)的藥物，它能抑制淋巴細(xì)胞增殖、分化和影響淋巴細(xì)胞的功能。選擇性免疫抑制劑是指對(duì)淋巴細(xì)胞有專一性作用，對(duì)紅細(xì)胞生成幾乎沒有影響，無(wú)毒性或毒性極微，不損害宿主對(duì)細(xì)菌和真菌的感染防御機(jī)制。免疫抑制劑應(yīng)用于器官移植中的抗排斥作用和治療自身免疫性疾病如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡、霉菌病、炎性腸病、自身免疫溶血性貧血等。第12頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫抑制劑作用機(jī)理第1代：以皮質(zhì)激素、硫唑嘌呤、抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)為代表，主要作用為溶解免疫活性細(xì)胞，阻斷細(xì)胞的分化，其特點(diǎn)為非特異性、廣泛的免疫抑制。第2代：以環(huán)孢素A(CsA)和FK506為代表，主要阻斷免疫活性細(xì)胞的白細(xì)胞介素2(IL-2)的效應(yīng)環(huán)節(jié)，因其以淋巴細(xì)胞為主而具有相對(duì)特異性。第3代：以單克隆抗體、雷帕霉素、霉酚酸脂為代表，其作用于抗原呈遞和分子間的相互作用，與第2代制劑有協(xié)同作用。第4代：以抗IL-2受體單克隆抗體、FTY20等為代表，主要針對(duì)改變cytokine環(huán)境，如抑制TH1，增強(qiáng)TH2。第13頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天作用機(jī)理1

環(huán)孢素和FK-506

通過(guò)與胞漿內(nèi)可溶性蛋白質(zhì)親免素受體結(jié)合而發(fā)揮作用的。親免素受體有3個(gè)亞型，分別為Cyclophilin,FKBP-12,Pin1,它們都具有旋折酶（PPIase，羥脯氨酸順反異構(gòu)酶）的活性。 其中FK-506與FKBP12結(jié)合，形成藥物受體復(fù)合物，抑制T細(xì)胞內(nèi)鈣調(diào)素依賴的磷酸酶（Calcineurin）活性，導(dǎo)致T細(xì)胞IL-2基因轉(zhuǎn)錄受抑制，IL-2分泌減少，造成免疫抑制。第14頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天第15頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天作用機(jī)理2霉酚酸酯（MPA） 高選擇性、非競(jìng)爭(zhēng)性、可逆性的次黃嘌呤核苷磷酸脫氫酶（IMPDH）抑制劑，可抑制鳥嘌呤核苷酸的經(jīng)典合成途徑。人體內(nèi)淋巴細(xì)胞與其他細(xì)胞不同，不能利用嘌呤補(bǔ)救途徑合成嘌呤，因此MPA可以高度選擇性的抑制淋巴細(xì)胞活化，抑制機(jī)體的細(xì)胞免疫和體液免疫功能。同時(shí)在淋巴細(xì)胞激活過(guò)程中，MPA通過(guò)減少GTP和GDP巖藻糖、GDP-甘露糖含量抑制淋巴細(xì)胞表面粘附分子的糖基化，從而抑制激活的淋巴細(xì)胞與上皮細(xì)胞或靶細(xì)胞粘附而殺傷靶細(xì)胞。第16頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天TCR:Tcellreceptor作用機(jī)理第17頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天第18頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天第19頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫抑制劑篩選傳統(tǒng)的篩選方法

MLR混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)

T細(xì)胞抑制活性

NK細(xì)胞抑制活性新的篩選方法 抑制Calcireurin活性方法（Dibefurin）

P56酪氨酸蛋白激酶活性方法（Lymphostin） 抑制活化T細(xì)胞的核因子的NFAT-68和NFAT-133第20頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫抑制劑篩選含RBP基因的酵母篩選模型 用含有RBP(雷帕霉素結(jié)合蛋白，RapamycinBindingProtein,RBP)基因的啤酒酵母菌RS188N及其變株RS188NΔrbp：：：LEU(RBP基因片段由于被亮氨酸基因嵌入從而阻斷該基因編碼RBP的產(chǎn)生)的篩選模型，凡對(duì)RS188N抑菌圈比對(duì)RS188NΔrbP：：：LEU的抑菌圈大6mm以上，被認(rèn)為產(chǎn)生Rapamycin及其結(jié)構(gòu)類似物。第21頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天抑制Calcireurin活性方法Abbott公司建立了Calcineurin活性分析體系:將小牛Calcineurin和Calmodlin在反應(yīng)緩沖液中混合,以4-甲基傘形基磷酸為底物。加入含底物的緩沖液以起始反應(yīng),快速振搖混勻反應(yīng)體系,37℃培養(yǎng)1小時(shí),加入堿性緩沖液以終止反應(yīng)。在355nm激發(fā)光下測(cè)460nm熒光強(qiáng)度。利用這一篩選體系發(fā)現(xiàn)了真菌產(chǎn)物Dibefurin,其抑制Calcineurin活性的IC50為μg/ml;抑制MLR的IC50為2.5μg/ml(BrillGM,1996年)。第22頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天重要品種In1970，cyclosporinswereisolatedintheSandozLaboratoriesinBaselfromCylindrocarponlucidumBooth(afungusfromaWisconsinsoilsample)andolypocladiuminflatumGams(afungusfromaNorwegiansoilsample).Theirstructureswerereportedin1976.1Itwasfortunatethatthisgrouptestedalloftheirnewcompoundsfornotonlyantibacterialandantifungalactivity,butalsoforantiviral,cytostaticandimmunosuppressiveactivity.ThelattertestslookedforadiminutionofcytotoxicT-cellactivity,andcyclosporinAprovedtohavehighpotencycoupledwithalackofcytotoxicityandthiswasakeydiscovery.環(huán)孢菌素A第23頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天重要品種

Subsequently,thestructurallyunrelatedpolyketidemetaboliteFK506(3)wasisolatedin1984bytheFujisawaPharmaceuticalCompanywhowereengagedinasystematicscreeningprogrammeforagentswithsimilaractivitytocyclosporin

Streptomycestsukubaensis9996(foundinasoilsamplefromtheTsukubaregionofN.Japan)providedaproductwitharound100timesgreaterimmunosuppressant activitythancyclosporinA.Itsstructurewasfinallyelucidatedin1987anditsubsequentlyenteredclinicalusein1991underthetradenameTacrolimus(Prograf).第24頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天來(lái)氟米特（LEF）又稱雷抑素第25頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫增強(qiáng)劑的研究免疫增強(qiáng)劑根據(jù)其作用原理可分為中樞性免疫增強(qiáng)劑和儲(chǔ)存性免疫增強(qiáng)劑；儲(chǔ)存性免疫增強(qiáng)劑與抗原同時(shí)、同部位注射時(shí)可以改變抗原分子構(gòu)型或其電荷，從而增強(qiáng)抗原性，或延長(zhǎng)抗原的儲(chǔ)存和釋放的時(shí)間，由此持續(xù)地刺激機(jī)體而增強(qiáng)特異性免疫應(yīng)答；中樞性免疫增強(qiáng)劑能激活一種或多種免疫活性細(xì)胞或是通過(guò)促進(jìn)免疫細(xì)胞表面標(biāo)志的表達(dá)、加速細(xì)胞的成熟與增殖，或是作用于某些淋巴細(xì)胞的亞群而間接發(fā)揮作用；常用的免疫增強(qiáng)劑有鋁佐劑、油懸液佐劑、BCG、干擾素、脂多糖、真菌糖肽、某些中草藥等。第26頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天白細(xì)胞介素-2白細(xì)胞介素-2是輔助T細(xì)胞分泌的淋巴因子，在免疫系統(tǒng)中起著重要的作用，它能促進(jìn)T細(xì)胞，NK細(xì)胞，B細(xì)胞的分化成熟及激活其生物活性，誘導(dǎo)淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞活性，還能促進(jìn)許多淋巴因子如干擾素、腫瘤壞死因子等的合成與釋放以及抗體生成。因此白細(xì)胞介素-2能大大增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，對(duì)不少感染性疾病有治療作用，對(duì)某些腫瘤的防治有良好的效果。第27頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天真菌多糖

從各種真菌中提取的真菌多糖組分，常有活化人體巨噬細(xì)胞，刺激抗體產(chǎn)生，從而達(dá)到提高人體免疫力，增強(qiáng)人體抗病防癌能力的作用。從真菌中提取的多糖，優(yōu)于從動(dòng)物體內(nèi)血液中提取的免疫球蛋白，具有更大的提高人體免疫力和抗癌的作用。香菇多糖：為一種免疫刺激劑，能增強(qiáng)輔助T細(xì)胞的功能，可用于治療慢性肝炎和肝癌；銀耳多糖：能明顯促進(jìn)特異抗體的形成和腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力，增加外周血液中T淋巴細(xì)胞數(shù)量；冬蟲夏草多糖、靈芝多糖等。第28頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫增強(qiáng)劑發(fā)展趨勢(shì)未來(lái)的免疫增強(qiáng)劑應(yīng)該有以下特征： 能促進(jìn)體液免疫和細(xì)胞免疫； 能增強(qiáng)弱免疫性抗原的抗原性，而沒有毒副作用； 能以不同途經(jīng)免疫，也能用于不同抗原； 能在免疫抑制個(gè)體中發(fā)揮作用； 能應(yīng)用于食用動(dòng)物不應(yīng)有殘余毒素； 能有效影響免疫反應(yīng)的質(zhì)量；穩(wěn)定、便宜而且容易生產(chǎn)和保存。第29頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天核酸藥物的研究什么是核酸藥物？ 各種具有不同功能的核酸、核酸類似物、寡聚核糖核苷酸（RNA）和寡聚脫氧核糖核苷酸（DNA），后者主要作用于基因水平，在信息流上游起作用。核酸類藥物：Aptamers，抗基因核酸藥物，核酶，反義核酸和其他核酸類似物等。第30頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天核酸藥物分類第31頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天反義核酸反義核酸包括反義ＲＮＡ(ａｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡ)和反義ＤＮＡ(ａｎｔｉｓｅｎｓｅＤＮＡ)兩種,是指與靶ＲＮＡ(多為ｍＲＮＡ)具有互補(bǔ)序列的ＲＮＡ或ＤＮＡ分子。它通過(guò)與靶ＲＮＡ進(jìn)行堿基配對(duì)結(jié)合的方式參與基因表達(dá)的調(diào)控。通常把轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生反義ＲＮＡ的基因稱為反義基因(ａｎｔｉｓｃｎｓｅｇｅｎｅ)或反義ＤＮＡ,因其與轉(zhuǎn)錄靶ＲＮＡ的目的基因是反義的。第32頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天

新的反義核酸藥物反義核酸的第二代新藥通過(guò)抑制apoB蛋白100來(lái)降低血脂，它是致動(dòng)脈硬化脂蛋白的克星；波士頓麻薩諸塞州召開的2004年世界藥物開發(fā)技術(shù)的會(huì)議上，美國(guó)舊金山加利福尼亞大學(xué)的StephenYoung說(shuō)：“因?yàn)檫@種藥物專門抑制apoB蛋白，從而達(dá)到降低血漿膽固醇的作用，這在人類歷史上還是第一次，所以原始資料另人非常滿意。第33頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天抑制SARS病毒復(fù)制的反義核酸藥物

工研院生物醫(yī)學(xué)工程中心與美國(guó)ISIS藥廠於1月14日同步在臺(tái)北及美國(guó)加州同步發(fā)表SARS反意核酸藥物其一為開發(fā)可有效抑制SARS冠狀病毒複製的第二代反意核酸藥物；其二為成功完成利用肺部輔助器械之吸入式噴霧劑型藥物。以開發(fā)RNA藥物為主的美國(guó)ISIS公司為全球第一個(gè)商業(yè)化量產(chǎn)反意核酸藥物的公司，共取得一千餘項(xiàng)反意核酸藥物相關(guān)專利，目前至少有11個(gè)反意核酸藥物正在臨床試驗(yàn)階段，包括：氣喘、癌癥等。第34頁(yè),共39頁(yè)，2024年2月25日，星期天RＮａｓｅＡRＮａｓｅＡ是第一個(gè)被應(yīng)用于動(dòng)物腫瘤和臨床白血病治療的ＲＮａｓｅ,并取得一定的效果。但由于它在抗腫瘤方面存在一定的缺陷和不足,因此酶學(xué)家們轉(zhuǎn)向其它的ＲＮａｓｅ的研究。最初從曲霉菌中分離出的一種ＲＮａｓｅ,能夠抑制大鼠腫瘤生長(zhǎng),但是臨床試驗(yàn)顯示其毒性較高,抗腫瘤作用較弱。后來(lái),ＢＳＲＮａｓｅ顯示出強(qiáng)大的抗腫瘤功能,通過(guò)細(xì)胞毒