北京市2023-2024學(xué)年高二綜合測(cè)生物生物試題02（解析版）

高級(jí)中學(xué)名校試卷PAGEPAGE1北京市2023-2024學(xué)年高二綜合測(cè)試卷02（滿(mǎn)分100分，時(shí)間90分鐘）第一部分（選擇題共30分）本部分共15題，每題2分，共30分。在每題列出的四個(gè)選項(xiàng)中，選出最符合題目要求的一項(xiàng)。1．在一些傳統(tǒng)食品的制作過(guò)程中，滅菌、消毒、防腐等是控制有害微生物的常用方法。下列說(shuō)法正確的是（）A．葡萄制作果酒過(guò)程中，葡萄用清水沖洗后需用70%的酒精消毒B．金華火腿制作過(guò)程中鹽腌等防腐措施能抑制微生物生長(zhǎng)繁殖C．制作泡菜時(shí)泡菜壇要密封，主要目的是避免外界雜菌的污染D．泡菜腌制過(guò)程中，通常用加入抗生素的方法來(lái)抑制雜菌〖答案〗B〖祥解〗1、泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開(kāi)乳酸菌。在無(wú)氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。2、果酒的制作離不開(kāi)酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，酵母菌最適宜生長(zhǎng)繁殖的溫度范圍是18～25℃；反應(yīng)中是否有酒精的產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。3、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)，其代謝類(lèi)型屬于異養(yǎng)需氧型。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷４姿峋淖钸m生長(zhǎng)溫度為30～35℃。【詳析】A、發(fā)酵瓶需要用70%的酒精消毒，葡萄制作果酒過(guò)程中，葡萄用清水沖洗后瀝干即可，A錯(cuò)誤；B、金華火腿制作過(guò)程中鹽腌等防腐措施能抑制微生物生長(zhǎng)繁殖，這是因?yàn)槭雏}的主要成分是NaCl，當(dāng)細(xì)胞的鹽濃度過(guò)高就會(huì)導(dǎo)致微生物細(xì)胞失水，從而失去活性，B正確；C、制作泡菜時(shí)泡菜壇要密封，主要目的是提供無(wú)氧環(huán)境，使得乳酸菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生乳酸，C錯(cuò)誤；D、制作泡菜時(shí)，泡菜水中含有乳酸菌、硝酸鹽還原菌和其他雜菌。乳酸菌可使蔬菜發(fā)酵，能有效控制發(fā)酵過(guò)程，抑制其他菌類(lèi)和微生物生長(zhǎng)，它保存有大量維生素C、L-乳酸菌，使泡好的蔬菜中的營(yíng)養(yǎng)易被人體吸收利用。鹽濃度高以及酒精可抵制雜菌生長(zhǎng)，防止泡菜發(fā)霉、變質(zhì)，所以我們?cè)谂莶怂幸欲}和白酒來(lái)抑制雜菌而非添加抗生素，D錯(cuò)誤。故選B。2．小曲白酒以大米、大麥、小麥等為原料，以小曲為發(fā)酵劑釀造而成。小曲中所含的微生物主要有好氧微生物霉菌、兼性厭氧型微生物酵母菌，還有乳酸菌、醋酸菌等細(xì)菌。釀酒的原理主要是酵母菌在無(wú)氧條件下利用葡萄糖發(fā)酵產(chǎn)生酒精。傳統(tǒng)釀造工藝流程如圖所示。關(guān)于小曲白酒的釀造過(guò)程，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A．若發(fā)酵壇密封不嚴(yán)可能會(huì)導(dǎo)致酒變酸B．蒸熟的原料立即加入糟醅后密封可高效進(jìn)行酒精發(fā)酵C．糖化主要是利用霉菌將淀粉水解為葡萄糖D．釀造白酒的過(guò)程也是微生物生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程〖答案〗B〖祥解〗1、果酒的制作離不開(kāi)酵母菌，酵母菌是兼性厭氧微生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在無(wú)氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。故果酒的制作原理是酵母菌無(wú)氧呼吸產(chǎn)生酒精，酵母菌最適宜生長(zhǎng)繁殖的溫度范圍是18～30℃；生產(chǎn)中是否有酒精的產(chǎn)生，可用酸性重鉻酸鉀來(lái)檢驗(yàn)，該物質(zhì)與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一種好氧細(xì)菌，只有當(dāng)氧氣充足時(shí)，才能進(jìn)行旺盛的生理活動(dòng)，其代謝類(lèi)型屬于異養(yǎng)需氧型。當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解為醋酸；當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷４姿峋淖钸m生長(zhǎng)溫度為30～35℃。【詳析】A、釀造過(guò)程中應(yīng)在無(wú)氧條件下進(jìn)行，若密封不嚴(yán)，會(huì)導(dǎo)致醋酸菌在有氧條件下發(fā)酵產(chǎn)生醋酸而使酒變酸，A正確；B、蒸熟并攤晾的原料需要冷卻后才可加入糟醅，不能馬上密封，需要提供氧氣先讓糟醅中的好氧型霉菌將原料中的淀粉糖化，以及讓酵母菌進(jìn)行有氧呼吸大量繁殖，B錯(cuò)誤；C、糖化過(guò)程主要是利用霉菌分泌的淀粉酶將淀粉分解為葡萄糖，C正確；D、釀造白酒的過(guò)程也是酵母菌等微生物利用糧食中的物質(zhì)進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖的過(guò)程，D正確。故選B。3．微生物的純培養(yǎng)包括配制培養(yǎng)基、滅菌、接種、分離和培養(yǎng)等步驟。下列關(guān)于酵母菌的純培養(yǎng)的敘述錯(cuò)誤的是（）A．采用平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法均可分離酵母菌B．可用濕熱滅菌法對(duì)培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌C．通過(guò)接種環(huán)連續(xù)蘸取菌液在固體培養(yǎng)基表面劃線(xiàn)的操作，可將菌種逐步稀釋D．完成平板劃線(xiàn)后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，再將接種后的平板進(jìn)行培養(yǎng)〖答案〗C〖祥解〗微生物常見(jiàn)的接種的方法①平板劃線(xiàn)法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線(xiàn)，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線(xiàn)的開(kāi)始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線(xiàn)的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過(guò)大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！驹斘觥緼、對(duì)于微生物進(jìn)行分離的方法有平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法，A正確；B、可用濕熱滅菌法（通常是高壓蒸汽滅菌法）對(duì)培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，B正確；C、通過(guò)接種環(huán)在固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線(xiàn)連續(xù)劃線(xiàn)的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面，該過(guò)程中只蘸取一次菌液，C錯(cuò)誤；D、完成平板劃線(xiàn)后，待菌液被培養(yǎng)基吸收，將接種后的平板（和一個(gè)未接種的平板）倒置培養(yǎng)，D正確。故選C。4．某種物質(zhì)A（一種含有C、H、N的有機(jī)物）難以降解，會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染，只有某些細(xì)菌能降解A．研究人員按照如圖所示流程從淤泥中分離得到能高效降解A的細(xì)菌菌株。圖中③將M中的菌液稀釋一定倍數(shù)后，取0．1mL涂布到平板上，初步估測(cè)搖瓶M中1mL菌液中細(xì)菌數(shù)為2．4x108個(gè)。相關(guān)敘述正確的是（

）

A．實(shí)驗(yàn)時(shí)，淤泥及盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌B．乙中需要加瓊脂和物質(zhì)A等，實(shí)驗(yàn)需設(shè)平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，無(wú)需另外設(shè)置空白對(duì)照C．③接種方法為稀釋涂布平板法，涂布時(shí)用涂布器蘸取菌液均勻涂布于平板上D．若乙平板上菌落數(shù)平均為240個(gè)，則接種的菌液的稀釋倍數(shù)為105〖答案〗D〖祥解〗分析題圖：①為淤泥取樣進(jìn)行稀釋?zhuān)跒榻臃N到液體培養(yǎng)基上，③稀釋涂布平板法接種到以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，④為挑取單菌落接種，⑤在以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)一步篩選出高效降解A的菌株?！驹斘觥緼、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要從淤泥中分離得到能高效降解A的細(xì)菌菌株，則圖①為淤泥取樣進(jìn)行稀釋?zhuān)梢匀∮倌嗉訜o(wú)菌水制成菌懸液，淤泥中有菌種，因此不能進(jìn)行滅菌處理；盛有培養(yǎng)基的搖瓶通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，A錯(cuò)誤；B、識(shí)圖分析可知，③是稀釋涂布平板法接種到以A為唯一碳源和氮源的選擇培養(yǎng)基上，因此乙為固體培養(yǎng)基，需要加瓊脂和物質(zhì)A等，為了提高準(zhǔn)確度，實(shí)驗(yàn)需設(shè)平行重復(fù)實(shí)驗(yàn)，且需要另外設(shè)置空白對(duì)照，檢測(cè)培養(yǎng)基配制是否合格，B錯(cuò)誤；C、③接種方法為稀釋涂布平板法，接種工具是涂布器，但是不能用涂布器蘸取菌液，應(yīng)該將菌液用微量移液管加入到培養(yǎng)基中，用涂布器進(jìn)行均勻涂抹，C錯(cuò)誤；D、若乙平板上長(zhǎng)出的菌落數(shù)平均為240個(gè)，假設(shè)稀釋倍數(shù)為a，根據(jù)搖瓶M中1mL菌液中細(xì)菌數(shù)為2.4×108個(gè)，在每個(gè)平板上涂布0.1mL稀釋后的菌液，則有240×a÷0.1=2.4×108，則稀釋倍數(shù)a=105，D正確。故選D。5．工業(yè)污水中含有的多環(huán)芳烴類(lèi)化合物（僅含C、H元素）會(huì)造成農(nóng)田土壤污染。研究人員按照如圖所示的流程從受污染的農(nóng)田土壤中分離得到能高效降解多環(huán)芳烴類(lèi)化合物的細(xì)菌菌株。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．甲、乙培養(yǎng)基中應(yīng)以多環(huán)芳烴類(lèi)化合物為唯一碳源B．步驟①接種操作需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行C．步驟②中應(yīng)用涂布器從甲中蘸取菌液均勻涂布于培養(yǎng)基乙表面D．步驟③中應(yīng)從降解圈直徑與菌落直徑比值最大的菌落進(jìn)行挑選〖答案〗C〖祥解〗圖示表示科研人員從被多環(huán)芳烴類(lèi)化合物污染的土壤中分離出高效降解多環(huán)芳烴類(lèi)化合物的菌株的主要步驟。培養(yǎng)基甲和乙中加入多環(huán)芳烴類(lèi)化合物作為唯一碳源，其目的是篩選出高效降解多環(huán)芳烴類(lèi)化合物的菌株?！驹斘觥緼、該研究的目的是從被多環(huán)芳烴類(lèi)化合物污染的土壤中分離出高效降解多環(huán)芳烴類(lèi)化合物的菌株，所以甲、乙培養(yǎng)基中應(yīng)以多環(huán)芳烴類(lèi)化合物為唯一碳源，A正確；B、為了能篩選出高效降解多環(huán)芳烴類(lèi)化合物的菌株、防止雜菌污染，在進(jìn)行步驟①培養(yǎng)的接種操作時(shí)，需要在酒精燈火焰附近進(jìn)行，B正確；C、步驟②是采用稀釋涂布平板法接種并分離高效降解多環(huán)芳烴類(lèi)化合物的菌株（目的菌），應(yīng)先用微量移液器從甲中取0.1mL菌液滴加到培養(yǎng)基乙的表面，再用涂布器將菌液均勻涂布于培養(yǎng)基乙的表面，C錯(cuò)誤；D、透明圈直徑與菌落直徑比值越大，說(shuō)明目的菌降解多環(huán)芳烴類(lèi)化合物的效果越好，因此步驟③應(yīng)從降解圈直徑與菌落直徑比值最大的菌落進(jìn)行挑選菌株并培養(yǎng)，D正確。故選C。6．三白草和魚(yú)腥草二者因療效相近且具有疊加效應(yīng)常被中醫(yī)用作“藥對(duì)”。研究者欲利用原生質(zhì)體融合技術(shù)將復(fù)方的配伍（兩種或兩種以上藥物配合使用）提前到雜種細(xì)胞，并實(shí)現(xiàn)有效成分的工廠(chǎng)化生產(chǎn)，操作如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（）A．①過(guò)程可利用鹽酸和酒精混合液（1：1）配制的解離液來(lái)完成B．②過(guò)程通常在低滲溶液中采用PEG融合法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合C．雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過(guò)程中，其特有功能喪失，但結(jié)構(gòu)不變D．圖中所示的生產(chǎn)流程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性，但未體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性〖答案〗D〖祥解〗圖示為三白草和魚(yú)腥草體細(xì)胞雜交過(guò)程，其中①為去除細(xì)胞壁，②為原生質(zhì)體融合，③脫分化形成愈傷組織，④提取代謝產(chǎn)物?！驹斘觥緼、植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，因此過(guò)程①三白草和魚(yú)腥草體細(xì)胞雜交過(guò)程中要利用纖維素酶和果膠酶水解細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體，鹽酸和酒精混合液（1：1）配制的解離液會(huì)殺死細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、過(guò)程②通常在等滲或略高滲溶液中，不能用低滲溶液，不然原生質(zhì)體會(huì)吸水漲破；可以采用化學(xué)法（PEG融合法）或物理法誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合，B錯(cuò)誤；C、植物細(xì)胞的脫分化就是讓已分化的細(xì)胞，經(jīng)過(guò)誘導(dǎo)后，失去其特有的結(jié)構(gòu)和功能，而轉(zhuǎn)變?yōu)槲捶只募?xì)胞——愈傷組織的過(guò)程，因此雜種細(xì)胞形成愈傷組織的過(guò)程中，其特有功能喪失，結(jié)構(gòu)也發(fā)生改變，C錯(cuò)誤；D、圖中過(guò)程②原生質(zhì)體融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流動(dòng)性；將雜種細(xì)胞培育成一個(gè)完整的新的植物體的過(guò)程才體現(xiàn)了植物細(xì)胞的全能性，故圖中所示的生產(chǎn)流程沒(méi)有體現(xiàn)植物細(xì)胞的全能性，D正確。故選D。7．紫杉醇是細(xì)胞的次生代謝產(chǎn)物，對(duì)多種癌癥有較好治療效果?？蒲腥藛T為獲得更多紫杉醇，嘗試?yán)弥参锝M織培養(yǎng)技術(shù)從紅豆杉的愈傷組織中提取紫杉醇，流程圖如下。下列敘述正確的是（

）A．配置培養(yǎng)基時(shí)，添加適量的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和凝固劑B．細(xì)胞懸浮培養(yǎng)與繼代是為了快速獲得更多的薄壁細(xì)胞C．用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，利于原生質(zhì)體融合D．采用非胚性愈傷組織的目的是通過(guò)器官發(fā)生途徑再分化成植株〖答案〗B〖祥解〗1、植物組織培養(yǎng)的過(guò)程:離體的植物組織。器官或細(xì)胞(外植體)脫分化形成愈傷組織愈傷組織再分化形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育植株(新植體)。2、植物組織培養(yǎng)技術(shù)具有廣泛的應(yīng)用：植物繁殖的新途徑(快繁技術(shù)、作物脫毒、人工種子)、作物新品種的培育(單倍體育種、突變體的利用)、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠(chǎng)化生產(chǎn)?！驹斘觥緼、該，不需要培養(yǎng)基為液體培養(yǎng)基，不需要添加凝固劑，A錯(cuò)誤；B、細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)和繼代培養(yǎng)是為了快速獲得更多的薄壁細(xì)胞，B正確；C、用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁為了將愈傷組織分散成單個(gè)細(xì)胞，C錯(cuò)誤；D、采用非胚性愈傷組織的目的是通過(guò)體細(xì)胞發(fā)生途徑再分化成植株，D錯(cuò)誤。故選B。8．下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的敘述，不正確的是（）A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測(cè)有毒物質(zhì)和獲得大量自身健康細(xì)胞B．從細(xì)胞株中分離出特殊性質(zhì)的細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)獲得細(xì)胞系C．培養(yǎng)保留接觸抑制的細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成單層細(xì)胞D．能連續(xù)傳代的細(xì)胞系是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，但不一定有異倍體核型、接觸抑制〖答案〗B〖祥解〗1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中（原代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿(mǎn)瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液（傳代培養(yǎng)）→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2、細(xì)胞株和細(xì)胞系（1）細(xì)胞株：是指從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞，能夠繁殖50代左右。（2）細(xì)胞系：是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，分為連續(xù)細(xì)胞系和有限細(xì)胞系，其中連續(xù)細(xì)胞系是指能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系，是發(fā)生轉(zhuǎn)化了的細(xì)胞系，大多數(shù)具有異倍體核型，有的是惡性細(xì)胞系，具有異體致癌性，有的連續(xù)細(xì)胞系獲得了不死性，但保留接觸抑制現(xiàn)象，不致癌；有限細(xì)胞系是指不能連續(xù)培養(yǎng)下去的細(xì)胞系。二倍體細(xì)胞一般為有限細(xì)胞系?！驹斘觥緼、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理即是細(xì)胞增殖，可獲得大量自身健康細(xì)胞，用于檢測(cè)有毒物質(zhì)等，A正確；B、通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱(chēng)為細(xì)胞株，細(xì)胞株是具有特殊性質(zhì)的細(xì)胞系，B錯(cuò)誤；C、由于接觸抑制，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)只能形成單層細(xì)胞，C正確；D、連續(xù)細(xì)胞系是指發(fā)生了轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系，有的獲得了不死性（癌變），但保留接觸抑制現(xiàn)象，大多數(shù)具有異倍體核型，D正確。故選B。9．研究表明，髓系細(xì)胞觸發(fā)受體2（TREM2）是一種免疫抑制受體，在腫瘤免疫逃逸中發(fā)揮重要作用。因此，TREM2抗體藥物有望提高腫瘤免疫療法的療效。下圖為T(mén)REM2單克隆抗體的制備流程圖，下列說(shuō)法正確的是（

）A．步驟①和步驟⑤分別向小鼠注射TREM2蛋白和分泌TREM2抗體的雜交瘤細(xì)胞B．經(jīng)步驟②誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞既能分泌TREM2抗體又可無(wú)限增殖C．步驟③和④的培養(yǎng)孔中均含有TREM2蛋白，依據(jù)的原理都是抗原一抗體雜交D．步驟⑥和植物組織培養(yǎng)均需使用二氧化碳培養(yǎng)箱進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)〖答案〗A〖祥解〗單克隆抗體的制備過(guò)程：（1）制備產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；（2）獲得雜交瘤細(xì)胞：①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體；（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取?！驹斘觥緼、步驟①向小鼠注射TREM2蛋白，讓小鼠發(fā)生免疫反應(yīng)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞；步驟⑤向小鼠腹腔注射雜交瘤細(xì)胞，目的是獲得單克隆抗體，A正確；B、經(jīng)步驟②誘導(dǎo)后融合的細(xì)胞只有雜交瘤細(xì)胞才能既能分泌TREM2抗體又可無(wú)限增殖，B錯(cuò)誤；C、步驟③的培養(yǎng)孔中含有TREM2蛋白，依據(jù)的原理是抗原-抗體雜交，步驟④的培養(yǎng)孔中含有特定的培養(yǎng)基，依據(jù)的原理是雜交瘤細(xì)胞能分泌抗體，C錯(cuò)誤；D、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中二氧化碳用于調(diào)節(jié)培養(yǎng)液的pH值，而植物組織培養(yǎng)的過(guò)程中不需要二氧化碳培養(yǎng)箱，D錯(cuò)誤。故選A。10．利用治療性克隆技術(shù)治療胰島功能異常型糖尿病患者的基本流程如圖所示，下列敘述正確的是（

）A．胚胎干細(xì)胞可以取自囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)B．細(xì)胞培養(yǎng)需要含有95%氧氣和5%二氧化碳的氣體條件C．該流程利用了細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞核移植和胚胎移植技術(shù)D．患者對(duì)注入的胰島細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生免疫排斥〖答案〗A〖祥解〗治療性克隆是指把患者體細(xì)胞移植到去核卵母細(xì)胞中構(gòu)建形成重組胚胎，體外培養(yǎng)到一定時(shí)期分離出ES細(xì)胞，獲得的ES細(xì)胞定向分化為所需的特定類(lèi)型細(xì)胞(如神經(jīng)細(xì)胞、肌肉細(xì)胞和血細(xì)胞)，用于治療。【詳析】A、囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞具有全能性，可以作為胚胎干細(xì)胞，A正確；B、細(xì)胞培養(yǎng)需要含有95%的空氣和5%的二氧化碳的氣體條件，B錯(cuò)誤；C、此流程中沒(méi)有利用胚胎移植技術(shù)，C錯(cuò)誤；D、培養(yǎng)的健康胰島細(xì)胞是由患者自身的胚胎干細(xì)胞發(fā)育而成，患者對(duì)注入的胰島細(xì)胞不發(fā)生免疫排斥，D錯(cuò)誤。故選A。11．如圖表示畜牧業(yè)生產(chǎn)上培育某種優(yōu)良種牛的兩種方法，有關(guān)分析錯(cuò)誤的是（）

A．應(yīng)用1中的卵母細(xì)胞常取自卵巢，并可直接用于融合B．應(yīng)用2常用雌性激素處理供體1，目的是使其超數(shù)排卵C．應(yīng)用3一般選擇桑葚胚或囊胚進(jìn)行分割D．應(yīng)用4體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性〖答案〗C〖祥解〗1、應(yīng)用1用到了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，應(yīng)用2用到了體外受精技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，應(yīng)用3用到了胚胎分割技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，應(yīng)用4用到了胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。2、細(xì)胞的全能性是指經(jīng)分裂和分化后，仍具有產(chǎn)生完整有機(jī)體或分化成其他各種細(xì)胞的潛能和特性?！驹斘觥緼、應(yīng)用1用到了核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，用到的卵母細(xì)胞常取自卵巢，但是需要在體外培養(yǎng)到MⅡ中期才能用于融合，A錯(cuò)誤；B、應(yīng)用2用到了體外受精技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，常用外源促性腺激素處理供體1，目的是目的是使其超數(shù)排卵，B錯(cuò)誤；C、應(yīng)用3用到了胚胎分割技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，一般選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑葚胚或囊胚進(jìn)行分割，C正確；D、應(yīng)用4用到了胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，因?yàn)榕囵B(yǎng)的目的是需要的組織和器官，而不是個(gè)體或其他各種細(xì)胞，所以不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，D錯(cuò)誤。故選C。12．關(guān)于“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）A．過(guò)濾液沉淀過(guò)程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止DNA降解B．DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水C．粗提取的DNA中含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)D．將粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑DNA被染成藍(lán)色〖答案〗D〖祥解〗DNA的粗提取與鑒定的實(shí)驗(yàn)原理是：①DNA的溶解性，DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的氯化鈉溶液中的溶解度不同，利用這一特點(diǎn)可以選擇適當(dāng)濃度的鹽溶液可以將DNA溶解或析出，從而達(dá)到分離的目的；②DNA不溶于酒精溶液，細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)可以溶解于酒精，利用這一原理可以將蛋白質(zhì)和DNA進(jìn)一步分離；③在沸水浴的條件下DNA遇二苯胺會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色。【詳析】A、低溫時(shí)DNA酶的活性較低，過(guò)濾液沉淀過(guò)程在4℃冰箱中進(jìn)行是為了防止DNA降解，A正確；B、DNA既溶于2mol/LNaCl溶液也溶于蒸餾水，且溶解度較高，B正確；C、粗提取的DNA中含有核蛋白、多糖等雜質(zhì)，因此為了獲得純度較高的DNA需要進(jìn)一步提純，C正確；D、將粗提取的DNA溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺試劑后經(jīng)過(guò)水浴加熱可發(fā)現(xiàn)DNA被染成藍(lán)色，D錯(cuò)誤。故選D。13．HA蛋白是禽流感病毒的重要抗原。雞卵清蛋白是由輸卵管上皮細(xì)胞中卵清蛋白基因特異性表達(dá)后分泌至輸卵管內(nèi)，參與構(gòu)成雞蛋清的蛋白質(zhì)。下圖是利用基因工程技術(shù)制備HA蛋白雞輸卵管生物反應(yīng)器的過(guò)程。幾種可供選擇的限制酶識(shí)別序列如下，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（

）

A．①為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，該過(guò)程需要逆轉(zhuǎn)錄酶、4種游離的脫氧核苷酸等組分B．目的基因與雞卵清蛋白基因啟動(dòng)子拼接前應(yīng)先在目的基因兩端分別引入HindⅢ和EcoRI的識(shí)別序列C．利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，退火溫度偏低、引物特異性差均可導(dǎo)致產(chǎn)物中出現(xiàn)部分非目標(biāo)序列D．基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精雞胚的胚盤(pán)可以使用顯微注射法〖答案〗B〖祥解〗基因表達(dá)載體包括目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子和終止子等；啟動(dòng)子是一段由特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的上游，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終表達(dá)出蛋白質(zhì)；終止子位于基因的下游，作用是終止轉(zhuǎn)錄，也是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段?！驹斘觥緼、圖中①以禽流感病毒RNA形成目的基因DNA過(guò)程，為逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程，需要的酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，逆轉(zhuǎn)錄合成的是DNA，需要4種脫氧核苷酸作為原料，A正確；B、目的基因兩端引入HindⅢ和EcoRI的識(shí)別序列，進(jìn)而使目的基因能夠與雞卵清蛋白基因啟動(dòng)子、載體正確連接，構(gòu)建基因表達(dá)載體，B錯(cuò)誤；C、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，若退火溫度偏低、則可能導(dǎo)致引物與非目的基因序列部分配對(duì)，進(jìn)而擴(kuò)增出非目的基因，引物特異性差也會(huì)導(dǎo)致和非目的基因序列部分配對(duì)，導(dǎo)致產(chǎn)物中出現(xiàn)部分非目標(biāo)序列，C正確；D、受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞時(shí)通常采用顯微注射法，因此基因表達(dá)載體導(dǎo)入受精雞胚的胚盤(pán)可以使用顯微注射法，D正確。故選B。14．在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，傳統(tǒng)方法常受限于限制酶識(shí)別序列?？蒲腥藛T研發(fā)了新的DNA重組方法:In-Fusion技術(shù)。該技術(shù)關(guān)鍵是要在目的基因兩端構(gòu)建與線(xiàn)性化質(zhì)粒末端相同的DNA序列（即同源序列），然后用In-Fusion酶處理，使同源序列形成黏性末端，最終形成的重組質(zhì)粒會(huì)在受體細(xì)胞內(nèi)形成完整的重組序列。主要操作過(guò)程如圖示。下列敘述錯(cuò)誤的是（

）A．推測(cè)In-Fusion酶的作用是識(shí)別同源序列、形成黏性末端、連接磷酸二酯鍵B．載體A端和B端的序列不同，可防止目的基因與質(zhì)粒反向連接及自身環(huán)化C．形成重組質(zhì)粒時(shí)，如果溫度遠(yuǎn)高于50℃，黏性末端的堿基不容易互補(bǔ)配對(duì)D．該技術(shù)無(wú)需識(shí)別特定切割位點(diǎn)，需識(shí)別目的基因與線(xiàn)性質(zhì)粒任意同源序列〖答案〗A〖祥解〗基因工程的工具：（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體、動(dòng)植物病毒?！驹斘觥緼、分析題意可知，本技術(shù)的過(guò)程是在目的基因兩端構(gòu)建與線(xiàn)性化質(zhì)粒末端相同的DNA序列（即同源序列），然后用In-Fusion酶處理，使同源序列形成黏性末端，最終形成的重組質(zhì)粒會(huì)在受體細(xì)胞內(nèi)形成完整的重組序列推測(cè)In-Fusion酶的作用是識(shí)別同源序列、連接磷酸二酯鍵，不具有形成黏性末端的作用，A錯(cuò)誤；B、若用限制酶切割后黏性末端相同，會(huì)導(dǎo)致自身環(huán)化和反向連接等，載體A端和B端的序列不同，可防止目的基因與質(zhì)粒反向連接及自身環(huán)化，B正確；C、據(jù)圖可知，重組質(zhì)粒形成時(shí)需要加入In-Fusion酶連接磷酸二酯鍵，且如果溫度遠(yuǎn)高于50℃，黏性末端的堿基不容易互補(bǔ)配對(duì)，C正確；D、分析題意，傳統(tǒng)方法常受限于限制酶識(shí)別序列，故科研人員研發(fā)了新的DNA重組方法:In-Fusion技術(shù)，結(jié)合圖示可知，該技術(shù)無(wú)需識(shí)別特定切割位點(diǎn)，但用In-Fusion酶處理，使同源序列形成黏性末端，故需識(shí)別目的基因與線(xiàn)性質(zhì)粒任意同源序列，D正確。故選A。15．下列關(guān)于蛋白質(zhì)工程和基因工程的比較，不合理的是（）A．蛋白質(zhì)工程的操作起點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)出相應(yīng)的基因，并借助基因工程實(shí)現(xiàn)B．蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的，蛋白質(zhì)工程最終還是要通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)完成C．當(dāng)?shù)玫娇梢员４姘肽甑母蓴_素后，在相關(guān)酶、氨基酸和適宜的溫度、pH條件下，干擾素可以大量自我合成D．基因工程和蛋白質(zhì)工程產(chǎn)生的變異都是可遺傳的〖答案〗C〖祥解〗1、蛋白質(zhì)工程：指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿(mǎn)足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需求。（基因工程在原則上只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)）。2、蛋白質(zhì)工程的基本途徑：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)應(yīng)有的氨基酸序列，找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑；之后按照基因工程的一般步驟進(jìn)行。【詳析】A、蛋白質(zhì)工程的操作起點(diǎn)是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)，設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，推測(cè)出相應(yīng)的基因序列，進(jìn)而設(shè)計(jì)出相應(yīng)的基因，并借助基因工程實(shí)現(xiàn)，A正確；B、基因工程生產(chǎn)的自然界中已存在的蛋白質(zhì)不能完全符合人類(lèi)需要，因此催生了蛋白質(zhì)工程，但由于基因決定蛋白質(zhì)，因此蛋白質(zhì)工程最終還是要通過(guò)基因修飾或基因合成來(lái)完成，B正確；C、干擾素作為一種表達(dá)產(chǎn)物，其化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)不具有自我合成的能力，C錯(cuò)誤；D、基因工程產(chǎn)生的變異即為基因重組，目的基因轉(zhuǎn)入后便可以隨宿主的基因一同表達(dá)并遺傳給后代，蛋白質(zhì)工程最終也要通過(guò)基因來(lái)改造，因此蛋白質(zhì)工程產(chǎn)生的變異也可以遺傳，D正確。故選C。第二部分（非選擇題共70分）本部分共6題，共70分。16．糯米酒是具有中國(guó)特色的傳統(tǒng)酒種，其釀造過(guò)程中需要由酒曲中的根霉實(shí)現(xiàn)淀粉的糖化，由酵母菌實(shí)現(xiàn)酒精發(fā)酵。研究人員從幾種酒曲中進(jìn)行了優(yōu)良根霉與酵母菌的篩選。請(qǐng)回答問(wèn)題：(1)家庭釀造糯米酒時(shí)，需要將蒸熟的糯米與酒曲拌勻后放在容器中，在糯米中央挖一個(gè)洞，蓋好容器。通常一天后容器中就會(huì)出現(xiàn)大量液體，其中含有可溶性糖和酒精，液體中水的來(lái)源是根霉和酵母菌的有氧呼吸，水的產(chǎn)生是在有氧呼吸第階段發(fā)生的，該階段發(fā)生場(chǎng)所是。(2)為比較不同根霉產(chǎn)糖能力，將從酒曲中分離所得的5種根霉分別接種到等量蒸熟糯米中，24h后所得醪液體積大致相同，檢測(cè)醪液中糖量，結(jié)果如圖1．檢測(cè)結(jié)果表明，產(chǎn)糖能力最強(qiáng)的根霉是。(3)為比較不同酵母菌的發(fā)酵產(chǎn)酒精能力，將從酒曲中分離所得的5種酵母菌接種到等量葡萄糖液中，檢測(cè)發(fā)酵液因釋放導(dǎo)致的失重量，結(jié)果如圖2，產(chǎn)酒精能力最強(qiáng)的酵母菌是。(4)進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，糖化過(guò)快的菌株并不適合釀酒，原因是發(fā)酵液中葡萄糖濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致酵母菌。〖答案〗(1)三線(xiàn)粒體內(nèi)膜(2)E-2(3)CO2Y-1(4)滲透失水〖祥解〗酵母菌是一類(lèi)單細(xì)胞真菌，能以多種糖類(lèi)作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和能量的來(lái)源，因此在一些含糖量較高的水果、蔬菜表面經(jīng)?？梢园l(fā)現(xiàn)酵母菌的存在。酵母菌是兼性厭氧微生物，在無(wú)氧條件下能進(jìn)行酒精發(fā)酵，可用于釀酒、制作饅頭和面包等。溫度是影響酵母菌生長(zhǎng)的重要因素，釀酒酵母的最適生長(zhǎng)溫度約為28°C?！驹斘觥浚?）酵母菌有氧呼吸第三階段氧氣和[H]發(fā)生反應(yīng)生成水，發(fā)生在線(xiàn)粒體內(nèi)膜上。（2）據(jù)圖可知，根霉E-2總糖量和葡萄糖量最高，所以產(chǎn)糖能力最強(qiáng)的根霉是E-2。（3）酵母菌無(wú)氧條件下能進(jìn)行酒精發(fā)酵，產(chǎn)生酒精和CO2，發(fā)酵液失重是因?yàn)榘l(fā)酵過(guò)程中CO2的釋放。據(jù)圖2可知酵母菌Y-1對(duì)應(yīng)的累計(jì)失重量最大，所以產(chǎn)酒精能力最強(qiáng)的酵母菌是Y-1。（4）發(fā)酵液中葡萄糖濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致酵母菌滲透失水，這樣的菌株不適合釀酒。17．大麗輪枝菌侵染棉花導(dǎo)致其減產(chǎn)?？茖W(xué)家欲用芽孢桿菌對(duì)其進(jìn)行生物防治。(1)培養(yǎng)基中的蛋白胨可為菌體生長(zhǎng)提供和維生素等。將現(xiàn)有的芽孢桿菌ZY-17、ZY-109置于（填“液體”或“固體”）培養(yǎng)基中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。(2)在培養(yǎng)基平板中央分別放置大麗輪枝菌的菌絲塊，然后在菌絲塊對(duì)應(yīng)三角點(diǎn)分別滴加ZY-17和ZY-109的菌液，以接種的培養(yǎng)基為空白對(duì)照，進(jìn)行“平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)”，結(jié)果如圖1。①若在一個(gè)平板中完成圖1中三組平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)，請(qǐng)?jiān)趫D2中畫(huà)出實(shí)驗(yàn)方案。②分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知ZY-17的抑菌效果較好，依據(jù)是：ZY-17處理后。(3)為探究ZY-17抑制大麗輪枝菌的方式，請(qǐng)?zhí)岢鲆粋€(gè)假設(shè)，該假設(shè)能用以下材料和設(shè)備加以驗(yàn)證。主要實(shí)驗(yàn)材料和設(shè)備：ZY-17、大麗輪枝菌、培養(yǎng)基、圓形濾紙小片、離心機(jī)和細(xì)菌培養(yǎng)箱。〖答案〗(1)供氮源、碳源、無(wú)機(jī)鹽液體(2)不含菌體的培養(yǎng)基ZY-17處理后大麗輪枝菌的菌絲塊明顯小于ZY-109處理效果(3)假設(shè)ZY-17通過(guò)分泌相關(guān)物質(zhì)抑制大麗輪枝菌先用培養(yǎng)基分別培養(yǎng)ZY-17和大麗輪枝菌，一段時(shí)間后，將ZY-17及其培養(yǎng)基離心后取其上清液（含有ZY-17的分泌物），用圓形濾紙小片浸入其中，隨后將浸有ZY-17的分泌物接種到含大麗輪枝菌的培養(yǎng)基上，同時(shí)以只接種大麗輪枝菌的平板作為對(duì)照，置于細(xì)菌培養(yǎng)箱，一段時(shí)間后觀(guān)察，若含有圓形濾紙小片的平板上，大麗輪枝菌菌落明顯小于對(duì)照組，則說(shuō)明假設(shè)成立〖祥解〗蛋白胨可為菌體生長(zhǎng)提供氮源、碳源、無(wú)機(jī)鹽、維生素等營(yíng)養(yǎng)。由圖可知，ZY-17處理后大麗輪枝菌的菌絲塊明顯小于ZY-109處理效果，說(shuō)明ZY-17的抑菌效果較好。【詳析】（1）蛋白胨可為菌體生長(zhǎng)提供氮源、碳源、無(wú)機(jī)鹽、維生素等營(yíng)養(yǎng)；菌體擴(kuò)大培養(yǎng)一般用液體培養(yǎng)基，有利于菌體與培養(yǎng)基充分接觸。（2）ZY-17和ZY-109的菌液中除菌體外為培養(yǎng)基，所以接種不含菌體的培養(yǎng)基為空白對(duì)照。①若在一個(gè)平板中完成圖1中三組平板對(duì)峙實(shí)驗(yàn)，則可在培養(yǎng)基平板中央放置大麗輪枝菌的菌絲塊，然后分別在對(duì)應(yīng)三角點(diǎn)分別滴加ZY-17和ZY-109的菌液和不含菌體的培養(yǎng)基，其接種如下：

②由圖可知，ZY-17處理后大麗輪枝菌的菌絲塊明顯小于ZY-109處理效果，說(shuō)明ZY-17的抑菌效果較好。（3）假設(shè)ZY-17通過(guò)分泌相關(guān)物質(zhì)抑制大麗輪枝菌?？上扔门囵B(yǎng)基分別培養(yǎng)ZY-17和大麗輪枝菌，一段時(shí)間后，將ZY-17及其培養(yǎng)基離心后取其上清液（含有ZY-17的分泌物），用圓形濾紙小片浸入其中，隨后將浸有ZY-17的分泌物接種到含大麗輪枝菌的培養(yǎng)基上，同時(shí)以只接種大麗輪枝菌的平板作為對(duì)照，置于細(xì)菌培養(yǎng)箱，一段時(shí)間后觀(guān)察，若含有圓形濾紙小片的平板上，大麗輪枝菌菌落明顯小于對(duì)照組，則說(shuō)明假設(shè)成立。18．花椰菜（2n=18）易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因?？蒲腥藛T用一定劑量的紫外線(xiàn)處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株，流程如下圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：(1)過(guò)程①所用的酶是。(2)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的，從而維持原生質(zhì)體的形態(tài)和活性。細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是的再生，進(jìn)而經(jīng)過(guò)形成愈傷組織。(3)經(jīng)過(guò)②操作后，需篩選出融合的雜種細(xì)胞，顯微鏡下觀(guān)察融合的活細(xì)胞中有黑芥葉肉細(xì)胞的（填寫(xiě)細(xì)胞器名稱(chēng)）存在，可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(4)采用特異性引物對(duì)花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對(duì)雙親及再生植株1~4進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖判斷，再生植株1~4中一定是雜種植株的有。

雜種植株染色體數(shù)目材料染色體數(shù)花椰菜18黑芥16雜種植株128雜種植株226雜種植株330雜種植株424雜種植株534(5)進(jìn)一步檢測(cè)獲得的雜種植株的染色體條數(shù)，結(jié)果如上表，除了紫外線(xiàn)處理使黑芥原生質(zhì)體染色體片段化導(dǎo)致染色體條數(shù)改變以外，雜種植株染色體條數(shù)在24-34范圍內(nèi)不等的原因可能是。(6)對(duì)雜種植株進(jìn)行接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株。〖答案〗(1)纖維素酶和果膠酶(2)滲透壓細(xì)胞壁脫分化(3)葉綠體(4)1、2、4(5)雜種細(xì)胞分裂過(guò)程中會(huì)丟失來(lái)自黑芥、花椰菜的部分染色體，有時(shí)會(huì)發(fā)生染色體易位(6)黑腐病菌〖祥解〗分析題圖：圖示為采用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得抗黑腐病雜種植株的流程圖，其中①表示采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁的過(guò)程；②表示誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的過(guò)程；之后再采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)即可得到雜種植株?！驹斘觥浚?）植物細(xì)胞壁的主要成分是纖維素和果膠，根據(jù)酶的專(zhuān)一性原理，可采用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。（2）原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓以維持原生質(zhì)體的形態(tài)和活性。原生質(zhì)體經(jīng)過(guò)細(xì)胞壁再生，進(jìn)而脫分化形成愈傷組織。（3）過(guò)程②使用PEG誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合后，需要篩選出融合的雜種細(xì)胞，可以通過(guò)觀(guān)察融合的活細(xì)胞中有黑芥葉肉細(xì)胞的葉綠體存在可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。（4）根據(jù)圖譜，花椰菜含有堿基對(duì)為300和600的DNA片段，黑芥含有堿基對(duì)為1000、1300和1500的片段，再生植株3只含有長(zhǎng)度為300和600的片段，與花椰菜一致，而1、2、4既含有花椰菜DNA片段，又含有黑芥DNA片段，為雜種植株。（5）雜種細(xì)胞分裂過(guò)程中會(huì)丟失來(lái)自黑芥、花椰菜的部分染色體，有時(shí)會(huì)發(fā)生染色體易位，這使雜種植株染色體組成呈現(xiàn)多樣性，因此雜種植株染色體條數(shù)在24-34范圍內(nèi)不等。（6）對(duì)雜種植株進(jìn)行個(gè)體水平上進(jìn)行檢測(cè)，即接種黑腐病菌，觀(guān)察植物的性狀，即可篩選出具有高抗性的雜種植株。19．KLA是一類(lèi)在細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的小分子抗癌肽，但其進(jìn)入細(xì)胞的能力很弱。研究者利用噬菌體展示技術(shù)篩選靶向胰腺癌細(xì)胞的多肽，并利用該多肽對(duì)KLA進(jìn)行改造，以提高其進(jìn)入細(xì)胞的能力，進(jìn)而增強(qiáng)其抗癌效果。(1)M13噬菌體是一種在大腸桿菌體內(nèi)的DNA病毒。以胰腺癌細(xì)胞特異性表達(dá)的B蛋白為靶點(diǎn)，設(shè)計(jì)不同DNA片段，插入M13噬菌體外殼蛋白基因中，并以融合蛋白的形式表達(dá)到噬菌體表面，從而獲得展示不同多肽的M13噬菌體庫(kù)。(2)將M13噬菌體庫(kù)與胰腺癌細(xì)胞共孵育，篩選靶向B蛋白的多肽，過(guò)程如圖。第一次洗脫的目的是洗去的噬菌體，對(duì)第二次洗脫獲得的噬菌體進(jìn)行擴(kuò)增，重復(fù)如圖過(guò)程。多輪淘選后，對(duì)篩選出的噬菌體進(jìn)行DNA測(cè)序，并與比對(duì)，獲得靶向胰腺癌細(xì)胞的HMN多肽及TAP多肽的編碼序列。用熒光素標(biāo)記HMN及TAP多肽，分別與胰腺癌細(xì)胞混合，保溫后漂洗，檢測(cè)熒光強(qiáng)度，發(fā)現(xiàn)，因此選取HMN多肽進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。利用基因工程技術(shù)獲得HMN-KLA融合多肽，發(fā)現(xiàn)胰腺癌細(xì)胞對(duì)融合多肽的攝取率顯著提高。(3)評(píng)估HMN-KLA融合多肽對(duì)胰腺癌細(xì)胞的影響，結(jié)果如圖。

如圖結(jié)果表明，。(4)線(xiàn)粒體損傷可導(dǎo)致膜電位下降，釋放細(xì)胞色素C蛋白至細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，進(jìn)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的發(fā)生。線(xiàn)粒體膜電位正常時(shí)，熒光染料M以紅色熒光聚集體的形式存在于線(xiàn)粒體中；膜電位下降時(shí)，染料M不能在線(xiàn)粒體中聚集，而以綠色熒光單體的形式存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中。為驗(yàn)證“融合多肽通過(guò)破壞線(xiàn)粒體誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞凋亡”，利用題目給定的材料和設(shè)備提出實(shí)驗(yàn)思路。主要材料和設(shè)備：胰腺癌細(xì)胞、培養(yǎng)基、HMN-KLA融合多肽、染料M、顯微鏡〖答案〗(1)寄生(2)不能特異性結(jié)合設(shè)計(jì)的DNA片段用熒光素標(biāo)記HMN多肽的一組中熒光強(qiáng)度更強(qiáng)(3)HMN-KLA融合多肽對(duì)胰腺癌細(xì)胞活性的抑制作用較強(qiáng)，且隨著HMN-KLA融合多肽的濃度升高，對(duì)胰腺癌細(xì)胞的抑制作用增強(qiáng)(4)將胰腺癌細(xì)胞分成A、B兩組，A組細(xì)胞置于含HMN-KLA融合多肽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，B組置于不含HMN-KLA融合多肽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，其他培養(yǎng)條件相同，并用染料M對(duì)兩組細(xì)胞進(jìn)行染色，一段時(shí)間后用顯微鏡觀(guān)察兩組細(xì)胞中熒光染料M存在的部位?！枷榻狻绞删w是一類(lèi)病毒的統(tǒng)稱(chēng)，它們主要的寄生目標(biāo)是特定的某些細(xì)菌，噬菌體的寄生可以導(dǎo)致細(xì)菌的破裂，因此被稱(chēng)為噬菌體?！驹斘觥浚?）噬菌體是一類(lèi)病毒的統(tǒng)稱(chēng)，它們主要的寄生目標(biāo)是特定的某些細(xì)菌，因此M13噬菌體是一種寄生在大腸桿菌體內(nèi)的DNA病毒。（2）多種基因分別轉(zhuǎn)入不同噬菌體DNA上，表達(dá)出多種不同的多肽，要檢測(cè)哪個(gè)噬菌體能表達(dá)出與B蛋白特異性結(jié)合的多肽，需要將胰腺癌細(xì)胞與噬菌體混合，第一次洗脫掉的是不能特異性結(jié)合的，第二次是將與胰腺癌細(xì)胞B蛋白結(jié)合的洗脫下來(lái)，因此收集第二次洗脫液，提取篩選出的噬菌體DNA進(jìn)行測(cè)序，并與所設(shè)計(jì)的DNA片段進(jìn)行對(duì)比，獲得靶向胰腺癌細(xì)胞的HMN多肽及TAP多肽的編碼序列；用熒光素標(biāo)記HMN及TAP多肽，分別與胰腺癌細(xì)胞混合，保溫后漂洗，檢測(cè)熒光強(qiáng)度，若發(fā)現(xiàn)用熒光素標(biāo)記HMN多肽的一組中熒光強(qiáng)度更強(qiáng)，說(shuō)明HMN多肽與乳腺癌細(xì)胞的相對(duì)結(jié)合力更強(qiáng)，因此選取HMN多肽進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。（3）如圖分析可知，與其他三組相比，不同濃度下的HMN-KLA融合多肽處理下胰腺癌細(xì)胞活性均是最低的，且濃度越高，胰腺癌細(xì)胞活性越低，表明HMN-KLA融合多肽對(duì)胰腺癌細(xì)胞活性的抑制作用較強(qiáng)，且隨著HMN-KLA融合多肽的濃度升高，對(duì)胰腺癌細(xì)胞的抑制作用增強(qiáng)。（4）由題意可知，線(xiàn)粒體膜電位正常時(shí)，熒光染料M以紅色熒光聚集體的形式存在于線(xiàn)粒體中；膜電位下降時(shí)，染料M不能在線(xiàn)粒體中聚集，而以綠色熒光單體的形式存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，若要驗(yàn)證“融合多肽通過(guò)破壞線(xiàn)粒體誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞凋亡”，可以將胰腺癌細(xì)胞分成A、B兩組，A組細(xì)胞置于含HMN-KLA融合多肽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，B組置于不含HMN-KLA融合多肽的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，其他培養(yǎng)條件相同，并用染料M對(duì)兩組細(xì)胞進(jìn)行染色，一段時(shí)間后用顯微鏡觀(guān)察兩組細(xì)胞中熒光染料M存在的部位。20．閱讀以下材料，回答（1）~（5）題?！叭嗽炀印薄叭嗽炀印笔且环N可以替代精子使卵細(xì)胞“受精”的單倍體胚胎干細(xì)胞。我國(guó)科研人員利用先進(jìn)的胚胎操作技術(shù)，獲得小鼠“人造精子”的流程如圖1所示：目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞系，其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無(wú)包含Y染色體的細(xì)胞。單倍體胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)成為二倍體細(xì)胞，原因是有一部分單倍體細(xì)胞在分裂期時(shí)發(fā)生異常，跳過(guò)分裂期重新進(jìn)入分裂間期，導(dǎo)致DNA含量加倍。流式細(xì)胞儀（FACS）可根據(jù)細(xì)胞中DNA含量對(duì)不同細(xì)胞進(jìn)行分選，最終獲得單倍體胚胎干細(xì)胞。小鼠孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞具有一定的受精能力，將其注射到卵細(xì)胞中成功得到健康的小鼠。但是，運(yùn)用這種技術(shù)獲得的小鼠成活率很低。研究人員發(fā)現(xiàn)小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞中H19和IG兩個(gè)基因的DNA甲基化水平要低于精子（甲基化能抑制這兩個(gè)基因的表達(dá)），隨著細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，這兩個(gè)區(qū)域甲基化逐漸變少?；谶@些事實(shí)，科研人員又進(jìn)一步設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)明顯提高了小鼠的成活率。“人造精子”由于其基因組的單倍體性，在體外幾乎能夠無(wú)限增殖且“受精”后能產(chǎn)生后代，可應(yīng)用于各種基因功能的研究。例如：正常二倍體的胚胎干細(xì)胞包含兩套完整的基因組，如果一條染色體上的基因發(fā)生隱性突變，另一條染色體上的基因可以彌補(bǔ)，就能保證細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。對(duì)于單倍體細(xì)胞來(lái)說(shuō)，無(wú)論基因發(fā)生顯性突變或隱性突變，由于沒(méi)有備份基因來(lái)補(bǔ)償其功能的缺失，就會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的生理缺陷，進(jìn)而得知該基因與這一生理功能相關(guān)。（1）文中提到的小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞有個(gè)染色體組，該類(lèi)細(xì)胞可通過(guò)方式進(jìn)行增殖，能夠長(zhǎng)期傳代培養(yǎng)。已知小鼠Y染色體比X染色體短小，因此實(shí)驗(yàn)無(wú)法獲得含Y染色體的單倍體胚胎干細(xì)胞，其原因可能是。（2）將利用同一小鼠獲得的孤雄單倍體胚胎干細(xì)胞分別注射到不同卵細(xì)胞中，激活并啟動(dòng)胚胎發(fā)育，成功得到多個(gè)健康小鼠。這些小鼠被稱(chēng)為半克隆小鼠的原因是。（請(qǐng)從遺傳物質(zhì)的來(lái)源進(jìn)行分析）（3）圖2為FACS檢測(cè)的結(jié)果，下列相關(guān)分析正確的是：A．c峰中細(xì)胞的DNA含量是b峰中的2倍，是a峰中的4倍B．a(chǎn)峰與b峰，b峰與c峰之間的細(xì)胞正進(jìn)行DNA復(fù)制C．c峰中的細(xì)胞有處于分裂期的單倍體細(xì)胞D．a(chǎn)峰中的細(xì)胞是科研人員想要獲得的單倍體細(xì)胞（4）結(jié)合文中信息推測(cè)科研人員如何提高了半克隆小鼠的成活率。（5）基于文中信息，請(qǐng)從構(gòu)建基因突變小鼠模型、遺傳病的控制等角度分析“人造精子”可能具有的應(yīng)用價(jià)值（寫(xiě)出一條即可）?！即鸢浮剑?）1有絲分裂Y染色體上的基因無(wú)法支持單倍體胚胎干細(xì)胞的存活/Y染色體上缺少支持單倍體胚胎干細(xì)胞存活的基因（2）克隆小鼠細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)全部來(lái)自同一個(gè)體，半克隆小鼠細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)一半來(lái)自同一個(gè)雄性個(gè)體（3）ABD（4）提高H19和IG基因的甲基化水平/抑制H19和IG基因的表達(dá)/敲除H19和IG基因（5）應(yīng)用價(jià)值1：可利用具有顯性突變基因的“人造精子”與卵細(xì)胞受精，構(gòu)建各種基因突變的小鼠模型庫(kù)，進(jìn)而在個(gè)體水平上研究基因的功能。應(yīng)用價(jià)值2：若父親的精子存在基因缺陷，可利用能無(wú)限增殖且可供長(zhǎng)時(shí)間修復(fù)操作、檢測(cè)、挑選的“人造精子”，進(jìn)行突變基因的修復(fù)。（〖答案〗合理即可得分）〖祥解〗“人造精子”是一種可以替代精子使卵細(xì)胞“受精”的單倍體胚胎干細(xì)胞。目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞系，其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無(wú)包含Y染色體的細(xì)胞。單倍體胚胎干細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中可能會(huì)成為二倍體細(xì)胞，原因是有一部分單倍體細(xì)胞在分裂期時(shí)發(fā)生異常，跳過(guò)分裂期重新進(jìn)入分裂間期，導(dǎo)致DNA含量加倍。【詳析】（1）小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞有一個(gè)染色體組，可通過(guò)有絲分裂方式進(jìn)行增殖。小鼠Y染色體比X染色體短小，包含的基因信息不完整，無(wú)法支持單倍體胚胎干細(xì)胞的存貨，因此實(shí)驗(yàn)無(wú)法獲得含Y染色體的單倍體胚胎干細(xì)胞。（2）克隆小鼠細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)一半來(lái)自單倍體干細(xì)胞，一半來(lái)自生殖細(xì)胞，全部來(lái)自同一個(gè)體。半克隆小鼠細(xì)胞核中的遺傳物質(zhì)一半來(lái)自同一個(gè)雄性個(gè)體。（3）由圖可知，a峰的DNA含量為20，b峰的DNA含量為40，c峰的DNA含量為80，c峰中細(xì)胞的DNA含量是b峰中的2倍，是a峰中的4倍。a峰與b峰，b峰與c峰之間的細(xì)胞正進(jìn)行DNA復(fù)制。a峰的DNA含量為20是科研人員想要獲得的單倍體細(xì)胞。（4）題中信息“小鼠單倍體胚胎干細(xì)胞中H19和IG兩個(gè)基因的DNA甲基化水平要低于精子（甲基化能抑制這兩個(gè)基因的表達(dá)），隨著細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，這兩個(gè)區(qū)域甲基化逐漸變少?！彼钥赏ㄟ^(guò)提高H19和IG基因的甲基化水平來(lái)提高半克隆小鼠的成活率。（5）“人造精子”可能具有的應(yīng)用價(jià)值可能有：構(gòu)建各種基因突變的小鼠模型庫(kù)，進(jìn)而在個(gè)體水平上研究基因的功能；進(jìn)行突變基因的修復(fù)等。21．大腸桿菌能進(jìn)入實(shí)體瘤核心并保持較強(qiáng)活性，科研人員期望利用大腸桿菌構(gòu)建一種基因表達(dá)可控的工程菌，期望用于人體特定部位實(shí)體瘤的免疫治療。(1)科研人員利用溫度敏感型轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白構(gòu)建溫控表達(dá)的質(zhì)粒系統(tǒng)，如下圖。①利用來(lái)自λ噬菌體的溫度敏感型轉(zhuǎn)錄抑制因子Tcl42作為“開(kāi)關(guān)”構(gòu)建溫控抑制元件，在（選填“λ噬菌體”、“大腸桿菌”或“人”）中具強(qiáng)活性的啟動(dòng)子pLac可以使Tcl42持續(xù)性表達(dá)，抑制啟動(dòng)子pRL；當(dāng)控溫至42℃時(shí)才開(kāi)啟特定基因的表達(dá)。②Tcl42開(kāi)關(guān)僅在加熱時(shí)瞬時(shí)激活特定基因，而免疫療法需要數(shù)周才能見(jiàn)效，所以設(shè)計(jì)了“基因電路”——一次短暫的溫度激活后可維持長(zhǎng)期的基因表達(dá)。其核心基因包括重組酶Bxb1基因、分泌型αPD-L1蛋白基因（該蛋白可用免疫治療）等。請(qǐng)選擇相關(guān)選項(xiàng)完善該“基因電路”的技術(shù)路線(xiàn)：及質(zhì)粒，獲基因電路→受體菌37℃時(shí)，蛋白Tcl42抑制啟動(dòng)子pRL→→免疫元件無(wú)功能（不表達(dá)αPD-L1）→→解除蛋白Tcl42對(duì)啟動(dòng)子pRL的抑制→→→細(xì)菌合成GFP，并分泌大量αPD-L1。A、重組酶Bxb1基因不表達(dá)

B、菌體升溫至42℃時(shí)C、用不同的限制酶、DNA連接酶分別處理溫控抑制元件、重組元件、免疫元件D、啟動(dòng)子p7啟動(dòng)熒光蛋白GFP基因、αPD-L1基因的轉(zhuǎn)錄E、重組酶Bxb1基因表達(dá)，進(jìn)而引起啟動(dòng)子p7兩側(cè)發(fā)生重組(2)科研人員用處理大腸桿菌，使其處于感受態(tài)，從而將“基因電路”質(zhì)粒導(dǎo)入菌體內(nèi)，經(jīng)過(guò)培養(yǎng)、涂布后，篩選（選項(xiàng)），由此成功構(gòu)建用于免疫治療的溫控工程菌（EcT）。A、含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上形成的菌落