公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座

動物細(xì)胞工程公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第1頁動物細(xì)胞工程慣用技術(shù)伎倆：動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞核移植、動物細(xì)胞融合、單克隆抗體思索：植物細(xì)胞工程慣用技術(shù)伎倆有哪些？植物組織培養(yǎng)、

植物體細(xì)胞雜交強調(diào)：動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是其它動物細(xì)胞工程技術(shù)基礎(chǔ)。公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第2頁燒傷病人治療通常是取燒傷病人健康皮膚進行自體移植，但對于大面積燒傷病人來講，健康皮膚很有限，請同學(xué)們想一想怎樣來治療該病人？

取該患者皮膚進行細(xì)胞培養(yǎng),取得足量細(xì)胞后再移植公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第3頁學(xué)習(xí)目標(biāo)：【知識能力】1、動物細(xì)胞培養(yǎng)過程、條件及應(yīng)用

2、應(yīng)用細(xì)胞基礎(chǔ)知識，分析細(xì)胞工程理論基礎(chǔ)【情感態(tài)度與價值觀】

1、討論細(xì)胞工程技術(shù)社會意義

2、認(rèn)同細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)理論研究與技術(shù)開發(fā)之間關(guān)系一、動物細(xì)胞培養(yǎng)公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第4頁

概念：從動物機體中取出相關(guān)組織，將它分散成單個細(xì)胞，然后在適宜培養(yǎng)基中，讓這些細(xì)胞生長和繁殖。

一、動物細(xì)胞培養(yǎng)原理：是細(xì)胞增殖（有絲分裂）公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第5頁一、動物細(xì)胞培養(yǎng)閱讀P53-55“哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)”并思索：

1、動物細(xì)胞生長特點是什么？2、為何選取動物胚胎或幼齡個體器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？

3、為何要對取出動物組織進行處理，使細(xì)胞分散？4、用胰蛋白酶對動物組織進行處理是因為細(xì)胞間物質(zhì)主要是什么？胰蛋白酶真不會把細(xì)胞消化掉嗎？為何？

5、動物細(xì)胞培養(yǎng)條件有哪些？6、簡述動物細(xì)胞培養(yǎng)操作過程公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第6頁1、動物細(xì)胞生長特點：細(xì)胞貼壁：

懸液中分散細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上，稱為細(xì)胞貼壁。要求：培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿內(nèi)表面光滑、無毒、易于貼附。

公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第7頁接觸抑制：細(xì)胞在貼壁生長過程中，伴隨細(xì)胞分裂，數(shù)量不停增加，最終形成一個單層，此時細(xì)胞間相互接觸，細(xì)胞分裂和生長停頓，數(shù)量不再增加。50代以后失去接觸抑制接觸抑制動物細(xì)胞生長特點部分細(xì)胞突變，取得不死性，向癌細(xì)胞方向發(fā)展，糖蛋白降低，失去接觸抑制（如腫瘤細(xì)胞）。接觸抑制公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第8頁動物組織塊細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞幼齡動物器官組織；動物胚胎加入培養(yǎng)液用胰蛋白酶等處理貼壁細(xì)胞適宜條件公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第9頁2、為何選取動物胚胎或幼齡個體器官或組織做動物細(xì)胞培養(yǎng)材料？動物胚胎或幼齡動物組織、器官，它們細(xì)胞分化程度低，增殖能力強，分裂旺盛，輕易培養(yǎng)。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第10頁動物組織塊細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞幼齡動物器官組織；動物胚胎加入培養(yǎng)液用胰蛋白酶等處理貼壁細(xì)胞適宜條件公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第11頁3、為何要對取出動物組織進行處理，使細(xì)胞分散？

分散單個細(xì)胞輕易攝取所需營養(yǎng)，排出代謝廢物。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第12頁4、用胰蛋白酶對動物組織進行處理是因為細(xì)胞間物質(zhì)主要是什么？胰蛋白酶真不會把細(xì)胞消化掉嗎？為何？

細(xì)胞間物質(zhì)主要是蛋白質(zhì)（膠原纖維）。一、動物細(xì)胞培養(yǎng)胰蛋白酶除了能夠消化細(xì)胞間蛋白外，長時間作用也會消化細(xì)胞膜蛋白，對細(xì)胞有損傷作用，所以必須控制好胰蛋白酶消化時間。

公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第13頁動物組織塊細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)胰蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞幼齡動物器官組織；動物胚胎加入培養(yǎng)液用胰蛋白酶等處理貼壁細(xì)胞適宜條件公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第14頁5、動物細(xì)胞培養(yǎng)條件1、無菌、無毒環(huán)境（添加一定量抗生素，定時更換培養(yǎng)液）2、營養(yǎng)（葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素、動物血清等。）3、溫度和PH36.5+（-）0.5度,7.2-7.44、氣體環(huán)境：

O2和CO2（95%空氣和5%CO2

）確保細(xì)胞順利生長增殖一、動物細(xì)胞培養(yǎng)公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第15頁一、動物細(xì)胞培養(yǎng)6、過程：動物胚胎或幼齡動物組織、器官細(xì)胞懸浮液胰蛋白酶10代細(xì)胞原代培養(yǎng)50代細(xì)胞傳代培養(yǎng)細(xì)胞株無限傳代細(xì)胞系單個細(xì)胞加培養(yǎng)液遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變（分解彈性纖維）從機體取出后馬上培養(yǎng)細(xì)胞為原代細(xì)胞。普通培養(yǎng)第1代細(xì)胞與傳10代以內(nèi)細(xì)胞稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。將原代細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細(xì)胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，普通培養(yǎng)第11代細(xì)胞與傳40代或50代稱為傳代培養(yǎng)。用胰蛋白酶等處理貼壁細(xì)胞公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第16頁植物組織培養(yǎng)和動物細(xì)胞培養(yǎng)比較比較項目植物組織培養(yǎng)動物細(xì)胞培養(yǎng)原理細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖培養(yǎng)基狀態(tài)固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基特有成份蔗糖植物激素葡萄糖動物血清培養(yǎng)結(jié)果植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系培養(yǎng)目標(biāo)快速繁殖、培育無病毒植株取得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白細(xì)胞全能性細(xì)胞增殖固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基蔗糖植物激素葡萄糖動物血清植物體細(xì)胞株、細(xì)胞系快速繁殖、培育無病毒植株取得細(xì)胞或細(xì)胞分泌蛋白公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第17頁動物細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用：①.大規(guī)模生產(chǎn)生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；②.檢測有毒物質(zhì)，判斷某種物質(zhì)毒性；③.培養(yǎng)基因工程中受體細(xì)胞公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第18頁1.用動、植物成體體細(xì)胞進行離體培養(yǎng)，以下敘述正確是

A．都需用培養(yǎng)箱

B．都須用液體培養(yǎng)基

C．都要在無菌條件下進行

D．都可表達細(xì)胞全能性C鞏固練習(xí)：公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第19頁2、以下屬于動物細(xì)胞培養(yǎng)與植物組織培養(yǎng)主要區(qū)分是

A.培養(yǎng)基成份不一樣

B.動物細(xì)胞培養(yǎng)不需要在無菌條件下進行

C.動物細(xì)胞能夠傳代培養(yǎng)，而植物細(xì)胞不能

D.動物細(xì)胞能夠大量培養(yǎng)，而植物細(xì)胞只能培養(yǎng)成植株A3、動物細(xì)胞工程技術(shù)基礎(chǔ)是

A.動物細(xì)胞融合B.單克隆抗體

C.胚胎移植D.動物細(xì)胞培養(yǎng)D公開課動物細(xì)胞培養(yǎng)專家講座第20頁4、細(xì)胞株特點是

A．遺傳物質(zhì)沒有改變，能夠無限傳代

B．遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，不可無限傳代

C．遺傳物質(zhì)沒有改變，不可無限傳代

D．遺傳物質(zhì)發(fā)生改變，且有癌變特點，能夠無限傳代

5、在動物細(xì)胞培養(yǎng)中有部分細(xì)胞可能在培養(yǎng)條件下無限制地傳代下去，這種傳代細(xì)胞稱之為:A．原代培養(yǎng)B．傳代培養(yǎng)

C．細(xì)胞株D．