血糖含量的測(cè)定_第1頁
血糖含量的測(cè)定_第2頁
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血糖含量的測(cè)定_第4頁
血糖含量的測(cè)定_第5頁
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二、試驗(yàn)原理血液中所含葡萄糖,稱為血糖。它是糖在體內(nèi)運(yùn)輸形式。本試驗(yàn)采取鄰甲苯胺法測(cè)定血糖。其原理是葡萄糖在酸性介質(zhì)中加熱脫水反應(yīng)生成5-羥甲基-2-呋喃甲醛,分子中醛基與鄰甲苯胺縮合成青色薛夫氏堿,經(jīng)過比色能夠定量。血糖含量的測(cè)定第1頁三、試劑和器材試劑鄰甲苯胺試劑:稱取硫脲1.5g溶于750mL冰醋酸中,加鄰甲苯胺150mL及飽和硼酸40mL,混勻后加冰醋酸至1000mL,置棕色瓶中,冰箱保留。葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液:0.1mg/mL。血糖含量的測(cè)定第2頁材料動(dòng)物血清器材具塞試管1.5×15cm(×8);分光光度計(jì)。血糖含量的測(cè)定第3頁四、操作方法1.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線取6支試管編號(hào)后,按下表次序加入試劑:加畢,溫和混勻,于沸水浴中煮沸4min取下,冷卻,放置30min,用1cm比色杯,試劑空白為參比,測(cè)定630nm處吸光值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。血糖含量的測(cè)定第4頁管號(hào)012345標(biāo)準(zhǔn)葡萄糖液(mL)0.00.20.40.60.81.0蒸餾水(mL)1.00.80.60.40.20.0鄰甲苯胺試劑(mL)5.05.05.05.05.05.0A630血糖含量的測(cè)定第5頁2、樣品測(cè)定取3支試管編號(hào)后,分別加入試劑,與標(biāo)準(zhǔn)曲線同時(shí)作比色測(cè)定:管號(hào)對(duì)照樣品①樣品②稀釋未知血清樣品(mL)0.000.100.10蒸餾水(mL)0.100.000.00鄰甲苯胺試劑(mL)5.05.05.0A630血糖含量的測(cè)定第6頁

加畢,溫和混勻,于沸水浴中煮沸4min取下,冷卻,放置30min,用1cm比色杯,試劑空白為參比,測(cè)定630nm處吸光值,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中可查出樣品中血糖含量。血糖含量的測(cè)定第7頁五、注意事項(xiàng)

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