生化分離分析技術與原理智慧樹知到期末考試答案2024年

生化分離分析技術與原理智慧樹知到期末考試答案2024年生化分離分析技術與原理請根據(jù)存在于層析基質上的交換容量從大到小排序（）

A:薄層層析＞柱層析＞紙層析B:柱層析＞紙層析＞薄層層析C:薄層層析＞紙層析＞柱層析D:柱層析＞薄層層析＞紙層析答案:柱層析＞薄層層析＞紙層析在層析技術中，分配系數(shù)是指（）

A:二種化合物在固相與流動相中的分配達到平衡時的濃度比B:一種化合物在固相與流動相中的分配達到平衡時的濃度比C:二種化合物在固相與流動相中的分配達到平衡時的質量比D:一種化合物在固相與流動相中的分配達到平衡時的質量比答案:一種化合物在固相與流動相中的分配達到平衡時的濃度比關于凝膠層析加樣的說法正確的是（）

A:測定樣品含量的方法靈敏或床體積大時，加樣量可少B:加樣量多少與分離效果無關C:加樣量與層析柱大小無關D:加樣量與測定方法有關答案:加樣量與測定方法有關下列哪項（）不是層析技術中的速率理論指出的影響柱效的因素

A:分子擴散B:理論塔板高度C:傳質阻力D:渦流擴散答案:理論塔板高度以下不屬于常用載氣的氣體是（）

A:氧氣B:氫C:二氧化碳D:氮答案:氧氣關于氣液色譜，以下說法正確的是（）

A:各組分分配系數(shù)差異越大，越不利于分離B:各組分沿柱子移動速度取決于它們在液體固定相中的溶解程度C:利用惰性氣體如氮氣或氧氣等通過柱子進行洗脫D:樣品以液體形式從柱子前端引入答案:各組分沿柱子移動速度取決于它們在液體固定相中的溶解程度柱層析中的洗脫劑是（）

A:流動相B:固定相C:固體相D:氣相答案:流動相一般來說，不是理想基質的要求的有（）

A:當配體固化和各種因素變化時，基質較易受影響B(tài):極低的非特異吸附性C:高度親水性D:具有適當?shù)亩嗫仔源鸢?當配體固化和各種因素變化時，基質較易受影響關于離子交換劑的處理，以下說法不正確的是（）

A:取適量的固體離子交換劑先用水浸泡，充分膨脹后即可處理B:加過量水懸浮除去細顆粒，用酸堿浸泡，除去雜質并使其帶上需要的反離子C:每次用酸或堿處理后，均應先用水洗滌至近中性，再用堿或酸處理，再用水洗滌至中性后使用或裝柱D:酸堿處理的次序決定了離子交換劑攜帶反離子的類型答案:每次用酸或堿處理后，均應先用水洗滌至近中性，再用堿或酸處理，再用水洗滌至中性后使用或裝柱聚焦層析的原理之一蛋白質的行為說法不正確的是（）

A:蛋白質所帶電荷取決于等電點pI與層析柱中pH的關系B:層析一開始柱中pH＜pI時，蛋白質帶正電，不與陰離子交換劑結合C:隨著洗脫液遷移，pH反復變化，蛋白質就在各自等電點被洗下來D:隨著洗脫劑移動至環(huán)境pH＞pI時，蛋白質帶正電，并從交換劑解吸附答案:隨著洗脫劑移動至環(huán)境pH＞pI時，蛋白質帶正電，并從交換劑解吸附高效液相色譜儀的檢測系統(tǒng)常用的檢測器有紫外檢測器、示差折光檢測器、熒光檢測器等；下列關于這三種檢測器的說法中正確的是（）

A:檢測器的選擇主要取決于待檢測組分的性質和實驗對靈敏度的要求B:凡具有與流動相折光率不同的樣品組分，均可使用示差折光檢測器檢測C:熒光檢測器的靈敏度是這三種檢測器中最高的，常用于痕量分析和梯度洗脫樣品D:紫外檢測器對溫度和流速變化不敏感答案:示差折光檢測器抗原和抗體在體外進行的反應，又稱血清學反應，可借助免疫學方法檢測。對抗原或抗體進行適當?shù)臉擞浀姆椒ㄓ型凰貥擞浄?、酶標記法和熒光標記法等。下列關于這三種標記方法的說法中正確的有（）

A:與H標記相比，I標記的方法更簡便且易獲得高比放射性標記物B:酶標記法使用的酶類，其活性不受機體組織、血清及其提取物的影響C:用同位素標記法時，比活性（或比放射性強度）大小不會直接影響測定的靈敏度D:用熒光素標記時，被標抗體或抗原溶液一定要比較純，效果才好答案:與H標記相比，I標記的方法更簡便且易獲得高比放射性標記物;酶標記法使用的酶類，其活性不受機體組織、血清及其提取物的影響;用熒光素標記時，被標抗體或抗原溶液一定要比較純，效果才好下列關于親和層析實質性描述中正確的有（）

A:當把固相載體裝入小層析柱后，讓欲分離的樣品液通過該柱，無親和力或非特異吸附的物質被緩沖液首先洗滌出來，形成第一個層析峰B:在親和層析中，如果樣品液中存在兩個以上的物質與固相載體具有親和力，它們不可能被分離開C:固化后的配體仍保持識別、束縛特異物質的能力D:把物質S從固相載體上解離下來的方法包括改變緩沖液的pH值、增加離子強度、加入抑制劑等答案:固化后的配體仍保持識別、束縛特異物質的能力;當把固相載體裝入小層析柱后，讓欲分離的樣品液通過該柱，無親和力或非特異吸附的物質被緩沖液首先洗滌出來，形成第一個層析峰;把物質S從固相載體上解離下來的方法包括改變緩沖液的pH值、增加離子強度、加入抑制劑等下列關于凝膠過濾時加樣和洗脫的描述中正確的有（）

A:洗脫一般都以單一緩沖液（如磷酸緩沖液、Tris-HCl緩沖液等）或者鹽溶液作為洗脫液，必要的時候也可用蒸餾水作洗脫液B:所有的洗脫液均以能溶解被洗脫物質和不使其變性或失活為原則C:可以通過恒流泵或控制操作壓嚴格控制洗脫時的流速，保證收集的每一部分洗脫體積恒定D:加樣量與測定方法和層析柱大小有關，且加樣量掌握得當可提高分離效果答案:加樣量與測定方法和層析柱大小有關，且加樣量掌握得當可提高分離效果;所有的洗脫液均以能溶解被洗脫物質和不使其變性或失活為原則;洗脫一般都以單一緩沖液（如磷酸緩沖液、Tris-HCl緩沖液等）或者鹽溶液作為洗脫液，必要的時候也可用蒸餾水作洗脫液;可以通過恒流泵或控制操作壓嚴格控制洗脫時的流速，保證收集的每一部分洗脫體積恒定酶聯(lián)免疫吸附測定法（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA）現(xiàn)在已成為分析化學領域中的前沿課題，它是一種特殊的試劑分析方法，是在免疫酶技術（immunoenzymatictechniques）的基礎上發(fā)展起來的一種新型的免疫測定技術。下列關于酶聯(lián)免疫吸附測定法的說法中正確的有（）

A:“用已知抗體包被，加入待檢血清，再加酶標抗體，加底物顯色”是雙抗體夾心法的操作B:酶聯(lián)免疫吸附測定法測定的對象可以是抗體也可以是抗原C:酶聯(lián)免疫吸附測定法可大致分為包被、反應、洗滌、底物顯色等四個步驟D:免疫吸附劑、標記物、和顯色劑是ELISA中3種必要的試劑答案:酶聯(lián)免疫吸附測定法測定的對象可以是抗體也可以是抗原;酶聯(lián)免疫吸附測定法可大致分為包被、反應、洗滌、底物顯色等四個步驟;免疫吸附劑、標記物、和顯色劑是ELISA中3種必要的試劑;“用已知抗體包被，加入待檢血清，再加酶標抗體，加底物顯色”是雙抗體夾心法的操作影響吸附劑操作容量的因素包括配體性質、配體在吸附劑中的含量、配體與吸附物結合時的位阻效應大小、基質的多孔性、操作條件。下列哪些操作可以有效提高吸附劑的操作容量？（）

A:在配體和基質之間引入“手臂”B:對解離常數(shù)較大的配體，增加配體在基質上的濃度C:選擇合適的樣品濃度、pH、離子強度及上樣速度D:蛋白質和多肽作配體時，以最少的共價鍵連接到載體上答案:在配體和基質之間引入“手臂”;對解離常數(shù)較大的配體，增加配體在基質上的濃度;蛋白質和多肽作配體時，以最少的共價鍵連接到載體上;選擇合適的樣品濃度、p下列關于聚丙烯酰胺凝膠的說法中正確的有（）

A:一般聚丙烯酰胺凝膠均制成珠狀顆粒，以干凝膠形式出售，使用前必須溶脹B:聚丙烯酰胺凝膠對芳香族的、酸性和堿性的化合物有吸附現(xiàn)象，并且這種吸附現(xiàn)象無法通過實驗操作來避免C:聚丙烯酰胺凝膠是丙烯酰胺（單體）在甲叉雙丙烯酰胺（雙體）作交聯(lián)劑，過硫酸胺作催化劑，N,N,N',N'-四甲基乙二胺（TEMED)作加速劑的條件下聚合而成D:聚丙烯酰胺凝膠要避免長期與強酸和強堿接觸，否則，酰胺基將迅速發(fā)生分解（高溫條件）答案:聚丙烯酰胺凝膠是丙烯酰胺（單體）在甲叉雙丙烯酰胺（雙體）作交聯(lián)劑，過硫酸胺作催化劑，N,N,N’,N’-四甲基乙二胺（TEME;作加速劑的條件下聚合而成;聚丙烯酰胺凝膠對芳香族的、酸性和堿性的化合物有吸附現(xiàn)象，并且這種吸附現(xiàn)象無法通過實驗操作來避免下列關于薄層層析過程中操作及注意事項的說法中你認為正確的有（）

A:活化時應避免突然升溫和降溫操作,否則薄層在展層過程易于脫落B:用于柱層柱的吸附劑不能涂布薄層板C:選擇展層劑的標準是分離物的極性和固定相的性質D:薄層均一性和厚度對樣品的分離效果以及Rf值的重復性影響很大答案:用于柱層柱的吸附劑不能涂布薄層板;薄層均一性和厚度對樣品的分離效果以及Rf值的重復性影響很大;活化時應避免突然升溫和降溫操作,否則薄層在展層過程易于脫落;選擇展層劑的標準是分離物的極性和固定相的性質利用親和層析可以分離酶和雜質，下面是一些關于這個實驗中洗脫的描述，請選出你認為正確的選項（）

A:特異性洗脫再次利用生物學特異性，只洗脫和配基專一作用的酶B:非特異性洗脫的原理是改變緩沖液的pH、離子強度、介電常數(shù)或溫度使物質構象改變C:當洗脫結束后，連續(xù)用大量的洗脫液或高濃度的鹽溶液徹底洗滌柱子，再用平衡緩沖液使層析柱重新平衡；經(jīng)過這樣處理的柱子可再次上樣，進行第二次親和層析D:可能出現(xiàn)的洗脫結果只會是酶與雜質沒有完全分離或酶與雜質完全分開兩種答案:特異性洗脫再次利用生物學特異性，只洗脫和配基專一作用的酶;非特異性洗脫的原理是改變緩沖液的p;離子強度、介電常數(shù)或溫度使物質構象改變下面是一些關于聚焦層析原理的說法，請選出你認為正確的選項（）

A:聚焦層析柱中的pH梯度溶液是在淋洗過程中自動形成的，但是隨著淋洗的進行，pH梯度會逐漸向下遷移；從底部流出液的pH最后恒定于某值，這時層析柱的pH梯度消失B:不同蛋白質具有不同的等電點，它們在被離子交換劑結合以前，移動距離是不同的，洗脫出來的先后次序按等電點排列C:在聚焦層析中，當洗脫液流進多緩沖交換劑時，pH梯度溶液可以自動形成的原因是交換劑帶具有有緩沖能力的電荷基團D:在聚焦層析過程中，一種樣品分次加入時，只要先加入者尚未洗出，并且有一定的時間進行聚焦，剩余樣品再加到柱上，其聚焦過程能順利完成答案:在聚焦層析中，當洗脫液流進多緩沖交換劑時，pH梯度溶液可以自動形成的原因是交換劑帶具有有緩沖能力的電荷基團;聚焦層析柱中的pH梯度溶液是在淋洗過程中自動形成的，但是隨著淋洗的進行，pH梯度會逐漸向下遷移；從底部流出液的pH最后恒定于某值，這時層析柱的pH梯度消失;不同蛋白質具有不同的等電點，它們在被離子交換劑結合以前，移動距離是不同的，洗脫出來的先后次序按等電點排列;在聚焦層析過程中，一種樣品分次加入時，只要先加入者尚未洗出，并且有一定的時間進行聚焦，剩余樣品再加到柱上，其聚焦過程能順利完成吸附柱層析是以固體吸附劑（極性和非極性）為固定相，以有機溶劑或緩沖液為流動相構成柱狀的一種層析方法。下面關于吸附柱層析的說法中你認為正確的有（）

A:在層析過程中推動固定相上的物質向一定方向移動的液體或氣體稱為流動相B:操作容量數(shù)值大表明基質對某種成分的結合力強C:固定相能與相關的化合物進行可逆性的吸附、溶解和交換作用D:外水體積、內(nèi)水體積、基質體積都是隨著床體積和基質性質變化而變化的答案:固定相能與相關的化合物進行可逆性的吸附、溶解和交換作用;在層析過程中推動固定相上的物質向一定方向移動的液體或氣體稱為流動相;操作容量數(shù)值大表明基質對某種成分的結合力強;外水體積、內(nèi)水體積、基質體積都是隨著床體積和基質性質變化而變化的下列關于有機溶劑沉淀法的描述中正確的有（）

A:有機溶劑加入水溶液時產(chǎn)生放熱反應會引起蛋白質變性，所以有機溶劑需預冷至-10℃，并且在低溫下進行操作B:有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因與其脫水作用和介電常數(shù)有關C:用有機溶劑沉淀蛋白質時，宜在稀鹽溶液或低濃度緩沖液中進行D:在某些蛋白質溶液中加入多價陽離子（如Zn2+和Cu2+等）可大大減少有機溶劑的用量答案:有機溶劑能降低蛋白質溶解度的原因與其脫水作用和介電常數(shù)有關;有機溶劑加入水溶液時產(chǎn)生放熱反應會引起蛋白質變性，所以有機溶劑需預冷至-10℃，并且在低溫下進行操作;用有機溶劑沉淀蛋白質時，宜在稀鹽溶液或低濃度緩沖液中進行;在某些蛋白質溶液中加入多價陽離子（如Zn2+和Cu2+等）可大大減少有機溶劑的用量高效液相色譜儀的分離系統(tǒng)包括色譜柱、連接管和恒溫器等。下列說法中正確的是（）

A:色譜柱的固定相由基質和固定液構成B:正相色譜適宜于分離極性化合物，反相色譜則適宜于分離非極性或弱極性化合物C:填充色譜柱的方法有干法和濕法兩種，顆粒直徑大于20μm的可用干法填充，顆粒直徑10μm以下的采用濕法裝柱D:固定相中的基質表面經(jīng)過機械涂漬/化學法偶聯(lián)各種基團/配體的有機化合物，對結構不同的物質有良好的選擇性答案:色譜柱的固定相由基質和固定液構成;固定相中的基質表面經(jīng)過機械涂漬/化學法偶聯(lián)各種基團/配體的有機化合物，對結構不同的物質有良好的選擇性;填充色譜柱的方法有干法和濕法兩種，顆粒直徑大于20μm的可用干法填充，顆粒直徑10μm以下的采用濕法裝柱;正相色譜適宜于分離極性化合物，反相色譜則適宜于分離非極性或弱極性化合物抽提溶液應選擇對有效成分溶解度大，破壞作用小的溶液。（）

A:錯誤B:正確答案:正確堿性蛋白質應該選用低pH值得溶液抽提，酸性蛋白質則相反。（）

A:錯B:對答案:錯總交換容量受測定條件的影響。（）

A:錯B:對答案:對帶有強電荷基團的離子交換劑由于在任何pH值的溶液中部處于解離狀態(tài)，所以交換容量基本與pH值變化有密切關系

A:正確B:錯誤答案:正確正相色譜是固定液的極性大于流動相的極性。（）

A:錯誤B:正確答案:正確當溶液中的離子強度增大時，交換劑的有效交換容量降低。（）

A:正確B:錯誤答案:正確有機溶劑與鹽溶液一樣具有脫水作用，而且介電系數(shù)比水大而導致溶劑的極性減小。（）

A:正確B:錯誤答案:錯誤當用同樣直徑的層析柱分離兩種以上的物質時，長層析柱比短的分辨率低。（）

A:正確B:錯誤答案:錯誤凝集素在糖蛋白上的作用位點是糖蛋白中糖鏈的末端糖序列。()

A:錯誤B:正確答案:正確在聚焦層析中，當洗脫液流進多緩沖交換劑時，由于交換劑帶具有緩沖能力的電荷基團，故pH梯度溶液可以自動形成。（）

A:正確B:錯誤答案:正確為了提高分離效果，在一定范圍內(nèi)，加樣體積越小越好。（）

A:正確B:錯誤答案:正確若用陽離子交換劑，梯度緩沖液的pH要從低到高。（）

A:對B:錯答案:錯雙抗體夾心法是用已知抗體包被，加入待檢血清，再加酶標抗體，加底物顯色。（）

A:正確B:錯誤答案:正確聚酰胺薄膜層析法可用于酚類、醚類、硝基化合物、氨基酸及其衍生物等化合物的分析，因為聚酰胺能和被分離物之間形成氫鍵，氫鍵的強弱就決定了被分離物與聚酰胺薄膜之間吸附能力的大小。（）

A:正確B:錯誤答案:正確多緩沖交換劑和起始緩沖液的反離子只能是Cl。（）

A:正確B:錯誤答案:正確不同蛋白質具有不同的等電點，它們在被離子交換劑結合以前，移動之距離是不同的，洗脫出來的先后次序是按等電點排列的。（）

A:錯誤B:正確答案:正確不可以通過加入EDTA來減弱巰基與金屬離子如鉛、鐵或銅等的相互作用。（）

A:正確B:錯誤答案:錯誤可將組成復雜的樣品直接注入色譜柱內(nèi)。（）

A:錯誤B