PTEN及AR在PCOS大鼠模型卵巢中的表達(dá)及其相關(guān)性研究的開題報(bào)告

PTEN及AR在PCOS大鼠模型卵巢中的表達(dá)及其相關(guān)性研究的開題報(bào)告一、研究背景和意義多囊卵巢綜合征（PCOS）是一種常見的內(nèi)分泌疾病，其特征為卵巢多囊、高雄激素血癥、不規(guī)律月經(jīng)和不孕等。PCOS發(fā)病機(jī)制尚不清楚，但已有研究顯示與多個(gè)信號(hào)通路的異常調(diào)節(jié)有關(guān)。其中包括PI3K/Akt信號(hào)通路，該通路參與卵巢細(xì)胞增殖、生長(zhǎng)和黃體化等過程。PTEN是PI3K/Akt信號(hào)通路中的重要負(fù)調(diào)節(jié)因子，通過抑制Akt的活性調(diào)節(jié)PI3K/Akt通路的信號(hào)傳導(dǎo)。AR是雄激素的受體，在成年女性卵巢中廣泛表達(dá)，參與性激素的調(diào)節(jié)。本研究旨在探究PTEN和AR在PCOS大鼠模型卵巢中表達(dá)的變化及其相關(guān)性，為進(jìn)一步闡明PCOS的發(fā)病機(jī)制提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。二、研究?jī)?nèi)容和方法1.實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?）研究PTEN和AR在PCOS大鼠模型卵巢中的表達(dá)變化。（2）探究PTEN和AR的表達(dá)與PCOS發(fā)病機(jī)制的關(guān)系。2.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)（1）動(dòng)物模型：選擇SD大鼠，按照高胰島素/胰島素抵抗誘導(dǎo)PCOS動(dòng)物模型。（2）分組：按照隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組和模型組，每組10只大鼠。（3）實(shí)驗(yàn)操作：分離卵巢組織，采用免疫組化和Westernblotting分別檢測(cè)PTEN和AR的表達(dá)變化。3.實(shí)驗(yàn)方法（1）動(dòng)物模型：給予高脂飲食和小劑量的鏈脲佐菌素，誘導(dǎo)SD大鼠產(chǎn)生PCOS模型。（2）分離卵巢組織：取出大鼠卵巢，用0.1mol/LPBS沖刷清洗，然后迅速轉(zhuǎn)移到低溫RIPA溶解液中。（3）免疫組化：將卵巢切片，在37℃恒溫箱中揮發(fā)出甲醛，再用10%牛血清在室溫下進(jìn)行預(yù)處理。加入PTEN或AR的一抗，過夜孵育。第二天加入二抗孵育，用H2O2顯色處理后，加入氨基甲酸鹽顯色。（4）Westernblotting：取出大鼠卵巢組織，粉碎，加RIPA溶解液裂解，離心后用BCAProteinAssayKit測(cè)定蛋白濃度。將蛋白提取物進(jìn)行SDS電泳，轉(zhuǎn)膜并孵育PTEN和AR的一抗，加入二抗后顯色檢測(cè)。4.實(shí)驗(yàn)預(yù)期結(jié)果（1）PCOS模型組的大鼠卵巢中PTEN表達(dá)降低，AR表達(dá)升高。（2）PTEN和AR的表達(dá)變化與PCOS發(fā)病機(jī)制有關(guān)。三、論文結(jié)構(gòu)安排（1）緒論包括PCOS發(fā)病機(jī)制、PI3K/Akt通路的作用、PTEN和AR的作用及其在PCOS中的作用。（2）材料和方法包括動(dòng)物模型、分組、實(shí)驗(yàn)操作及方法。（3）結(jié)果包括實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)和分析，附圖表。（4）討論對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行討論，探究PTEN和AR