STIM1SOC細胞內(nèi)調(diào)節(jié)機制在血管平滑肌細胞增殖中的作用研究的開題報告

STIM1SOC細胞內(nèi)調(diào)節(jié)機制在血管平滑肌細胞增殖中的作用研究的開題報告一、研究背景和意義血管平滑肌細胞增殖是許多心血管疾病的重要原因，包括動脈粥樣硬化、肺動脈高壓和冠狀動脈疾病等。因此，探索血管平滑肌細胞增殖的調(diào)節(jié)機制，有助于尋找治療這些疾病的新靶點。STIM1SOC是一種質(zhì)膜蛋白，參與胞內(nèi)鈣離子動態(tài)調(diào)節(jié)。先前的研究表明，STIM1SOC在一些非肌細胞中參與增殖的調(diào)節(jié)。但是，其在血管平滑肌細胞中對增殖的作用機制還不清楚。因此，本研究旨在探索STIM1SOC在血管平滑肌細胞增殖中的調(diào)節(jié)機制，為心血管疾病的治療提供新的治療靶點。二、研究內(nèi)容和方法本研究將使用原代培養(yǎng)的血管平滑肌細胞。通過激活STIM1SOC，觀察其對血管平滑肌細胞增殖的影響，并分析背后的機制。具體的研究內(nèi)容和方法如下：1.真核表達載體構(gòu)建構(gòu)建真核表達質(zhì)粒，包含他人類STIM1和SOC敲低顯微體RNA（siRNA）和負對照siRNA以及哺乳動物表達質(zhì)粒IL-2，以監(jiān)測轉(zhuǎn)染效率并糾正樣本間變異。2.細胞培養(yǎng)和處理將原代血管平滑肌細胞（passage2-4）培養(yǎng)至70%-80%密度，按照計劃組分別處理，包括：陰性對照（沒有處理），激活組（激活STIM1SOC），敲低組（使用siRNA敲低STIM1SOC）。培養(yǎng)和處理時間點可以自行設(shè)計。3.細胞增殖檢測使用CCK-8或MTT檢測不同組別細胞的增殖率，以評估STIM1SOC對血管平滑肌細胞增殖的影響。4.分子生物學檢測利用qRT-PCR和Westernblotting檢測細胞增殖相關(guān)基因和蛋白質(zhì)表達的變化，以探索STIM1SOC在調(diào)節(jié)血管平滑肌細胞增殖中的作用。三、預期結(jié)果和意義本研究預期通過對STIM1SOC在血管平滑肌細胞增殖中的調(diào)節(jié)機制進行研究，探索心血管疾病的新靶點。預計研究結(jié)果會：1.揭示STIM1SOC在血管平滑肌細胞增殖中的分子機制；2.提供針對心血管疾病的新的治療靶點；3.為治療心血管疾病提供新的理論基礎(chǔ)。四、研究進度安排本研究計劃時長為一年。研究計劃進度安排如下：第1-3月：確定實驗方案、準備材料和細胞培養(yǎng)；第4-7月：進行細胞增殖檢測和分子生物學實驗；第8-10月：數(shù)據(jù)處理和分析；第11-12月：撰寫論文、準備答辯材料。五、參考文獻1.LiJ,etal.Stim1andOrai1MediateThrombin-InducedCa2+InfluxinRatPulmonaryArterySmoothMuscleCells.PlosOne9(6):e99163,2014.2.YuanJP,etal.SOARandthepolybasicSTIM1domainsgateandregulateOraichannels.NatureCellBiology11:337-343,2009.3.BartoliF,etal.ActivationofHumanLungEndothelialCellsbyTumorNecrosisFactor-αRapidlyActivatesPurinergicSignalingandShortensP2X7Re