發(fā)酵工程復習重點

10微生物生物技術(shù)重點第一章1發(fā)酵的概念傳統(tǒng)概念：指酵母作用于果汁或發(fā)芽谷物，進行酒精發(fā)酵時產(chǎn)生CO2的現(xiàn)象?，F(xiàn)代概念：培育生物細胞〔含動植物和微生物〕來制取產(chǎn)物的全部過程生物學概念：發(fā)酵是指微生物在無氧條件下分解代謝有機物質(zhì)開釋能量的過程〔生化〕產(chǎn)物的過程現(xiàn)代概念：培育生物細胞〔含動植物和微生物〕來制取產(chǎn)物的全部過程2〔MicrobialengineeringDNA重組、細胞融合、分子修飾和改造等技術(shù)結(jié)合并進展起來的現(xiàn)代發(fā)酵技術(shù)。發(fā)酵工程的進展簡史1、傳統(tǒng)的發(fā)酵時期——自然發(fā)幾千年酒〔古埃及龍山文化〕啤酒、黃酒、醬油、泡菜等特點多數(shù)產(chǎn)品為嫌氣性發(fā)酵非純種培育單憑體會傳授技術(shù)，使產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)固〔不了解微生物與發(fā)酵的關系〕2、近代發(fā)酵工程時期——純培育技術(shù)1665英國物理學家RobertHooke〔羅伯特·胡克〕細胞壁1680荷蘭列文·虎克(AntonievanLeeuwenhoek)活細胞人類生疏到微生物的存在特點多數(shù)產(chǎn)品為嫌氣性發(fā)酵非純種培育單憑體會傳授技術(shù)，使產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)固〔不了解微生物與發(fā)酵的關系〕由自然發(fā)酵階段轉(zhuǎn)向純培育發(fā)酵〔第一次轉(zhuǎn)折過程特點產(chǎn)品的生產(chǎn)過程較為簡潔，對生產(chǎn)要求不高，規(guī)模不大3、近代發(fā)酵工程時期——深層培育技術(shù)顯現(xiàn)于20世紀40年月，以抗生素的生產(chǎn)為標志 青霉素的覺察與大量需求外表培育法(surfaceculture)效價40U/mL，純度20%，收率30%二戰(zhàn)期間，青霉素發(fā)酵生產(chǎn)成功青霉素發(fā)酵生產(chǎn)的成功，給發(fā)酵工業(yè)帶來兩大功績：開拓了以青霉素為先鋒的浩大抗生素發(fā)酵工業(yè)建立深層培育法submergedfermentatio，把通氣攪拌技術(shù)引入發(fā)酵工業(yè)。它使得需氧菌的發(fā)酵生產(chǎn)從今走上了大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)途徑工業(yè)最主要的生產(chǎn)方式機械攪拌通氣發(fā)酵技術(shù)的建立是其次次轉(zhuǎn)折4、近代發(fā)酵工程時期——代謝掌握發(fā)酵技術(shù)定義質(zhì)。1956 日本人Kinoshita〔木下祝郎〕谷氨酸發(fā)酵已用于氨基酸、核苷酸、有機酸以及一局部抗生素的發(fā)酵代謝掌握發(fā)酵技術(shù)的建立是第三次轉(zhuǎn)折5、近代發(fā)酵工程時期——連續(xù)化、自動化發(fā)酵技術(shù)6、近代發(fā)酵工程時期——開拓發(fā)酵原料時期7、現(xiàn)代發(fā)酵工程時期——現(xiàn)代分子生物學技術(shù)〔基因工程階段〕現(xiàn)代分子生物學技術(shù)的應用是第四次轉(zhuǎn)折初級代謝產(chǎn)物：初級代謝產(chǎn)物：次級代謝產(chǎn)物：指微生物從外界吸取各種養(yǎng)分物質(zhì)，通過分解代謝和合成代謝，生成堅持生命活動所需次級代謝產(chǎn)物：〔通常是穩(wěn)固期這些產(chǎn)物與微生物的生長繁育無明顯關系，如抗生素、色素、生物堿、胞外多糖等，即為次級代謝產(chǎn)物比較初級代謝產(chǎn)物和次級代謝產(chǎn)物初級代謝產(chǎn)物：與菌體生長相相伴的產(chǎn)物，氨基酸、核苷酸、維生素、有機酸、溶劑菌體對其合成反響掌握嚴密，一樣不過量積存次級代謝產(chǎn)物：與菌體生長不相相伴，以初級代謝產(chǎn)物為原料而合成抗生素、生物堿、毒素、胞外多糖等構(gòu)造常較簡單對環(huán)境條件敏銳甾體轉(zhuǎn)化化學轉(zhuǎn)化：步驟繁多、得率低、價格昂貴〔Savett,576kg脫氧膽酸，30多步反響，兩年→938mg醋酸可的松〕生物法：高效、收率高〔1952年，Munrry111位上導入一3步，這樣才使可的松問世〕其次章發(fā)酵工業(yè)對微生物菌種的要求1、能在廉價原料制成的培育基上快速生長，并形成所需的代謝產(chǎn)物，產(chǎn)量高2、可以在易于掌握的培育條件下快速生長和發(fā)酵，且所需酶活力高3、依據(jù)代謝掌握的要求，選擇單產(chǎn)高的養(yǎng)分缺陷型突變株或調(diào)劑突變株或野生菌株4、選育抗噬菌體力量強的菌株，使其不易感染噬菌體5、菌種純，不易變異退化，以保證發(fā)酵生產(chǎn)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)固性6、菌種不是病原菌，不產(chǎn)生有害的生物活性物質(zhì)和毒素，以保證安全細菌、酵母菌、霉菌和放線菌細菌1、枯草芽孢桿菌Bacillussubtilis生芽孢、需氧菌，G+，30-39℃，如淀粉酶和蛋白酶纈氨酸等大腸桿菌的谷氨酸脫羧酶在工業(yè)上被用來進展谷氨酸的定量分析基因工程的很好材料3、乳酸桿菌(Lactobacillussp.)革蘭氏陽性，無芽孢，厭氧或兼性厭氧可生產(chǎn)乳酸干酪的成熟、乳脂的酸化和腌菜、泡菜制作6、醋酸桿菌(Acetobacter)不形成芽孢，G－，好氣性分兩群：只將乙醇氧化成醋酸將產(chǎn)生的醋酸連續(xù)氧化成CO2和水可生產(chǎn)醋酸7(Corynebacterium其他氨基酸的高產(chǎn)菌生產(chǎn)谷氨酸等9Xanthomonas)細胞直桿狀，G－，無芽孢，極生鞭毛在含色粘稠的膠狀物——莢膜多糖，其黃色為一種水溶性色素野油菜黃單胞菌(X.campestris(Xanthangum)放線菌鏈霉菌屬(Streptomyces)灰色鏈霉菌(Streptomycesgriseu)生產(chǎn)鏈霉素金霉素鏈霉菌(StreptomycesaureofaciePDA內(nèi)菌絲產(chǎn)生金黃色色素生產(chǎn)金霉素紅霉素鏈霉菌(Streptomyceserythreu)產(chǎn)紅霉素裂狀生產(chǎn)土霉素與一樣放線菌不同，菌絲體長入培育基內(nèi)，不形成氣生菌絲，而在基內(nèi)菌基嚴密結(jié)合在一起，外表凸起，多坎坷，疣狀；菌落常為橙黃色、紅色、深褐色、黑色和蘭色。酵母菌(Saccharomycescerevisiae)啤酒酵母在液體培育基中的生長行為有兩類——發(fā)酵度較高，不易凝集沉淀，浮于上面下面酵母——發(fā)酵度較低，易凝集沉淀酒精、藥用酵母、面包制作，故又稱釀酒酵母。5、假絲酵母(Candida) ，液體培育時能形成浮膜可生產(chǎn)SCP、甘油、脂肪酶畢赤氏酵母(Pichia)霉菌Aspergillus米曲霉(Aspergillusoryzae)有較強的蛋白分解力量，同時又具有糖化力量L-乳酸的生產(chǎn)黑曲霉(Aspergillusniger)氧化酶等；還能產(chǎn)生多種有機酸，如抗壞血酸、檸檬酸、葡萄糖酸和沒食子酸等是生產(chǎn)檸檬酸和葡萄糖酸的重要菌種Penicillumchrysogenum化酶、葡萄糖酸、檸檬酸和抗壞血酸橘青霉(P.citrinum):微生物工程工業(yè)生產(chǎn)水平的三個打算要素:生產(chǎn)菌種的性能發(fā)酵和提取工藝條件生產(chǎn)設備分別與選擇菌種的具體做法一樣分4個步驟：樣品采集 增殖培育 純種分別 定富集(enrichment)培育數(shù)量增加，由原先自然條件下的劣勢種變成人工環(huán)境下的優(yōu)勢種，以利分別到所需的菌株。目的菌種的分別與選擇分別的效率取決于培育基養(yǎng)分、pH值和參加的選擇性抑制劑通常有兩種方法涂布法〔易污染菌落，且一種菌/平板〕影印平板法這一“印章”〔不適用不長孢子的鏈霉菌和游動細菌〕可顯著提高分別選擇效率的方法有1、透亮圈法物便會在菌落四周產(chǎn)生透亮圈，圈的大小初步反響菌株利用底物的力量。2、變色圈法色劑，使目的微生物菌落四周消滅變色圈，從而能被快速鑒別出來；3、生長圈法通常用于分別選擇氨基酸、核苷酸和維生素的產(chǎn)生菌將待檢菌涂布于高濃度指示菌并缺少所需養(yǎng)分物的平板上進展培育，假設某菌株能合成平板所需的養(yǎng)分物，在該菌株的菌落四周便會形成一個混濁的生長圈4、抑菌圈法常用于抗生素產(chǎn)生菌的分別選擇11一個準確、快速的選擇模型十分重要。抑菌圈法是常用的初篩方法。假設被檢菌能分泌某些抑制菌生長的物質(zhì)，如菌種選育定義：應用微生物遺傳和變異理論，用人工方法(或自然變異的方法)造成變異，酵工業(yè)產(chǎn)品的產(chǎn)量和質(zhì)量；b.增加對所用原輔料的適應性；c.增加對不良培育條件的抗擊；d.縮短生產(chǎn)周期；e.簡化發(fā)酵和下游處理工藝。誘變育種就是利用物理或化學誘變劑等處理平均分散的微生物細胞群，促DNA復制和細胞分裂后，才在細胞表型上〔如多核〕純合狀態(tài)，但照舊不表現(xiàn)突變性狀。如養(yǎng)分缺陷型分為物理化學生物誘變劑〔亞硝酸鹽〕特點逐步減退或消逝的現(xiàn)象。防止菌種退化的方法防止菌種退化的方法掌握傳代次數(shù)〔避開表型延遲〕選用適宜的培育基制造良好的培育條件承受有效的菌種保藏方法及多種保藏方法菌種的復壯菌種的復壯在菌種的生產(chǎn)性能尚未衰退前，就常常有意識的進展純種分別和生產(chǎn)性能〔廣義〕從衰退的群體中找出少數(shù)尚未衰退的個體，從而到達復原該菌原有典型性狀的〔狹義〕菌種復壯的方法通過寄主進展復壯：適用退化的寄生型微生物聯(lián)合復壯：誘變育種菌種保藏菌種保藏主要是依據(jù)菌種的生理、生化特性，在人工制造的條件下，使其代謝活動方法123礦物油中浸沒保藏4枯燥載體保藏種子擴大培育方法指將儲存在沙土管、冷凍枯燥管中處于休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入試管斜面活化后，再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級放大培育而獲得肯定數(shù)量和質(zhì)量的純種過程。這些純種培育物稱為種子試驗室種子制備1、孢子的制備：適用于產(chǎn)孢子力量強及孢子發(fā)芽、生長繁育快細菌孢子的制備：C限制，N豐富；霉菌孢子的制備：大米、小米、麩皮、麥粒等放線菌孢子的制備：含適合產(chǎn)孢子的物質(zhì)組成，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨及無機鹽等如：谷氨酸棒桿菌、青霉、龜裂鏈霉菌2、液體種子的制備：產(chǎn)孢子力量不強或孢子發(fā)芽慢的菌種S.kanamucetics卡那鏈霉菌〕用搖瓶液體培養(yǎng)法。 斜面試管→三角瓶→搖床→種子罐厭氧培育：如酵母菌 三角瓶→卡式罐→種子罐生產(chǎn)車間種子的制備1、種子罐的作用：〔絲〕體保持種子的活力保證種子的數(shù)量2、種子罐級數(shù)確實定芽及菌體繁育速度，所承受發(fā)酵罐的容積如：細菌，二級；霉菌，三級；放線菌，三級或四級3、確定種子罐級數(shù)需留意：種子級數(shù)越少越好。簡化工藝和掌握，削減染菌太少，導致接種量小→發(fā)工藝或其他條件轉(zhuǎn)變〔如工程菌〕時，也有可能影響級數(shù)二、種子質(zhì)量的掌握〔重要〕影響孢子質(zhì)量的因素及掌握影響孢子質(zhì)量的因素及掌握影響因素通常有：培育基、培育條件、培育時間和冷藏時間等培育基原材料〔主要緣由解決的措施：培育基所用原料要經(jīng)過發(fā)酵試驗合格才可使用嚴格掌握滅菌后培育基的質(zhì)量斜面培育基使用前，需在適當溫度下放置肯定時間單一氮源〔生產(chǎn)，較簡單的有機氮源〔選種或分別培育條件37℃培育→C代謝↓、氨基氮上升提前、菌絲過早自溶、效價降低等培育時間和冷藏時間措施：嚴格掌握在孢子量多、成熟、發(fā)酵產(chǎn)量正常階段終止培育濕度：對數(shù)量和質(zhì)量有較大影響。措施：嚴格掌握孢子斜面的培育濕度62118%；335%措施：依據(jù)生產(chǎn)打算有規(guī)律的培育成熟孢子影響種子質(zhì)量的因素及掌握影響種子質(zhì)量的因素及掌握影響因素通常有：孢子的質(zhì)量、培育基、培育條件、種齡、接種量等培育基養(yǎng)分成分適合種子培育的需要選擇有利于孢子發(fā)芽和菌體生長的培育基養(yǎng)分上要易于被菌體直接吸取和利用養(yǎng)分成分要適當豐富和完全，NVitamin要高培育條件溫度：選擇最適溫度通氣量：選擇適宜的通氣量〔絲時的培育時間時間較為適宜接種量大可以縮短發(fā)酵周期承受較大接種量的優(yōu)缺點：優(yōu)點：縮短延滯期和對數(shù)期的時間，產(chǎn)物形成速度加快；種子液中大量的體外水解酶有利于原料的利用缺點：菌體生長過快，培育液粘度增加溶氧缺乏，影響產(chǎn)物合成培育種子費工費時生產(chǎn)中通常進展兩項檢查菌種穩(wěn)固性的檢查〔選擇〕無雜菌檢查種子質(zhì)量標準 細胞或菌體 生化指標 產(chǎn)物生成量 酶活力第三章培育基按生產(chǎn)工藝分孢子培育基種子培育基發(fā)酵培育基孢子培育基供制備孢子用的，要求此種培育基能形成大量優(yōu)質(zhì)孢子。常用固體培育基孢子培育基根本要求：根本要求是能使菌體快速生長，產(chǎn)生較多優(yōu)質(zhì)孢子，且不易引起菌種發(fā)生變異。配制時需留意：A〕養(yǎng)分不要太豐富〔特別是有機氮源C〕留意pH和培育基的濕度。常用孢子培育基：麩皮培育基小米培育基玉米碎屑培育基大米培育基用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食鹽等配制的瓊脂斜面培育基種子培育基量菌體生長和繁育。種子培育基的成分要考慮在代謝過程中能堅持穩(wěn)固的pH，其成分還要依據(jù)不同菌種的主要特點而定。最終一級的種子培育基的成分最好能較接近于發(fā)酵培育基，這樣可使種子進入發(fā)酵培育基后能快速適應，快速生長?！拆B(yǎng)分成分要求速效〕氮源有機氮源但凡作為微生物細胞構(gòu)造或代謝產(chǎn)物中氮的來源的養(yǎng)分物質(zhì)，都稱為氮源有機氮源無機氮源豆餅〔粕〕粉、花生餅粉、魚粉、蠶蛹粉、酵母粉、玉米漿、尿素、蛋白胨、酵母膏、牛肉膏等無機氮源銨鹽、硝酸鹽等無機氮源和尿素、玉米漿等可被快速利用，為速效氮蛋白質(zhì)氮則需先水解成肽和氨基酸后才能被吸取利用，屬遲效氮在常用的無機氮中，象硫酸銨那樣被微生物代謝后形成酸性物質(zhì)的，為生理酸性物質(zhì)；pH上升，為生理堿性物質(zhì)淀粉水解糖的制備前體(precursor)淀粉水解糖的制備酸解法〔acidhydrolysismethod〕以酸〔無機酸或有機酸〕為催化劑，在高溫高壓下將淀粉水解轉(zhuǎn)化為葡萄糖的方法。優(yōu)點生產(chǎn)簡易,對設備要求簡潔;水解時間短;設備生產(chǎn)力量大等優(yōu)點。缺點:要求有耐腐蝕，耐高溫、高壓的設備;副反響的發(fā)生，這將造成葡萄糖的缺失而使淀粉轉(zhuǎn)化率降低;,,濃度高,淀粉轉(zhuǎn)化率低。酶解法〔enzymehydrolysismethod〕是用酶將淀粉水解為葡萄糖〔雙酶水解法〕酶解法可分兩步：α-“液化”；“糖化”。雙酶法優(yōu)點：淀粉水解是在酶的作用下進展的，酶解反響條件溫存，對設備要求較低。微生物酶作用的專一性強，淀粉的水解副反響少，因而水解糖p液H純6度0-7高淀用粉糖的化轉(zhuǎn)酶化，率反〔應出溫糖度率50〕-60高°。C，pH3.5-5.03〕可在較高淀粉乳濃度下水解，且可承受粗原料。4〕酶法制得的糖液色淺、較純潔、無苦味、質(zhì)量高。雙酶法缺點：酶解反響時間較長〔需2-3天是蛋白質(zhì)，易造成糖液過濾困難。酸酶結(jié)合法酸酶法淀粉———糊精或低聚糖+〔糖化酶葡萄糖值〔DE值;dextroseequivalent value〕——指葡萄糖〔全部測定的復原糖都當作葡萄糖〕占干物質(zhì)的百分率，用于表示淀粉水解程度及糖化程度。酸酶法特點1液化速度快；2高生產(chǎn)效率；3用酸較少，產(chǎn)品顏色淺，糖液質(zhì)量較高。酶酸法淀粉+〔α-淀粉酶〕———糊精或低聚糖+〔酸〕———葡萄糖酶酸法特點：可用于粗原料淀粉，淀粉濃度也較酸法高，糖液色淺培育基優(yōu)化1、確定起始培育基；2、單因素試驗,確定最適宜的培育基成分；3、多因素試驗，進展各組分之間濃度優(yōu)化和最正確配比；4、放大試驗5、確定最終培育基依據(jù)不同的工業(yè)發(fā)酵方式分類：

第四章依據(jù)微生物需氧或不需氧厭氧發(fā)酵 好氧發(fā)酵依據(jù)培育基是固態(tài)或液態(tài)液態(tài)發(fā)酵 固態(tài)發(fā)酵依據(jù)發(fā)酵位置是外表或深層外表發(fā)酵 深層發(fā)酵依據(jù)發(fā)酵是間歇或是連續(xù)進展〔重點〕分批發(fā)酵 連續(xù)發(fā)酵 補料分批發(fā)酵依據(jù)菌種是否被固定 游離發(fā)酵 固定化發(fā)酵依據(jù)所用的菌種是單一或多種 單一純種發(fā)酵 混合發(fā)酵分批發(fā)酵排出，與外部沒有物料交換。特點操作簡潔，除了掌握溫度、泡沫和pH及通氣以外，不進展任何其他掌握養(yǎng)分物削減而降低培育效率從細胞的增殖來看，初期濃度低，增長慢；后期濃度高，但養(yǎng)分物濃度低，也生長不快；總的生長力量不是很高。分批發(fā)酵的具體操作過程終止后提取、精制種子培育系統(tǒng)開頭工作〔空消、實消〕〔搖瓶種子接入種子罐〕培育〔同時進展主發(fā)酵罐的預備工作，假設為大型發(fā)酵罐，則對培育基連消〕種子轉(zhuǎn)移到主發(fā)酵罐中發(fā)酵〔掌握溫度、pH值；攪拌和通氣〕終止后提取、精制補料分批發(fā)酵方式向培育系統(tǒng)補加肯定物料的培育技術(shù)，又稱半連續(xù)發(fā)酵。分兩種類型：單一補料分批發(fā)酵：在開頭時投入肯定量的根底培育基，到發(fā)酵過程的適當時期，開頭連補料，最終將發(fā)酵液一次全部放出。特點：受罐容積的限制酵液，使發(fā)酵液體積始終不超過發(fā)酵罐的最大操作容積，從而在理論上可以延長發(fā)酵周期，直至發(fā)酵產(chǎn)率明顯下降，才最終將發(fā)酵液全部放出。特點：保存了優(yōu)點，避開了缺點補料分批發(fā)酵的優(yōu)點同分批發(fā)酵相比：多，造成細胞大量生長，耗氧過多，以致通風攪拌設備不能匹配的狀況；可以削減菌體量，提高有用產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率。制了其它一些碳源、氮源的分解利用〔葡萄糖分解阻遏效應〕發(fā)酵工藝掌握微生物發(fā)酵是一個簡單的生化過程，涉及諸多因素。這里主要講溫度、pH值、溶氧、泡沫及補料等因素對發(fā)酵的影響及其掌握一、溫度對發(fā)酵的影響及其掌握 Q發(fā)酵=Q生物+Q攪拌-Q蒸發(fā)±Q輻射方法：罐壁調(diào)溫 夾層調(diào)溫 罐內(nèi)調(diào)溫二、溶氧濃度對發(fā)酵的影響及掌握1、供氧方面增加空氣中氧的含量，使氧分壓增加，進展富氧通氣提高罐壓轉(zhuǎn)變通氣速率增加攪拌速度2、需氧方面調(diào)整養(yǎng)料的濃度調(diào)劑掌握溫度3、提高溶解氧的措施〔重點〕攪拌是提高溶氧的重要的措施在培育基方面：掌握限制因子，以降低菌的生長速率，限制菌對氧的大量消耗，提高溶氧水平改善發(fā)酵液的黏度：降低黏度，增大流淌性，能有效的提高傳質(zhì)成效，特別是溶氧染菌，是指在發(fā)酵培育基中侵入了有礙生產(chǎn)的其它微生物。從染菌的現(xiàn)象分析染菌的緣由從染菌的時間分析早期〔如接種后12h或24 ，除了種子帶菌外，主要是培育基或設備滅菌不徹底。相反，中、后期染菌則可能與中間補料、設備滲漏以及操作不合理等有關，也可能是空氣過濾器不嚴所致。從污染的雜菌類型分析污染耐熱的芽孢桿菌，多數(shù)是因培育基滅菌不徹底或設備存在死角所致；造成。從發(fā)酵罐及批次分析大批發(fā)酵罐染菌是指整個工廠各個產(chǎn)品的發(fā)酵罐都顯現(xiàn)雜菌現(xiàn)象，而且染的是同一種菌，個別發(fā)酵罐連續(xù)染菌，較多地是由于設備問題而造成的。如閥門的滲漏或罐體破舊，特別是蛇形管的穿孔，有時不易覺察。有時設備破舊引起的染菌會顯現(xiàn)每批染菌時間前移現(xiàn)象。染3個途徑覺察判定染菌的主要依據(jù)。無菌試驗方法有平板培育、斜面培育、肉湯培育等，其中以雙碟和肉湯培育為主。第五章優(yōu)良的發(fā)酵設備應具有：嚴密的構(gòu)造良好的液體混合性能較高的傳質(zhì)傳熱速率配套而又牢靠的檢測及掌握外表判定發(fā)酵設備好壞的唯獨標準：能否適合工藝要求，獲得最大生產(chǎn)效率通用式發(fā)酵罐〔機械攪拌通風發(fā)酵罐〕根本條件1、適宜的徑高比。 [高：直徑約為1.7～4]2、能擔當肯定的壓力。3O2的利用率。4、應具有足夠的冷卻面積。[代謝產(chǎn)熱]5、發(fā)酵罐內(nèi)應拋光，盡量削減死角。[避開積污、染菌]6、軸封應嚴密，盡量削減泄漏。部安排件1、攪拌器〔重點〕中的固形物料保持懸浮狀態(tài)。2、擋板作用：轉(zhuǎn)變液體的方向，由徑向流改為軸向流，使液體猛烈翻動，增加溶解氧。3、空氣分布裝置作用：通入無菌空氣并使分散平均位置：罐底中心類型：環(huán)形管：環(huán)徑=0.8d;多噴孔，向下；易堵30～60mm分散器〔防止空氣噴擊、蝕穿罐底〕滅菌一、空罐滅菌1、目的：排解罐內(nèi)死角，確保下一批發(fā)酵的成功殺滅與罐直接相通的各管路、閥門的微生物2、步驟：〔熱蒸汽法〕1〕先徹底清洗作用：a〕有利于排解死角b〕免于料受熱〔特別是干熱的部位〕干焦于罐體、管或閥門2〕從底部通入蒸汽 3〕排冷氣升壓翻開各個需滅菌的管路、放氣閥等〔如接種管、取樣管、空氣進管、流量計等〕1kg/cm2,30~60min降溫關閉各放汽閥、進汽閥；然后漸漸放汽，或自然冷卻，或泵循環(huán)水加速冷卻二、實罐滅菌1、在進展培育基滅菌之前，通常應先把發(fā)酵罐的分空氣過濾器滅菌并用無菌空氣吹干。2、預熱向夾套或蛇管中通入蒸汽，間接將培育基加熱至70℃左右。作用：利于糊化；削減冷凝水的生成；減輕噪音3、開啟蒸汽管，向培育基中通入蒸汽，升溫〔34兩步為升溫階段〕41kg/cm2(0.1MPa)時，裝在發(fā)酵罐封頭的接種管、補料管、消泡劑管等應排汽。5、保溫調(diào)劑好各進汽和排汽閥門，使罐壓和溫度保持在一穩(wěn)固水平，堅持肯定時間。在保溫階段，凡進口在培育基液面下的各管道都應通入蒸汽；在液面上的其余管道則應排放蒸汽，這樣才能保證滅菌徹底，不留死角。6、保溫終止后，依次關閉各排汽、進汽閥；待罐內(nèi)壓力降至0.5～0.8kg/cm2時，向罐內(nèi)通入無菌空氣，向夾套或蛇管中通入冷水，使培育基降至所需溫度。通入無菌空氣的作用：加速降溫； 保持罐內(nèi)正壓 〔降溫階段〕第六章一、啤酒生產(chǎn)的原料以大麥為主要原料，以其他谷物等為輔料，并添加少量啤酒花等。1、大麥〔主原料〕2、關心原料輔料以不發(fā)芽谷類為主，如大米和脫胚玉米等降低生產(chǎn)本錢，提高啤酒的非穩(wěn)固性，降低啤酒的色度，改善麥汁浸出物組成3、酒花〔hop〕酒花的功能：賜予啤酒香味和爽口苦味增進啤酒泡持性和穩(wěn)固性與麥汁共沸時能促進蛋白凝固，利于澄清增加麥汁和啤酒的防腐力量酒花的成分：α-酸具苦味和防腐力量，其多少是衡量酒花質(zhì)量的重要標準酒花油花粉內(nèi)，味芳香；萜烯、酯類等多酚物質(zhì)能與蛋白結(jié)合，促進凝固沉淀〔雙重性——穩(wěn)固、渾濁〕抗生素定義：由微生物(包括細菌、真菌、放線菌等)或動植物等在其生命活動過程中所產(chǎn)生的，或經(jīng)過其他方法〔生物化學或半合成〕(卑微)濃度下，具有抑制或殺滅病原體的一類化學物質(zhì)。依據(jù)微生物來源分類：放線菌產(chǎn)生的抗生素：鏈霉素、金霉素等真菌產(chǎn)生的：青霉素、頭孢菌素類、灰黃霉素等細菌產(chǎn)生的：短桿菌肽〔地衣芽孢桿菌〕植物或動物產(chǎn)生的：大蒜素、乳鐵蛋白(Lactoferrin)等以放線菌產(chǎn)生的最多，真菌次之，細菌再次之，動植物很少生素最多依據(jù)抗生素的作用分類：抗細菌類抗生素：青霉素族抗生素、頭孢菌族抗生素、喹諾酮類抗生素等抗真菌類：兩性霉素B、制霉菌素等抗結(jié)核分枝桿菌類：氨基糖苷類等抗癌細胞類：絲裂依據(jù)抗生素的作用機制分類：抑制細胞壁合成的抗生素：青霉素、頭孢菌素、桿菌肽等影響細胞膜功能的：多粘菌素、短桿菌素等抑制核酸合成的：絲裂霉素、利福霉素等抑制蛋白質(zhì)合成的：鏈霉素、慶大、卡那等抑制