形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)-外周血細(xì)胞種類與形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)外周血細(xì)胞種類與形態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)掌握血細(xì)胞的涂片與瑞氏染色方法

二、實(shí)驗(yàn)原理：不同種類的細(xì)胞及細(xì)胞的不同成分對(duì)酸性及堿性染料的親和力不同，因而瑞氏染色后各種血細(xì)胞顯示出各自的染色特征。三、試劑器材

1．試劑瑞氏染液Ⅰ液：包含瑞氏染料1.0g、純甲醇（AR級(jí)以上）600.0ml、甘油

15ml。Ⅱ液：磷酸鹽緩沖液（pH6.4~6.8）：包含磷酸二氫鉀（KH2PO4）0.3g、磷酸氫二鈉（Na2HPO4）0.2g、蒸餾水加至1000.0ml。2．器材載玻片、吸耳球、染色架、顯微鏡。2四、操作步驟1.取血：選擇手指肚，先用75%酒精棉球消毒局部皮膚。等待干后，用消毒后的刺血針刺入皮膚，深約2毫米。輕輕擠壓，使血液流出形成綠豆大小的血滴。3四、操作步驟（2）制片：取干凈玻片一張，加血樣一小滴，推成薄涂片，室溫自然晾干。（3）染色:待血涂片干透后，將玻片平置于染色架上，滴加染液（I液）3滴~5滴，使其迅速蓋滿血涂片，約0.5min~1min后，滴加等量或稍多的緩沖液（II液），搖動(dòng)玻片，使染液充分混合。（4）沖洗:室溫染色5min~10min后用滴水沖去染液，待干。（5）結(jié)果觀察:用低倍鏡觀察血涂片體、尾交界處血細(xì)胞平鋪的部分。在正常情況下，血涂片外觀為淡紫紅色，在鏡下紅細(xì)胞染為粉紅色，白細(xì)胞胞漿能顯示各種細(xì)胞的特有色彩，細(xì)胞核染紫紅色，染色質(zhì)清楚，粗細(xì)松緊可辨。4五、注意事項(xiàng)1．未干透的血膜不能染色。2．加染液應(yīng)適量，過(guò)少則易蒸發(fā)沉淀，一旦染料沉積在血涂片上，則不易沖掉，使細(xì)胞深染不易檢查。3．染色時(shí)間的長(zhǎng)短與染液濃度、染色時(shí)溫度及血細(xì)胞多少有關(guān)。染色時(shí)間與染液濃度、染色時(shí)溫度成反比；染色時(shí)間與細(xì)胞數(shù)量成正比。沖洗前，應(yīng)先在低倍鏡下觀察有核細(xì)胞是否染色清楚，核質(zhì)是否分明。4．沖洗時(shí)不能先倒掉染液，應(yīng)以流水沖洗，以防染料沉著在血涂片上。時(shí)間不能過(guò)久，以防脫色。5．染色過(guò)淡，可以復(fù)染。5六、思考題

血細(xì)胞的種類有哪些？6中性粒細(xì)胞是白細(xì)胞的一種，在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞質(zhì)呈無(wú)色或極淺的淡紅色。正常值：

中性粒細(xì)胞0.5～0.7（50％～70％）

7中性桿狀核粒細(xì)胞、嗜酸粒細(xì)胞、嗜堿粒細(xì)胞和幼稚細(xì)胞圖片8中性粒細(xì)胞圖片

9圖D：血像，瑞氏染色，×1000，淋巴細(xì)胞漿中含有一個(gè)（偶也可見(jiàn)二個(gè)）圓形或橢圓形紫紅色顆粒，直徑2~3um。

10血小板是血液中體積最小的血細(xì)胞，正常人血液中計(jì)數(shù)為100×109／升一300×109／升，占血液體積的0．3％

血小板為圓盤形，直徑1～4微米到7一8微米不等，且個(gè)體差異很大(5～12立方微米),是有折光的扁圓形小體,正常時(shí)呈圓盤狀，有時(shí)可伸出偽足。

11各種血細(xì)胞1.2.3.單核細(xì)胞；4.5.6.淋巴細(xì)胞；7.8