形態(tài)學實驗-外周血細胞種類與形態(tài)觀察實驗

實驗外周血細胞種類與形態(tài)觀察實驗

一、實驗目的：學習掌握血細胞的涂片與瑞氏染色方法

二、實驗原理：不同種類的細胞及細胞的不同成分對酸性及堿性染料的親和力不同，因而瑞氏染色后各種血細胞顯示出各自的染色特征。三、試劑器材

1．試劑瑞氏染液Ⅰ液：包含瑞氏染料1.0g、純甲醇（AR級以上）600.0ml、甘油

15ml。Ⅱ液：磷酸鹽緩沖液（pH6.4~6.8）：包含磷酸二氫鉀（KH2PO4）0.3g、磷酸氫二鈉（Na2HPO4）0.2g、蒸餾水加至1000.0ml。2．器材載玻片、吸耳球、染色架、顯微鏡。2四、操作步驟1.取血：選擇手指肚，先用75%酒精棉球消毒局部皮膚。等待干后，用消毒后的刺血針刺入皮膚，深約2毫米。輕輕擠壓，使血液流出形成綠豆大小的血滴。3四、操作步驟（2）制片：取干凈玻片一張，加血樣一小滴，推成薄涂片，室溫自然晾干。（3）染色:待血涂片干透后，將玻片平置于染色架上，滴加染液（I液）3滴~5滴，使其迅速蓋滿血涂片，約0.5min~1min后，滴加等量或稍多的緩沖液（II液），搖動玻片，使染液充分混合。（4）沖洗:室溫染色5min~10min后用滴水沖去染液，待干。（5）結(jié)果觀察:用低倍鏡觀察血涂片體、尾交界處血細胞平鋪的部分。在正常情況下，血涂片外觀為淡紫紅色，在鏡下紅細胞染為粉紅色，白細胞胞漿能顯示各種細胞的特有色彩，細胞核染紫紅色，染色質(zhì)清楚，粗細松緊可辨。4五、注意事項1．未干透的血膜不能染色。2．加染液應適量，過少則易蒸發(fā)沉淀，一旦染料沉積在血涂片上，則不易沖掉，使細胞深染不易檢查。3．染色時間的長短與染液濃度、染色時溫度及血細胞多少有關(guān)。染色時間與染液濃度、染色時溫度成反比；染色時間與細胞數(shù)量成正比。沖洗前，應先在低倍鏡下觀察有核細胞是否染色清楚，核質(zhì)是否分明。4．沖洗時不能先倒掉染液，應以流水沖洗，以防染料沉著在血涂片上。時間不能過久，以防脫色。5．染色過淡，可以復染。5六、思考題

血細胞的種類有哪些？6中性粒細胞是白細胞的一種，在瑞氏（Wright）染色血涂片中，胞質(zhì)呈無色或極淺的淡紅色。正常值：

中性粒細胞0.5～0.7（50％～70％）

7中性桿狀核粒細胞、嗜酸粒細胞、嗜堿粒細胞和幼稚細胞圖片8中性粒細胞圖片

9圖D：血像，瑞氏染色，×1000，淋巴細胞漿中含有一個（偶也可見二個）圓形或橢圓形紫紅色顆粒，直徑2~3um。

10血小板是血液中體積最小的血細胞，正常人血液中計數(shù)為100×109／升一300×109／升，占血液體積的0．3％

血小板為圓盤形，直徑1～4微米到7一8微米不等，且個體差異很大(5～12立方微米),是有折光的扁圓形小體,正常時呈圓盤狀，有時可伸出偽足。

11各種血細胞1.2.3.單核細胞；4.5.6.淋巴細胞；7.8