醫(yī)院檢驗科生化室作業(yè)指導(dǎo)書

醫(yī)院檢驗科生化室作

業(yè)指導(dǎo)書

文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP

編制：丁冬萍

審核：李文明

批準(zhǔn)：丁福林

生效日期：2014年01月01日

醫(yī)院檢驗科

醫(yī)院文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP

檢驗科目錄版本：A/0頁碼：2/136

生化室SOP生效日期：2014-01-01

目錄

序號主題內(nèi)容代號頁

1血清總膽紅素測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-0015

2血清直接膽紅素測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-0029

3血清總蛋白液體雙縮服法測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-00313

4血清白蛋白澳甲酚綠法測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-00417

5血清前白蛋白測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-00521

25

6血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-006

7血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-00729

8血清堿性磷酸酶測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-00833

9血清GGT速率法測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-00937

10血清尿素氮酶法測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-01041

11血清尿酸酶法測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-01145

12血清肌酢酶法測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-01249

13血清B2-微球蛋白測定SYXHYY-JYK-SII-SOP-01353

14血清葡萄糖氧化酶法測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-01456

15血清總膽固醇酶法測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-01560

16血清甘油三酯酶法測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-01663

17血清高密度脂蛋白膽固醇測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-01767

18血清低密度脂蛋白膽固醇測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-01871

19血清載脂蛋白A1測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-01975

20血載脂蛋白B測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-02079

21血清脂蛋白a測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-02183

22血清肌酸激酶測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-02287

23血清肌酸激酶同功酶測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-02391

醫(yī)院文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP

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24血清乳酸脫氫酶測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-02495

25血清a-羥丁酸脫氫酶測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-02599

26血清a-淀粉酶測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-026103

27鈣測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-027107

28鎂測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-028111

29磷測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-029115

30血清二氧化碳測定SYXHYY-JYK-SH-S0P-030118

31抗鏈球菌溶血素0測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-031120

32類風(fēng)濕因子測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-032123

33K/Na/Cl測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-033126

34尿液和腦脊液總蛋白測定SYXHYY-JYK-SH-SOP-034132

35復(fù)合校準(zhǔn)品SYXHYY-JYK-SH-SOP-03135

1

醫(yī)院文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP

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修訂頁

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檢驗科（T-BIL）測定

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血清總膽紅素（T-BIL）測定

一、目的

保證總膽紅素測定的結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

二、修改程序

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽

字：質(zhì)量主管、授權(quán)人（科主任）。

三、適用范圍

鋼酸鹽氧化法測定總膽紅素。

四、試劑來源

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序適用于深圳邁瑞生產(chǎn)的總膽紅素測定試劑盒。

五、溯源

全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）。

六、原理

此方法基于樣品中的總膽紅素在PI13.0環(huán)境中，在有機(jī)復(fù)合物氧化劑的作用下，可以

被氧化成膽綠素，而膽紅素特有的黃色也隨即消失，在450nm處測定吸光度的變化，即可

計算出樣品中總膽紅素的濃度。

七、試劑

R1：硫磺酸緩沖液（pH2.9）0.Imol/L

表面活性劑

R2：磷酸緩沖液（pH7.0）10mmol/L

有機(jī)鈕酸鹽4mmol/L

不同批號試劑盒中各組份不能互換。

本試劑對光敏感，2?8c密閉避光保存可以穩(wěn)定18個月（勿冷凍）；首次開啟試劑后，

避光保存于2?8℃防污染環(huán)境中，可繼續(xù)穩(wěn)定至效期。

校準(zhǔn)液：Randox公司提供的系列校準(zhǔn)品。

八、標(biāo)本采集

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檢驗科(T-BIL)測定

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血清總膽紅素(T-BIL)測定

血清、血漿。樣本2?8℃保存可以存放約3天，-20℃保存可以存放3個月，但只能凍融一

次。

九、操作步驟

1、標(biāo)本編號，分離血清，依順序置樣品架上。

2、按標(biāo)本編號在全自動化生化儀器上輸入標(biāo)本的基本信息和測定要求，進(jìn)行測定。

3、儀器校準(zhǔn)：將校準(zhǔn)液置試管架上，輸入校準(zhǔn)液濃度，然后進(jìn)行測定(測定參數(shù)與下

同)，其吸光度貯存在電腦中，濃度值測定符合要求即可應(yīng)用。一般每3?6個月校準(zhǔn)一次，

若更換不同批號的試劑、質(zhì)控超標(biāo)或儀器維修處理后應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)。

4、測定參數(shù)：

血清量7ul

試劑I200Pl

試劑1150ul

主波長444nm

次波長548nm

反應(yīng)類型終點法；負(fù)反應(yīng)

測定時間10分鐘

溫度37℃

報告單位umol/L

5、結(jié)果計算：

△A樣品

樣本中總膽紅素的含量=-------X標(biāo)準(zhǔn)液濃度

△A標(biāo)準(zhǔn)

單位換算：mg/dlX17.1=Pmol/L

十、正常參考值

5.1-20umol/L

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檢驗科（T-BIL）測定

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血清總膽紅素（T-BIL）測定

十一、室內(nèi)質(zhì)控

質(zhì)控方法：每天測定樣品前做一組質(zhì)控，在標(biāo)本中間插一組質(zhì)控，最后再做一組質(zhì)控品，

共三組。

控制限（%±2SD）：超過+2SD或-2SD均為失控，尋找原因，另作處理。當(dāng)校準(zhǔn)物或質(zhì)

控物達(dá)不到靶值時,將質(zhì)控物或校準(zhǔn)物按本單位條件重復(fù)測定20次,計算均值和標(biāo)準(zhǔn)差,

再以測定結(jié)果為靶值進(jìn)行校準(zhǔn)或質(zhì)控用。

十二、性能指標(biāo)

1.外觀：R1試劑為澄清、無色液體；R2試劑為澄清、無色到淺黃色液體。

2.裝量：液體試劑的凈含量不少于標(biāo)識值。

3.空白吸光度：以蒸儲水為空白對照（450nm；1cm；37℃）應(yīng)不大于0.45。

4.分析靈敏度：測得的校準(zhǔn)品在5分鐘內(nèi)單位濃度吸光度的變化絕對值》0.1X10-3。

5.線性范圍:在0.47?30mg/dL范圍內(nèi)，劑量-反應(yīng)曲線線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.9900；

線性相對偏差＜±15%。

6.準(zhǔn)確度：誤差W±10%。

7.精密度：批內(nèi)變異系數(shù)＜6%,批間相對極差＜8%。

8.在2?8℃避光條件下，總膽紅素測定試劑盒自生產(chǎn)之日起可以保存18個月。

十三、檢驗方法的局限性

1.樣本中血紅素（500mg/dL）、甘油三酯（2000mg/dL）、抗壞血酸（30mg/dL）在達(dá)到

以上濃度前基本不會影響該試劑的測定。為了不影響測試結(jié)果，操作時請格外注意，用

移液器移液時勿用嘴。

2.因為反應(yīng)液pH值低，故不推薦使用肝素抗凝血漿。

3.濃度最大可達(dá)30mg/dL。高于此濃度，請用生理鹽水稀釋，所得結(jié)果乘以稀釋因子。

十四、臨床意義

⑴、血清總膽紅素病理性增高常見于：

1、溶血性黃疸：如新生兒黃疸、陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿、瘧疾、血型不合的輸血、

醫(yī)院血清總膽紅素文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-001

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檢驗科(T-BIL)測定

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血清總膽紅素(T-BIL)測定

急性溶血性貧血等。

2、肝細(xì)胞性黃疸：如急性黃疸性肝炎、慢性活動性肝炎、肝硬化、急性肝壞死、中

性肝炎、肝癌等。

3、阻塞性黃疸：如膽石癥、胰頭癌等。

⑵、血清總膽紅素降低：主要見于再生障礙性貧血等。

十五、【參考文獻(xiàn)】

1.臨床化學(xué)常用項目自動分析發(fā)/韓志鈞等主編.一沈陽：遼寧科學(xué)技術(shù)出版社,2005.8

2.臨床檢驗自動化分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程/陸永綏，李清華，張偉民主編。一杭州：浙江大

學(xué)出版社,2006.9

3.臨床檢驗管理與技術(shù)規(guī)程/陸永綏，張偉民主編。一杭州：浙江大學(xué)出版社，2004.10

4.張秀明等主編。現(xiàn)在臨床生化檢驗學(xué)，北京：人民軍醫(yī)出版社，2001

醫(yī)院血清立接膽紅文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-002

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檢驗科索（T-BIL）測定

生化室SOP生效日期：2014-0L01

血清直接膽紅素（D-BIL）測定

一、目的

保證直接膽紅素測定的結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

二、修改程序

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽

字：質(zhì)量主管、授權(quán)人（科主任）。

三、適用范圍

鋼酸鹽氧化法測定直接膽紅素。

四、試劑來源

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序適用于長春迪瑞科技股份有限公司生產(chǎn)的總膽紅素測定試劑盒。

五、溯源

全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）。

六、原理

此方法基于樣品中的直接膽紅素在PI13.0環(huán)境中，在有機(jī)復(fù)合物氧化劑和表面活性劑

的共同作用下，可以被氧化成膽綠素，而膽紅素特有的黃色也隨即消失，在450nm處測定

吸光度的變化，即可計算出樣品中直接膽紅素的濃度。

七、試劑

R1：酒石酸緩沖液（pH2.9）0.lmol/L

表面活性劑

R2：磷酸緩沖液（pH7.0）10mmol/L

有機(jī)鈕酸鹽4mmol/L

不同批號試劑盒各組份不能互換。

本試劑對光敏感，2?8c密閉避光保存可以穩(wěn)定18個月（勿冷凍）；首次開啟試劑后，

避光保存于2?8℃防污染環(huán)境中，可繼續(xù)穩(wěn)定至效期。

校準(zhǔn)液：Randox公司提供的系列校準(zhǔn)品。

醫(yī)院血清立接膽紅文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-002

版本：A/0頁碼：10/136

檢驗科索（T-BIL）測定

生化室SOP生效日期：2014-0L01

血清宜接膽紅素（D-BIL）測定

八、標(biāo)本采集

血清、血漿。樣本2?8c保存可以存放約3天，-20C保存可以存放3個月，但只能

凍融一次；又因為反應(yīng)液pH值低，故不推薦使用肝素抗凝血漿。

九、操作步驟

1、標(biāo)本編號，分離血清，依順序置樣品架上。

2、按標(biāo)本編號在全自動化生化儀器上輸入標(biāo)本的基本信息和測定要求，進(jìn)行測定。

3、儀器校準(zhǔn)：將校準(zhǔn)液置試管架上，輸入校準(zhǔn)液濃度，然后進(jìn)行測定（測定參數(shù)與下

同），其吸光度貯存在電腦中，濃度值測定符合要求即可應(yīng)用。一般每3?6個月校準(zhǔn)一次，

若更換不同批號的試劑、質(zhì)控超標(biāo)或儀器維修處理后應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)。

4、測定參數(shù)：

血清量7p1

試劑I200N1

試劑II50u1

主波長444nm

次波長548nm

反應(yīng)類型終點法；負(fù)反應(yīng)

測定時間10分鐘

溫度37℃

5、結(jié)果計算：

AA樣品

樣本中直接膽紅素的含量=-------X標(biāo)準(zhǔn)液濃度

AA標(biāo)準(zhǔn)

單位換算:mg/dlX17.1=Pmol/L

十、正常參考值：

1.70-6.80umol/Lo

醫(yī)院血清立接膽紅文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-002

版本：A/0頁碼：11/136

檢驗科索（T-BIL）測定

生化室SOP生效日期：2014-0L01

血清直接膽紅素（D-BIL）測定

十一、室內(nèi)質(zhì)控

質(zhì)控方法：每天測定樣品前做一組質(zhì)控，在標(biāo)本中間插一組質(zhì)控，最后再放一組質(zhì)控

品，共三組。

控制限（處2SD）：超過+2SD或-2SD均為失控，需尋找原因，另作處理。

當(dāng)校準(zhǔn)物或質(zhì)控物達(dá)不到靶值時，將質(zhì)控物或校準(zhǔn)物按本單位條件重復(fù)測定20次，計

算均值和標(biāo)準(zhǔn)差，再以測定結(jié)果為靶值進(jìn)行校準(zhǔn)或質(zhì)控用。

十二、性能指標(biāo)

1.外觀：R1試劑為澄清無色液體；R2試劑為澄清無色到微黃色液體。

2.裝量：液體試劑的凈含量不少于標(biāo)識值。

3.空白吸光度：以蒸鐳水為空白對照與試劑1和試劑2混合后測得的吸光度值W

0.45ABS（450nm；1cm；37℃）。

4.分析靈敏度：測得的校準(zhǔn)品在5分鐘內(nèi)單位濃度吸光度的變化絕對值》0.15X

10-3o

5.線性范圍：在0.16~10mg/dL范圍內(nèi)，劑量-反應(yīng)曲線線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于

0.9900；線性相對偏差W±15%。

6.準(zhǔn)確度：用試劑盒測定校準(zhǔn)血清，作3次測定并計算其測定結(jié)果均值，所得的結(jié)果

與靶值對照，誤差W±10%。

7.精密度：批內(nèi)變異系數(shù)CV<6%,批間相對極差<8%。

8.在2?8℃避光條件下，直接膽紅素測定試劑盒自生產(chǎn)之日起可以保存18個月。

十三、檢驗結(jié)果的解釋

1.常用于診斷膽道阻塞、肝硬化、肝炎等疾病。

2.膽管梗阻（如膽結(jié)石）或肝細(xì)胞病（如肝硬化或肝炎）可引起高結(jié)合膽紅素（直接

膽紅素）血癥。

3.直接膽紅素測定結(jié)果升高也可能由各種藥物引起，其中包括抗生素、巴比妥類、固

醇類或口腹避孕藥。

醫(yī)院血清直接膽紅文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-002

檢驗科素（T-BIL）測定版本：A/0頁碼：12/136

生化室SOP生效日期：2014?01?01

血清直接膽紅素（D-BIL）測定

十四、臨床意義

血清直接膽紅素顯著增高常見于：

1、阻塞性黃疸：如膽石癥、肝癌、胰頭癌等。

2、肝細(xì)胞性黃疸：如急性黃疸性肝炎、慢性活動性肝炎、急性黃色肝萎縮等。

十五、【參考文獻(xiàn)】

1.臨床化學(xué)常用項目自動分析發(fā)/韓志鈞等主編.一沈陽：遼寧科學(xué)技術(shù)出版社，

2005.8

2.臨床檢驗自動化分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程/陸永綏，李清華，張偉民主編。一杭州：浙江

大學(xué)出版社，2006.9

3.臨床檢驗管理與技術(shù)規(guī)程/陸永綏，張偉民主編。一杭州：浙江大學(xué)出版社，2004.10

4.張秀明等主編?，F(xiàn)在臨床生化檢驗學(xué)，北京：人民軍醫(yī)出版社，2001

醫(yī)院m清總蛋白文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-005

版本：A/0頁碼：13/136

檢驗科雙縮膊法測定

生化室SOP生效日期：2014-01-01

血清總蛋白（TP）雙縮朦法測定

一、目的

保證總蛋白測定的結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

二、修改程序

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽

字：質(zhì)量主管、授權(quán)人（科主任）。

三、適用范圍

雙縮版法測定總蛋白。

四、試劑來源

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序適用于3V總蛋白測定試劑盒。

五、溯源

全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）。

六、原理

蛋白質(zhì)是由許多氨基酸通過肽鍵相互結(jié)合而成的，肽鍵在堿性溶液中，能與二價銅離子

作用產(chǎn)生紫紅色絡(luò)合物，在546nm有吸收峰,并與蛋白含量成正比，通過與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)

蛋白比較可求出標(biāo)本血清中總蛋白的含量。

七、試劑

氫氧化鈉600mmol/L

硫酸銅12minol/L

酒石酸鉀鈉32mmol/L

碘化鉀30mmol/L

穩(wěn)定劑

不同批號試劑盒中各組份不能互換。

本試劑2-25℃密閉避光保存可以穩(wěn)定18個月（勿冷凍），首次開啟試劑后，避光保存

于2-25℃防污染環(huán)境中，可繼續(xù)使用到有效期止。

校準(zhǔn)液：Randox公司提供的系列校準(zhǔn)品。

醫(yī)院血清總蛋白文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-005

版本：A/0頁碼：14/136

檢驗科雙縮愿法測定

生化室SOP生效日期：2014?0L01

m清總蛋白（TP）雙縮膊法測定

八、本采集

血清或血漿（應(yīng)使用澄清、不溶血的血清，盡快與紅血球分離；室溫可穩(wěn)定1周；建議

冷藏。）

九、操作步驟

1、標(biāo)本編號，分離血清，按順序置樣品架上。

2、按標(biāo)本編號在全自動化生化儀器上輸入標(biāo)本的基本信息和測定要求，進(jìn)行測定。

3、儀器校準(zhǔn)：將校準(zhǔn)液置樣品架上，輸入校準(zhǔn)液濃度，然后進(jìn)行測定（測定參數(shù)與下

同），其吸光度貯存在電腦中，濃度值符合校準(zhǔn)值即可，一般每3?6個月校準(zhǔn)一次。若更換

不同批號的試劑、質(zhì)控超標(biāo)或儀器維修處理后應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)。

4、測定參數(shù)：

血清量4u1

試劑量240Hl

波長548nm

反應(yīng)類型終點法；正反應(yīng)

測定時間10分鐘

溫度37℃

報告單位g/L

5、結(jié)果計算：

A樣品一A空白

樣品中總蛋白含量=-------------X標(biāo)準(zhǔn)液濃度（單位：g/L）

A標(biāo)準(zhǔn)一A空白

十、正常參考值

成人：60-80g/L

十一、室內(nèi)質(zhì)控

質(zhì)控方法：每天測定樣品前做一組質(zhì)控，在標(biāo)本中間插一組質(zhì)控，最后再做一組質(zhì)控,

醫(yī)院血清總蛋白文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-005

版本：A/0頁碼：15/136

檢驗科雙縮膊法測定

生化室SOP生效日期：2014-01-01

血清總蛋白（TP）雙縮脾法測定

共三組。

控制限（灶2SD）超過+2SD或-2SD均為失控，需尋找原因，另作處理。

當(dāng)校準(zhǔn)物或質(zhì)控物達(dá)不到靶值時，將質(zhì)控物或標(biāo)準(zhǔn)物重復(fù)測定20次，計算均值和標(biāo)準(zhǔn)

差，再以測定結(jié)果為靶值來進(jìn)行校準(zhǔn)或質(zhì)控。

十二、性能指標(biāo)

1.外觀：澄清，藍(lán)色液體。

2.裝量：液體試劑的凈含量不少于標(biāo)識值。

3.空白吸光度：以蒸儲水為空白對照（546nm；1cm；37℃）應(yīng)不大于0.25。

4.分析靈敏度：測得的校準(zhǔn)品在5分鐘內(nèi)單位濃度吸光度的變化絕對值》0.45X10-5。

5.線性范圍：在7.5?120g/L范圍內(nèi)，劑量-反應(yīng)曲線線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.9900；

線性相對偏差W±15%。

6.準(zhǔn)確度：誤差W±10%。

7.精密度：批內(nèi)變異系數(shù)＜4%,批間相對極差＜5%。

8.在2?8C避光條件下，總蛋白測定試劑盒自生產(chǎn)之日起可以保存18個月。

十三、檢驗方法的局限性

1.雙縮胭比色法目前還沒有標(biāo)準(zhǔn)化，試劑組成的摩爾濃度經(jīng)過了多種方法的修改，但雙

縮胭比色法仍被視為基礎(chǔ)的參考方法。牛血清白蛋白被推薦為總蛋白定量的校準(zhǔn)品。

2.輸注溶液、鏤鹽、溶血、脂血及濃度大于5mg/dl的膽紅素等可能影響測量結(jié)果。

十四、臨床意義

⑴、血清總蛋白濃度增高：

1、主要是由于血清濃縮而致，尤其是急性失水（如嚴(yán)重腹瀉、嘔吐、高熱等）是造成

脫水的主要原因；

2、多發(fā)性骨髓瘤的病人由于血清蛋白質(zhì)合成增加，使血清總蛋白顯著增加，可高達(dá)

lOOg/L,其中主要為球蛋白。

⑵、血清總蛋白濃度降低

醫(yī)院m清總蛋白文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-005

版本：A/0頁碼：16/136

檢驗科雙縮膊法測定

生化室SOP生效日期：2014-01-01

血清總蛋白（TP）雙縮膈法測定

1、蛋白質(zhì)合成功能障礙：肝臟是合成白蛋白的唯一場所，肝臟嚴(yán)重?fù)p害時，如慢性肝

炎、肝硬化、急性肝壞死、肝癌等，血清總蛋白含量降低；

2、蛋白質(zhì)攝入不足：食物中的蛋白質(zhì)含量不足或慢性胃腸疾病所引起的吸收不良，常

見于營養(yǎng)不良、妊娠后期、饑餓等；

3、蛋白質(zhì)消耗太多：常見于慢性消耗性疾病，如嚴(yán)重結(jié)核病、甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)、惡性

腫瘤、高熱、外傷、糖尿病等；

4、蛋白質(zhì)丟失：嚴(yán)重大面積燒傷、大出血、腎病綜合癥等。

十五、【參考文獻(xiàn)】

1.臨床化學(xué)常用項目自動分析發(fā)/韓志鈞等主編.一沈陽：遼寧科學(xué)技術(shù)出版社,2005.8

2.臨床檢驗自動化分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程/陸永綏，李清華，張偉民主編。一杭州：浙江大

學(xué)出版社,2006.9

3.臨床檢驗管理與技術(shù)規(guī)程/陸永綏，張偉民主編。一杭州：浙江大學(xué)出版社，2004.10

醫(yī)院血清白蛋白澳文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-006

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檢驗科甲酚綠法測定

生化室SOP生效日期：2014-0L01

血清白蛋白（ALB）澳甲酚綠法測定

一、目的

保證白蛋白測定的結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

二、修改程序

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)簽

字：質(zhì)量主管、授權(quán)人（科主任）。

三、適用范圍

澳甲酚綠法測定白蛋白。

四、試劑來源

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序適用于3V生產(chǎn)的白蛋白測定試劑盒。

五、溯源

全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）。

六、原理

血清中的白蛋白與漠甲酚綠在PII4.2的條件下可以結(jié)合生成藍(lán)綠色復(fù)合物，溶液亦由黃

色變?yōu)榫G色，且其顏色深淺與白蛋白濃度成正比，通過在630nm處測定其吸光度可得出標(biāo)本

中白蛋白的含量。

PH=4.2

白蛋白+溟甲酚綠--------綠色復(fù)合物

七、試劑

溪鉀酚綠0.25mmol/L

緩沖液pH4.2

穩(wěn)定劑和表面活性劑

不同批號試劑盒中各組份不能互換。

本試劑2-25C密閉避光保存可以穩(wěn)定18個月（勿冷凍），首次開啟試劑后，避光保存于

2-25C防污染環(huán)境中，可繼續(xù)使用到有效期止。避免強(qiáng)光直曬試劑！

校準(zhǔn)液：Randox公司提供的系列校準(zhǔn)品。

八、標(biāo)本采集

醫(yī)院血清白蛋白澳文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-006

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檢驗科甲酚綠法測定

生化室SOP生效日期：2014-0L01

血清白蛋白（ALB）澳甲酚綠法測定

血清，肝素或EDTA抗凝血漿。如在收集后4小時后方能分析樣品，一定要在2?8℃密塞保

存，在2?8℃可穩(wěn)定2周，在-20C冷凍穩(wěn)定6個月。

九、操作步驟

1、標(biāo)本編號，分離血清，按順序置樣品架上。

2、按標(biāo)本編號在全自動化生化儀器上輸入標(biāo)本的基本信息和測定要求，進(jìn)行測定。

3、儀器校準(zhǔn)：將校準(zhǔn)液置試管架上，輸入校準(zhǔn)液濃度，然后進(jìn)行測定（測定參數(shù)與下

同），其吸光度貯存在電腦中，濃度值符合校準(zhǔn)值即可，一般每3~6個月校準(zhǔn)一次。若更換

不同批號的試劑、質(zhì)控超標(biāo)或儀器維修處理后應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)。

4、測定參數(shù):

血清量3ul

試劑量340u1

主波長628nm

次波長700nm

反應(yīng)類型終點法:；正反應(yīng)

測定時間10分鐘

溫度37℃

報告單位g/L

5、結(jié)果計算：

A樣品一A空白

樣品中白蛋白含量（g/L）=-----------X標(biāo)準(zhǔn)液濃度

A標(biāo)準(zhǔn)一A空白

十、正常參考值

35?55g/L

十一、室內(nèi)質(zhì)控

質(zhì)控方法：每天測定樣品前做一組質(zhì)控，在標(biāo)本中間插一組質(zhì)控，最后再做一組質(zhì)控

共三組。

醫(yī)院血清白蛋白澳文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-006

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檢驗科甲酚綠法測定

生化室SOP生效日期：2014-0L01

血清白蛋白（ALB）澳甲酚綠法測定

控制限（X±2SD）超過+2SD或-2SD均為失控，需尋找原因，另作處理。

當(dāng)校準(zhǔn)物或質(zhì)控品達(dá)不到靶值時，應(yīng)將質(zhì)控物或校準(zhǔn)物重復(fù)測定20次，計算均值和標(biāo)

準(zhǔn)差，再以測定結(jié)果為靶值來進(jìn)行校準(zhǔn)或質(zhì)控。

十二、性能指標(biāo)

1.外觀：棕色液體。

2.裝量：液體試劑的凈含量不少于標(biāo)識值。

3.空白吸光度：以蒸鏘水為空白對照（630nm；1cm；37℃）應(yīng)不大于0.6。

4.分析靈敏度：測得的校準(zhǔn)品在5分鐘內(nèi)單位濃度吸光度的變化絕對值》0.39X10-3o

5.線性范圍：在5?80g/L范圍內(nèi)，劑量-反應(yīng)曲線線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.9900；線

性相對偏差W±15%。

6.準(zhǔn)確度：誤差W±10%。

7.精密度：批內(nèi)變異系數(shù)＜4%,批間相對極差＜5%。

8.在2?8℃避光條件下，白蛋白測定試劑盒自生產(chǎn)之日起可以保存18個月。

十三、檢驗方法的局限性

與免疫散射比濁法和免疫透射比濁法比較澳甲酚綠法測結(jié)果稍偏高些。我國目前采用手

工操作為多，呈色時間為10?30分鐘，所以很難完全克服BCG法的非特異性反應(yīng)。

十四、臨床意義

血清白蛋白濃度降低：急性白蛋白濃度降低，主要見于大量出血或嚴(yán)重?zé)齻麜r的血漿大

量的丟失。慢性白蛋白濃度降低主要由于肝臟合成功能障礙和腹水生成時白蛋白丟失，腎病

時尿液蛋白質(zhì)的丟失。若血清白蛋白濃度低于25g/L時，由于血清膠體滲透壓下降，可出現(xiàn)

全身性水腫。

十五、【參考文獻(xiàn)】

1.臨床化學(xué)常用項目自動分析發(fā)/韓志鈞等主編.一沈陽：遼寧科學(xué)技術(shù)出版社，

2005.8

2.臨床檢驗自動化分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程/陸永綏，李清華，張偉民主編。一杭州：浙江

醫(yī)院血清白蛋白澳文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-006

版本：A/0頁碼：20/136

檢驗科甲酚綠法測定

生化室SOP生效日期：2014-0L01

血清白蛋白（ALB）澳甲酚綠法測定

2.臨床檢驗自動化分析標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程/陸永綏，李清華，張偉民主編。一杭州：浙江大

學(xué)出版社，2006.9

3.臨床檢驗管理與技術(shù)規(guī)程/陸永綏，張偉民主編。一杭州：浙江大學(xué)出版社，2004.10

4.林其燧等.臨床化學(xué)診斷方法大全，東南大學(xué)出版社，1360年第一版

醫(yī)院前白蛋白文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-007

檢驗科測定版本：A/0頁碼：21/136

生化室SOP”生效日期：2014-0L01

前白蛋白（PA）測定

一、目的

保證前白蛋白測定的結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

二、修改程序

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批

準(zhǔn)簽字：質(zhì)量主管、授權(quán)人（科主任）。

三、適用范圍

免疫比濁法測定前白蛋白。

四、試劑來源

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序適用于長春迪瑞科技股份有限公司生產(chǎn)的前白蛋白測定試劑盒。

五、溯源

全國臨床檢驗操作規(guī)程（第二版）。

六、原理

此方法基于樣品中的前白蛋白特異性的與試劑中的抗人前白蛋白抗血清反應(yīng)形成不

溶性的復(fù)合物，可在340nm處比濁測定，再通過標(biāo)準(zhǔn)曲線就可讀取樣品中前白蛋白

的濃度。PEG的存在可加速并增強(qiáng)結(jié)合物形成。

七、試劑

?RITris/HCl緩沖液（pH7.4）20mmol/L

?聚乙二醇W4%

?氯化鈉150mmol/L

R2抗人前白蛋白抗血清

?Tris/HCl緩沖液（pH7.4）20mmol/L

?氯化鈉150mmol/L

不同批號試劑盒各組份不能互換。

本試劑2?8℃密閉避光保存可以穩(wěn)定18個月（勿冷凍）；首次開啟試劑后，避光保

存于2?8℃防污染環(huán)境中，可繼續(xù)使用到有效期止八

?八、標(biāo)本采集

醫(yī)院前白蛋白(PA)文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-007

版本：A/0頁碼：22/136

檢驗科測定

生化室SOP生效日期：2014?01?01

前白蛋白(PA)測定

血清，樣品在2?8℃可以穩(wěn)定48小時，如需保存更長的時間，請將樣品冷凍。

?九、操作步驟

?1、標(biāo)本編號，分離血清，按順序置樣品架上。

?2、按標(biāo)本編號在全自動生化分析儀上輸入標(biāo)本的基本信息和測定要求，進(jìn)行測定。

?3、儀器校準(zhǔn)：將校準(zhǔn)液置試管架上，輸入校準(zhǔn)液濃度，然后進(jìn)行測定(測定參數(shù)與

下同)，其吸光度貯存在電腦中，濃度值符合要求即可應(yīng)用。一般每3?6個月校準(zhǔn)

一次，若更換不同批號的試劑、質(zhì)控超標(biāo)或儀器維修處理后應(yīng)進(jìn)行校準(zhǔn)。

4、測定參數(shù):

血清量3Hl

試劑I200LU

試劑n40ul

主波長340nm

次波長700nm

反應(yīng)類型終點法；正反應(yīng)

測定時間10分鐘

溫度37℃

報告單位mg/dl

5、結(jié)果計算:

在坐標(biāo)紙上標(biāo)繪出△A標(biāo)準(zhǔn)，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品的濃度即可依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取。

得到的標(biāo)本吸光度高于校正品最高值時，需做進(jìn)一步稀釋，然后重做。

十、正常參考值：200~400mg/l

十一、室內(nèi)質(zhì)控

質(zhì)控方法：每天測定樣品前做一組質(zhì)控，在樣品中間插一組質(zhì)控，最后再做一組質(zhì)

控，共三組。

醫(yī)院前白蛋白(PA)文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-007

版本：A/0頁碼：23/136

檢驗科測定

生化室SOP生效日期：2014-0L01

前白蛋白(PA)測定

?控制限(X±2SD)：超過+2SD或-2SD均判為失控，需尋找原因，另作處理。當(dāng)校準(zhǔn)

品或質(zhì)控物達(dá)不到原靶值時，將質(zhì)控物或校準(zhǔn)液在本單位條件下重復(fù)測定20次，計

算均值和標(biāo)準(zhǔn)差，再以此靶值進(jìn)行校準(zhǔn)儀器或作質(zhì)控用。

?十二、性能指標(biāo)

?1.外觀：R1試劑為無色到微黃色透明液體；R2試劑為無色到微黃色透明液體。

?2.裝量：液體試劑的凈含量不少于標(biāo)識值。

?3.空白吸光度：以蒸鐲水為空白對照與試劑1和試劑2混合后測得的吸光度值W

0.30ABS(340nm；1cm；37℃)。

?4.分析靈敏度：測得的校準(zhǔn)品在5分鐘內(nèi)單位濃度吸光度的變化絕對值N0.4X

10-3。

?5.線性范圍：在23~650mg/L范圍內(nèi)，劑量-反應(yīng)曲線線性相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于

0.9900；線性相對偏差W±15%。

?6.準(zhǔn)確度：用試劑盒測定校準(zhǔn)血清，作3次測定并計算測定結(jié)果均值，所得結(jié)果與

靶值對照，誤差W±10%。

?7.精密度：批內(nèi)變異系數(shù)CVV6%,批間相對極差<8%。

?8.在2?8℃避光條件下，前白蛋白測定試劑盒自生產(chǎn)之日起可以保存18個月。

?十三、檢驗方法的局限性

?樣本中膽紅素(<600umol/L)、甘油三酯(<500mg/dL)、血紅蛋白(<5g/L)等

物質(zhì)在達(dá)到以上濃度前不會影響該試劑的測定。

?十四、臨床意義

?PA升高可見于腎病綜合癥(通常>500mg/L,此時ALB<30g/L)與何杰金氏病；

?PA減低常見于嚴(yán)重肝病和蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良。肝臟疾病時PA比較敏感，有人認(rèn)為有

30%白蛋白正常的肝病患者的PA減少；而且比轉(zhuǎn)氨酶特異性好，多數(shù)肝病患者PA

下降50%；壞死后肝硬化PA幾乎是零，肝硬化肝細(xì)胞壞死較輕時，PA變化不大，

預(yù)后較好，當(dāng)病情改善時，PA亦迅速升高：亞急性肝壞死PA一直在低值，故PA

?可用作判斷肝病預(yù)后指標(biāo)；肝癌以及阻塞性黃疸患者均可降低，其降低程度與病情

醫(yī)院前白蛋白(PA)文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-007

版本：A/0頁碼：24/136

檢驗科測定

生化室SOP生效日期：2014-0L01

前白蛋白(PA)測定

有密切關(guān)系。

?十五、【參考文獻(xiàn)】

?1.臨床化學(xué)常用項目自動分析發(fā)/韓志鈞等主編.一沈陽：遼寧科學(xué)技術(shù)出版社，

2005.8

?2.臨床檢驗管理與技術(shù)規(guī)程/陸永綏，張偉民主編。一杭州：浙江大學(xué)出版社，2004.10

文件編號：SYXHYY-JYK-SH-SOP-008

醫(yī)院檢驗科血清丙氨酸氨

生化室SOP版本：A/0頁碼：25/136

基轉(zhuǎn)移酶測定生效日期：2014?01?01

血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶速率法測定

一、目的

保證丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶測定的結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。

二、修改程序

本標(biāo)準(zhǔn)操作程序的改動，可由任一使用本SOP的工作人員提出，并報經(jīng)下述人員批準(zhǔn)

簽字：質(zhì)量主管、授權(quán)人（科主任）。

三、適用范圍

供醫(yī)療機(jī)構(gòu)用于體外檢測人血清/血漿中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶的活力，作臨床輔助