臨床檢驗(yàn)儀器學(xué)-復(fù)習(xí)大綱

第一章概論

1、一個(gè)優(yōu)良的檢驗(yàn)儀器應(yīng)具有(P3)：靈敏度、分辨率和精度高，噪音和誤差小，可靠性、

穩(wěn)定性和重復(fù)性好，響應(yīng)時(shí)間短，測(cè)量范圍、示值范圍、頻率響應(yīng)范圍和線性范圍寬等性能

指標(biāo)。

2、最小檢測(cè)量與分辨率的區(qū)別？(P5)

答：①分辨率：儀器設(shè)備能感覺、識(shí)別或探測(cè)的輸入量(或能產(chǎn)生、能響應(yīng)的輸入量)的最

小值。

3、精確度與靈敏度的區(qū)別？(P3)

答：①靈敏度：檢驗(yàn)儀器在穩(wěn)態(tài)下輸出量變化與輸入量變化之比，即檢驗(yàn)儀器對(duì)單位濃度或

質(zhì)量的被檢物質(zhì)通過檢測(cè)器是所產(chǎn)生的響應(yīng)信號(hào)值變化大小的反應(yīng)能力，他反應(yīng)儀器能夠檢

測(cè)的最小被測(cè)量。②精確度：對(duì)檢測(cè)可靠度或檢測(cè)結(jié)果可靠度的--種評(píng)價(jià)，是指檢測(cè)值偏離

真值的程度。精度是一個(gè)定性的概念，其高低是用誤差來衡量的，誤差大則精度低，誤差小

則精度高。③區(qū)別：

4、精確度(P5)：對(duì)檢測(cè)可靠度或檢測(cè)結(jié)果可靠度的-一種評(píng)價(jià)，是指檢測(cè)值偏離真值的程度。

精度是一個(gè)定性的概念，其高低是用誤差來衡量的，誤差大則精度低，誤差小則精度高。

5、重復(fù)性(P5)：在同一檢測(cè)方法和檢測(cè)條件(儀器、設(shè)備、檢測(cè)者、環(huán)境條件)下，在一

個(gè)不太長(zhǎng)的時(shí)間間隔內(nèi)，連續(xù)多次檢測(cè)同一參數(shù)，所得到的數(shù)據(jù)的分散程度。重復(fù)性與精密

度密切相關(guān)，重復(fù)性反映一臺(tái)設(shè)備固有誤差的精密度。

6、準(zhǔn)確度和精確度的區(qū)別。(P5)

第二章離心機(jī)

1、簡(jiǎn)述分析型超速離心機(jī)的工作原理。(P26)

答：分析型超速離心機(jī)主要由一個(gè)橢圓形的轉(zhuǎn)子、一套真空系統(tǒng)和一套光學(xué)系統(tǒng)所組成。該

轉(zhuǎn)子通過一個(gè)柔性的軸聯(lián)接成一個(gè)高速的驅(qū)動(dòng)裝置，此軸可使轉(zhuǎn)子在旋轉(zhuǎn)時(shí)形成自己的軸。

轉(zhuǎn)子在一個(gè)冷凍的真空腔中旋轉(zhuǎn)，其容納了兩個(gè)小室：分析室和配衡室。配衡室是一個(gè)經(jīng)過

精密加工的金屬塊，作為分析室的平衡用。分析室的容量一般為1ml,呈扇形排列在轉(zhuǎn)子中，

其工作原理與一個(gè)普通水平轉(zhuǎn)子相同。分析室有上下兩個(gè)平面的石英窗，離心機(jī)中裝有的光

學(xué)系統(tǒng)可保證在整個(gè)離心期間都能觀察小室中正在沉降的物質(zhì)，可以通過對(duì)紫外光的吸收

(如對(duì)蛋白質(zhì)和DNA)或折射率的不同對(duì)沉降物進(jìn)行監(jiān)測(cè)。在分析室中物質(zhì)沉降時(shí)重粒子和

輕粒子之間形成的界面就像一個(gè)折射的透鏡，在檢測(cè)系統(tǒng)的照相底板上產(chǎn)出一個(gè)“峰工

由于沉降不斷進(jìn)行，界面向前推進(jìn)，“峰”也在移動(dòng)，從峰移動(dòng)的速度可以得到物質(zhì)沉降速

度的指標(biāo)。

2、什么是離心力及相對(duì)離心力？（P17）

答：離心力：當(dāng)物體所受外力小于運(yùn)動(dòng)所需要的向心力時(shí)，物體將向遠(yuǎn)離圓心的方向運(yùn)動(dòng)。

物體遠(yuǎn)離圓心運(yùn)動(dòng)的現(xiàn)象稱為離心現(xiàn)象也叫離心運(yùn)動(dòng)。離心運(yùn)動(dòng)是由于向心力消失或不足而

造成的。

相對(duì)離心力：是指在離心場(chǎng)中，作用于顆粒的離心力相當(dāng)于地球重力的倍數(shù)，單位是重力加

速度"g"。

3、離心力計(jì)算式（每個(gè)符號(hào)的含義）。（P17）

答：離心作用是根據(jù)在一定角速度下作圓周運(yùn)動(dòng)的任何物體都受到一個(gè)向外的離心力進(jìn)行

的。離心力（Fc）的大小等于離心加速度32r與顆粒質(zhì)量m的乘積，即：

22

27lN247tNrm

Fc=m(o2r=m(

3600

式中3是旋轉(zhuǎn)角速度，N是每分鐘轉(zhuǎn)頭旋轉(zhuǎn)次數(shù)，r為離心半徑，m是質(zhì)量。

4、離心機(jī)的主要部件。（P19）

答：低速離心機(jī)結(jié)構(gòu)較簡(jiǎn)單，由電動(dòng)機(jī)、離心轉(zhuǎn)盤（轉(zhuǎn)頭）、調(diào)速器、定時(shí)器、離心套管與

底座等主要部件構(gòu)成。

高速（冷凍）離心機(jī)由轉(zhuǎn)動(dòng)裝置、速度控制系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、真空系統(tǒng)、離心室、離心

轉(zhuǎn)頭及安全保護(hù)裝置等。

超速（冷凍）離心機(jī)結(jié)構(gòu)主要由一個(gè)橢圓形轉(zhuǎn)子，一套真空系統(tǒng)和一套光學(xué)系統(tǒng)所組成。

5、差速離心法的優(yōu)點(diǎn)，特點(diǎn)。（P23）

答:采用不同的離心速度和離心時(shí)間,使沉降速度不同的顆粒分步離心的方法,稱為差速離心.

操作時(shí)，將含有兩種不同顆粒的混懸液，以常速離心，使大的顆粒下沉，將上清液傾倒于另一

離心管中，再加大離心力，離心一定時(shí)間，分離小的顆粒，反復(fù)多次分離，達(dá)到分離目的。

差速離心主要用于分離大小和密度差異較大的顆粒。

差速離心法的優(yōu)點(diǎn)是：操作簡(jiǎn)單，離心后用傾倒法即可將上清液與沉淀分開，并可使用容量

較大的角式轉(zhuǎn)子；分離時(shí)間短、重復(fù)性高；樣品處理量大。

缺點(diǎn)是：分辨率有限、分離效果差，沉淀系數(shù)在同一個(gè)數(shù)量級(jí)內(nèi)的各種粒子不容易分開，不

能一次得到純顆粒；壁效應(yīng)嚴(yán)重，特別是當(dāng)顆粒很大或濃度很高時(shí)，在離心管一側(cè)會(huì)出現(xiàn)沉

淀；顆粒被擠壓，離心力過大、離心時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使顆粒變形、聚集而失活。

向心IWMWfl網(wǎng)一次分離一Wt一分MJ

第三章顯微鏡

1、光學(xué)顯微鏡的性能參數(shù)。（P31）

答：顯微鏡的性能參數(shù)主要有放大率、數(shù)值孔徑、分辨率、視場(chǎng)、景深、鏡像亮度、鏡像清

晰度、工作距離和機(jī)械筒長(zhǎng)。顯微鏡的數(shù)值孔徑與其放大率成正比u,與分辨率、景深

成反比，它的平方與圖像亮度成正比。因此，使用較大數(shù)值孔徑的物鏡，其放大率和分

辨本領(lǐng)較高，淡視場(chǎng)、景深、工作距離較小。

①數(shù)值孔徑：又叫鏡口率，是物體與物鏡間媒質(zhì)的折射率n與物鏡孔徑角的一半（B）正弦值

的乘積，通?？s寫為NA,即NA=nsinB。顯微鏡的數(shù)值孔徑與其放大率成正比，與分辨率、

景深成反比，它的平方與圖像亮度成正比。

②分辨率：顯微鏡的最重要參數(shù)，指透鏡能分辨兩點(diǎn)之間的最小距離。N與D成反比，X

與D成正比。D=您1（D：分辨率；X：光波的波長(zhǎng)；N：介質(zhì)折射率；a:物鏡鏡口

角）。提高顯微鏡分辨率的方法：增大物鏡的數(shù)值孔徑；用短波長(zhǎng)的光照射。

③放大率:或稱放大倍數(shù)是指顯微鏡經(jīng)多次成像后最終所成（放大的）像的大小相對(duì)于原物體

大小的比值，常記作M。M=maq（M是顯微鏡的總放大倍數(shù)；m是物鏡的放大倍數(shù)；a是目鏡

的放大倍率，一般表達(dá)為明視距離（正常視力者為25cm）與目鏡焦距之比；q為在雙目顯微鏡

中所增設(shè)的棱鏡所起的放大倍數(shù)，一般取值為1.6倍。）

④視野：稱視場(chǎng)，是指通過顯微鏡所能看到標(biāo)本所在空間的范圍。

⑤景深與焦長(zhǎng)：景深又稱焦點(diǎn)深度，是指在成一幅清晰像的前提下，像平面不變，景物沿光

軸前后移動(dòng)的距離稱“景深二景物不動(dòng)，像平面沿光軸前后移動(dòng)的距離稱“焦長(zhǎng)”。

⑥鏡像亮度和清晰度：鏡像亮度即顯微鏡的圖像亮度的簡(jiǎn)稱。高倍率工作條件下的喑場(chǎng)、偏

光、攝影顯微鏡等都需要足夠的亮度，與照明及物鏡的性能參數(shù)相關(guān)。鏡像清晰度是指圖像

的輪廓清晰、襯度適中的程度。

⑦工作距離：工作距離是指從物鏡前表面中心到被觀察標(biāo)本間滿足工作要求的距離范圍，與

物鏡的數(shù)值孔徑成反比。一般情況下，物鏡的數(shù)值孔徑越大，其工作距離越小。

2、簡(jiǎn)述掃描電子顯微鏡的工作原理。（P37）

答：掃描電子顯微鏡的工作原理是用一束極細(xì)的電子束掃描樣品，在樣品表面激發(fā)出次級(jí)

電子，次級(jí)電子由探測(cè)體收集，并在那里被閃爍器轉(zhuǎn)變?yōu)楣庑盘?hào)，再經(jīng)光電倍增管和放大器

轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)來控制熒光屏上電子束的強(qiáng)度，顯示出與電子束同步的掃描圖像。

3、顯微鏡的核心部件(心臟)。(P31)

答：光學(xué)系統(tǒng)是顯微鏡的主體部分，有包括物鏡、目鏡、聚光鏡及反光鏡等組成的照明裝置。

物鏡，目鏡，光源。物鏡是顯微鏡中最重要的和最復(fù)雜的部分，被稱為顯微鏡的心臟，其性

能直接關(guān)系到顯微鏡的成像質(zhì)量和技術(shù)性能。

4、光學(xué)顯微鏡的照明設(shè)置主要部件(4個(gè))。(P34)

答：照明裝置的主要部件有光源、濾光器、聚光鏡和玻片等。

第四章紫外-可見分光光度計(jì)

1、什么是光的吸收定律？(P51)

答：在朗伯-比爾定律中，比例常數(shù)k稱為吸光系數(shù)。如果溶液濃度以物質(zhì)的量的濃度表示

時(shí)，此常數(shù)稱為摩爾吸光系數(shù)(。)，它表示在一定波長(zhǎng)下測(cè)得的液層厚度為1cm、溶液濃

度c為Imol/L時(shí)的溶液吸光度值。如果溶液濃度以質(zhì)量體積比表示時(shí)，此常數(shù)稱為比吸光

系數(shù)(。)，它表示當(dāng)溶液濃度為lg/L、液層厚度為1cm時(shí)，在一定波長(zhǎng)下測(cè)得的吸光度值。

摩爾吸光系數(shù)￡和比吸光系數(shù)”可相互換算。

2、紫外-可見分光光度計(jì)有哪些基本類型？各自有什么特點(diǎn)？

答：紫外-可見分光光度計(jì)可以按儀器的使用光波長(zhǎng)分類；也可按儀器的光學(xué)系統(tǒng)分類。按

使用波長(zhǎng)分類可分為：紫外分光光度計(jì)(0.Inm?200nm)；可見分光光度計(jì)(360nm?800nm)；

紫外-可見分光光度計(jì)(200nm-1000nm)；紫外-可見-紅外分光光度計(jì)(200nm-2500nm)等。

按光學(xué)系統(tǒng)分類可分為：?jiǎn)喂馐止夤舛扔?jì)；雙光束分光光度計(jì)；雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)；雙波

長(zhǎng)一雙光束分光光度計(jì)；動(dòng)力學(xué)分光光度計(jì)等。根據(jù)目前分光光度計(jì)的應(yīng)用情況，主要介紹

單光束、雙光束和雙波長(zhǎng)等三種分光光度計(jì)。

特點(diǎn)：?jiǎn)喂馐止夤舛扔?jì)是一類結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，使用、維護(hù)比較方便，應(yīng)用廣泛的分光光度

計(jì)。雙光束分光光度計(jì)在其出射狹縫和樣品吸收池之間增加了一個(gè)光束分裂器或斬波器，作

用是以一定的頻率將一個(gè)光束交替分成兩路，使一路經(jīng)過參比溶液，另一路經(jīng)過樣品溶液，

然后由一個(gè)檢測(cè)器交替接收或由兩個(gè)檢測(cè)器分別接收兩路信號(hào)，這是目前國(guó)內(nèi)外使用最多，

性能較為完善的一類分光光度計(jì)。雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)不用參比溶液，只用一個(gè)待測(cè)溶液，能

較好的解決由于非特征吸收信號(hào)(如試樣的渾濁、吸收池與空氣界面以及吸收池與溶液界面

的折射差別等)影響而帶來的誤差，大大提高檢測(cè)的準(zhǔn)確度。

3、朗伯比爾定律。

答：光照射到物質(zhì)可發(fā)生折射、反射和透射，一部分光會(huì)被物質(zhì)吸收。不同的物質(zhì)會(huì)吸收不

同波長(zhǎng)的光。改變?nèi)肷涔獾牟ㄩL(zhǎng)，并依次記錄物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的吸收程度，就得到該物質(zhì)

的吸收光譜。每一種物質(zhì)都有其特定的吸收光譜，因此可根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜來分析物質(zhì)的

結(jié)構(gòu)、含量和純度。紫外-可見分光光度計(jì)的工作原理遵循朗伯-比爾定律。設(shè)入射光強(qiáng)度為

Io,當(dāng)透過濃度為C、液層厚度為6的溶液后，透射光強(qiáng)度為7,透射光強(qiáng)度與入射光強(qiáng)度

的比值稱為透光度，也叫透射率，以「表示。當(dāng)液層厚度方或溶液濃度C按算術(shù)級(jí)數(shù)增加時(shí),

T=-L=I()3

透光度T按幾何級(jí)數(shù)減少，數(shù)學(xué)表達(dá)式為：。式中4為比例常數(shù)。

在光譜分析中，常常用吸光度表示溶液對(duì)入射光的吸收程度。吸光度與透光度的關(guān)系是:

吸光度等于透光度的負(fù)對(duì)數(shù)，用A表示吸光度，有下列公式關(guān)系。

/=7g7=_lgZ=lg4=lgl=kbc該公式表明，當(dāng)用一束單色光照射吸收溶液時(shí)，其

吸光度與液層厚度及溶液濃度的乘積成正比。此即朗伯-比爾定律。

4、紫外光區(qū)波段范圍。(P51)

答：200-400nm。

5、單色光分光光度計(jì)的特點(diǎn)。(P54)

答：?jiǎn)喂馐止夤舛扔?jì)是一類結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，使用、維護(hù)比較方便，應(yīng)用廣泛的分光光度計(jì)。其

設(shè)計(jì)原理和結(jié)構(gòu)具有以下特點(diǎn)：①單光束光路，從光源到試樣至接收器只有一個(gè)光通道，使

用中依次對(duì)參考樣品和待測(cè)試樣進(jìn)行測(cè)定，然后將二次測(cè)定數(shù)據(jù)進(jìn)行比較、計(jì)算，獲得最終

結(jié)果；②只有一個(gè)色散元件，工作波長(zhǎng)范圍較窄；③通常采用直接接收放大顯示的簡(jiǎn)單電子

系統(tǒng)，用電表或數(shù)字顯示；④結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、附件少、功能范圍小，不能做特殊試樣測(cè)定。

第五章臨床血液常規(guī)檢驗(yàn)儀器

1、電阻抗型血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理及要點(diǎn)。(P64)

答：電阻抗法血細(xì)胞檢測(cè)原理(庫(kù)爾特原理)血細(xì)胞與等滲的電解質(zhì)溶液相比為相對(duì)

的不良導(dǎo)體；電阻值大于稀釋液的電阻值：當(dāng)細(xì)胞通過檢測(cè)器微孔的孔徑感受區(qū)時(shí)，在內(nèi)外

電極之間恒流源電路上，電阻值瞬間增大，產(chǎn)生一個(gè)電壓脈沖信號(hào)；產(chǎn)生的脈沖信號(hào)數(shù)，等

于通過的細(xì)胞數(shù)，脈沖信號(hào)幅度大小與細(xì)胞體積大小成正比。電阻抗法白細(xì)胞的檢測(cè)、紅細(xì)

胞和血小板的檢測(cè)。

2、聯(lián)合檢測(cè)型血細(xì)胞分析儀檢測(cè)原理(VCS技術(shù))(P65)

答：主要體現(xiàn)在白細(xì)胞分類，實(shí)質(zhì)是選用較特異的方法將血中含量較少的嗜酸、嗜堿性粒細(xì)

胞檢出，發(fā)現(xiàn)異常細(xì)胞。共有特點(diǎn)是：均使用了鞘流技術(shù)。

每個(gè)細(xì)胞接受三維分析，定義到三維散點(diǎn)圖的相應(yīng)位置

體積(V)電阻抗原理測(cè)定細(xì)胞體積和數(shù)量。

電導(dǎo)性(C)高頻電磁探針，測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，細(xì)胞內(nèi)核漿比例。

光散射(S)細(xì)胞內(nèi)粗顆粒的光散射強(qiáng)度要比細(xì)顆粒更強(qiáng)。

3、凝固法原理。（P74）

答：是通過檢測(cè)血漿在凝血激活劑作用下發(fā)生一系列物理量（光、電、超聲、機(jī)械運(yùn)動(dòng)等）

的變化，再由計(jì)算機(jī)分析所得最終結(jié)果，稱生物物理法。按測(cè)量原理分為電流法、超聲分析

法、光學(xué)法和磁珠法四種。光學(xué)法（比濁法）：是根據(jù)血漿凝固過程中濁度的變化，導(dǎo)致光

強(qiáng)度變化來測(cè)定相關(guān)因子。磁珠法原理：是根據(jù)磁珠運(yùn)動(dòng)的幅度隨血漿凝固過程中黏度的增

加而變化來測(cè)量凝血功能的方法。根據(jù)儀器對(duì)磁珠運(yùn)動(dòng)測(cè)量原理的不同，又可分為光電探測(cè)

法和電磁珠探測(cè)法。

電流法_纖維蛋白原一纖維蛋白一^導(dǎo)電

會(huì)第散射比濁法_凝畫過程中散射涯化

「（）箍固法透射比濁法~凝國(guó)過程中吸光度變化

血Y光電四法一用光探測(cè)颯運(yùn)動(dòng)度的謝

凝

儀雙道路成需去一電磁探淵網(wǎng)恫酸;成程度

檢超聲波法~超聲波衰閭程度判晚冬點(diǎn)

測(cè)V

原（-）底物顯色法:以觸解放產(chǎn)色基團(tuán)里順陽澆定有關(guān)因子

理

“^ar雌

火箭電泳

（三）免疫學(xué)&雙向免疫電泳

.比濁「直接比濁一散射比濁

L乳膠比濁L透射比濁

<ELISA^

第六章臨床血液流變學(xué)檢驗(yàn)儀器

1,血沉：紅細(xì)胞沉降率（ESR）是指紅細(xì)胞在一定條件下沉降的速度，簡(jiǎn)稱血沉。

紅細(xì)胞沉降率的傳統(tǒng)測(cè)定方法是（Westergren）魏氏法。

紅細(xì)胞沉降曲線方程：H=_2_。其中，是血漿層的極限高度（7—8）,

1+&。”

f5G是血漿高度為“8/2的時(shí)刻，夕為常數(shù)（夕>1）。沉降速度則表示為V=力，求極

限便可得紅細(xì)胞的最大沉降速度。影響紅細(xì)胞沉降的因素很多，主要包括紅細(xì)胞的形態(tài)和大

小、紅細(xì)胞的變形性、紅細(xì)胞的聚集性、紅細(xì)胞間的相互作用，血細(xì)胞比容，血漿介質(zhì)和上

升流動(dòng)，沉降管的傾斜度等。對(duì)于紅細(xì)胞沉降這一非線性過程而言，自動(dòng)血沉分析儀可完整

記錄紅細(xì)胞沉降的全過程。

第七章臨床尿液檢驗(yàn)儀器

1、試劑帶的結(jié)構(gòu)與應(yīng)用。（P95）

答：①試劑帶的結(jié)構(gòu)單項(xiàng)試劑帶以濾紙為載體，將各種試劑成分浸漬后干燥，作為試劑層,

再在其表面覆蓋一層纖維素膜作為反射層。一般把這樣一條上面附有試劑塊的塑料條叫做試

劑帶。尿液浸入試劑帶后，與試劑發(fā)生反應(yīng)，可產(chǎn)生顏色變化。多聯(lián)試劑帶是將多種項(xiàng)目試

劑塊集成在一個(gè)試劑帶上，使用多聯(lián)試劑帶，浸入一次尿液可同時(shí)測(cè)定多個(gè)項(xiàng)目。

②試劑帶的應(yīng)用不同型號(hào)的尿液分析儀一般使用自己配套的專用試劑帶。試劑塊要比測(cè)試

項(xiàng)目多一個(gè)空白塊，有些儀器還多一個(gè)位置參考?jí)K。各試劑塊與尿液中被測(cè)定成分反應(yīng)而呈

現(xiàn)不同顏色。空白塊是為了消除尿液本身的顏色及試劑塊分布的狀態(tài)不均等產(chǎn)生出測(cè)試誤

差，提高測(cè)量準(zhǔn)確度而設(shè)置的。固定塊是為了消除在測(cè)試過程中為免每次測(cè)定試劑塊的位置

不同產(chǎn)生測(cè)試誤差設(shè)置的，每次測(cè)定前，檢測(cè)頭都會(huì)移到參考位置進(jìn)行自檢，必要時(shí)，自動(dòng)

調(diào)整發(fā)光二極管的亮度和靈敏度，以提高檢測(cè)的信噪比。

2、尿液分析儀的檢測(cè)原理及結(jié)構(gòu)。（P97）

答：①檢測(cè)原理：把試劑帶浸入尿液中后，除了空白塊外，其余的試劑塊都因和尿液發(fā)生了

化學(xué)反應(yīng)而產(chǎn)生了顏色的變化。試劑塊的顏色深淺與光的吸收和反射程度有關(guān)，顏色越深，

相應(yīng)某種成分濃度越高，吸收光量值越大，反射光量值越小，反射率也越?。环粗?，反射率

越大。因?yàn)轭伾纳顪\與光的反射率成比例關(guān)系，而顏色的深淺又與尿液中各種成分的濃度

成比例關(guān)系，所以只要測(cè)得光的反射率即可以求得尿液中各種成分的濃度。

②結(jié)構(gòu)：尿液分析儀一般由機(jī)械系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、電路系統(tǒng)三部分組成。機(jī)械系統(tǒng)：機(jī)械

系統(tǒng)的主要功能是將待檢的試劑帶傳送到位，檢測(cè)后將試劑帶排送到廢物盒。光學(xué)系統(tǒng)：光

學(xué)系統(tǒng)通常包括光源、單色處理、光電轉(zhuǎn)換三部分。電路系統(tǒng)：光電檢測(cè)器將試劑帶所反射

的信號(hào)的強(qiáng)弱轉(zhuǎn)換成電信號(hào)的大小，送往前置放大器進(jìn)行放大。

3、流式細(xì)胞術(shù)尿有形成分分析儀的工作原理。（P102）

答：流式細(xì)胞術(shù)全自動(dòng)尿有形成分分析儀的測(cè)定是應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)和電阻抗的原理進(jìn)行的。

當(dāng)一個(gè)尿液標(biāo)本被稀釋并經(jīng)染色液染色后，靠液壓作用通過鞘液流動(dòng)池。反應(yīng)樣品從樣品噴

嘴出口進(jìn)入鞘液流動(dòng)室時(shí)，被一種無粒子顆粒的鞘液包圍，使每個(gè)細(xì)胞以單個(gè)縱列的形式通

過流動(dòng)池的中心（豎直）軸線，在這里每個(gè)尿液細(xì)胞被菽激光光束照射。每個(gè)細(xì)胞有不同程

度的熒光強(qiáng)度，從染色尿液細(xì)胞發(fā)出的熒光，主要反映細(xì)胞的定量特性，如細(xì)胞膜、核膜、

線粒體和核酸）、前向散射光強(qiáng)度，它成比例地反映細(xì)胞的大小和電阻抗的大?。娮杩闺?/p>

信號(hào)主要與細(xì)胞的體積成正比）。儀器是將這種熒光、散射光等光信號(hào)轉(zhuǎn)變成電信號(hào)，并對(duì)

各種信號(hào)進(jìn)行分析，最后得到每個(gè)尿液標(biāo)本產(chǎn)生出的直方圖和散射圖。通過分析這些圖形，

即可區(qū)分每個(gè)細(xì)胞并得出有關(guān)細(xì)胞的形態(tài)。

第九章臨床電化學(xué)分析儀器

1、臨床電化學(xué)分析儀器的設(shè)計(jì)概念。（P125）

答：臨床電化學(xué)分析儀器是利用電化學(xué)分析技術(shù)而設(shè)計(jì)的臨床分析儀器。

2、維持人體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的三要素。（P125）

答：水、電解質(zhì)和酸堿平衡。

3、血?dú)夥治鰞x的利用電極對(duì)人體哪些指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定？

答：測(cè)量樣品中的指標(biāo)：pH,PCO2、PO2、AB、SB、BB、TCO2、BEblood.BEECF、SO2等。根

據(jù)所測(cè)得的pH,PCOz、P02參數(shù)及輸入的血紅蛋白值，血?dú)夥治鰞x可進(jìn)行計(jì)算而求出血液中

的其他參數(shù)，如：實(shí)際碳酸氫根濃度（AB）,標(biāo)準(zhǔn)碳酸氫根濃度（SB）,血液緩沖堿（BB）,

血漿二氧化碳總量（T-C02）,血液堿剩余（BEblood）,細(xì)胞外液堿剩余（BE.）

血氧飽和度（S02）

4,血?dú)夥治鰞x的基本種類。

答：血?dú)夥治鰞x種類型號(hào)很多，其基本結(jié)構(gòu)均可分為三大部分：電極系統(tǒng)、管路系統(tǒng)、電路

系統(tǒng)。

5、血?dú)夥治鰞x的電極的分類。

答：電極主要包括兩大類,即離子型（主要有K'、Na'、Li\Ca2\Cl、pH和PCO2）和伏安

型傳感器（主要是P0。。一般的血?dú)夥治鰞x使用四支電極，分別是pH、PCO2、PO2電極和pH

參比電極。

①pH電極和pH參比電極：血?dú)夥治鰞x使用毛細(xì)管pH玻璃電極和甘汞電極測(cè)量溶液的酸堿

度。②PCOz電極：/COz電極是一個(gè)氣敏電極，其前端有一層半透膜，只允許CO2分子通過，

其內(nèi)部有一玻璃電極和參比電極。③POz電極：P0,電極是一種氣敏電極，其工作原理是基

于電解氧的過程中產(chǎn)生的電極電流，P0?電極電流信號(hào)大小正比于滲透到陰極表面氧的濃度，

后者又決定于膜外的P0”

6、概念：

①電極：電極是血?dú)夥治鰞x的電化學(xué)傳感器。電極主要包括兩大類，即離子型（主要有K'、

Na\Li\Ca2\Cl、pH和PCO2）和伏安型傳感器（主要是P01。

②PC02電極：氏。2電極是一個(gè)氣敏電極，其前端有一層半透膜，只允許COz分子通過，其內(nèi)

部有一玻璃電極和參比電極。

7、電解質(zhì)分析儀的結(jié)構(gòu)框圖。（P127）

答：電解質(zhì)分析儀由離子選擇性電極、參比電極、分析箱、測(cè)量電路、控制電路、驅(qū)動(dòng)電機(jī)

和顯示器等組成。

①板面系統(tǒng)：電解質(zhì)分析儀在儀器板面上具有人機(jī)對(duì)話的操作鍵。板面上具有“Yes”或“No”

兩個(gè)鍵，其中“Yes”鍵用來接收顯示屏上的提問，“No”鍵用來否定顯示屏上的問句。

②電極系統(tǒng)：分析儀的電極系統(tǒng)是測(cè)定樣品結(jié)果的關(guān)鍵，決定測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確度和靈敏度。

電極系統(tǒng)包括指示電極和參比電極。指示電極包括pH、Na\K\Li\Cl\Ca2\Mg"等離子

選擇性電極。參比電極一般是銀/氯化銀電極。

③液路系統(tǒng)：液路系統(tǒng)直接影響到樣品濃度測(cè)定的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。分析儀的液路系統(tǒng)通常

由標(biāo)本盤、溶液瓶、吸樣針、三通閥、電極系統(tǒng)、蠕動(dòng)泵等組成。蠕動(dòng)泵為各種試劑的流動(dòng)

提供動(dòng)力，標(biāo)本盤、三通閥和蠕動(dòng)泵的轉(zhuǎn)動(dòng)、轉(zhuǎn)換均由微機(jī)自動(dòng)控制。液路系統(tǒng)中的通路由

定標(biāo)液/沖洗液通路、標(biāo)本通路、廢液通路、回水通路、電磁閥通路等組成。

④電路系統(tǒng)：各種分析儀的電子部件各有相同，通常由測(cè)量電路將電極產(chǎn)生的微弱信號(hào)經(jīng)

反對(duì)數(shù)放大器放大，然后進(jìn)入A/D轉(zhuǎn)換，最后送到三位LED數(shù)字顯示器顯示并打印結(jié)果。

⑤軟件系統(tǒng)：各種分析儀的軟件系統(tǒng)，是控制儀器運(yùn)作的關(guān)鍵。它提供儀器微處理系統(tǒng)操

作、儀器設(shè)定程序操作、儀器測(cè)定程序操作和自動(dòng)清洗等操作程序。

附：

1、概念。

①電解質(zhì)分析儀（P126）：采用離子選擇性電極（ISE）測(cè)量體液中離子濃度的儀器。

②血?dú)夥治鰞x（P129）：利用電極對(duì)血樣中的酸堿度（pH）、二氧化碳分壓（PC02）和氧分壓

（P02）進(jìn)行測(cè)定的儀器。

2、電解質(zhì)分析儀的工作原理框圖。（P127）

答：當(dāng)樣品通過測(cè)量毛細(xì)管時(shí)，各離子選擇電極膜與其相應(yīng)的離子發(fā)生作用，與參比電極產(chǎn)

生相關(guān)的電位差E,經(jīng)放大處理后，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線與待測(cè)離子電位差值對(duì)照，即可求得各離

子的濃度值，并顯示或打印出來。儀器將測(cè)量電極與測(cè)量毛細(xì)管做成一體化的結(jié)構(gòu)，使各電

極對(duì)接在一起自然形成測(cè)量毛細(xì)管。參比電極采用甘汞電極。

3、血?dú)夥治鰞x的管路組成。(P131)

答：管路系統(tǒng)通常由氣瓶、溶液瓶、連接管道、電磁閥、正壓泵、負(fù)壓泵和轉(zhuǎn)換裝置等部分

組成。

第十章臨床微生物檢測(cè)儀器

1、第三代血培養(yǎng)系統(tǒng)的工作原理。(P138)

答：第三代血培養(yǎng)系統(tǒng)即連續(xù)監(jiān)測(cè)血培養(yǎng)系統(tǒng)。其工作原理主要是通過自動(dòng)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基(液)

中的混濁度、pH值、代謝終產(chǎn)物CO?的濃度、熒光標(biāo)記底物或代謝產(chǎn)物等的變化，定性地檢

測(cè)微生物的存在。

2、微生物自動(dòng)鑒定系統(tǒng)的工作原理。(P147)

答：采用微生物數(shù)碼鑒定原理。數(shù)碼鑒定是指通過數(shù)學(xué)的編碼技術(shù)將細(xì)菌的生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)

換成數(shù)學(xué)模式，給每種細(xì)菌的反應(yīng)模式賦予一組數(shù)碼，建立數(shù)據(jù)庫(kù)或編成檢索本。通過對(duì)未

知菌進(jìn)行有關(guān)生化試驗(yàn)并將生化反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字(編碼)，查閱檢索本或數(shù)據(jù)庫(kù)，得到

細(xì)菌名稱。其基本原理是計(jì)算并比較數(shù)據(jù)庫(kù)內(nèi)每個(gè)細(xì)菌條目對(duì)系統(tǒng)中每個(gè)生化反應(yīng)出現(xiàn)的頻

率總和。

3、ESP系列自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的檢測(cè)原理。(P139)

答:根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本的數(shù)量分為128、256及384型。以128型為例，有8個(gè)孵育器，4個(gè)用

于需氧菌振蕩培養(yǎng)，4個(gè)用于厭氧菌不振蕩培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶頂部的連接裝置與儀器的感壓探測(cè)

器相接，探測(cè)器每12分鐘監(jiān)測(cè)一次需氧瓶，每24分鐘監(jiān)測(cè)一次厭氧瓶，并將氣體壓力數(shù)據(jù)

傳到計(jì)算機(jī)。計(jì)算機(jī)軟件以氣體壓力對(duì)時(shí)間的變化制成生長(zhǎng)曲線圖，按照特有的方法處理曲

線。當(dāng)培養(yǎng)瓶頂部壓力改變達(dá)到一定值時(shí)，則判斷為陽性，即有細(xì)菌生長(zhǎng)；否則為陰性，即

無細(xì)菌生長(zhǎng)。

4、BioArgos系統(tǒng)自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的工作原理。(P140)

答：該系統(tǒng)利用紅外分光計(jì)檢測(cè)CO?產(chǎn)生。系統(tǒng)由標(biāo)本裝載部分、檢測(cè)部分、孵育部分和計(jì)

算機(jī)部分組成。操作時(shí).，將已接種標(biāo)本的血培養(yǎng)瓶放入標(biāo)本裝載區(qū)，然后有機(jī)械臂自動(dòng)將培

養(yǎng)瓶移入檢測(cè)區(qū)。有紅外分光計(jì)對(duì)培養(yǎng)瓶進(jìn)行初次掃描，獲得初始讀數(shù)。血培養(yǎng)瓶被振蕩

12秒后再移入孵育器進(jìn)行培養(yǎng)，紅外分光光度計(jì)連續(xù)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)C02的產(chǎn)生情況，通過

C02水平的變化來判斷有無微生物生長(zhǎng)。

5、BacT/Alert系統(tǒng)自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)。（P140）（選擇）

答：陽性瓶的判斷有三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)：①C02初始值超過生物指數(shù)基數(shù)；②C02產(chǎn)生的速率持續(xù)增

加；③C02生長(zhǎng)速率異常高。

6、微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的性能特點(diǎn)。（P148）

答：①自動(dòng)化程度較高?？勺詣?dòng)加樣、聯(lián)機(jī)孵育、定時(shí)掃描、讀數(shù)、分析、打印報(bào)告等。②

功能范圍大。包括需氧菌、厭氧菌、真菌鑒定及細(xì)菌藥物敏感試驗(yàn)、最低抑菌濃度（MIC）

測(cè)定。③檢測(cè)速度快。快速熒光測(cè)試板的鑒定時(shí)間一般為2?4小時(shí)，絕大多數(shù)細(xì)菌的鑒定

可在4~6小時(shí)內(nèi)得出結(jié)果，常規(guī)測(cè)試板的鑒定時(shí)間一般為18小時(shí)左右。④系統(tǒng)具有較大的

細(xì)菌資料庫(kù)。鑒定細(xì)菌種類可達(dá)100?700余種不等，可進(jìn)行數(shù)十甚至100多種不同抗菌藥

物的敏感性測(cè)試。⑤使用一次性測(cè)試卡或測(cè)試板?？杀苊庥捎谙此⒉粷嵍斐扇藶檎`差。⑥

數(shù)據(jù)處理軟件功能強(qiáng)大，可根據(jù)用戶需要，自動(dòng)對(duì)完成的鑒定樣本及藥敏試驗(yàn)作出統(tǒng)計(jì)和組

成多種統(tǒng)計(jì)學(xué)報(bào)告。⑦軟件和測(cè)試卡（板）大多可不斷升級(jí)更新。檢測(cè)功能和數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)功能

不斷增強(qiáng)。⑧設(shè)有內(nèi)部質(zhì)控系統(tǒng)。保證儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

附：老師上課畫的重點(diǎn)。

1、微生物鑒定的自動(dòng)化系統(tǒng)的主要功能。（P138）

答：將培養(yǎng)基上分離的可疑致病菌配制成純菌液，放入自動(dòng)微生物鑒定及藥敏分析系統(tǒng)中，

通過計(jì)算機(jī)自動(dòng)掃描、讀數(shù)、分析、最后報(bào)告鑒定及藥敏結(jié)果。

2、自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的工作原理。（P138）

答：工作原理主要是通過自動(dòng)監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基（液）中的混濁度、pH值、代謝終產(chǎn)物CO?的濃度、

熒光標(biāo)記底物或代謝產(chǎn)物等的變化，定性地檢測(cè)微生物的存在。

根據(jù)檢測(cè)原理的不同分三類：

①以檢測(cè)培養(yǎng)基導(dǎo)電性和電壓為基礎(chǔ)的血培養(yǎng)系統(tǒng):血培養(yǎng)基中因含有不同電解質(zhì)而具有一

定導(dǎo)電性。微生物在生長(zhǎng)代謝的過程中可產(chǎn)生質(zhì)子、電子和各種帶電荷的原子團(tuán)（例如在液

體培養(yǎng)基內(nèi)COz轉(zhuǎn)變成C03「），通過電極檢測(cè)培養(yǎng)基的導(dǎo)電性或電壓可判斷有無微生物生長(zhǎng)。

②應(yīng)用測(cè)壓原理的血培養(yǎng)系統(tǒng)：許多細(xì)菌生長(zhǎng)過程中，常伴有吸收或產(chǎn)生氣體現(xiàn)象，如很多

需氧菌在胰酶消化大豆肉湯中生長(zhǎng)時(shí)，由于消耗培養(yǎng)瓶中的氧氣，故首先表現(xiàn)為吸收氣體。

而厭氧菌生長(zhǎng)時(shí)最初均無吸收氣體現(xiàn)象，僅表現(xiàn)為產(chǎn)生氣體（主要為CO。，因此可利用培養(yǎng)

瓶?jī)?nèi)壓力的改變檢測(cè)微生物的生長(zhǎng)情況。

③采用光電原理監(jiān)測(cè)的血培養(yǎng)系統(tǒng)：是目前國(guó)內(nèi)外應(yīng)用最廣泛的自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)。其工作原

理是微生物在代謝過程中必然會(huì)產(chǎn)生終代謝產(chǎn)物C02,引起培養(yǎng)基pH值及氧化還原電位改

變。利用光電比色檢測(cè)血培養(yǎng)瓶中某些代謝產(chǎn)物量的改變，可判斷有無微生物生長(zhǎng)。

3、自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的基本結(jié)構(gòu)。（P142）

答：通常自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)主要由：①培養(yǎng)瓶、②培養(yǎng)儀、③數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)三部分組成。

4、自動(dòng)血培養(yǎng)系統(tǒng)的性能特點(diǎn)。（P144）

答：1）培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)豐富；2）以連續(xù)、恒溫、振蕩方式培養(yǎng)；3）培養(yǎng)瓶多采用不易碎材料

制成；4）采用封閉式非侵入性的瓶外監(jiān)測(cè)方式；5）自動(dòng)連續(xù)監(jiān)測(cè)；6）陽性結(jié)果報(bào)告及時(shí)，

并經(jīng)打印顯示或報(bào)警提示；7）培養(yǎng)瓶多采用雙條形碼技術(shù)；8）培養(yǎng)瓶可在隨時(shí)放入培養(yǎng)系

統(tǒng)并進(jìn)行追蹤檢測(cè)；9）數(shù)據(jù)處理功能較強(qiáng)；10）設(shè)有內(nèi)部質(zhì)控系統(tǒng)；11）用途廣泛。

5、微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)鑒定原理。（P147）

答：采用微生物數(shù)碼鑒定原理。數(shù)碼鑒定是指通過數(shù)學(xué)的編碼技術(shù)將細(xì)菌的生化反應(yīng)模式轉(zhuǎn)

換成數(shù)學(xué)模式，給每種細(xì)菌的反應(yīng)模式賦予一組數(shù)碼，建立數(shù)據(jù)庫(kù)或編成檢索本。通過對(duì)未

知菌進(jìn)行有關(guān)生化試驗(yàn)并將生化反應(yīng)結(jié)果轉(zhuǎn)換成數(shù)字（編碼），查閱檢索本或數(shù)據(jù)庫(kù)，得到

細(xì)菌名稱。其基本原理是計(jì)算并比較數(shù)據(jù)庫(kù)內(nèi)每個(gè)細(xì)菌條目對(duì)系統(tǒng)中每個(gè)生化反應(yīng)出現(xiàn)的頻

率總和。

6、微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)抗菌藥物敏感性試驗(yàn)的檢測(cè)原理。（P147）

答：自動(dòng)化抗菌藥物敏感性試驗(yàn)使用藥敏測(cè)試板（卡）進(jìn)行測(cè)試，其實(shí)質(zhì)是微型化的肉湯稀

釋試驗(yàn)。將抗菌藥物微量稀釋在條孔或條板中，加入菌懸液孵育后放入儀器或在儀器中直接

孵育，儀器每隔一定時(shí)間自動(dòng)測(cè)定細(xì)菌生長(zhǎng)的濁度，或測(cè)定培養(yǎng)基中熒光指示劑的強(qiáng)度或熒

光原性物質(zhì)的水解，觀察細(xì)菌的生長(zhǎng)情況。

7、微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)的主要功能。（P146）

答:主要功能包括微生物鑒定、抗菌藥物敏感性試驗(yàn)（AST）及最低抑菌濃度（MIC）的測(cè)定

等。

8、微生物自動(dòng)鑒定及藥敏分析系統(tǒng)基本結(jié)構(gòu)。（P148）

答：①測(cè)試卡（板）；②菌液接種器；③培養(yǎng)和監(jiān)測(cè)系統(tǒng)；④數(shù)據(jù)管理系統(tǒng)。

第十一章臨床免疫檢測(cè)儀器

1、均相酶免疫分析法（HEI）的測(cè)定對(duì)象。（P154）

答：均相酶免疫分析法（HEI）的測(cè)定，以激素、藥物等小分子抗原或半抗原為主。均相酶

免疫分析主要有酶擴(kuò)大免疫測(cè)定技術(shù)和克隆酶供體免疫測(cè)定兩種方法。

2、最適合進(jìn)行熒光免疫分析的物質(zhì)。

答：

3、電化學(xué)免疫分析法的工作原理。(P157)

答：待測(cè)標(biāo)本與包被了抗體的順磁性微粒和發(fā)光劑標(biāo)記的抗體共同溫育，形成磁性微珠包被

抗體一抗原一發(fā)光劑標(biāo)記抗體復(fù)合物。吸人流動(dòng)室，緩沖液沖洗。磁性微粒流經(jīng)電極表面時(shí),

被電極下的磁鐵吸引，而游離的發(fā)光劑標(biāo)記抗體被沖洗走。同時(shí)在電極加電壓，啟動(dòng)電化學(xué)

發(fā)光反應(yīng)，使發(fā)光試劑標(biāo)記物三氯聯(lián)毗咤釘[Ru(bpy)3]2+TPA在電極表面進(jìn)行電子轉(zhuǎn)移，產(chǎn)

生電化學(xué)發(fā)光。光的強(qiáng)度與待測(cè)抗原的濃度成正比。

4,散射比濁法和透射比濁法的特異性分別是什么？

答：

5、名詞解釋：

發(fā)光免疫分析技術(shù)檢測(cè)：將發(fā)光反應(yīng)與免疫反應(yīng)相結(jié)合，產(chǎn)生一種很有發(fā)展前途的的免疫分

析方法。

散射免疫比濁法：

6、酶免疫分析技術(shù)的分類。(P154)

答：①酶標(biāo)儀；②)半自動(dòng)微孔板式ELISA分析儀；③全自動(dòng)微孔板式ELISA分析儀；④管

式固相酶免疫測(cè)定儀；⑤微粒固相酶免疫測(cè)定儀；⑥磁微粒固相酶免疫測(cè)定儀。

7、免疫濁度分析技術(shù)的基本原理及分類。

答：①免疫透射比濁度測(cè)定可分為沉淀反應(yīng)免疫透射比濁測(cè)定和免疫膠乳濁度測(cè)定法。免

疫透射比濁測(cè)定原理：抗原抗體在特殊緩沖液中快速形成抗原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁

度。當(dāng)反應(yīng)液中保持抗體過剩時(shí)，形成的復(fù)合物隨抗原增加而增加，反應(yīng)液的濁度亦隨之增

加。免疫膠乳濁度測(cè)定法原理：選擇一種大小適中、均勻一致的膠乳顆粒，吸附抗體后，當(dāng)

遇到相應(yīng)抗原時(shí)，則發(fā)生凝集。單個(gè)膠乳顆粒在入射光波長(zhǎng)之內(nèi)，光線可透過。當(dāng)兩個(gè)膠乳

顆粒凝集時(shí)，則使透過光減少，這種減少的程度與膠乳凝聚成正比。

②激光散射濁度測(cè)定按測(cè)試的方式不同分二種比濁法：即終點(diǎn)散射比濁法和速率散射比濁

法。激光散射濁度的基本原理是：激光散射光系沿水平軸照射，通過溶液時(shí)碰到小顆粒的抗

原一抗體免疫復(fù)合物時(shí)，導(dǎo)致光線被折射，發(fā)生偏轉(zhuǎn)。偏轉(zhuǎn)角度可以從0°~90°,這種偏轉(zhuǎn)的

角度可因光線波長(zhǎng)和離子大小不同而有所區(qū)別。散射光的強(qiáng)度與抗原一抗體復(fù)合物的含量成

正比，同時(shí)也和散射夾角成正比，和波長(zhǎng)成反比。

附：老師上課畫的重點(diǎn)。

1、定義：(P154)

①均相酶免疫分析法(HEI)均相酶免疫分析主要有酶擴(kuò)大免疫測(cè)定技術(shù)和克隆酶供體免疫

測(cè)定兩種方法。

②非均相酶免疫分析法(heterogeneousenzymeimmunoassay)常用的酶免疫分析法多為

非均相法，又可分為液相酶免疫法和固相酶免疫法兩種，以后者最常用，稱為酶聯(lián)免疫吸附

測(cè)定(ELISA)oELISA是臨床上最常用的免疫分析方法，目前常用的酶免疫分析儀都是基于

ELISA技術(shù)，稱為酶免疫分析儀。

2、酶免疫分析技術(shù)的分類。(P154)

答：①酶標(biāo)儀；②)半自動(dòng)微孔板式ELISA分析儀：③全自動(dòng)微孔板式ELISA分析儀；④管

式固相醐免疫測(cè)定儀；⑤微粒固相酶免疫測(cè)定儀；⑥磁微粒固相酶免疫測(cè)定儀。

3、酶免疫分析儀的性能評(píng)價(jià)。(P156)

答：包括：1)濾光片波長(zhǎng)精度檢查及其峰值測(cè)定；2)靈敏度和準(zhǔn)確度；3)通道差與孔間

差檢測(cè)；4)零點(diǎn)飄移；5)精密度評(píng)價(jià)；6)線性測(cè)定；7)雙波長(zhǎng)評(píng)價(jià)。

4、發(fā)光免疫技術(shù)根據(jù)示蹤物檢測(cè)的不同而分為熒光免疫測(cè)定、化學(xué)發(fā)光免疫測(cè)定及電化學(xué)

發(fā)光免疫測(cè)定三大類。(P156)

5、發(fā)光免疫分析技術(shù)采用微量倍增技術(shù)。(P156)

6、全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)儀器測(cè)定原理。(P157)

答：該類分析技術(shù)有兩種方法，小分子抗原物質(zhì)測(cè)定采用的是競(jìng)爭(zhēng)法，而大分子抗原物質(zhì)

測(cè)定采用的是夾心法。儀器所用固相磁粉顆粒極微小，其直徑僅LOum。這樣大大增加了

包被表面積，增加抗原或抗體的吸附量，使反應(yīng)速度加快，也使清洗和分離更簡(jiǎn)便。其反應(yīng)

基本過程有：競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)；夾心法。

7、全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)儀器組成。(P157)

答：一般由主機(jī)和微機(jī)兩部分組成。主機(jī)部分是儀器的運(yùn)行反應(yīng)測(cè)定部分，包括原材料配備

部分、液路部分、機(jī)械傳動(dòng)部分、光路檢測(cè)部分。微機(jī)系統(tǒng)是儀器的核心部分，是指揮控制

中心，其功能有程控操作、指示判斷、數(shù)據(jù)處理、故障診斷、自動(dòng)監(jiān)測(cè)等。

8、免疫比濁分析儀的種類及其臨床應(yīng)用。(P162)

答：①臨床上測(cè)定微量蛋白(如Ig等)由最初的試管沉淀反應(yīng)、瓊脂凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)，發(fā)展到

現(xiàn)代自動(dòng)免疫分析技術(shù)，其靈敏度逐步提高，檢測(cè)水平由微克(ug)發(fā)展到納克(ng),甚至

皮克(pg)水平。微量蛋白免疫分析隨著自動(dòng)化程度不斷提高，在臨床上得到廣泛應(yīng)用，其自

動(dòng)化檢測(cè)方法主要為免疫比濁法。根據(jù)檢測(cè)原理的不同，又分為透射比濁法和散射比濁法。

免疫透射比濁法分為免疫透射濁度測(cè)定法和免疫膠乳濁度測(cè)定法；免疫散射比濁法分為終點(diǎn)

散射比濁法和速率散射比濁法。

②免疫比濁分析的臨床應(yīng)用：免疫功能監(jiān)測(cè)；心血管疾病檢測(cè)；炎癥狀況監(jiān)測(cè)；類風(fēng)濕性關(guān)

節(jié)炎的檢測(cè)；腎臟功能監(jiān)測(cè)；營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)監(jiān)測(cè)；新生兒體檢；凝血及出血性疾病的檢測(cè)；貧血

監(jiān)測(cè)；血腦屏障監(jiān)測(cè)等。

9、IMMAGE免疫分析測(cè)定儀主要部件。(P162)

答：儀器主要部件：1)散射測(cè)濁儀；2)加液系統(tǒng)；3)試劑和樣品盤；4)閱讀器。

10、時(shí)間分辨熒光免疫分析儀(TR-FIA)檢測(cè)原理。(P163)

答：用錮系三價(jià)稀土離子及其螯合物作為示蹤物標(biāo)記抗原、抗體、核酸探針等物質(zhì)。當(dāng)免

疫反應(yīng)發(fā)生后，根據(jù)稀土離子螯合物的熒光光譜的特點(diǎn)，用時(shí)間分辨熒光分析儀延緩測(cè)量時(shí)

間，排除標(biāo)本中非特異性熒光的干擾，所得信號(hào)完全是稀土元素螯合物發(fā)射的特異熒光，測(cè)

定免疫反應(yīng)最后產(chǎn)物的特異性熒光信號(hào)。

第十二章臨床即時(shí)檢測(cè)儀器

1、即時(shí)檢測(cè)的主要技術(shù)有哪幾種？(P168)

答：POCT的主要技術(shù)：

①簡(jiǎn)單顯色(干化學(xué)法測(cè)定)技術(shù)將多種反應(yīng)試劑干燥、固定在紙片上，加上檢驗(yàn)標(biāo)

本后產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用肉眼觀察定性或儀器檢測(cè)(多為半定量)。

②多層涂膜(干化學(xué)法測(cè)定)技術(shù)將多種反應(yīng)試劑依次涂布在片基上，制成干片，

用儀器檢測(cè)，可準(zhǔn)確定量。

③免疫金標(biāo)記技術(shù)膠體金顆粒具有高電子密度的特性，金標(biāo)蛋白結(jié)合處，在顯微鏡

下可見黑褐色顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的標(biāo)記處大量聚集時(shí)，肉眼可見紅色或粉紅色斑點(diǎn),

這一反應(yīng)可通過銀顆粒的沉積被放大。

④免疫熒光技術(shù)通過檢測(cè)板條上激光激發(fā)的熒光，定量檢測(cè)以pg/ml為單位的檢測(cè)

板條上單個(gè)或多個(gè)標(biāo)志物。

④生物傳感器技術(shù)利用離子選擇電極，底物特異性電極，電導(dǎo)傳感器等特定的生物

檢測(cè)器進(jìn)行分析檢測(cè)。

④生物芯片技術(shù)其特點(diǎn)是在小面積的芯片上同時(shí)測(cè)定多個(gè)項(xiàng)目。

⑦紅外和遠(yuǎn)紅外分光光度技術(shù)此類技術(shù)常用于無創(chuàng)性檢測(cè)儀器。

⑧其他技術(shù)

2、即時(shí)檢測(cè)(POCT)的檢驗(yàn)特點(diǎn)。(P169)

表1萬］床實(shí)檢室檢測(cè)與POCT的主要不同點(diǎn)

時(shí)賴目POCT

周轉(zhuǎn)時(shí)間慢快

標(biāo)本鑒定復(fù)雜簡(jiǎn)單

標(biāo)本處理通常需要不需要

血標(biāo)本血清、血漿多為全血

校正頻繁不頻繁

試劑需要配制隨時(shí)可用

消耗品相對(duì)少相對(duì)多

檢測(cè)儀器復(fù)雜簡(jiǎn)單

對(duì)操作者的要求專業(yè)人員普通人亦可以

每個(gè)試臉花費(fèi)低高

答：試蛤結(jié)果質(zhì)量高一般

3、快速血糖、血?dú)夥治鰞x的質(zhì)量校準(zhǔn)的方法。(P174)

答：血糖儀的校準(zhǔn)：利用模擬血糖液檢查血糖儀和試紙條相互運(yùn)作是否正常。當(dāng)出現(xiàn)以下幾

種情況時(shí)需要對(duì)血糖儀進(jìn)行校準(zhǔn)：①第一次使用新購(gòu)的血糖儀；②使用新的一盒試紙條時(shí)；

③懷疑血糖儀和試紙條出現(xiàn)問題時(shí)；④測(cè)試結(jié)果未能反映出患者感覺的身體狀況時(shí)；⑤血

糖儀不小心摔落后。

附：老師上課畫的重點(diǎn)。

1、即時(shí)檢測(cè)的概念。(P167)

答：即時(shí)檢測(cè)(POCT)也稱床邊檢測(cè)，是檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)發(fā)展的新領(lǐng)域。關(guān)于POCT有多種解釋，

指在患者身邊，由非檢驗(yàn)專業(yè)人員(臨床人員或病人)利用便攜式儀器快速分析患者標(biāo)本并

準(zhǔn)確獲取結(jié)果的分析技術(shù)，或者說測(cè)試不在主實(shí)驗(yàn)室而在一個(gè)可移動(dòng)的系統(tǒng)內(nèi)進(jìn)行。

2、即時(shí)檢測(cè)的基本原理和主要技術(shù)。(P168)

答：1)POCT的基本原理：POCT技術(shù)的基本原理大致可分為四類：把傳統(tǒng)方法中的相關(guān)液體

試劑浸潤(rùn)于濾紙和各種微孔膜的吸水材料中，成為整合的干燥試劑塊，然后將其固定于硬質(zhì)

型基質(zhì)上，成為各種形式的診斷試劑條；把傳統(tǒng)分析儀器微型化，操作方法簡(jiǎn)單化，使之成

為便攜式和手掌式的設(shè)備；將上述兩者整合為統(tǒng)一的系統(tǒng)；應(yīng)用生物感應(yīng)技術(shù)，利用生物感

應(yīng)器檢測(cè)待測(cè)物。

2)POCT的主要技術(shù)

①簡(jiǎn)單顯色(干化學(xué)法測(cè)定)技術(shù)將多種反應(yīng)試劑干燥、固定在紙片上，加上檢驗(yàn)標(biāo)

本后產(chǎn)生顏色反應(yīng)，用肉眼觀察定性或儀器檢測(cè)(多為半定量)。

②多層涂膜(干化學(xué)法測(cè)定)技術(shù)將多種反應(yīng)試劑依次涂布在片基上，制成干片，

用儀器檢測(cè)，可準(zhǔn)確定量。

③免疫金標(biāo)記技術(shù)膠體金顆粒具有高電子密度的特性，金標(biāo)蛋白結(jié)合處，在顯微鏡

下可見黑褐色顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的標(biāo)記處大量聚集時(shí)，肉眼可見紅色或粉紅色斑點(diǎn)，

這一反應(yīng)可通過銀顆粒的沉積被放大。

④免疫熒光技術(shù)通過檢測(cè)板條上激光激發(fā)的熒光，定量檢測(cè)以pg/ml為單位的檢測(cè)

板條上單個(gè)或多個(gè)標(biāo)志物。

④生物傳感器技術(shù)利用離子選擇電極，底物特異性電極，電導(dǎo)傳感器等特定的生物

檢測(cè)器進(jìn)行分析檢測(cè)。

④生物芯片技術(shù)其特點(diǎn)是在小面積的芯片上同時(shí)測(cè)定多個(gè)項(xiàng)目。

⑦紅外和遠(yuǎn)紅外分光光度技術(shù)此類技術(shù)常用于無創(chuàng)性檢測(cè)儀器。

⑧其他技術(shù)

3、即時(shí)檢測(cè)儀器的特點(diǎn)。(P172)

答：理想的POCT儀器應(yīng)具備以下特點(diǎn)：①儀器小型化，便于攜帶；②操作簡(jiǎn)單化、一般3~4

個(gè)步驟即可完成檢測(cè)；③縮短檢驗(yàn)周期，報(bào)告即時(shí)；④能獲得權(quán)威機(jī)構(gòu)的質(zhì)量認(rèn)證；⑤儀器

和配套試劑中應(yīng)配有質(zhì)控品，可監(jiān)控儀器和試劑的工作狀態(tài)；⑥儀器檢驗(yàn)項(xiàng)目具備臨床價(jià)值

和社會(huì)學(xué)意義；⑦儀器的檢測(cè)費(fèi)用合理；⑧儀器試劑的應(yīng)用不會(huì)造成對(duì)病人和工作人員的健

康損害或?qū)Νh(huán)境污染等不利影響。

第十三章PCR核酸擴(kuò)增儀

1、PCR技術(shù)的本質(zhì)及反應(yīng)步驟。(P181)

答:①PCR技術(shù)的本質(zhì)是核酸擴(kuò)增技術(shù)。重復(fù)''變性(denature)—?退火(anneal)—引物

(primer)延伸(extension)”過程至25-40個(gè)循環(huán)，呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)大待測(cè)樣本中的核酸拷貝數(shù)，

達(dá)到體外擴(kuò)增核酸序列的目的。

②基本步驟：DNA的變性；模板DNA與引物的退火(復(fù)性)；引物的延伸。

2、PCR核酸擴(kuò)增儀的溫度控制方式。(P182)

答：PCR核酸擴(kuò)增儀工作關(guān)鍵是溫度控制。①水浴鍋控溫：以不同溫度的水浴鍋串聯(lián)成一個(gè)

控溫體系。②壓縮機(jī)控溫：由壓縮機(jī)自動(dòng)控溫，金屬導(dǎo)熱，控溫較第一代PCR核酸擴(kuò)增儀方

便，但壓縮機(jī)故障率高，邊緣效應(yīng)及溫度overshooting現(xiàn)象嚴(yán)重。③半導(dǎo)體控溫：由半導(dǎo)

體自動(dòng)控溫，金屬導(dǎo)熱，控溫方便，體積小，相對(duì)穩(wěn)定性好。④離心式空氣加熱控溫：由金

屬線圈加熱，采用空氣作為導(dǎo)熱媒介，溫度均一性好，各孔擴(kuò)增效率高度一致，滿足熒光定

量PCR的高要求。

3、PCR擴(kuò)增儀的種類。(P183)

答：PCR擴(kuò)增儀的種類總體來說，可以分成兩大類，即普通PCR擴(kuò)增儀和實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)

增儀。①普通PCR擴(kuò)增儀即通常所謂的定性PCR擴(kuò)增儀。水浴式PCR儀：變溫金屬塊式PCR儀：

變溫氣流式PCR儀;梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的核酸擴(kuò)增儀;原位PCR

儀是由普通PCR儀衍生出的帶原位擴(kuò)增功能的核酸擴(kuò)增儀。②實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增儀：金屬

板式實(shí)時(shí)定量PCR儀；離心式實(shí)時(shí)定量PCR儀；各孔獨(dú)立控溫的定量PCR儀。

4、熒光實(shí)時(shí)定量PCR(RQ-PCR)的組成部分。(P183)

答：實(shí)時(shí)熒光定量PCR核酸擴(kuò)增儀由兩部分組成：PCR系統(tǒng)和熒光檢測(cè)系統(tǒng)。熒光檢測(cè)系統(tǒng)

主要包括激發(fā)光源和檢測(cè)器。

5、PCR技術(shù)的原理。(P182)

答：加熱使雙鏈DNA解開螺旋，在退火溫度條件下引物同模板DNA雜交，在TaqDNA聚合酶,

dNTPs,Mg2+和合適pll緩沖液存在條件下延伸引物，重復(fù)“變性一退火一引物延伸”過程

至25?40個(gè)循環(huán)，呈指數(shù)級(jí)擴(kuò)大待測(cè)樣本中的核酸拷貝數(shù)。

6、溫度overshooting現(xiàn)象。(P182)

答：升溫過程中，由于一些加熱元件，比如半導(dǎo)體、金屬塊本身會(huì)積蓄能量，雖然溫度探頭

探測(cè)溫度到達(dá)了設(shè)定溫度，但半導(dǎo)體、金屬塊上積蓄的能量仍然會(huì)傳給PCR體系，造成實(shí)際

的溫度高于設(shè)定的溫度，即溫度overshooting現(xiàn)象。

附：老師上課畫的重點(diǎn)。

1、PCR技術(shù)的原理。

2、PCR核酸擴(kuò)增儀的溫度控制方式。

3、PCR核酸擴(kuò)增儀的工作原理。

4、PCR技術(shù)的三個(gè)步驟。

第十四章全自動(dòng)DNA測(cè)序儀和蛋白質(zhì)自動(dòng)測(cè)序儀

1、全自動(dòng)DNA測(cè)序儀的一、二、三階儀器結(jié)構(gòu)是什么？(P193)

答：不同類型全自動(dòng)DNA測(cè)序儀的外觀有所差異，但基本結(jié)構(gòu)大致相同，主要由主機(jī)、

微型計(jì)算機(jī)和各種應(yīng)用軟件等組成。D主機(jī)功能主機(jī)具有自動(dòng)灌膠、進(jìn)樣、電泳、熒光檢

測(cè)等功能。2)微型計(jì)算機(jī)功能控制主機(jī)的運(yùn)行，并對(duì)來自主機(jī)的數(shù)據(jù)進(jìn)行收集和分析。3)

各類軟件功能承擔(dān)數(shù)據(jù)收集、DNA序列分析及DNA片段大小和定量分析等功能。

2、全自動(dòng)DNA測(cè)序儀的工作原理有哪些方法？(P193)

答：DNA測(cè)序是指檢測(cè)其一級(jí)結(jié)構(gòu)一核甘酸的線性排列順序。目前DNA測(cè)序儀的工作原理主

要是利用Sanger雙脫氧鏈末端終止法或Maxam-GiIbert化學(xué)降解法。

3、熒光標(biāo)記DNA的檢測(cè)原理。（P193）

答：熒光標(biāo)記DNA的檢測(cè)原理：測(cè)序反應(yīng)產(chǎn)物加入測(cè)序儀后，兩極間極高的電勢(shì)差推動(dòng)著各

個(gè)熒光DNA片段在凝膠高分子聚合物中從負(fù)極向正極泳動(dòng)并達(dá)到相互分離，且依次通過檢測(cè)

窗口。由激光器發(fā)出的極細(xì)光束，通過精密的光學(xué)系統(tǒng)被導(dǎo)向檢測(cè)區(qū)，在這里激光束以與凝

膠垂直的角度激發(fā)熒光DNA片段。DNA片段上的熒光發(fā)色基團(tuán)吸收了激光束提供的能量而發(fā)

射出特征波長(zhǎng)的熒光。這種代表不同堿基信息的不同顏色熒光經(jīng)過光柵分光后再投射到CCD

攝像機(jī)上同步成像。經(jīng)計(jì)算機(jī)軟件分析后顯示測(cè)序結(jié)果。整個(gè)電泳過程結(jié)束時(shí)在檢測(cè)區(qū)某一

點(diǎn)上采集的所有熒光信號(hào)就轉(zhuǎn)化為一個(gè)以時(shí)間為橫軸坐標(biāo)，熒光波長(zhǎng)種類和強(qiáng)度為縱軸的信

號(hào)數(shù)據(jù)的集合。經(jīng)測(cè)序分析軟件對(duì)這些原始數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，最后的測(cè)序結(jié)果以一種清晰直觀

的圖形顯示出來。

4、全自動(dòng)DNA測(cè)序儀的分類。（P193）

答：目前使用的全自動(dòng)DNA測(cè)序儀都是通過凝膠電泳技術(shù)進(jìn)行DNA片段的分離。根據(jù)電泳方

式的不同又分為平板型電泳和毛細(xì)管電泳兩種儀器類型。平板型電泳的凝膠灌制在兩塊玻璃

板中間，聚合后厚度一般小于0.4mm或更少，因此又稱為超薄片層凝膠電泳。毛細(xì)管電泳技

術(shù)將凝膠高分子聚合物灌制于毛細(xì)管中（內(nèi)徑50卬1?100岬），在高壓及較低濃度膠的條件

下實(shí)現(xiàn)DNA片段的快速分離。

5、全自動(dòng)DNA測(cè)序儀的主機(jī)分幾個(gè)功能區(qū)？（P194）

答：主機(jī)具有自動(dòng)灌膠、進(jìn)樣、電泳、熒光檢測(cè)等功能。主機(jī)主要包括電泳系統(tǒng)、激光器和

熒光檢測(cè)系統(tǒng)等。大致可分為以下幾個(gè)結(jié)構(gòu)功能區(qū)：1）自動(dòng)進(jìn)樣器區(qū)裝載有樣品盤、電極

（負(fù)極）、電極緩沖液瓶、洗滌液（蒸儲(chǔ)水）瓶和廢液管。2）凝膠塊區(qū)凝膠塊區(qū)包括注射

器驅(qū)動(dòng)桿、樣品盤按鈕、注射器固定平臺(tái)、電極（正極）、緩沖液閥、玻璃注射器、毛細(xì)管

固定螺母和廢液閥等部件。3）檢測(cè)區(qū)檢測(cè)區(qū)內(nèi)有激光檢測(cè)器窗口及窗蓋、加熱板、毛細(xì)管、

熱敏膠帶。

6、與單色熒光標(biāo)記相比，多色熒光標(biāo)記有什么優(yōu)點(diǎn)？（P191）

答：多色熒光標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)優(yōu)點(diǎn)：①一個(gè)樣本的四個(gè)測(cè)序反應(yīng)產(chǎn)物可以同時(shí)在一個(gè)泳道內(nèi)電

泳，避免單一標(biāo)記時(shí)四個(gè)泳道測(cè)序因泳道間遷移率不同對(duì)精確度的影響，提高了測(cè)序精度。

②一個(gè)樣品所有反應(yīng)產(chǎn)物只需進(jìn)樣一次，所以一次實(shí)驗(yàn)便可以處理較之手工方法更多的樣

品。在相同樣品數(shù)的情況下，加樣的工作量也大大減少。

單色熒光標(biāo)記法與多色熒光標(biāo)記法的異同點(diǎn)：

①均可分為熒光標(biāo)記引物法和熒光標(biāo)記終止底物法。②單色熒光標(biāo)記法需將A、C、G、T四

個(gè)反應(yīng)分別在不同擴(kuò)增管中進(jìn)行，電泳時(shí)各管產(chǎn)物也分別在不同泳道中電泳。③多色熒光標(biāo)

記引物法需將A、C、G、T四個(gè)反應(yīng)分別在不同擴(kuò)增管中進(jìn)行，電泳時(shí)可合并在同一泳道中

電泳。④多色熒光標(biāo)記終止底物法可將A、C、G、T四個(gè)反應(yīng)在同一擴(kuò)增管中進(jìn)行，電泳時(shí)

在同一泳道中電泳。

附：老師上課畫的重點(diǎn)。

1、目前DNA測(cè)序儀的的工作原理包括哪兩類？

答：DNA測(cè)序是指檢測(cè)其一級(jí)結(jié)構(gòu)一核甘酸的線性排列順序。目前DNA測(cè)序儀的工作原理主

要是利用Sanger雙脫氧鏈末端終止法或Maxam-Gilbert化學(xué)降解法。

2、熒光標(biāo)記DNA有哪幾種？

答：新生鏈的熒光標(biāo)記：1）多色熒光標(biāo)記法多色熒光標(biāo)記法的熒光染料摻入方式有兩種。

第一種方式是將熒光染料預(yù)先標(biāo)記在測(cè)序反應(yīng)所用引物的5'端，稱為熒光標(biāo)記引物法。第二

種摻入方式是將熒光染料標(biāo)記在作為終止底物的雙脫氧單核甘酸上，稱為熒光標(biāo)記終止底物

法。2）單色熒光標(biāo)記法也包括熒光標(biāo)記引物法和熒光標(biāo)記終止底物法兩種。與多色熒光

標(biāo)記法不同的是單色熒光標(biāo)記引物法和熒光標(biāo)記終止底物法均需將A、C、G、T四個(gè)反應(yīng)分

別在不同擴(kuò)增管中進(jìn)行，電泳時(shí)各管產(chǎn)物也分別在不同泳道中電泳。

第十五章流式細(xì)胞儀

1,流式細(xì)胞儀生物學(xué)顆粒分析原理。

答：生物學(xué)顆粒分析原理

①流式細(xì)胞技術(shù)是在單細(xì)胞水平上，對(duì)于處在快速直線流動(dòng)狀態(tài)中的大量細(xì)胞或生物

顆粒進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析和分選的技術(shù)，現(xiàn)己成為現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究最先進(jìn)的分析技術(shù)

之一。應(yīng)用流式細(xì)胞儀對(duì)于處在快速直線流動(dòng)狀態(tài)中的細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行快速的、多參數(shù)

的定量分析和分選的技術(shù)稱為流式細(xì)胞術(shù)。②生物學(xué)顆粒包括大的免疫復(fù)合物、DNA、RNA、

蛋白質(zhì)、病毒顆粒、脂質(zhì)體、細(xì)胞器、細(xì)菌、霉菌、染色體、真核細(xì)胞、雜交細(xì)胞、聚集細(xì)

胞等，所檢測(cè)的生物顆粒的理化性質(zhì)包括細(xì)胞大小、細(xì)胞形態(tài)、胞漿顆?；潭取NA含量、

總蛋白質(zhì)含量、細(xì)胞膜完整性和酶活性等。③流式細(xì)胞儀是以激光為光源，集流體力學(xué)技

術(shù)、電子物理技術(shù)、光電測(cè)量技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)以及細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)為

一體的新型高科技儀器。④流式細(xì)胞儀是在熒光顯微鏡技術(shù)、血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀和噴墨技術(shù)的

基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。⑤鞘液和樣品流在噴嘴附近組成一個(gè)圓柱流束，與水平方向的激

光束垂直相交，染色的細(xì)胞受激光照射后發(fā)出熒光，這些信號(hào)分別被光電倍增管熒光

檢測(cè)器和光電二極管散射光檢測(cè)器接收，經(jīng)過計(jì)算機(jī)儲(chǔ)存、計(jì)算、分析這些數(shù)字化

信息，就可得到細(xì)胞的大小、活性、核酸含量、酶和抗原的性質(zhì)等物理和生化指標(biāo)。

2、散射熒光分選。

答：散射光信號(hào)散射光分為前向角散射和側(cè)向角散射，散射光不依賴任何細(xì)胞樣品的制備

技術(shù)(如染色)，稱為細(xì)胞的物理參數(shù)

I前向角散射前向角散射與被測(cè)細(xì)胞的大小有關(guān)，確切地說與細(xì)胞直徑的平方密切相關(guān)。

n側(cè)向角散射側(cè)向角散射是指與激光束正交90°方向的散射光信號(hào)。側(cè)向散射光對(duì)細(xì)胞

膜、細(xì)胞質(zhì)、核膜的折射率更為敏感，可提供細(xì)胞內(nèi)精細(xì)結(jié)構(gòu)和顆粒性質(zhì)的信息。

第十八章色譜分析儀器

1、氣相色譜儀的核心。(P247)

答：分析柱是整個(gè)氣相色譜系統(tǒng)的核心，混合物各個(gè)組分的分離在此完成。在使用氣相色譜

儀的過程中，優(yōu)良的柱子應(yīng)該具有適當(dāng)?shù)某叽绾瓦m當(dāng)?shù)墓潭ㄏ唷?/p>

2、色譜分析的特征是什么？(P244)

答：色譜儀的主要特點(diǎn)是可以對(duì)混合物進(jìn)行多組分分析或全分析。儀器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，操作使用

方便，具有應(yīng)用范圍廣、樣品用量少、高選擇性、高效能、高速度以及高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)。

3、常用的程序升溫法。(P247)

答：常用的程序升溫方式有兩種：線性程序(單階線性升溫)和非線性程序(多階線性升溫)。

程序升溫控制方式有機(jī)電式與電子式兩種，電子式最常用。

①線性程序：即柱溫T隨時(shí)間成比例地升高。可表示為1二川+這，式中T0為初溫，。C；t

表示時(shí)間，min；r代表升溫速度，℃/min。

②非線性程序：1)線性一恒溫適于高沸點(diǎn)組分較多的樣品的分離。2)恒溫一線性適于

低沸點(diǎn)組分較多的樣品的分離。3)恒溫一線性一恒溫適于組分沸點(diǎn)范圍很寬的樣品。4)

多種升溫速度適于復(fù)雜樣品。

4、高效液相最常用的……。(P251)

答：高效液相色譜儀中常用的高壓泵大致可分為兩類，一類是恒壓泵，常用的有直接氣動(dòng)泵

和氣動(dòng)放大泵等。另一類是恒流泵，如機(jī)械注射泵、機(jī)械往復(fù)式柱塞泵都屬于恒流泵。目前

最常用的高壓泵是機(jī)械往復(fù)式柱塞泵。

第十九章質(zhì)譜分析儀器

1、需要基質(zhì)的電離方式是？(P262)

答：快原子轟擊(FAB),樣品必須能溶于基質(zhì)?；|(zhì)輔助激光解吸電離(MALDI),將樣品溶

液和基質(zhì)混勻。

2、只用磁場(chǎng)不用電場(chǎng)的質(zhì)譜分析儀是？(P264)

答：只用電場(chǎng)不用磁場(chǎng)的質(zhì)譜分析儀是離子阱分析器和四極桿分析器。只用磁場(chǎng)不用電場(chǎng)的

質(zhì)譜分析儀是……

3、質(zhì)譜儀的性能關(guān)于質(zhì)量范圍取決于什么？（P266）

答：質(zhì)量范圍的大小取決于質(zhì)量分析器。不同的分析器有不同的質(zhì)量范圍，彼此間比較沒任

何意義。同類型分析器則在一定程度上反映質(zhì)譜儀的性能。

分辨率、靈敏度、質(zhì)量范圍、質(zhì)量穩(wěn)定性、質(zhì)量精度。

附：老師上課畫的重點(diǎn)。

1、質(zhì)譜儀的工作原理。（P260）

答：質(zhì)譜儀離子源中的樣品，一般在極高的真空狀態(tài)下，在電子、電場(chǎng)、光、熱或激發(fā)態(tài)原

子等能量源作用下，將物質(zhì)氣化、電離成正離子束，經(jīng)電壓加速和聚焦導(dǎo)入質(zhì)量分析器中，

一般利用離子在電場(chǎng)、磁場(chǎng)中運(yùn)動(dòng)的性質(zhì)，按離子質(zhì)荷比（m/z）的大小順序進(jìn)行收集和記錄,

縱坐標(biāo)一般為離子相對(duì)強(qiáng)度（以離子強(qiáng)度最強(qiáng)峰為100,其他的峰則以此為標(biāo)準(zhǔn)，確定其相

對(duì)強(qiáng)度，又稱相對(duì)豐度、豐度），或?yàn)殡x子強(qiáng)度（離子流強(qiáng)度），橫坐標(biāo)為質(zhì)荷比，得到質(zhì)譜

圖（圖19-1）。也可以按質(zhì)荷比一相對(duì)強(qiáng)度或離子強(qiáng)度列表，得到質(zhì)譜表。

2、質(zhì)譜儀有哪些組成部分？（P261）

答：質(zhì)譜儀主要由真空系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、離子源、加速區(qū)、質(zhì)量分析器、檢測(cè)器及計(jì)算機(jī)系

統(tǒng)組成，以離子源和質(zhì)量分析器為核心。

3、質(zhì)譜儀中最常見的離子源的電離方式有哪些？（P262）

答：常見的電離方式有電子電離（EI）、化學(xué)電離（CI）、場(chǎng)電離（FI）、場(chǎng)解吸（FD）、快原

子轟擊（FAB）、電噴霧電離（ESD、大氣壓化學(xué)電離（APCI）、基質(zhì)輔助激光解吸電離（MALDI）、

電噴霧解吸電離（DESI）等。其中，EI屬于硬電離，其他都屬于軟電離。軟電離方式易得到準(zhǔn)

分子離子峰，硬電離方式一般只能得到碎片離子。

第二十章磁共振波譜分析儀器

1、磁共振波譜分析儀設(shè)備的主要組成部分。（P272）

答：磁共振波譜分析儀的結(jié)構(gòu)較復(fù)雜，但基本設(shè)備均由兩部分組成，一部分是磁共振信號(hào)的

發(fā)生與采集部分，主要包括磁體、射頻振蕩器、掃描發(fā)生器；另一部分包括射頻接收器以及

數(shù)據(jù)處理及圖象顯示。根據(jù)核磁共振的基本原理，任何一臺(tái)核磁共振儀都應(yīng)該包括磁體，射

頻發(fā)射系統(tǒng)和射頻接收系統(tǒng)三個(gè)基本組成部分。傅里葉變換核磁共振儀還包括ADC、DAC和

計(jì)算機(jī)組成的數(shù)據(jù)系統(tǒng)。

2、核磁成像的優(yōu)點(diǎn)。（P276）

答：①不破壞生物高分子結(jié)構(gòu)（包括空間結(jié)構(gòu)）；②在溶液中測(cè)定符合生物體的常態(tài)，也可

測(cè)定固體樣品，比較晶態(tài)和溶液態(tài)的構(gòu)象異同；③不僅可用來研究構(gòu)象而且可用來研究構(gòu)象

變化即動(dòng)力