皮膚光毒性試驗(yàn)

西安白癜風(fēng)醫(yī)院雜志周刊——第6期西安白癜風(fēng)醫(yī)院官方網(wǎng)站：本文西安白癜風(fēng)醫(yī)院網(wǎng)站（）分享的皮膚知識(shí)皮膚光毒性試驗(yàn)SkinPhototoxicityTest范圍本規(guī)范規(guī)定了皮膚光毒性試驗(yàn)的基本原則，要求和方法。本規(guī)范適用于化妝品原料及其產(chǎn)品安全性毒理學(xué)檢測(cè)。2試驗(yàn)?zāi)康脑u(píng)價(jià)化妝品原料及其產(chǎn)品引起皮膚光毒性的可能性。3定義光毒性（Phototoxicity）：皮膚一次接觸化學(xué)物質(zhì)后，繼而暴露于紫外線照射下所引發(fā)的一種皮膚毒性反應(yīng)，或者全身應(yīng)用化學(xué)物質(zhì)后，暴露于紫外線照射下發(fā)生的類似反應(yīng)。4試驗(yàn)的基本原則將一定量受試物涂抹在動(dòng)物背部去毛的皮膚上，經(jīng)一定時(shí)間間隔后暴露于UVA光線下，觀察受試動(dòng)物皮膚反應(yīng)并確定該受試物有否光毒性。5試驗(yàn)方法5.1受試物液體受試物一般不用稀釋，可直接使用原液。若受試物為固體，應(yīng)將其研磨成細(xì)粉狀并用水或其它溶劑充分濕潤(rùn)，在使用溶劑時(shí)，應(yīng)考慮到溶劑對(duì)受試動(dòng)物皮膚刺激性的影響。對(duì)于化妝品產(chǎn)品而言，一般使用原霜或原液。陽(yáng)性對(duì)照物選用8-甲氧基補(bǔ)骨脂（8-methoxypsoralen，8-Mop）。5.2實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和飼養(yǎng)條件使用成年白色家兔或白化豚鼠，盡可能雌雄各半。選用6只動(dòng)物進(jìn)行正式試驗(yàn)。試驗(yàn)前動(dòng)物要在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房環(huán)境中至少適應(yīng)3d~5d時(shí)間。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房應(yīng)符合國(guó)家相應(yīng)規(guī)定。選用常規(guī)飼料，飲水不限制，需注意補(bǔ)充適量Vc。5.3UV光源5.3.1UV光源：波長(zhǎng)為320nm~400nm的UVA，如含有UVB，其劑量不得超過(guò)0.1J/cm2。5.3.2強(qiáng)度的測(cè)定：用前需用輻射計(jì)量?jī)x在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物背部照射區(qū)設(shè)6個(gè)點(diǎn)測(cè)定光強(qiáng)度（mw/cm2），以平均值計(jì)。5.3.3照射時(shí)間的計(jì)算：照射劑量為10J/cm2，按下式計(jì)算照射時(shí)間。注：1mw/cm2=1mJ/cm2/sec5.4試驗(yàn)步驟5.4.1進(jìn)行正式光毒試驗(yàn)前18h~24h，將動(dòng)物脊柱兩側(cè)皮膚去毛，試驗(yàn)部位皮膚需完好，無(wú)損傷及異常。備4塊去毛區(qū)（見(jiàn)圖1），每塊去毛面積約為2cm×2cm。5.4.2將動(dòng)物固定，按表1所示，在動(dòng)物去毛區(qū)1和2涂敷0.2mL(g)受試物。所用受試物濃度不能引起皮膚刺激反應(yīng)(可通過(guò)預(yù)試驗(yàn)確定)，30min后，左側(cè)（去毛區(qū)1和3）用鋁箔復(fù)蓋，膠帶固定，右側(cè)用UVA進(jìn)行照射。5.4.3結(jié)束后分別于1、24、48和72h觀察皮膚反應(yīng)，根據(jù)表2判定每只動(dòng)物皮膚反應(yīng)評(píng)分。5.4.4為保證試驗(yàn)方法的可靠性，至少每半年用陽(yáng)性對(duì)照物檢查一次。即在去毛區(qū)1和2涂陽(yáng)性對(duì)照物，方法同5.4.2。圖1動(dòng)物皮膚去毛區(qū)位置示意圖表1動(dòng)物去毛區(qū)的試驗(yàn)安排去毛區(qū)編號(hào)試驗(yàn)處理1涂受試物，不照射2涂受試物，照射3不涂受試物，不照射4不涂受試物，照射表2皮膚刺激反應(yīng)評(píng)分皮膚反應(yīng)積分紅斑和焦痂形成無(wú)紅斑0輕微紅斑（勉強(qiáng)可見(jiàn)）1明顯紅斑2中度~重度紅斑3嚴(yán)重紅斑（紫紅色）至輕微焦痂形成4水腫形成無(wú)水腫0輕微水腫（勉強(qiáng)可見(jiàn)）1輕度水腫（皮膚隆起輪廓清楚）2中度水腫（皮膚隆起約1mm）3重度水腫（皮膚隆起超過(guò)1mm，范圍擴(kuò)大）4最高積分86結(jié)果評(píng)價(jià)單純涂受試物而未經(jīng)照射區(qū)域未出現(xiàn)皮膚反應(yīng)，而涂受試物后經(jīng)照射的區(qū)域出現(xiàn)皮膚反應(yīng)分值之和為2或2以上的動(dòng)物數(shù)為1只或1只以上時(shí)，判為受試物具有光毒性。7試驗(yàn)報(bào)告報(bào)告應(yīng)包括下列內(nèi)容：（1）受試物名稱、理化性狀、配制方法、所用濃度；（2）動(dòng)物種屬、品系、性別、體重、來(lái)源（注明合格證號(hào)和動(dòng)物級(jí)別）；（3）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)環(huán)境，包括飼料來(lái)源、室溫、相對(duì)濕度、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房合格證號(hào)；（4）光源的生產(chǎn)廠、規(guī)格；（5）光強(qiáng)度和照射時(shí)間以及試驗(yàn)方法；（6）結(jié)果：以列表方式報(bào)告動(dòng)物出現(xiàn)皮膚反應(yīng)的積分（見(jiàn)表3和表4）；（7）結(jié)論。表3×××對(duì)豚鼠皮膚光毒性試驗(yàn)結(jié)果動(dòng)物編號(hào)性別體重(g)皮膚反應(yīng)積分1h123424h123448h123472h1234123456注：1，2，3，4為表1所示試驗(yàn)區(qū)。表4陽(yáng)性對(duì)照物對(duì)豚鼠皮膚光毒性試驗(yàn)結(jié)果動(dòng)物編號(hào)性別體重(g)皮膚反應(yīng)積分1h123424h12