免疫組化標記物臨床意義

免疫組化標記物臨床意義2021/3/29星期一1免疫組織化學技術(shù)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過化學反應(yīng)使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(shù)(immunocytochemistry)。顯色劑抗體抗原為什么要做該檢查？2021/3/29星期一2檢查目的1、確定細胞類型2、辨認細胞產(chǎn)物3、了解分化程度4、鑒定病變性質(zhì)5、發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶6、探討腫瘤起源或分化表型7、確定腫瘤分期8、指導治療和預(yù)后9、輔助疾病診斷和分類10、尋找感染病因2021/3/29星期一32021/3/29星期一4大腸癌套餐(CEA)癌胚抗原P53蛋白nm23轉(zhuǎn)移抑制基因Ki-67細胞增殖相關(guān)核抗原MRP多藥耐藥相關(guān)蛋白P53、Ki-67和nm23的表達與大腸癌的侵襲轉(zhuǎn)移和預(yù)后密切相關(guān)；CEA可能是大腸癌的侵襲轉(zhuǎn)移的促進因素；MRP所引起的耐藥機制是一個相對獨立的機制。CEA，P53，nm23，Ki-67可作為判斷大腸癌惡性程度、侵襲轉(zhuǎn)移以及預(yù)后的指標，分析他們的表達情況可以作為臨床選擇更合理的治療方案提供可靠的依據(jù)。2021/3/29星期一5CEACEA是大腸癌分泌的一組酸性糖蛋白，作為抗原可引起患者的免疫反應(yīng)。廣泛存在于各種上皮性腫瘤，尤其是各種腺癌。一般認為，大腸癌分化程度越低，CEA陽性表達率越高。上皮組織被覆在機體體表，或襯于機體內(nèi)中空器官的腔面，以及體腔腔面。腫瘤的命名：良性腫瘤一般稱為瘤，來源于上皮組織的惡性腫瘤稱為癌，來源于間葉組織的惡性腫瘤為肉瘤，既有癌又有肉瘤者稱為癌肉瘤。CEA陽性表達的提示大腸癌，陽性強度越高，說明癌的分化程度越低，浸潤性強，轉(zhuǎn)移快。例如腺瘤為陽性（+），早期癌變就變成（++）2021/3/29星期一6P53蛋白P53基因可分為野生型和突變型，野生型是抑癌基因，可以抑制腫瘤的增殖，但突變型則起反作用。免疫組化所檢測的是突變型基因所表達的蛋白，即p53蛋白那么p53陽性的意義是什么？免疫組化檢測的P53蛋白是一種腫瘤的促進因子，不但沒有起到抑制腫瘤的作用，反而會促進腫瘤的生長，因此其陽性率越高，預(yù)后越差。2021/3/29星期一7nm23抗轉(zhuǎn)移基因，其表達降低與腫瘤的高轉(zhuǎn)移能力，復(fù)發(fā)相關(guān)。nm23編碼的產(chǎn)物具有抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的功能，nm23在分化良好的腫瘤中呈高水平表達，且nm23基因表達與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)，與無病生存期，整個生存期呈正相關(guān)，因此檢測nm23基因的表達高低，可以作為判斷腫有無轉(zhuǎn)移的一個重要指標.故nm23陽性率越低，腫瘤越容易轉(zhuǎn)移。2021/3/29星期一8Ki-67Ki-67是一種與細胞周期相關(guān)的一種核蛋白，主要表達于細胞增殖分裂的各個時期（G1、G2、M、S期），但是在靜息的細胞（G0期）中不表達，常用于檢測腫瘤細胞的生長指數(shù)（免疫組化利用計算洗腦總數(shù)中的Ki-67陽性細胞數(shù)所占比例得到Ki-67指數(shù)），反映腫瘤細胞的增殖程度。細胞增殖相關(guān)核抗原Ki-67在多種腫瘤及癌前病變中均有異常表達，且與腫瘤的種植、浸潤、轉(zhuǎn)移潛能密切相關(guān)。簡言之，腫瘤長它就漲，腫瘤靜它就靜。2021/3/29星期一9MRPMRP屬ABC轉(zhuǎn)運蛋白超家族成員，MRP基因定位于16號染色體p13.1帶上，由6500bp組成，編碼1531個氨基酸的跨膜糖蛋白，分子量為190kD。耐藥的發(fā)生與依賴ATP的谷胱甘肽S結(jié)合載體（glutathione-S-conjugatecarrier）活性提高的緣故，谷胱甘肽S結(jié)合的輸出載體又稱為"GS-X泵"，它可將陰離子的共軛物排泄出細胞，并在清除外源性毒素中發(fā)揮作用。MRP能介導藥物中的谷胱甘肽硫共軛物、葡萄糖醛酸甙共軛物和硫酸鹽共軛物排出細胞。MRP轉(zhuǎn)運的步驟可能為：GSH合成→GSH與藥物偶和→MRP將藥物泵出細胞外MRP不但定位于血漿細胞膜，而且存在于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基濾泡處，提示MRP還可在細胞內(nèi)隔離藥物，使藥物不能與靶位點結(jié)合，從而間接導致耐藥。MRP依靠ATP的作用能夠把帶有負電荷的化療藥物逆濃度梯度轉(zhuǎn)運，使進入腫瘤細胞中的藥物濃度減低，在靶細胞中達不到有效作用濃度，導致耐藥。2021/3/29星期一102021/3/29星期一11CK細胞角蛋白(Cytokeratin,CK)主要存于上皮細胞胞漿中,是構(gòu)成細胞骨架的一類中間絲狀物,有多種類型,其中以細胞角蛋白19(CK19)片段CYFRA21-1(cytokeratin19frag2ments)在惡性腫瘤診斷中最為重要;細胞癌變時CK19釋放增加,這與CK19的DNA基因組改變有關(guān),CK19經(jīng)蛋白酶降解或細胞凋亡后其碎片釋放入血。CK18低分子量角蛋白，主要標記各種單層上皮包括腺上皮，而復(fù)層鱗狀上皮常陰性，主要用于腺癌診斷。CK19分布于單層上皮和間皮，常用于腺癌診斷，肝細胞不表達，而膽管為陽性反應(yīng)。CK7卵巢、肺和乳腺上皮常陽性，結(jié)腸、前列腺、胃腸道上皮陰性。

2021/3/29星期一12常用免疫組化項目Her-2：抗凋亡，參與調(diào)節(jié)P13K/AK途徑和MAPK激活途徑,胞膜,≥++,耐藥：環(huán)磷酰胺,三苯氧胺,氨甲喋呤ERCC1：過表達使停滯在G2/M期的損傷DNA迅速恢復(fù)胞核,≥++,耐藥：順氯氨鉑PRM1：DNA修復(fù)的限速酶，吉西他濱的結(jié)合位點，胞漿，≥++，耐藥：吉西他濱/順鉑BRCA1：高表達使細胞修復(fù)能力增強，胞漿/核，≥++，耐藥：順鉑ER、PR：正常乳腺上皮細胞內(nèi)存在ER、PR。當細胞發(fā)生癌變時，ER和PR出現(xiàn)部分和全部缺失。如果細