革蘭氏陰性兼性厭氧

革蘭氏陰性兼性厭氧第一節(jié)腸桿菌科概述

腸桿菌科(Enterobacteriaceae）為一大群革蘭氏陰性桿菌。根據(jù)生化反應(yīng)、血清學(xué)試驗、DNA同源性研究，本科至少包括28個菌屬，110個以上的菌種。本科細(xì)菌廣泛分布于自然界，包括腐生菌、寄生菌和人及動物的病原菌。多數(shù)是人和動物腸道正常菌群的重要成員，只有少數(shù)生活在植物及水和土壤中。沙門氏菌屬、志賀氏菌屬以及埃希氏菌屬和耶爾森氏菌屬的部分成員對人或動物具有廣泛的致病性，在公共衛(wèi)生和獸醫(yī)臨診上都有重要意義。第2頁,共81頁，2024年2月25日，星期天第二節(jié)埃希氏菌屬（Escherichia）

本屬中最重要的菌種是大腸埃希氏菌（Escherichiacoli)，俗稱大腸桿菌，為德國科學(xué)家Escherich首先發(fā)現(xiàn)（1885年）。長期以來，一直認(rèn)為大腸埃希氏菌是人和動物腸道內(nèi)正常菌群的重要成員之一，維持著腸道的正常生理功能。但后來的許多研究，發(fā)現(xiàn)一些特定血清型可致畜禽的疾病，給畜牧業(yè)造成危害。對大腸桿菌的正確認(rèn)識：是人和動物腸道正常菌群成員之一；某些血清型可引起畜禽的疾??；在環(huán)境衛(wèi)生和食品衛(wèi)生學(xué)上，常被用作糞便直接或間接污染的檢測指標(biāo)；本菌還是分子生物學(xué)和基因工程中重要的實驗材料和研究對象。第3頁,共81頁，2024年2月25日，星期天一、形態(tài)及染色特性

1.G－直桿菌，大小0.4-0.7×1-3μm，兩端鈍圓，散在或成對，無芽胞。第4頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

第5頁,共81頁，2024年2月25日，星期天2.大多數(shù)菌株具有鞭毛，但也有無鞭毛或丟失鞭毛的變異株。第6頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

3.多數(shù)菌株有菌毛，少數(shù)菌株兼有性菌毛，菌毛與毒力相關(guān)！第7頁,共81頁，2024年2月25日，星期天4.除少數(shù)菌株外，通常無可見莢膜，但常有微莢膜第8頁,共81頁，2024年2月25日，星期天二、培養(yǎng)及生化特性

1、培養(yǎng)特性①兼性厭氧；②最適生長溫度37℃，最適生長pH7.2-7.6；③普通瓊脂：生長良好，圓形凸起、光滑、濕潤、半透明、灰白色菌落，直徑約2~3mm；④肉湯培養(yǎng)：均勻渾濁，管底有粘性沉淀，液面管壁有菌環(huán).第9頁,共81頁，2024年2月25日，星期天⑤麥康凱瓊脂：紅色菌落；伊紅美藍(lán)瓊脂：黑色帶金屬閃光的菌落；SS瓊脂：一般不生長或生長較差，生長者呈紅色。第10頁,共81頁，2024年2月25日，星期天⑥血平板：一些致病性菌株常β溶血；第11頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

2、生化特性①能發(fā)酵多種糖類，產(chǎn)酸產(chǎn)氣。多數(shù)菌株發(fā)酵乳糖；約半數(shù)菌株不分解蔗糖；

②IMViC：＋＋――

③幾乎均不產(chǎn)生硫化氫，不分解尿素；

④其余生化反應(yīng)見課本。第12頁,共81頁，2024年2月25日，星期天第13頁,共81頁，2024年2月25日，星期天三、抗原及血清型

1.大腸桿菌抗原主要有O、K和H三種

（1）O抗原：即菌體抗原，化學(xué)本質(zhì)——多糖-磷脂-蛋白質(zhì)復(fù)合物。耐熱——121℃2h不破壞其抗原性。每個菌株只含有一種O抗原，其種類以阿拉伯?dāng)?shù)字表示；可用抗O單因子血清通過凝集試驗鑒定。（2）K抗原：即莢膜抗原；個別位于菌毛中。不耐熱。O不凝集性：具有K抗原的菌株不會被其相應(yīng)的抗O血清凝集。第14頁,共81頁，2024年2月25日，星期天（3）H抗原：即鞭毛抗原；不耐熱，80℃可破壞其抗原性。1個菌株僅有1種H抗原。第15頁,共81頁，2024年2月25日，星期天2、血清型：可用O:K:H排列表示其血清型。如：O8:K23:H19，表示該菌具有O抗原8，K抗原23，H抗原為19。致人畜腹瀉的產(chǎn)腸毒素大腸桿菌，除含K抗原外，還可含有蛋白質(zhì)性粘附素抗原。對粘附素抗原應(yīng)并列寫于多糖K抗原之后。如：O8:K87,K88:H19中K88即為粘附素抗原。第16頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

四、致病性

1.多數(shù)是條件致病菌，只在特定條件下致病，如：侵入腸外組織或器官。2.少數(shù)特定的血清型是病原性大腸桿菌，正常情況下極少存在于健康機(jī)體內(nèi)。3.據(jù)毒力因子與發(fā)病機(jī)制，致病性大腸桿菌分為：

（1）產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（enterotoxigenicE.coli，ETEC）

（2）產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌(shigatoxin-producingE.coli，STEC)

（3）腸致病性大腸桿菌（enteropathogenicE.coli，EPEC）

（4）腸侵襲性大腸桿菌（enteroinvasiveE.coli,EIEC）

（5）腸出血性大腸桿菌（enterohemorrhagicE.coli,EHEC）

（6）腸粘附性大腸桿菌（enteroadherentE.coli,EAEC）其中研究的最清楚的是前二類第17頁,共81頁，2024年2月25日，星期天（一）產(chǎn)腸毒素大腸桿菌（ETEC）ETEC是致人和幼畜腹瀉最常見的病原菌；毒力因子有粘附素性菌毛和腸毒素，二者密切相關(guān)且缺一不可，否則不引起腹瀉或只致輕度腹瀉。第18頁,共81頁，2024年2月25日，星期天1、粘附素性菌毛（1）是一類特有菌毛，能粘附于宿主小腸上皮細(xì)胞；對其抗原亦相應(yīng)稱作粘附素菌毛抗原（2）動物ETEC的粘附素主要有K88、K99、987P和F41，其他：F18ac、F42、F17、F165等。粘附素不是腹瀉的直接致病因子，但它是感染的首要毒力因子；

ETEC首先粘附于宿主小腸上皮細(xì)胞；在腸內(nèi)定居和繁殖，從而增強(qiáng)細(xì)菌的致病性。第19頁,共81頁，2024年2月25日，星期天2、腸毒素（enterotoxin）（1）是ETEC分泌到胞外的一種蛋白質(zhì)性毒素。（2）根據(jù)對熱的耐受性可分為：不耐熱腸毒素（heat-labileenterotoxin，LT）和耐熱腸毒素（heat-stableenterotoxin，ST）

第20頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

3、ETEC的致病機(jī)制

第21頁,共81頁，2024年2月25日，星期天第22頁,共81頁，2024年2月25日，星期天（二）產(chǎn)志賀毒素大腸桿菌（STEC）

STEC——產(chǎn)生志賀毒素的病原性大腸桿菌。在獸醫(yī)臨床主要與豬的水腫病、犢牛出血性結(jié)腸炎、幼兔腹瀉等疾病相關(guān)。第23頁,共81頁，2024年2月25日，星期天STEC有兩類毒力因子：1、粘附性菌毛：多為F18ab菌毛，少數(shù)為K88等。大多數(shù)豬水腫病菌株（主要為O139、O141、O138）都有該菌毛。

F18ab菌毛是一個重要的毒力因子，有助于STEC在豬腸粘膜上皮細(xì)胞上定居和繁殖。2、志賀毒素2型變異體（shigatoxinvariant，Stx2e）（1）Stx2e是一種蛋白質(zhì)性細(xì)胞毒素，是引起豬水腫病的直接毒力因子

第24頁,共81頁，2024年2月25日，星期天（2）仔豬水腫病是一種腸毒血癥，發(fā)病機(jī)制為:大腸桿菌以其菌毛粘附于小腸上皮細(xì)胞→細(xì)菌定居和大量繁殖→在腸內(nèi)產(chǎn)生Stx2e并被吸收。（3）Stx2e的作用機(jī)制:Stx2e在腸道內(nèi)被吸收→B亞單位與上皮細(xì)胞的Gb4受體特異性結(jié)合→A亞單位進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)并造成細(xì)胞死亡和組織病變。

Stx2e可引起血管內(nèi)皮損傷,血管通透性改變，導(dǎo)致病豬出現(xiàn)水腫和典型的神經(jīng)癥狀。神經(jīng)癥狀是由腦水腫所致,并非毒素對神經(jīng)細(xì)胞的直接作用。第25頁,共81頁，2024年2月25日，星期天（三）大腸桿菌致病性有關(guān)的其他毒力因子

除了毒素和菌毛外，內(nèi)毒素（LPS）、具有抗吞噬作用的K抗原、溶血素、大腸菌素V、血清抵抗因子、鐵離子清除因子等在不同動物大腸桿菌病的發(fā)生中可能起到不同的致病作用。第26頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

五、微生物學(xué)診斷

畜禽致病性大腸桿菌的分離與鑒定程序。1、病料的采集：敗血癥病例——病變的內(nèi)臟組織，在麥康凱上劃線分離培養(yǎng)；腹瀉及水腫病病例——小腸粘膜刮取物在麥康凱上劃線分離培養(yǎng)2、畜禽致病性大腸桿菌的分離與鑒定程序

第27頁,共81頁，2024年2月25日，星期天畜禽致病性大腸桿菌的

分離與鑒定程序第28頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

3、ETEC腸毒素檢測

（1）檢測LT的常用方法：兔回腸結(jié)扎腸試驗；ELISA；中國地鼠卵巢細(xì)胞（CHO）培養(yǎng)法；平板免疫溶血試驗；夾心紅細(xì)胞免疫試驗。

（2）檢測ST常用方法有：乳鼠胃內(nèi)投服試驗；GM1-ELISA等。4、Stx2e的檢測

（1）Vero細(xì)胞毒性試驗；（2）小鼠神經(jīng)毒性試驗；（3）抗Stx2e抗體中和試驗；（4）PCR方法對Stx2e基因特異序列的擴(kuò)增。

第29頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

第三節(jié)沙門氏菌屬（Salmonella）

沙門氏菌屬是一大群寄生于人和動物腸道內(nèi)、生化特性和抗原結(jié)構(gòu)相似，兼性厭氧，G－，無芽胞直桿菌。在醫(yī)學(xué)、獸醫(yī)和公共衛(wèi)生上均十分重要：許多沙門氏菌對人和動物有致病性；能致人和動物多種不同臨床表現(xiàn)的沙門氏菌病!第30頁,共81頁，2024年2月25日，星期天第31頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

一、形態(tài)及染色特性

1、呈直桿狀，0.4~0.7×1.0~3.0μm，G-。第32頁,共81頁，2024年2月25日，星期天2、除雞白痢和雞傷寒沙門氏菌外，其余各菌：周生鞭毛，絕大多數(shù)具有菌毛。第33頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

二、培養(yǎng)及生化特性

1、培養(yǎng)特性（1）培養(yǎng)特性與埃希氏菌屬相似。（2）雞白痢、雞傷寒、羊流產(chǎn)和甲型副傷寒等沙門氏菌在普通瓊脂上生長貧瘠。培養(yǎng)基中加入血清、葡萄糖、硫代硫酸鈉、胱氨酸、腦心浸液和甘油等均有助于本菌生長。（3）本菌屬有S-R變異。第34頁,共81頁，2024年2月25日，星期天（4）麥康凱上，大多形成無色菌落（不發(fā)酵乳糖）；SS平板上，形成黑色菌落。第35頁,共81頁，2024年2月25日，星期天2、生化鑒別（1）本菌屬的具體生化鑒別可參考課本；（2）大多數(shù)沙門氏菌具有以下特性：第36頁,共81頁，2024年2月25日，星期天三、抗原結(jié)構(gòu)

菌體(O)抗原─分群；鞭毛(H)抗原─分型；毒力(Vi)抗原─微莢膜成分。1、O抗原（58種）（1）細(xì)胞壁表面的耐熱多糖抗原；（2）根據(jù)O抗原分為：A、B、C1-C4、D1-D3、E1-E4、F、G1-G2、H……Z和O51-O63以及O65-O67計51個O群，包括58種O抗原。第37頁,共81頁，2024年2月25日，星期天2、H抗原（63種）（1）蛋白質(zhì)性鞭毛抗原，計有63種；（2）同一O群沙門氏菌根據(jù)H抗原的不同可分成不同的血清型。第38頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

3、Vi抗原

（1）為微莢膜成分；相當(dāng)于K抗原，與毒力（virulence）有關(guān)，故稱為Vi抗原；（2）其抗原性弱，刺激機(jī)體產(chǎn)生短暫低效價抗體,

伴隨活菌一起存在.測定Vi抗體有助于檢出帶菌者（3）新分離的菌株多有Vi抗原，但在普通培養(yǎng)基上多次傳代后易丟失此抗原，這種變異稱為“V-W變異”。第39頁,共81頁，2024年2月25日，星期天4、血清型

（1）以O(shè):H:Vi形式表示（2）目前本菌屬至少已有2300個血清型。對人和溫血動物致病的血清型絕大多數(shù)分屬于A—F群；在疾病中經(jīng)常出現(xiàn)的不足50種。例如：雛沙門氏菌(雞白痢沙門氏菌)：1,9,12:-:-

雞沙門氏菌(雞傷寒沙門氏菌)：1,9,12:-:-

鼠傷寒沙門氏菌：1,4,[5],12:i:1,2第40頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

四、致病性及免疫性

1、動物宿主廣泛，人畜共患?。蛔畛Ｇ趾τ?、青年動物，發(fā)生敗血癥、胃腸炎及其它組織局部炎癥；成年動物多引起散發(fā)性沙門氏菌??；發(fā)生敗血癥的懷孕母畜可表現(xiàn)流產(chǎn)。2、隱性感染或康復(fù)帶菌(可間歇排菌,主要傳染來源)。3、野鳥、嚙齒動物、蜱和一些昆蟲也可傳播。4、主要傳染途徑是消化道。5、許多環(huán)境條件，如：衛(wèi)生不良、過度擁擠、氣候惡劣、內(nèi)服皮質(zhì)類激素、分娩、長途運輸、發(fā)生病毒或寄生蟲感染等，均可增加易感動物發(fā)生沙門氏菌病。第41頁,共81頁，2024年2月25日，星期天（一）致病性類型根據(jù)沙門氏菌對宿主適應(yīng)性或嗜性不同，可將沙門氏菌分成三群。第一群：專嗜性或高度適應(yīng)性，只對人或某種動物產(chǎn)生特定的疾??；屬于這群的不多。如：

①雞白痢和雞傷寒沙門氏菌→僅使雞和火雞發(fā)病

②馬流產(chǎn)沙門氏菌→馬流產(chǎn)

③牛流產(chǎn)沙門氏菌→牛流產(chǎn)

④羊流產(chǎn)沙門氏菌→羊的流產(chǎn)

⑤豬傷寒沙門氏菌→僅侵害豬；

⑥傷寒與甲、乙、丙三型副傷寒以及仙臺等血清型高度適應(yīng)于人類，對動物不引起自然感染。第42頁,共81頁，2024年2月25日，星期天第二群：偏嗜性，多多少少適應(yīng)于特定動物；僅個別血清型，如：①豬霍亂和都柏林沙門氏菌，分別對豬和牛羊為強(qiáng)適應(yīng)性,多在各自宿主中致病，但也能感染其它動物。②現(xiàn)在?？蓮母嵫蚋篂a中分離到亞利桑那沙門氏菌，并認(rèn)為這型菌正在適應(yīng)于羊。第三群：泛嗜性或非適應(yīng)性，具有廣泛的宿主感染譜。能致人和各種動物的疾病，具有重要的公共衛(wèi)生意義。占大多數(shù)！鼠傷寒和腸炎沙門氏菌是其中二個突出代表。常見的危害人和動物的泛嗜性沙門氏菌約20余種（加上專嗜性和偏嗜性菌型有30余種）。第43頁,共81頁，2024年2月25日，星期天（二）沙門氏菌的致?。ǘ玖Γ┮蜃釉S多研究資料表明，沙門氏菌具有多種可能的毒力因素，其中主要的有：1、粘附因子：為沙門氏菌的纖毛成分，能與腸上皮細(xì)胞的甘露糖結(jié)合。2、脂多糖（LPS）：內(nèi)毒素；引起發(fā)熱、粘膜出血、白細(xì)胞減少、彌散性血管內(nèi)凝血、循環(huán)衰竭等中毒癥狀以及休克死亡。第44頁,共81頁，2024年2月25日，星期天3、腸毒素4、侵襲蛋白：①使得沙門氏菌能侵入并穿越小腸粘膜上皮細(xì)胞層,而到達(dá)下層組織;

②使得菌細(xì)胞被吞噬細(xì)胞吞噬后，不被殺滅并可在細(xì)胞內(nèi)繼續(xù)生長繁殖。

第45頁,共81頁，2024年2月25日，星期天5、誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞凋亡：沙門氏菌侵入巨噬細(xì)胞后可通過激活細(xì)胞的酶系統(tǒng)而引起巨噬細(xì)胞的凋亡；與在巨噬細(xì)胞中存活有關(guān)。

第46頁,共81頁，2024年2月25日，星期天（三）、免疫性1、細(xì)胞內(nèi)寄生細(xì)菌的清除依賴于細(xì)胞免疫；2、細(xì)胞外寄生細(xì)菌的清除依賴于體液免疫五、微生物學(xué)診斷第47頁,共81頁，2024年2月25日，星期天常用增菌培養(yǎng)基：①亮綠-膽鹽-四硫磺酸鈉肉湯；②四硫磺酸鹽增菌液；③亞硒酸鹽增菌液；④亮綠-胱氨酸-亞硒酸氫鈉增菌液；等等

常用鑒別培養(yǎng)基：①麥康凱瓊脂；②SS瓊脂；③伊紅美蘭瓊脂；④去氧膽鹽鈉-枸櫞酸鹽瓊脂；⑤HE瓊脂；⑥三糖鐵斜面；⑦尿素瓊脂；等等六、防制

1、疫苗接種；

2、嚴(yán)格實行衛(wèi)生檢驗和檢疫規(guī)程；

3、有效的抗生素：由于本屬菌的耐藥菌株不斷在增加，最好使用經(jīng)藥敏試驗選定的高敏藥物用于治療病畜禽。第48頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

第四節(jié)其它腸道桿菌(Otherentericbacilli)

一、耶爾森氏菌屬（Yersinia）

1、本菌屬現(xiàn)有11個種，1980年被正式歸入腸桿菌科。對人和動物有致病性的主要是：（1）鼠疫耶爾森氏菌（Y.pestis）（簡稱鼠疫桿菌）；

（2）假結(jié)核耶爾森氏菌（Y.pseudotuberculosis）；

（3）小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌（Y.enterocolitica）。另外，魯氏耶爾森氏菌是蛙科魚類尤其硬頭鱒的腸型紅口病(entericredmouthdisease)的病原。

第49頁,共81頁，2024年2月25日，星期天2、生物學(xué)特性（1）G－，運動或不運動、多形性短小桿菌（2）除鼠疫耶爾森氏菌外，22~28℃有鞭毛，37℃無鞭毛（3）氧化酶陽性，H2O2酶陽性，能發(fā)酵葡萄糖；尿素酶陽性（除鼠疫和魯氏二種耶爾森氏菌）；氨酸脫羧酶陽性（除鼠疫和假結(jié)核二種菌）（4）V-P試驗：22~25℃陽性，37℃陰性，而鼠疫和假結(jié)核耶爾森氏菌總是陰性第50頁,共81頁，2024年2月25日，星期天二、克雷伯氏菌屬（Klebsiella）1、現(xiàn)可分成五個種和三個亞種。（1）肺炎克雷伯氏菌（K.pnenmoniae）——肺炎亞種、臭鼻亞種、鼻硬結(jié)

（2）催娩克雷伯氏菌（K.oxytoca）

（3）土生克雷伯氏菌（K.terrigena）

（4）植生克雷伯氏菌（K.planticala）

（5）變形克雷伯氏菌（K.preteus）

第51頁,共81頁，2024年2月25日，星期天2、分布：人和動物的腸道、呼吸道以及水、土壤和谷物中。

3、形態(tài)：G－、較粗短的直桿菌，0.3-1.0×0.6-6μm，單個、成對或短鏈狀排列。無鞭毛和芽胞，有莢膜，多數(shù)有菌毛。

4、兼性厭氧；營養(yǎng)要求一般；

5、發(fā)酵多種糖類產(chǎn)酸產(chǎn)氣，IMViC－－＋＋，尿素酶陽性、不產(chǎn)生H2S。

6、肺炎克雷伯氏菌為條件致病菌，在動物抵抗力降低時，引起大葉性肺炎、子宮炎、乳房炎等。第52頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

三、變形桿菌屬（Proteus）

1、本菌屬為：G－桿菌，無莢膜，無芽胞，周生鞭毛，有菌毛，大小0.4-0.8×1.0-3.0μm。有明顯多形性(球狀或長絲狀)2、包括四個種：①普通變形桿菌（P.vulgaris）②奇異變形桿菌（P.mirabillis）

③潘納氏變形桿菌（P.penneri）④產(chǎn)粘液變形桿菌（P.myxofacienes）

第53頁,共81頁，2024年2月25日，星期天3、有鞭毛能運動，尿素酶陽性，能產(chǎn)生硫化氫，苯丙氨酸脫氨基陽性。

4、兼性厭氧5、有溶血現(xiàn)象

第54頁,共81頁，2024年2月25日，星期天四、志賀氏菌（Shigella）第55頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

第五節(jié)巴氏桿菌屬與里默氏桿菌屬

巴氏桿菌科是一群個體微小、粗短、卵圓形的G－桿菌。為法國微生物學(xué)家、化學(xué)家巴斯特最早發(fā)現(xiàn)，故名巴氏桿菌科。巴氏桿菌屬細(xì)菌主要的菌種：1、多殺性巴氏桿菌（P.multocida）2、溶血性巴氏桿菌（P.haemolytica）

3、脲巴氏桿菌（P.ureae）4、嗜肺巴氏桿菌（P.pneumotropica）

其中多殺巴氏桿菌和溶血巴氏桿菌是引起畜禽巴氏桿菌病的主要病原體。第56頁,共81頁，2024年2月25日，星期天一、多殺巴氏桿菌

1、形態(tài)特性

（1）G－，細(xì)小短桿菌、兩端鈍圓、中央凸起、近似橢圓形。第57頁,共81頁，2024年2月25日，星期天（2）無芽胞，無鞭毛，有莢膜。（3）兩極染色（美蘭或瑞氏染色）。第58頁,共81頁，2024年2月25日，星期天2、培養(yǎng)特性（1）需氧或兼性厭氧；（2）最適溫度37℃，pH7.2~7.4。（3）營養(yǎng)要求稍高：普通培養(yǎng)基中加蛋白胨、血液、血清或微量血紅蛋白時可促進(jìn)生長。

麥康凱瓊脂上不生長!（4）菌落形態(tài)：①血瓊脂（血清瓊脂）：光滑、濕潤、水滴樣、邊緣整齊、淡灰白小菌落，

不溶血。

②血清肉湯或胰蛋白胨肉湯：均勻混濁，軸性沉淀，形成菌環(huán)。第59頁,共81頁，2024年2月25日，星期天3、生化特性①分解葡、蔗、果、甘露和半乳，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。

②大多數(shù)發(fā)酵甘露醇。

③一般對乳糖、鼠李糖、楊苷、肌醇、菊糖和側(cè)金盞花醇不發(fā)酵。

④產(chǎn)生H2S、分解NH3、IMViC＋－－－、還原硝酸鹽、還原美藍(lán)、接觸酶陽性、氧化酶陽性、不明膠液化4、抵抗力不強(qiáng)（1）易被普通的消毒藥、陽光或熱殺死。如：3%石炭酸、3%福爾馬林、10%石灰乳、0.5~l%NaOH、0.1%升汞及2%來蘇兒經(jīng)1~2min可被殺死。

（2）水浴56℃15min、60℃10min內(nèi)被殺死。陽光曝曬10min可失活。第60頁,共81頁，2024年2月25日，星期天5、抗原結(jié)構(gòu)抗原結(jié)構(gòu)復(fù)雜，主要有莢膜抗原和菌體抗原。（1）莢膜抗原：分成A、B、D、E四個血清群。（E型：1987，Rimler和Rhoade，火雞）（2）菌體抗原（O抗原）：共16個型。（3）我國禽巴氏菌以5:A最多，其次是8:A；豬以5:A、6:B為主，其次是8:A和2:D；牛、羊以6:B最多；家兔以7:A為主，其次是5:A。第61頁,共81頁，2024年2月25日，星期天6、致病性可引起多種畜禽巴氏桿菌病(亦稱出血性敗血癥)。不同動物的巴氏桿菌，常對該種動物呈現(xiàn)較強(qiáng)致病力，對其他動物較少引起交叉感染。常見的有：馬巴氏桿菌病、豬巴氏桿菌?。ㄘi肺疫）、牛巴氏桿菌?。ㄅ３鲅詳⊙Y）、羊巴氏桿菌病、家兔巴氏桿菌病、禽巴氏桿菌?。ㄇ莼魜y）、鹿巴氏桿菌病、貂巴氏桿菌病（貂出血性敗血癥）、駱駝巴氏桿菌病等。第62頁,共81頁，2024年2月25日，星期天7、微生物學(xué)診斷（1）采集病料：血液、肝臟等（2）染色鏡檢：革蘭氏染色、美蘭染色等（3）分離培養(yǎng)：接種于鮮血瓊脂。①24h后，可形成淡灰色、圓形、濕潤、露珠樣小菌落，不溶血；②革蘭氏染色為陰性的短小桿菌；③美蘭染色兩極濃染。（4）生化試驗：見前述（5）動物感染試驗第63頁,共81頁，2024年2月25日，星期天第64頁,共81頁，2024年2月25日，星期天二、溶血性巴氏桿菌1、形態(tài)和多殺巴氏桿菌相似，呈球狀或桿狀，但較大，0.5×2.5μm。

G－、無芽胞、無鞭毛、有莢膜，兩極著色。2、營養(yǎng)要求不嚴(yán)格：（1）普通瓊脂生長良好，24h后，菌落呈圓形、光滑、濕潤，半透明

（2）血瓊脂上，新分離菌微弱的?溶血。連續(xù)傳代培養(yǎng)，溶血性減弱或消失。

（3）麥康凱上緩慢生長。3、發(fā)酵某些糖類產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(如葡/麥/蔗/半乳/果/甘露醇等)；

與多殺巴氏桿菌相比不產(chǎn)生靛基質(zhì)、紫乳變酸且凝固，有些菌株產(chǎn)生硫化氫。第65頁,共81頁，2024年2月25日，星期天4、抵抗力與多殺巴氏桿菌相似。5、按生化特性和致病力可分為兩個生物型：①A生物型包括1、2、5、6、7、8、9、11、12、13、14血清型

②B生物型分為3、4、10、15血清型6、引起牛和綿羊的肺炎、新生羔羊敗血癥。第66頁,共81頁，2024年2月25日，星期天三、鴨疫里默氏桿菌（Riemerellaanatipestifer）1、該菌曾稱為“鴨疫巴氏桿菌”，為什么？（1）形態(tài)與巴氏桿菌相似，為G－、有莢膜、無芽胞、不運動、兩極著色（2）菌落形態(tài)也與巴氏桿菌相同（3）培養(yǎng)特性：在巧克力瓊脂、血瓊脂、胰酶大豆瓊脂生長良好（但該菌培養(yǎng)時需要5%的CO2）（4）生化特性：與敗血性巴氏桿菌基本相同。由于以上等因素，把該菌稱為“鴨疫巴氏桿菌”第67頁,共81頁，2024年2月25日，星期天2、現(xiàn)在為什么稱為“鴨疫里默氏桿菌”？Rossau等(1991)和Segers等(1993)，據(jù)DNA-rRNA雜交分析、蛋白質(zhì)、脂肪酸組成和表型特征(如不產(chǎn)生色素、產(chǎn)生呼吸醌“7-甲基萘醌”)等，建議將該菌單獨列為“里默氏桿菌屬”，將該菌命名為“鴨疫里默氏桿菌”3、致病性

（1）可感染家鴨、火雞和多種鳥類。（2）主要發(fā)生于1~8周齡鴨，尤其是2-3周齡可大批發(fā)病、死亡，也稱為傳染性漿膜炎、新鴨病。鵝也可發(fā)生，稱為鵝滲出性敗血癥。（3）特征病變：纖維素性心包炎、肝周炎、氣囊炎等；也可能發(fā)生無任何癥狀的呼吸道感染。第68頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

第六節(jié)嗜血桿菌屬

一、染色與形態(tài)特性1、G－；小到中等大小，0.3-0.4×1.0μm。2、無芽胞；無鞭毛；新分離菌株有時能見到莢膜。單個、成對分布；有時形成絲狀，表現(xiàn)為多形性。第69頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

二、培養(yǎng)特性

1、酶系統(tǒng)不完善，培養(yǎng)時需加入X和V兩種生長因子。血液中有兩種生長因子：X因子——血紅蛋白衍生物；V因子——輔酶I或輔酶II。2、需氧或兼性厭氧，初次分離時需要5~10%的CO2。3、常用巧克力培養(yǎng)基：呈針尖大小、光滑、透明、的露滴狀菌落；邊緣整齊。第70頁,共81頁，2024年2月25日，星期天4、普通瓊脂和鮮血瓊脂生長不良，不溶血。衛(wèi)星現(xiàn)象：在血瓊脂上培養(yǎng)時，如同時有葡萄球菌生長,可出現(xiàn)葡萄球菌周圍的嗜血桿菌菌落較大，離葡萄球菌越遠(yuǎn)則越小。第71頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

三、生化特性

①糖發(fā)酵試驗：能發(fā)酵葡、麥、甘、蔗；不發(fā)酵乳、伯膠糖等。②還原硝酸鹽、不產(chǎn)生H2S、不明液化膠、不產(chǎn)生靛基質(zhì)。③氧化酶和接觸酶：因不同菌株而有差異。四、抵抗力不強(qiáng)（1）常用消毒劑可殺滅；（2）一般在60℃條件下10~20min即可殺滅；（3）室溫下只能生存2~4d。第72頁,共81頁，2024年2月25日，星期天

五、致病力

嗜血桿菌屬共有19個種，對人有致病性的有9種；對動物有致病性的有以下幾種：

1、副雞嗜血桿菌——雞傳染性鼻炎2、雞嗜血桿菌——雞鼻腔卡他性炎癥

3、豬嗜血桿菌——流感病豬并發(fā)感染或漿膜腔、腦膜、關(guān)節(jié)的纖維素性炎癥