2022-2023學(xué)年山東省臨沂市六縣聯(lián)考高二下學(xué)期期中考試生物試題（解析版）

高中生物名校試卷PAGEPAGE1山東省臨沂市六縣聯(lián)考2022-2023學(xué)年高二下學(xué)期期中試題一、選擇題1.關(guān)于白酒、啤酒和果酒的生產(chǎn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣B.白酒、啤酒和果酒釀制的過程也是微生物生長繁殖的過程C.葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶既存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，也存在于線粒體D.生產(chǎn)白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但發(fā)酵過程中起主要作用的都是酵母菌〖答案〗C〖祥解〗果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵?！驹斘觥緼、在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣，讓酵母菌大量繁殖，再進(jìn)行酒精發(fā)酵，A正確；B、白酒、啤酒和果酒釀制的過程也是微生物生長繁殖的過程，如發(fā)酵初期酵母菌大量繁殖，B正確；CD、酒精發(fā)酵利用的菌種是酵母菌，葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，不存在線粒體中，C錯(cuò)誤，D正確。故選C。2.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，無菌技術(shù)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中有著廣泛的應(yīng)用。下列敘述正確的是（）A.動植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行B.微生物、動物細(xì)胞培養(yǎng)基（液）中需添加一定量的抗生素以防止污染C.為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D.用紫外線進(jìn)行消毒時(shí)，適量噴灑石炭酸等消毒液可以加強(qiáng)消毒效果〖答案〗D〖祥解〗消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念，消毒是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物的方法殺死物體表面或內(nèi)部的一部分微生物。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒方法包括煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法；常用的滅菌方法包括干熱滅菌法、灼燒滅菌法、濕熱滅菌法（如高壓蒸汽滅菌法）。【詳析】A、動、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、動物細(xì)胞培養(yǎng)基中可以添加一定量的抗生素以防止污染，保證無菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素，B錯(cuò)誤；C、一般用濕熱滅菌法（例如高壓蒸汽滅菌法）對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，C錯(cuò)誤；D、用紫外線照射30min，可以殺死物體表面或空氣中的微生物，在照射前，適量噴灑石炭酸等消毒液，可以加強(qiáng)消毒效果，D正確。故選D。3.聚羥基脂肪酸酯（PHA）是由某些嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，具有類似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具備的生物可降解性，可用于制造無污染的“綠色塑料”。科學(xué)家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如下。下列說法正確的是（）A.步驟①取湖水接種到含合成塑料的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選B.步驟②如用稀釋涂布平板法接種，需用涂布器蘸取少量湖水均勻地涂布在培養(yǎng)基的表面C.步驟③應(yīng)將培養(yǎng)基置于37℃恒溫下培養(yǎng)，長出的菌落均能夠合成PHAD.步驟④挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量〖答案〗D〖祥解〗稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落?！驹斘觥緼、結(jié)合題干“聚羥基脂肪酸酯（PHA）是由某些嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯”可知，步驟①取湖水接種到含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，A錯(cuò)誤；B、若步驟②用稀釋涂布平板法接種，需要將菌液滴在培養(yǎng)基上，再用涂布器涂布均勻，B錯(cuò)誤；C、步驟③應(yīng)將培養(yǎng)基置于37℃恒溫下培養(yǎng)，長出的菌落不一定都能夠合成PHA，需要通過步驟④進(jìn)一步測定，C錯(cuò)誤；D、為獲得高產(chǎn)PHA的菌種，步驟④挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量，以確定高產(chǎn)菌株，D正確。故選D。4.為了探究日常售賣的冰激凌中大腸桿菌含量是否超標(biāo)，某生物興趣小組設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)：制備伊紅－亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（生長在此培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落呈深紫色）→取10ml剛?cè)诨耐N冰激凌作為原液→用稀釋涂布平板法接種→適宜條件下培養(yǎng)、觀察→出現(xiàn)了不同形態(tài)、顏色的菌落。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)先滅菌再調(diào)節(jié)pH至弱酸性B.用稀釋涂布平板法接種后，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少C.該實(shí)驗(yàn)制備的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，需要設(shè)計(jì)不接種的空白培養(yǎng)基作為對照組D.培養(yǎng)基上出現(xiàn)了不同形態(tài)、顏色的菌落說明除了大腸桿菌之外還有其他雜菌污染〖答案〗A〖祥解〗利用稀釋涂布平板法得到數(shù)值往往偏小，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。微生物培養(yǎng)基需要為微生物繁殖提供碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿足微生物對特殊營養(yǎng)物質(zhì)，pH和O2的需求。培養(yǎng)基按照功能可以分為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等?！驹斘觥緼、配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)先調(diào)節(jié)pH至弱酸性再滅菌，如果滅菌后調(diào)pH，有可能會引入雜菌，A錯(cuò)誤；B、用稀釋涂布平板法接種后，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少，B正確；

C、大腸桿菌在伊紅－亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上的菌落呈深紫色，因此可推知該培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，需要設(shè)計(jì)不接種的空白培養(yǎng)基作為對照組，來檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否合格，C正確；D、不同微生物形成的菌落形態(tài)大小顏色不同，培養(yǎng)基上有不同形態(tài)、顏色的菌落，說明有雜菌污染，D正確。故選A。

5.發(fā)酵工程在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.食用醬油的制作以大豆為主要原料，利用能產(chǎn)生蛋白酶的黑曲霉將蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制而成B.啤酒發(fā)酵的過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段，酵母菌的繁殖在主發(fā)酵階段完成，大部分糖的分解和代謝物的生成在后發(fā)酵階段完成C.谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)在中性和微堿性條件下積累谷氨酸，在酸性條件下容易形成谷氨酰胺和N－乙酰谷胺酰胺D.在青貯飼料中添加乳酸菌，可以提高飼料的品質(zhì)，使飼料保鮮，動物食用后還能提高免疫力〖答案〗B〖祥解〗研究表明，微生物含有豐富的蛋白質(zhì)，如細(xì)菌的蛋白質(zhì)含量占細(xì)胞干重的60%?80%，而且細(xì)菌生長繁殖速度很快。因此，許多國家以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過發(fā)酵獲得了大量的微生物菌體，即單細(xì)胞蛋白。用酵母菌等生產(chǎn)的單細(xì)胞蛋白可以作為食品添加劑；用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料，能使家畜、家禽增重快，產(chǎn)奶或產(chǎn)蛋量顯著提高。另外，在青貯飼料中添加乳酸菌，可以提高飼料的品質(zhì)，使飼料保鮮，動物食用后還能提高免疫力?！驹斘觥緼、生產(chǎn)醬油的菌種主要是黑曲霉，原料主要是大豆，黑曲霉產(chǎn)生的蛋白酶能將蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，更容易被消化吸收，最后經(jīng)過淋洗調(diào)制成醬油，A正確；B、啤酒發(fā)酵的過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段，酵母菌的繁殖在主發(fā)酵階段完成，大部分糖的分解和代謝物的生成也在主發(fā)酵階段完成，后發(fā)酵主要指的是后期調(diào)風(fēng)味等過程，B錯(cuò)誤；C、谷氨酸是谷氨酸棒狀桿菌產(chǎn)生的，谷氨酸棒狀桿菌是細(xì)菌，在中性和微堿性條件下積累谷氨酸，在酸性條件下容易形成谷氨酰胺和N－乙酰谷胺酰胺，C正確；D、微生物含有豐富的蛋白質(zhì)，如細(xì)菌的蛋白質(zhì)含量占細(xì)胞干重的60%?80%，而且細(xì)菌生長繁殖速度很快，在青貯飼料中添加乳酸菌，可以提高飼料的品質(zhì)，使飼料保鮮，動物食用后還能提高免疫力，D正確。故選B。6.科研人員利用莖尖培育脫毒馬鈴薯，測得馬鈴薯莖尖外植體大小對幼苗的成苗率和脫毒率的影響如圖。下列敘述正確的是（）A.脫毒苗具有抗病毒的能力B.培育脫毒苗需要使用纖維素酶和果膠酶C.該實(shí)驗(yàn)涉及到1個(gè)自變量，2個(gè)因變量D.根據(jù)本實(shí)驗(yàn)可知，大規(guī)模生產(chǎn)脫毒苗時(shí)莖尖越小越好〖答案〗C〖祥解〗脫毒苗是選擇植物的分生區(qū)，如莖尖(剛形成，病毒含量極少，甚至無病毒)進(jìn)行組織培養(yǎng)而獲得的，屬于細(xì)胞工程的范疇?！驹斘觥緼、培育的脫毒苗只是體內(nèi)不含病毒，但它不具有抗病毒的能力，A錯(cuò)誤；B、脫毒苗的培育不需要使用纖維素酶和果膠酶，B錯(cuò)誤；C、該實(shí)驗(yàn)自變量為馬鈴薯莖尖外植體大小，因變量為成苗率和脫毒率，涉及到1個(gè)自變量，2個(gè)因變量，C正確；D、圖中數(shù)據(jù)顯示,在莖尖外植體大小為0.27mm時(shí)，脫毒率和成苗率均較高，因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為0.27mm左右，D錯(cuò)誤。故選C。7.下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞融合比較的敘述，正確的是（）A.過程中都涉及細(xì)胞膜流動性，都需要酶將細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞B.都可以用PEG融合法或滅活病毒誘導(dǎo)法誘導(dǎo)融合C.兩種雜交細(xì)胞都能獲得雜交前2個(gè)細(xì)胞的全部優(yōu)勢D.前者主要是為了獲得雜種植株，后者主要是為了獲得細(xì)胞產(chǎn)品〖答案〗D〖祥解〗誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合前，先要采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體；誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，可以采用物理方法（電激、振動等）和化學(xué)方法（聚乙二醇）?！驹斘觥緼、動物細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散開，而植物體細(xì)胞雜交前需要用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，A錯(cuò)誤；B、都可以用PEG融合法誘導(dǎo)融合，滅活病毒誘導(dǎo)法只用于動物細(xì)胞融合，B錯(cuò)誤；C、由于不同來源的遺傳物質(zhì)會相互影響，則兩種雜交細(xì)胞不一定獲得兩種細(xì)胞的全部優(yōu)勢，C錯(cuò)誤；D、動物細(xì)胞融合技術(shù)主要是為了獲得細(xì)胞產(chǎn)品，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)主要是為了獲得雜種植株，D正確。故選D。8.下圖為某哺乳動物受精作用及胚胎發(fā)育過程示意圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.卵子成熟和①過程發(fā)生在雌性動物的輸卵管中B.②③④過程都發(fā)生有絲分裂，b時(shí)期胚胎發(fā)生孵化C.桑葚胚細(xì)胞具有全能性，a時(shí)期細(xì)胞開始出現(xiàn)分化D.在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙觀察到兩個(gè)極體，是完成受精的標(biāo)志〖答案〗B〖祥解〗胚胎發(fā)育的過程：受精卵→卵裂期→桑葚胚→囊胚→原腸胚→幼體。過程①為受精作用，過程②③④為早期胚胎發(fā)育，a為囊胚，b為原腸胚?！驹斘觥緼、卵子的成熟及精子和卵細(xì)胞的相互結(jié)合發(fā)生在雌性動物的輸卵管中，A正確；B、②③④是受精卵的卵裂，發(fā)生有絲分裂，a時(shí)期囊胚期發(fā)生孵化現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；C、桑葚胚細(xì)胞尚未分化，實(shí)驗(yàn)證實(shí)，這一階段前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，a是囊胚期，此時(shí)細(xì)胞開始出現(xiàn)分化，C正確；D、判斷卵子是否受精的標(biāo)志是在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙觀察到兩個(gè)極體，D正確。故選B。9.下圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡易流程圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.①過程需在通入較高氧氣的培養(yǎng)箱培養(yǎng)，培養(yǎng)液中需要CO2維持pHB.②過程的細(xì)胞通常是次級卵母細(xì)胞，常使用顯微操作去核C.可通過電融合法使細(xì)胞融合，③過程可用Ca2+載體激活重構(gòu)胚D.分割囊胚時(shí)要保證內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，應(yīng)取滋養(yǎng)層細(xì)胞鑒定性別〖答案〗A〖祥解〗分析圖解：圖示過程為體細(xì)胞克隆過程，取甲牛體細(xì)胞，對處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞去核，然后進(jìn)行細(xì)胞核移植；融合后的細(xì)胞激活后培養(yǎng)到早期胚胎，再進(jìn)行胚胎移植，最終得到克隆牛?！驹斘觥緼、①過程需需要向CO2培養(yǎng)箱中通入95%的空氣和5%的CO2，培養(yǎng)液中需要CO2維持pH，A錯(cuò)誤；B、過程②常使用顯微操作去核法對處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞進(jìn)行去核處理，B正確；C、去核的卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞通過電融合法融合，供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚，重構(gòu)胚需要用物理或化學(xué)的方法進(jìn)行激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，C正確；D、對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，若不能將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，則會出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)多的部分正常發(fā)育的能力強(qiáng)，含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良，甚至不能發(fā)育等問題，取滋養(yǎng)層細(xì)胞鑒定性別，D正確。故選A。10.關(guān)于生物技術(shù)與工程的應(yīng)用，下列不符合人類倫理道德觀念的是（）A.利用克隆技術(shù)為不孕不育患者克隆人B.利用試管嬰兒提供骨髓造血干細(xì)胞，救治病人C.利用現(xiàn)代生物技術(shù)有效確認(rèn)身份和偵破案件D.設(shè)計(jì)試管嬰兒，避免遺傳病患兒的出生〖答案〗A〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的正確做法是趨利避害，不能因噎廢食?！驹斘觥緼、克隆人可沖擊現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)倫理道德觀念，不符合人類倫理道德觀念，A符合題意；B、利用試管嬰兒提供骨髓造血干細(xì)胞，救治病人合乎道德規(guī)范，B不符合題意；C、利用PCR技術(shù)可以有效確認(rèn)身份和偵破案件，符合人類倫理道德觀念，C不符合題意；D、設(shè)計(jì)嬰兒性別可以避免某些伴性遺傳病如紅綠色盲、抗維生素D佝僂病等患兒的出生，符合人類倫理道德觀念，D不符合題意。故選A。11.下面是幾種不同限制性內(nèi)切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.以上DNA片段由4種限制酶切割后產(chǎn)生B.②片段是在識別序列為的限制酶作用下形成的C.①和④兩個(gè)片段在Ｔ4DNA連接酶的作用下不能連接形成重組DNA分子D.限制酶、DNA連接酶和DNA聚合酶作用的部位都是磷酸二酯鍵〖答案〗B〖祥解〗1、基因工程的工具有限制酶、DNA連接酶、基因的載體。限制酶識別DNA分子中特定核苷酸序列，在特定的部位將兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、圖中①②④是黏性末端，③是平末端?！驹斘觥緼、堿基序列具有方向性，圖中①④的黏性末端不能互補(bǔ)配對，是兩種種限制酶切割的產(chǎn)物；②是第三種限制酶切割的部分產(chǎn)物；③是第四種限制酶切割的部分產(chǎn)物，共是由4種限制酶切割后產(chǎn)生的，A正確；B、②片段是在酶切位點(diǎn)為的限制酶作用下形成的，B錯(cuò)誤；C、堿基序列具有方向性，圖中①④的黏性末端不能互補(bǔ)配對，在Ｔ4DNA連接酶的作用下不能連接形成重組DNA分N子，C正確；D、限制酶識別DNA分子中特定核苷酸序列，在特定的部位將兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開；DNA聚合酶和DNA連接酶是催化磷酸二酯鍵的形成，都是作用于磷酸二酯鍵，D正確。故選B。12.質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。質(zhì)粒上有標(biāo)記基因如圖所示，通過標(biāo)記基因可以推知外源基因（目的基因）是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同，細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長情況也不同，下表是外源基因插入位置（插入點(diǎn)有a、b、c），請根據(jù)表中提供細(xì)菌的生長情況，推測①②③三種重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn)，正確的一組是（）細(xì)菌在含青霉素培養(yǎng)基上生長情況細(xì)菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長情況①能生長能生長②能生長不能生長③不能生長能生長A.①是c；②是b；③是a B.①是a和b；②是a；③是bC.①是a和b；②是b；③是a D.①是c；②是a；③是b〖答案〗A〖祥解〗分析圖形可知：（1）a是抗青霉素基因，如果外源基因插入到a中，此基因結(jié)構(gòu)被破壞，細(xì)菌無抗氨芐青霉素能力。將細(xì)菌放入含有氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長，則會死亡；相反，會存活。（2）b是抗四環(huán)素基因，如果外源基因插入到b中，抗四環(huán)素基因結(jié)構(gòu)被破壞，細(xì)菌無抗四環(huán)素能力。將細(xì)菌放入含有四環(huán)素培養(yǎng)基上生長，則會死亡；相反，會存活?！驹斘觥康冖俳M：細(xì)胞能在含青霉素培養(yǎng)基上生長，說明抗青霉素基因沒有被破壞；細(xì)菌能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗四環(huán)素基因沒有被破壞。由此可知，外源基因插入的位置不是a、b，而是c；第②組：細(xì)胞能在含青霉素培養(yǎng)基上生長，說明抗青霉素基因沒有被破壞；細(xì)菌不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗四環(huán)素基因被破壞。說明了外源基因插入位置是b，不是a；第③組：細(xì)胞不能在含青霉素培養(yǎng)基上生長，能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗青霉素基因被破壞，抗四環(huán)素基因沒有被破壞，由此可知，外源基因插入的位置是a，而不是b。故選A?！尽狐c(diǎn)石成金』】13.下圖是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖，質(zhì)粒P0有四環(huán)素抗性基因（tetr）和氨芐青霉素抗性基因（ampr），ECoRV酶切位點(diǎn)為。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.ECoRV酶切出來的線性載體P1兩端為平末端B.載體P1需要添加與目的基因片段兩端互補(bǔ)的脫氧核苷酸才能與其連接C.目的基因與P2可能反向連接會導(dǎo)致目的基因產(chǎn)物不能合成D.只有成功導(dǎo)入P3的受體細(xì)胞才能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上增殖〖答案〗D〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是鈣離子處理法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測；①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！驹斘觥緼、由題干可知，ECoRV酶切位點(diǎn)為，可推知其酶切出來的線性載體P1兩端為平末端，A正確；B、由圖可知，目的基因兩側(cè)是黏性末端，質(zhì)粒P0經(jīng)ECoRV酶切后獲得的載體P1為平末端，因此載體P1需要添加與目的基因片段兩端互補(bǔ)的脫氧核苷酸才能與其連接，B正確；C、目的基因和載體P1兩端若都是用同種限制酶進(jìn)行酶切，其兩側(cè)黏性末端相同，這會導(dǎo)致目的基因與P2可能反向連接，則目的基因產(chǎn)物不能合成，C正確；D、導(dǎo)入P3的受體細(xì)胞以及導(dǎo)入空白載體P2的受體細(xì)胞都含有氨芐青霉素抗性基因（ampr），因此都能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上增殖，D錯(cuò)誤。故選D。14.RT-PCR是以提取的RNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲得與之互補(bǔ)的DNA（cDNA）序列，再以cDNA序列為模板進(jìn)行目的片段的擴(kuò)增。具體過程如圖所示。以下有關(guān)RT-PCR的敘述正確的是（）A.過程1需要使用耐高溫的DNA聚合酶B.過程2中的引物B可與mRNA互補(bǔ)配對C.游離的脫氧核苷酸只能加到引物的5'端D.RT-PCR可用于對RNA病毒的檢測與鑒定〖答案〗D〖祥解〗PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈?！驹斘觥緼、過程①是由mRNA形成單鏈DNA的過程，為逆轉(zhuǎn)錄，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶，A錯(cuò)誤；B、引物可以在DNA分子過程中起作用，過程2中的引物B可與DNA互補(bǔ)配對，進(jìn)行DNA分子的復(fù)制，B錯(cuò)誤；C、游離的脫氧核苷酸只能從引物的3'端開始連接，C錯(cuò)誤；D、利用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR技術(shù)對某些微量RNA病毒進(jìn)行檢測，并可提高檢測的靈敏度（因?yàn)樵黾恿舜郎yRNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量，便于檢測），D正確。故選D。15.基因工程提供了新的育種方法?？鼓孓D(zhuǎn)基因作物的培育與推廣帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)和社會效益。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.在一定程度上使作物擺脫了土壤和氣候條件的限制B.減少了化肥的制造和使用量，有利于環(huán)境保護(hù)C.減少了化學(xué)農(nóng)藥對環(huán)境的污染和人畜的危害D.使得作物在不良環(huán)境下更好地生長，提高產(chǎn)量〖答案〗B〖祥解〗抗逆轉(zhuǎn)基因植物：各種抗逆基因包括①調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因，使作物抗鹽堿、抗旱；②魚的抗凍蛋白基因使作物耐寒；③抗除草劑基因，使作物抗除草劑?！驹斘觥緼、抗逆轉(zhuǎn)基因作物技術(shù)使農(nóng)作物具有抗逆(如抗除草劑、抗蟲、抗病毒、抗干旱、抗鹽堿等)能力，因此，抗逆轉(zhuǎn)基因作物的培育和推廣在一定程度上可以使農(nóng)作物擺脫土壤和氣候條件的限制，A正確；B、抗逆轉(zhuǎn)基因作物不具有不具有固氮等特性，不會使土壤中無機(jī)鹽含量增加，因此仍需要施加化肥等，并不能減少了化肥的制造和使用量，B錯(cuò)誤；C、某些抗逆轉(zhuǎn)基因作物具有抗蟲、抗病毒、抗干旱等特性，減少了化學(xué)農(nóng)藥的使用，因此對環(huán)境的污染和人畜的危害也隨之降低，C正確；D、大多數(shù)抗逆轉(zhuǎn)基因作物具有許多抗逆特性，例如抗旱、抗鹽堿等，使得作物在不良環(huán)境下更好地生長，提高產(chǎn)量，D正確。故選B。二、不定項(xiàng)選擇題16.泡菜古稱“菹”，制作工藝歷史悠久。在制作傳統(tǒng)泡菜時(shí)，可以向泡菜壇中加入一些“陳泡菜水”，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.“泡菜壇”裝置可以進(jìn)行果酒的發(fā)酵B.制作泡菜時(shí)加入的“陳泡菜水”需要煮沸，目的是減少雜菌C.發(fā)酵過程中泡菜水的表面出現(xiàn)“白膜”可能是由于乳酸菌大量繁殖所致D.腌制方法、時(shí)間長短和溫度高低均會影響泡菜中亞硝酸鹽的含量〖答案〗BC〖祥解〗參與果酒的制作的微生物主要是酵母菌，其新陳代謝的類型為異養(yǎng)兼性厭氧型，較適宜的發(fā)酵溫度為18~30℃。在無氧的環(huán)境中酵母菌把糖類分解為酒精和二氧化碳。泡菜的制作原理：泡菜的制作離不開乳酸菌。在無氧條件下，乳酸菌將葡萄糖分解成乳酸。在泡菜制作的過程中，要注意控制腌制的時(shí)間、溫度和食鹽用量。溫度過高、食鹽用量過低、腌制時(shí)間過短，容易造成細(xì)菌大量繁殖，亞硝酸鹽含量增加。【詳析】A、泡菜壇水槽加水并扣上壇蓋，可隔絕空氣，利于果酒發(fā)酵過程中酵母菌的無氧呼吸，因此“泡菜壇”裝置可以進(jìn)行果酒的發(fā)酵，A正確；B、制作泡菜時(shí)加入的“陳泡菜水”目的是提供乳酸菌菌種，因此不需要煮沸，B錯(cuò)誤；C、發(fā)酵過程中泡菜水的表面出現(xiàn)“白膜”可能是由于產(chǎn)膜酵母大量繁殖所致，C錯(cuò)誤；D、腌制泡菜時(shí)，食鹽用量太少，時(shí)間過短、溫度過高都會導(dǎo)致泡菜中亞硝酸鹽的含量增加，因此腌制方法、時(shí)間長短和溫度高低均會影響泡菜中亞硝酸鹽的含量，D正確。故選BC。17.有機(jī)物X含C、H、O、N等元素，因難以降解會對環(huán)境造成污染。X在培養(yǎng)基中達(dá)到一定濃度時(shí)，培養(yǎng)基表現(xiàn)為不透明。某研究小組在從土壤中分離能降解X的細(xì)菌（目標(biāo)菌）的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上出現(xiàn)甲、乙兩個(gè)菌落（如圖所示）。下列分析正確的是（）A.配制的培養(yǎng)基中的物質(zhì)X是唯一的碳源和氮源B.該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基組分中需要加入凝固劑C.如果要獲得目標(biāo)菌種，應(yīng)該選擇乙菌落進(jìn)行進(jìn)一步純化D.可以用圖中培養(yǎng)基進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)目標(biāo)菌種〖答案〗ABC〖祥解〗培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。微生物培養(yǎng)基需要為微生物繁殖提供碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿足微生物對特殊營養(yǎng)物質(zhì)，pH和O2的需求。培養(yǎng)基按照功能可以分為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等。【詳析】A、由題干可知，有機(jī)物X含C、H、O、N等元素，若要篩選能降解X的細(xì)菌，則培養(yǎng)基中添加的物質(zhì)X應(yīng)作為唯一的碳源和氮源，A正確；B、該培養(yǎng)基以物質(zhì)X作為唯一的碳源和氮源，因此屬于選擇培養(yǎng)基，在該培養(yǎng)基上，能夠生長分解X的細(xì)菌菌落，因此應(yīng)為固體培養(yǎng)基，需要添加凝固劑，B正確；C、乙菌落周圍形成透明圈，說明乙菌落中的細(xì)菌能夠分解物質(zhì)X，物質(zhì)X濃度降低從而形成透明圈，因此如果要獲得目標(biāo)菌種，應(yīng)該選擇乙菌落進(jìn)行進(jìn)一步純化，C正確；D、若要進(jìn)一步擴(kuò)大培養(yǎng)目標(biāo)菌種，需要選擇富含物質(zhì)X的液體培養(yǎng)基，D錯(cuò)誤。故選ABC。18.科學(xué)家用植物體細(xì)胞雜交的方法得到番茄—馬鈴薯雜種植株，但是雜種植株沒有如科學(xué)家想象的那樣地上結(jié)番茄地下長馬鈴薯。下列說法正確的是（）A.番茄—馬鈴薯雜種植株使番茄和馬鈴薯之間可以進(jìn)行基因交流B.番茄—馬鈴薯雜種植株沒有同時(shí)體現(xiàn)出馬鈴薯和番茄的形態(tài)特征C.雜種植株沒有達(dá)到理想結(jié)果可能是因?yàn)檫z傳物質(zhì)的表達(dá)相互干擾D.利用嫁接技術(shù)可以得到地上結(jié)番茄，地下長馬鈴薯的結(jié)果〖答案〗CD〖祥解〗植物體細(xì)胞雜交是指將不同種的植物體細(xì)胞，在一定條件下融合成雜種細(xì)胞，并把雜種細(xì)胞培育成新的植物體的技術(shù)。誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法：物理法（離心、振動、電激等）和化學(xué)法（聚乙二醇等）。植物體細(xì)胞雜交的意義：克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，擴(kuò)大親本范圍，培育作物新品種?！驹斘觥緼、即使通過植物體細(xì)胞雜交技術(shù)獲得了番茄—馬鈴薯雜種植株，但兩者之間仍屬于兩個(gè)物種，不能進(jìn)行基因交流，A錯(cuò)誤；B、番茄—馬鈴薯雜種植株同時(shí)體現(xiàn)出馬鈴薯和番茄的形態(tài)特征，但并未同時(shí)體現(xiàn)出兩者的功能，B錯(cuò)誤；C、利用植物體細(xì)胞雜交技術(shù)培育“番茄—馬鈴薯”，結(jié)果并沒有預(yù)想中的“地上結(jié)番茄，地下長馬鈴薯”，可能是遺傳物質(zhì)表達(dá)相互干擾所致，C正確；D、嫁接技術(shù)屬于無性繁殖，若雜交成功，則可能得到地上結(jié)番茄，地下長馬鈴薯的結(jié)果，D正確。故選CD。19.如圖表示牛胚胎移植的流程，其中①～④表示相應(yīng)的操作過程。下列敘述正確的是（）A.①過程使受體母牛同期發(fā)情，主要為了保證犢牛有足夠的的母乳B.②過程是通過注射性激素，達(dá)到超數(shù)排卵C.③過程中精子需要培養(yǎng)在獲能液中獲能后才能受精D.④過程是為了避免受體母牛對外來胚胎產(chǎn)生免疫排斥〖答案〗C〖祥解〗分析題圖：①表示同期發(fā)情處理，②表示超數(shù)排卵，③表示體外受精，④表示胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)。【詳析】A、圖中過程①表示供、受體同期發(fā)情處理，使供體和受體處于相同的生理狀態(tài)，為胚胎移植奠定基礎(chǔ)，A錯(cuò)誤；B、②過程是通過注射促性腺激素，達(dá)到超數(shù)排卵的目的，B錯(cuò)誤；C、③過程中精子需要培養(yǎng)在獲能液中獲能后才能受精，且參與受精作用的卵細(xì)胞也要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期，C正確；D、過程④示胚胎的收集、檢查、培養(yǎng)，主要目的是選擇適合移植的胚胎，D錯(cuò)誤。故選C。20.基因工程是一種DNA操作技術(shù)，其表達(dá)載體的構(gòu)建和檢測篩選是兩個(gè)重要步驟。圖1為某種質(zhì)粒簡圖。已知目的基因X的兩端分別有ECORⅠ、BantHI的酶切位點(diǎn)。圖2表示運(yùn)用影印培養(yǎng)法（指在一系列平板培養(yǎng)基的相同位置上接種并培養(yǎng)出相同菌落的一種微生物培養(yǎng)方法）檢測表達(dá)載體是否導(dǎo)入大腸桿菌。下列敘述錯(cuò)誤的是（）限制廓識別序列及切制位點(diǎn)EcoRⅠ-G↓AATTC-BamHI-G↓GATCC-A.同時(shí)使用ECORⅠ和BantHI切割質(zhì)粒，可避免酶切后質(zhì)粒的自身環(huán)化B.轉(zhuǎn)化方法是將質(zhì)粒表達(dá)載體溶于緩沖液后與經(jīng)Ca2+處理的大腸桿菌混合C.培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別含有四環(huán)素和青霉素D.從篩選結(jié)果分析，菌落1、2、3、5含目的基因X〖答案〗CD〖祥解〗分析題圖：質(zhì)粒中含有兩個(gè)抗性基因，即四環(huán)素抗性基因和青霉素抗性基因，對質(zhì)粒進(jìn)行改造時(shí)，已將四環(huán)素抗性基因破壞，所以含重組質(zhì)粒的大腸桿菌能在含有青霉素的培養(yǎng)基上生存，但在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生存。【詳析】A、為避免酶切后質(zhì)粒的自身環(huán)化，可同時(shí)使用EcoRⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒，A正確；B、將質(zhì)粒表達(dá)載體溶于緩沖液后與經(jīng)Ca2+處理的大腸桿菌混合屬于轉(zhuǎn)化，B正確；CD、用EcoRⅠ和BamHⅠ兩種限制酶對質(zhì)粒進(jìn)行切割時(shí)，會破壞四環(huán)素抗性基因，但不會破壞青霉素抗性基因，因此導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌能在含有青霉素的培養(yǎng)基上能生存，但不能在含有四環(huán)素培養(yǎng)基上生存，所以培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別含有青霉素、四環(huán)素，含目的基因X的菌落是4和6，CD錯(cuò)誤。故選CD。第Ⅱ卷非選擇題21.啤酒是以大麥芽、啤酒花、水為主要原料，經(jīng)酵母發(fā)酵作用釀制而成的飽含二氧化碳的低酒精度酒。啤酒中的低分子糖和氨基酸很容易被吸收利用，在體內(nèi)產(chǎn)生大量的熱量，被稱為“液體面包”。圖1是啤酒生產(chǎn)工藝流程簡圖。（1）圖中焙烤的目的是降低麥芽水分，并______，然后去根制成成品麥芽。將粉碎的麥芽等原料用溫水分別在糊化罐、糖化罐中混合，調(diào)節(jié)溫度以制造麥汁，加水糊化之前粉碎成品麥芽的目的是______。（2）發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)。麥汁冷卻后再加入啤酒酵母使其發(fā)酵，冷卻的目的是______。在發(fā)酵過程中，要隨時(shí)檢測培養(yǎng)液中的微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等，以了解發(fā)酵進(jìn)程；并及時(shí)添加必需的營養(yǎng)物質(zhì)組分，其目的是______；還要嚴(yán)格控制_________等發(fā)酵條件（至少寫出3個(gè)），以獲得所需的發(fā)酵產(chǎn)物。（3）現(xiàn)代發(fā)酵工程使用的大型發(fā)酵罐均具有計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)，能使發(fā)酵全過程處于最佳狀態(tài)，圖2為發(fā)酵罐示意簡圖。發(fā)酵過程有機(jī)物分解釋放的能量會引起發(fā)酵罐溫度升高，常用冷卻水對發(fā)酵罐進(jìn)行溫度的調(diào)節(jié)，冷卻水進(jìn)入口和排出口分別是______（填圖2中的標(biāo)號，下同）。酵母菌酒精發(fā)酵過程中要“先通氣后密封”，通過空氣入口______來控制溶解氧。發(fā)酵還需要用排氣管調(diào)節(jié)罐壓，原因是______?！即鸢浮剑?）①.加熱殺死大麥種子胚但不使淀粉酶失活②.破碎有利于淀粉酶與淀粉充分接觸，提升反應(yīng)速率（2）①.防止接種時(shí)酵母菌被殺死②.延長菌體生長穩(wěn)定期的時(shí)間，以得到更多的發(fā)酵產(chǎn)物③.溫度、pH、溶解氧、通氣量與攪拌（3）①.③④②.⑤③.防止酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生的CO2，氣體將發(fā)酵罐中的液體培養(yǎng)基溢出，防止罐體氣壓過高引起爆裂〖祥解〗發(fā)酵罐內(nèi)的發(fā)酵，是發(fā)酵工程的中心環(huán)節(jié)，環(huán)境條件不僅會影響微生物的生長繁殖，還會影響微生物代謝物的形成，因此在發(fā)酵過程中，要隨時(shí)監(jiān)測培養(yǎng)液中微生物數(shù)量、產(chǎn)物濃度等以了解發(fā)酵進(jìn)程，還要及時(shí)添加必需的營養(yǎng)組分，要嚴(yán)格控制溫度、pH和溶氧量等發(fā)酵條件。【小問1詳析】大麥發(fā)芽后焙烤，焙烤溫度較高，除了可以降低麥芽水分，還可以殺死大麥種子胚阻止其進(jìn)一步萌發(fā)，同時(shí)還可以保留淀粉酶活性，以便后續(xù)進(jìn)行糖化操作。進(jìn)行糖化之前，對麥芽進(jìn)行粉碎，因?yàn)辂溠科扑楹?，更有利于淀粉酶與其中淀粉充分接觸，加速酶促反應(yīng)速率，提高糖化效率?！拘?詳析】糖化后獲得的麥汁組要冷卻降溫才能加入啤酒酵母，否則溫度過高容易殺死菌種。發(fā)酵過程中，由于營養(yǎng)物質(zhì)的不斷消耗，需要添加必需的營養(yǎng)物質(zhì)組分，以延長菌體生長穩(wěn)定期的時(shí)間，得到更多的發(fā)酵產(chǎn)物。溫度、pH、溶解氧、通氣量等均會影響發(fā)酵的進(jìn)程，因此除了補(bǔ)充必需的營養(yǎng)物質(zhì)組分外，還要嚴(yán)格控制溫度、pH、溶解氧、通氣量、攪拌等發(fā)酵條件?！拘?詳析】用冷卻水對發(fā)酵罐進(jìn)行溫度的調(diào)節(jié)，下口進(jìn)水，上口出水，遵循逆流原理，冷凝效果更好，因此冷卻水進(jìn)入口和排出口分別是③④。酒精發(fā)酵前期通氣，利于酵母菌繁殖，后期密封，利于酒精發(fā)酵，因此需要通過空氣入口⑤來控制溶解氧。酒精發(fā)酵過程中產(chǎn)生CO2，若不利用排氣管調(diào)節(jié)罐壓，則可能導(dǎo)致發(fā)酵罐內(nèi)氣壓過大，液體培養(yǎng)基溢出，甚至可能引起爆炸。22.某生物興趣小組開展了“分離土壤中分解尿素的細(xì)菌并進(jìn)行計(jì)數(shù)”的實(shí)驗(yàn)，主要過程如下。I．配制尿素固體培養(yǎng)基。配方：水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、NaH2PO4尿素、酚紅、瓊脂糖。（酚紅是一種酸堿指示劑，在酸性時(shí)呈黃色，堿性時(shí)呈紅色；瓊脂糖是一種鏈狀多糖，35~40℃時(shí)形成凝膠，90℃以上溶解；瓊脂主要成分是瓊脂糖和果膠，還有少量含氮化合物）Ⅱ．取施用尿素的農(nóng)田土壤1g裝入事先滅過菌的錐形瓶中。然后進(jìn)行梯度稀釋和接種培養(yǎng)，如下圖。（1）從功能上看，該固體培養(yǎng)基屬于______培養(yǎng)基，理由是______。（2）培養(yǎng)基中添加一定量的K2HPO4、NaH2PO4，它們的作用是______（至少說出兩點(diǎn)）。尿素固體培養(yǎng)基需用瓊脂糖做凝固劑而不用瓊脂的原因是______。（3）實(shí)驗(yàn)中用酚紅指示劑鑒別的原理是以尿素為氮源的微生物培養(yǎng)一段時(shí)間后，細(xì)菌產(chǎn)生的______（填物質(zhì)名稱）向周圍擴(kuò)散，將培養(yǎng)基中的尿素分解，產(chǎn)生的______使培養(yǎng)基中的酚紅由黃色變成紅色。（4）據(jù)上圖分析，接種所用的方法是______。若C試管和D試管對應(yīng)平板上菌落數(shù)分別為135個(gè)、133個(gè)、134個(gè)和25個(gè)、23個(gè)、24個(gè)，則可推測每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為______個(gè)。該實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置的對照組是______?！即鸢浮剑?）①.選擇②.尿素是唯一氮源，只允許能分解尿素的微生物生長（2）①.為微生物提供無機(jī)鹽，維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定②.瓊脂含有少量含氮化合物，為其他不能以尿素為氮源的微生物提供氮源，干擾篩選尿素分解菌（3）①.脲酶②.（4）①.稀釋涂布平板法②.③.不接種樣品稀釋液的平板（包括尿素培養(yǎng)基平板和牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基），接種樣品稀釋液的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基〖祥解〗培養(yǎng)基的配方不同，但是一般都含有碳源、氮源、無機(jī)鹽、水；篩選出能高效降解尿素的細(xì)菌，培養(yǎng)基中以尿素為唯一氮源；用稀釋涂布平板法對分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離和計(jì)數(shù)時(shí)，需要設(shè)置兩種對照：①空白培養(yǎng)基，②全營養(yǎng)培養(yǎng)基?！拘?詳析】該培養(yǎng)基中尿素是唯一氮源，只允許能分解尿素的微生物生長，因此從功能上看，該固體培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基?！拘?詳析】培養(yǎng)基中添加一定量的K2HPO4、NaH2PO4，它們是培養(yǎng)基中的無機(jī)鹽成分，可以為微生物提供無機(jī)鹽，還可以維持培養(yǎng)基的pH穩(wěn)定。要篩選出尿素分解菌，該培養(yǎng)基中只能以尿素為唯一氮源，尿素固體培養(yǎng)基需用瓊脂糖做凝固劑而不用瓊脂，因瓊脂中含有少量含氮化合物，為其他不能以尿素為氮源的微生物提供氮源，干擾篩選尿素分解菌?！拘?詳析】實(shí)驗(yàn)中用酚紅指示劑鑒別的原理是以尿素為氮源的微生物培養(yǎng)一段時(shí)間后，細(xì)菌產(chǎn)生的脲酶向周圍擴(kuò)散，將培養(yǎng)基中的尿素分解，產(chǎn)生的氨使培養(yǎng)基中pH升高，讓酚紅由黃色變成紅色。【小問4詳析】由圖示可知，上圖使用的是稀釋涂布平板法接種微生物。若C試管（稀釋了104倍）和D試管（稀釋了105倍）對應(yīng)平板上菌落數(shù)分別為135個(gè)、133個(gè)、134個(gè)和25個(gè)、23個(gè)、24個(gè)，由于計(jì)算時(shí)要選擇菌落數(shù)介于30到300之間的數(shù)據(jù)，因此D試管的數(shù)據(jù)不能用于計(jì)數(shù)，應(yīng)使用C試管的數(shù)據(jù)，求出菌落的平均值是134個(gè)，可推測每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)為134÷0.1×104=1.34×107個(gè)。該實(shí)驗(yàn)需要設(shè)置的對照組是不接種樣品稀釋液的平板（判斷培養(yǎng)基是否被污染），接種樣品稀釋液的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（判斷選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用）。23.研究者以某品種月季嫩芽為外植體，探究細(xì)胞分裂素和生長素誘導(dǎo)愈傷組織分化生芽的機(jī)制。（1）月季嫩芽接種前需要一般先用酒精消毒，立即用______清洗2～3次，然后再用次氯酸鈉消毒，并做同樣的清洗過程。嫩芽需經(jīng)過______形成愈傷組織，該過程是否體現(xiàn)了基因的選擇性表達(dá)？______。判斷依據(jù)是______。（2）不同激素比例的培養(yǎng)基上的愈傷組織的芽分化率（％）結(jié)果如表。芽分化率(%)IBA/(mg.L-1)0.10.20.30.40.56-BA/(mg.L-1)1.031635849412.040957669503.037756454414.025353130255.08211284據(jù)表中數(shù)據(jù)可知，______是細(xì)胞分裂素類激素，______是實(shí)驗(yàn)處理中芽分化的最佳組合。（3）愈傷組織生芽過程與A基因和W基因有關(guān)。為探討其中關(guān)系，將A基因功能缺失突變體（突變體a）和野生型月季的愈傷組織分別置于高6－BA培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生芽，在此過程中測定W基因的相對表達(dá)量如圖：由圖可知，野生型的W基因表達(dá)量與高6－BA誘導(dǎo)時(shí)間的關(guān)系是______。此外，在高6－BA誘導(dǎo)下A基因能促進(jìn)W基因表達(dá)，該結(jié)論的依據(jù)為：與野生型相比，______?！即鸢浮剑?）①.無菌水②.脫分化③.是④.月季嫩芽和愈傷組織的遺傳物質(zhì)相同，但是形態(tài)和結(jié)構(gòu)有很大不同（2）①.6-BA②.2.0mg·L?16-BA和0.2mg·L?1IBA（3）①.隨著高6-BA誘導(dǎo)時(shí)間的延長，野生型的W基因表達(dá)量顯著升高②.隨著高6-BA誘導(dǎo)時(shí)間的延長，突變體的W基因表達(dá)量低于野生型〖祥解〗1、由題干信息分析可知，該實(shí)驗(yàn)的目的是以芽體為外植體，探究在培養(yǎng)基中添加不同濃度的6-BA和IBA對芽體增殖的影響，實(shí)驗(yàn)組的自變量是6-BA和IBA的不同濃度，因變量是芽的分化情況。2、由表格數(shù)據(jù)分析可知，隨著6-BA濃度的增加，芽的分化率呈先上升后下降的趨勢；隨著IBA濃度的增加，芽的分化率同樣呈先上升后下降的趨勢，其中2.0mg?L-16-BA和0.2mg?L-1IBA是實(shí)驗(yàn)處理中芽分化的最佳組合?！拘?詳析】植物組織培養(yǎng)過程中，整個(gè)過程應(yīng)嚴(yán)格無菌無毒，首先需將外植體用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒30s后，用無菌水清洗2-3次，再用次氯酸鈉處理30min后，立即用無菌水清洗2-3次。嫩芽經(jīng)脫分化形成愈傷組織，脫分化過程發(fā)生了基因的選擇性表達(dá)，因?yàn)樵录灸垩亢陀鷤M織的遺傳物質(zhì)相同，但是形態(tài)和結(jié)構(gòu)有很大不同?！拘?詳析】在誘導(dǎo)愈傷組織分化出芽的過程中，細(xì)胞分裂素與生長素的比值高，表格中6-BA含量更高，屬于細(xì)胞分裂素類激素。6-BA濃度為2.0mg?L-1和IBA濃度為0.2mg?L-1時(shí)芽分化率是95%，故該組成是實(shí)驗(yàn)處理中芽分化的最佳組合。【小問3詳析】由圖分析可知，野生型的W基因表達(dá)量與高6-BA誘導(dǎo)時(shí)間的關(guān)系是隨著處理時(shí)間的延長，W基因的表達(dá)量顯著升高，突變體的W基因的表達(dá)量明顯少于對照組，說明在高6-BA誘導(dǎo)下A基因促進(jìn)W基因表達(dá)。24.在腫瘤患者的治療中，被動免疫治療適用于腫瘤晚期患者，主要分為單克隆抗體治療和過繼性細(xì)胞治療兩類。利用單克隆抗體和高效細(xì)胞毒類藥物結(jié)合生產(chǎn)的藥物ADC可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞。ADC的作用機(jī)制和過繼性細(xì)胞治療相關(guān)過程如下圖所示?；卮鹣铝袉栴}：（1）在單克隆抗體制備過程中，初步篩選出來的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行______和______才可以獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。（2）圖1中，表示單克隆抗體是______（填數(shù)字），與單純使用細(xì)胞毒類藥物相比，利用ADC治療腫瘤的優(yōu)勢是______。（3）圖2所示過繼性細(xì)胞治療中，可以用______（實(shí)驗(yàn)器材）將從腫瘤患者體內(nèi)獲取多種免疫細(xì)胞一一分離，對這些分離的細(xì)胞進(jìn)行單克隆培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)分裂受阻，其原因主要有______（答出2點(diǎn)），還有可能發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象。（4）過繼性細(xì)胞治療最后得到的能夠特異性地識別并處理腫瘤細(xì)胞的免疫細(xì)胞是______，這些細(xì)胞回輸后能有效避免免疫排斥的原因是______?！即鸢浮剑?）①.克隆化培養(yǎng)②.抗體檢測（2）①.①②.ADC能通過實(shí)現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，不對健康細(xì)胞造成傷害（3）①.96孔板②.細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累、培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏（4）①.細(xì)胞毒性T細(xì)胞②.這些免疫細(xì)胞來自自體，與人體細(xì)胞的組織相容性抗原相同〖祥解〗1、單克隆抗體的制備利用的技術(shù)有動物細(xì)胞培養(yǎng)和動物細(xì)胞融合，所利用的原理是細(xì)胞增殖和細(xì)胞膜的流動性。2、在該過程中需要進(jìn)行兩次篩選，最終才能獲得能產(chǎn)生所需抗體的雜交瘤細(xì)胞。3、ADC上的單克隆抗體可以特異性識別腫瘤細(xì)胞表面的抗原，從而實(shí)現(xiàn)了對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷?！拘?詳析】單克隆抗體制備過程中兩次篩選，第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞，用特定的選擇培養(yǎng)基，未融合的親本細(xì)胞、融合的具有同種核的細(xì)胞都死亡，只有融合的雜交瘤細(xì)胞才能生長；第二次篩選出能合成特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，以克隆化培養(yǎng)和抗體檢測的方法進(jìn)行，選擇抗體檢測陽性的雜交瘤細(xì)胞?！拘?詳析】ADC通常由抗體、接頭和藥物三部分組成，圖1中①表示單克隆抗體。ADC治療腫瘤的優(yōu)勢是ADC能通過實(shí)現(xiàn)對腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，不對健康細(xì)胞造成傷害?！拘?詳析】圖2所示過繼性細(xì)胞治療中，可以用96孔板將從腫瘤患者體內(nèi)獲取多種免疫細(xì)胞一一分離。由于培養(yǎng)液中細(xì)胞密度過大、有害代謝物積累、培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)缺乏，對細(xì)胞進(jìn)行單克隆培養(yǎng)過程中會出現(xiàn)分裂受阻，還有可能發(fā)生接觸抑制現(xiàn)象。【小問4詳析】細(xì)胞毒性T細(xì)胞可以特異性識別并處理裂解腫瘤細(xì)胞；由于這些免疫細(xì)胞來自自體，與人體細(xì)胞的組織相容性抗原相同，則這些細(xì)胞回輸后能有效避免免疫排斥。25.甘藍(lán)型油菜中，抑制PEP基因的表達(dá)可提高油菜籽的含油量。通過基因工程將PEP基因反向連接在啟動子后，構(gòu)建轉(zhuǎn)反義PEP基因油菜是提高油菜籽含油量的常用技術(shù)路徑。請回答下列問題：（1）為將PEP基因反向連接在啟動子后，構(gòu)建反義PEP基因，需要將限制酶酶切位點(diǎn)設(shè)計(jì)在引物上，PEP基因的上游引物和下游引物中應(yīng)分別引入______酶切位點(diǎn)。（2）該實(shí)驗(yàn)選用Ti質(zhì)粒作為載體，除了它具有啟動子等基因表達(dá)載體必備結(jié)構(gòu)外，還因?yàn)開_____。用激光照射油菜愈傷組織時(shí)，可在細(xì)胞膜上打出一個(gè)穿孔，帶有轉(zhuǎn)反義PEP基因的Ti質(zhì)粒由此小孔進(jìn)入油菜細(xì)胞，幾秒鐘后小孔封閉，該過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有______。篩選時(shí)，在激光照射下，Ti質(zhì)粒導(dǎo)入成功的細(xì)胞一般會發(fā)出______。（3）為檢測反義PEP基因是否進(jìn)入細(xì)胞，研究者通常檢測細(xì)胞中是否存在ntp基因，而不檢測PEP基因，其原因是______。已知PEP基因的轉(zhuǎn)錄模板鏈為A鏈，則反義PEP基因的轉(zhuǎn)錄模板為______。轉(zhuǎn)反義PEP基因油菜中PEP基因的表達(dá)受阻，原因是______?！即鸢浮剑?）ScaⅠ、BamHⅠ（2）①.進(jìn)入細(xì)胞后，Ti質(zhì)粒上的T-DNA能整合到油菜細(xì)胞的染色體上②.流動性③.綠色熒光（3）①.油菜細(xì)胞的基因組中本身有PEP基因②.B鏈③.以B鏈為模板轉(zhuǎn)錄出的RNA與以A鏈為模板轉(zhuǎn)錄出的RNA配對形成雙鏈，抑制了PEP基因的翻譯過程〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法；（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因—DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA—分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原—抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【小問1詳析】為將PEP基因反向連接在啟動子后，構(gòu)建反義PEP基因，根據(jù)圖中啟動子好終止子的位置以及質(zhì)粒上的限制酶種類分析，若要構(gòu)成反義PEP基因表達(dá)載體，需要將限制酶切位點(diǎn)設(shè)計(jì)在引物上，結(jié)合圖示可知，PEP基因的上游引物和下游引物中應(yīng)分別引入ScaI、HamHI酶切位點(diǎn)?！拘?詳析】用Ti質(zhì)粒作為載體，除了它具有啟動子等基因表達(dá)載體必備結(jié)構(gòu)外，還因?yàn)檫M(jìn)入細(xì)胞后，Ti質(zhì)粒上的T-DNA能整合到油菜細(xì)胞的染色體上。用激光照射油菜愈傷組織時(shí)，可在細(xì)胞膜上打出一個(gè)穿孔，轉(zhuǎn)反義PEP基因表達(dá)載體由此小孔進(jìn)入油菜細(xì)胞，幾秒種后小孔封閉，該過程依賴細(xì)胞膜具有一定的流動性來實(shí)現(xiàn)。由于Ti質(zhì)粒上含有綠色熒光蛋白基因，故篩選時(shí)，在激光照射下，Ti質(zhì)粒導(dǎo)入成功的細(xì)胞一般會發(fā)出綠色熒光?！拘?詳析】檢測反義PEP基因是否整合到染色體上，研究者通常用檢測細(xì)胞中是否存在ntp基因（新霉素抗性基因），而不檢測PEP基因。不直接檢測PEP基因的原因是油菜細(xì)胞的基因組中本身有PEP基因，而沒有ntp基因，而ntp基因的存在能說明目的基因成功導(dǎo)入。已知PEP基因的轉(zhuǎn)錄模板鏈為A鏈，由于目的基因進(jìn)行了反接，則反義PEP基因的轉(zhuǎn)錄模板為B鏈，進(jìn)而使轉(zhuǎn)反義PEP基因油菜中PEP基因的表達(dá)受阻，因?yàn)橐訠鏈為模板轉(zhuǎn)錄出的RNA與以A鏈為模板轉(zhuǎn)錄出的RNA配對形成雙鏈，抑制了PEP基因的翻譯過程，進(jìn)而無法表達(dá)，從而實(shí)現(xiàn)了油菜籽中含油量的提高。山東省臨沂市六縣聯(lián)考2022-2023學(xué)年高二下學(xué)期期中試題一、選擇題1.關(guān)于白酒、啤酒和果酒的生產(chǎn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣B.白酒、啤酒和果酒釀制的過程也是微生物生長繁殖的過程C.葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶既存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，也存在于線粒體D.生產(chǎn)白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但發(fā)酵過程中起主要作用的都是酵母菌〖答案〗C〖祥解〗果酒的制作離不開酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型生物，在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖，在無氧條件下，酵母菌進(jìn)行酒精發(fā)酵?！驹斘觥緼、在白酒、啤酒和果酒的發(fā)酵初期需要提供一定的氧氣，讓酵母菌大量繁殖，再進(jìn)行酒精發(fā)酵，A正確；B、白酒、啤酒和果酒釀制的過程也是微生物生長繁殖的過程，如發(fā)酵初期酵母菌大量繁殖，B正確；CD、酒精發(fā)酵利用的菌種是酵母菌，葡萄糖轉(zhuǎn)化為乙醇所需的酶存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)，不存在線粒體中，C錯(cuò)誤，D正確。故選C。2.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止雜菌污染，無菌技術(shù)在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中有著廣泛的應(yīng)用。下列敘述正確的是（）A.動植物細(xì)胞DNA的提取必須在無菌條件下進(jìn)行B.微生物、動物細(xì)胞培養(yǎng)基（液）中需添加一定量的抗生素以防止污染C.為防止蛋白質(zhì)變性，不能用濕熱滅菌法對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌D.用紫外線進(jìn)行消毒時(shí)，適量噴灑石炭酸等消毒液可以加強(qiáng)消毒效果〖答案〗D〖祥解〗消毒和滅菌是兩個(gè)不同的概念，消毒是指使用較為溫和的物理、化學(xué)或生物的方法殺死物體表面或內(nèi)部的一部分微生物。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。消毒方法包括煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法；常用的滅菌方法包括干熱滅菌法、灼燒滅菌法、濕熱滅菌法（如高壓蒸汽滅菌法）?！驹斘觥緼、動、植物細(xì)胞DNA的提取不需要在無菌條件下進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、動物細(xì)胞培養(yǎng)基中可以添加一定量的抗生素以防止污染，保證無菌環(huán)境，而微生物的培養(yǎng)不能加入抗生素，B錯(cuò)誤；C、一般用濕熱滅菌法（例如高壓蒸汽滅菌法）對牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，以防止雜菌污染，C錯(cuò)誤；D、用紫外線照射30min，可以殺死物體表面或空氣中的微生物，在照射前，適量噴灑石炭酸等消毒液，可以加強(qiáng)消毒效果，D正確。故選D。3.聚羥基脂肪酸酯（PHA）是由某些嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯，具有類似于合成塑料的物化特性及合成塑料所不具備的生物可降解性，可用于制造無污染的“綠色塑料”?？茖W(xué)家從某咸水湖中尋找生產(chǎn)PHA菌種的流程圖如下。下列說法正確的是（）A.步驟①取湖水接種到含合成塑料的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選B.步驟②如用稀釋涂布平板法接種，需用涂布器蘸取少量湖水均勻地涂布在培養(yǎng)基的表面C.步驟③應(yīng)將培養(yǎng)基置于37℃恒溫下培養(yǎng)，長出的菌落均能夠合成PHAD.步驟④挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量〖答案〗D〖祥解〗稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基表面，進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落?！驹斘觥緼、結(jié)合題干“聚羥基脂肪酸酯（PHA）是由某些嗜鹽細(xì)菌合成的一種胞內(nèi)聚酯”可知，步驟①取湖水接種到含鹽量較高的選擇培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選，A錯(cuò)誤；B、若步驟②用稀釋涂布平板法接種，需要將菌液滴在培養(yǎng)基上，再用涂布器涂布均勻，B錯(cuò)誤；C、步驟③應(yīng)將培養(yǎng)基置于37℃恒溫下培養(yǎng)，長出的菌落不一定都能夠合成PHA，需要通過步驟④進(jìn)一步測定，C錯(cuò)誤；D、為獲得高產(chǎn)PHA的菌種，步驟④挑取菌落時(shí)，應(yīng)挑取多個(gè)菌落并分別測定嗜鹽細(xì)菌的PHA含量，以確定高產(chǎn)菌株，D正確。故選D。4.為了探究日常售賣的冰激凌中大腸桿菌含量是否超標(biāo)，某生物興趣小組設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)：制備伊紅－亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基（生長在此培養(yǎng)基上的大腸桿菌菌落呈深紫色）→取10ml剛?cè)诨耐N冰激凌作為原液→用稀釋涂布平板法接種→適宜條件下培養(yǎng)、觀察→出現(xiàn)了不同形態(tài)、顏色的菌落。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)先滅菌再調(diào)節(jié)pH至弱酸性B.用稀釋涂布平板法接種后，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少C.該實(shí)驗(yàn)制備的培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，需要設(shè)計(jì)不接種的空白培養(yǎng)基作為對照組D.培養(yǎng)基上出現(xiàn)了不同形態(tài)、顏色的菌落說明除了大腸桿菌之外還有其他雜菌污染〖答案〗A〖祥解〗利用稀釋涂布平板法得到數(shù)值往往偏小，因?yàn)楫?dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。微生物培養(yǎng)基需要為微生物繁殖提供碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿足微生物對特殊營養(yǎng)物質(zhì)，pH和O2的需求。培養(yǎng)基按照功能可以分為選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等?！驹斘觥緼、配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時(shí)先調(diào)節(jié)pH至弱酸性再滅菌，如果滅菌后調(diào)pH，有可能會引入雜菌，A錯(cuò)誤；B、用稀釋涂布平板法接種后，當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目少，B正確；

C、大腸桿菌在伊紅－亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基上的菌落呈深紫色，因此可推知該培養(yǎng)基為鑒別培養(yǎng)基，需要設(shè)計(jì)不接種的空白培養(yǎng)基作為對照組，來檢驗(yàn)培養(yǎng)基滅菌是否合格，C正確；D、不同微生物形成的菌落形態(tài)大小顏色不同，培養(yǎng)基上有不同形態(tài)、顏色的菌落，說明有雜菌污染，D正確。故選A。

5.發(fā)酵工程在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)、農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.食用醬油的制作以大豆為主要原料，利用能產(chǎn)生蛋白酶的黑曲霉將蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和氨基酸，然后經(jīng)淋洗、調(diào)制而成B.啤酒發(fā)酵的過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段，酵母菌的繁殖在主發(fā)酵階段完成，大部分糖的分解和代謝物的生成在后發(fā)酵階段完成C.谷氨酸的發(fā)酵生產(chǎn)在中性和微堿性條件下積累谷氨酸，在酸性條件下容易形成谷氨酰胺和N－乙酰谷胺酰胺D.在青貯飼料中添加乳酸菌，可以提高飼料的品質(zhì)，使飼料保鮮，動物食用后還能提高免疫力〖答案〗B〖祥解〗研究表明，微生物含有豐富的蛋白質(zhì)，如細(xì)菌的蛋白質(zhì)含量占細(xì)胞干重的60%?80%，而且細(xì)菌生長繁殖速度很快。因此，許多國家以淀粉或纖維素的水解液、制糖工業(yè)的廢液等為原料，通過發(fā)酵獲得了大量的微生物菌體，即單細(xì)胞蛋白。用酵母菌等生產(chǎn)的單細(xì)胞蛋白可以作為食品添加劑；用單細(xì)胞蛋白制成的微生物飼料，能使家畜、家禽增重快，產(chǎn)奶或產(chǎn)蛋量顯著提高。另外，在青貯飼料中添加乳酸菌，可以提高飼料的品質(zhì)，使飼料保鮮，動物食用后還能提高免疫力?！驹斘觥緼、生產(chǎn)醬油的菌種主要是黑曲霉，原料主要是大豆，黑曲霉產(chǎn)生的蛋白酶能將蛋白質(zhì)分解成小分子肽和氨基酸，更容易被消化吸收，最后經(jīng)過淋洗調(diào)制成醬油，A正確；B、啤酒發(fā)酵的過程分為主發(fā)酵和后發(fā)酵兩個(gè)階段，酵母菌的繁殖在主發(fā)酵階段完成，大部分糖的分解和代謝物的生成也在主發(fā)酵階段完成，后發(fā)酵主要指的是后期調(diào)風(fēng)味等過程，B錯(cuò)誤；C、谷氨酸是谷氨酸棒狀桿菌產(chǎn)生的，谷氨酸棒狀桿菌是細(xì)菌，在中性和微堿性條件下積累谷氨酸，在酸性條件下容易形成谷氨酰胺和N－乙酰谷胺酰胺，C正確；D、微生物含有豐富的蛋白質(zhì)，如細(xì)菌的蛋白質(zhì)含量占細(xì)胞干重的60%?80%，而且細(xì)菌生長繁殖速度很快，在青貯飼料中添加乳酸菌，可以提高飼料的品質(zhì)，使飼料保鮮，動物食用后還能提高免疫力，D正確。故選B。6.科研人員利用莖尖培育脫毒馬鈴薯，測得馬鈴薯莖尖外植體大小對幼苗的成苗率和脫毒率的影響如圖。下列敘述正確的是（）A.脫毒苗具有抗病毒的能力B.培育脫毒苗需要使用纖維素酶和果膠酶C.該實(shí)驗(yàn)涉及到1個(gè)自變量，2個(gè)因變量D.根據(jù)本實(shí)驗(yàn)可知，大規(guī)模生產(chǎn)脫毒苗時(shí)莖尖越小越好〖答案〗C〖祥解〗脫毒苗是選擇植物的分生區(qū)，如莖尖(剛形成，病毒含量極少，甚至無病毒)進(jìn)行組織培養(yǎng)而獲得的，屬于細(xì)胞工程的范疇?！驹斘觥緼、培育的脫毒苗只是體內(nèi)不含病毒，但它不具有抗病毒的能力，A錯(cuò)誤；B、脫毒苗的培育不需要使用纖維素酶和果膠酶，B錯(cuò)誤；C、該實(shí)驗(yàn)自變量為馬鈴薯莖尖外植體大小，因變量為成苗率和脫毒率，涉及到1個(gè)自變量，2個(gè)因變量，C正確；D、圖中數(shù)據(jù)顯示,在莖尖外植體大小為0.27mm時(shí)，脫毒率和成苗率均較高，因此馬鈴薯脫毒培養(yǎng)中莖尖外植體的適宜大小為0.27mm左右，D錯(cuò)誤。故選C。7.下列關(guān)于植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞融合比較的敘述，正確的是（）A.過程中都涉及細(xì)胞膜流動性，都需要酶將細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞B.都可以用PEG融合法或滅活病毒誘導(dǎo)法誘導(dǎo)融合C.兩種雜交細(xì)胞都能獲得雜交前2個(gè)細(xì)胞的全部優(yōu)勢D.前者主要是為了獲得雜種植株，后者主要是為了獲得細(xì)胞產(chǎn)品〖答案〗D〖祥解〗誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合前，先要采用酶解法（纖維素酶和果膠酶）去除細(xì)胞壁，獲得原生質(zhì)體；誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合時(shí)，可以采用物理方法（電激、振動等）和化學(xué)方法（聚乙二醇）。【詳析】A、動物細(xì)胞融合前需用胰蛋白酶處理使細(xì)胞分散開，而植物體細(xì)胞雜交前需要用纖維素酶和果膠酶去除細(xì)胞壁，A錯(cuò)誤；B、都可以用PEG融合法誘導(dǎo)融合，滅活病毒誘導(dǎo)法只用于動物細(xì)胞融合，B錯(cuò)誤；C、由于不同來源的遺傳物質(zhì)會相互影響，則兩種雜交細(xì)胞不一定獲得兩種細(xì)胞的全部優(yōu)勢，C錯(cuò)誤；D、動物細(xì)胞融合技術(shù)主要是為了獲得細(xì)胞產(chǎn)品，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)主要是為了獲得雜種植株，D正確。故選D。8.下圖為某哺乳動物受精作用及胚胎發(fā)育過程示意圖。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.卵子成熟和①過程發(fā)生在雌性動物的輸卵管中B.②③④過程都發(fā)生有絲分裂，b時(shí)期胚胎發(fā)生孵化C.桑葚胚細(xì)胞具有全能性，a時(shí)期細(xì)胞開始出現(xiàn)分化D.在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙觀察到兩個(gè)極體，是完成受精的標(biāo)志〖答案〗B〖祥解〗胚胎發(fā)育的過程：受精卵→卵裂期→桑葚胚→囊胚→原腸胚→幼體。過程①為受精作用，過程②③④為早期胚胎發(fā)育，a為囊胚，b為原腸胚?！驹斘觥緼、卵子的成熟及精子和卵細(xì)胞的相互結(jié)合發(fā)生在雌性動物的輸卵管中，A正確；B、②③④是受精卵的卵裂，發(fā)生有絲分裂，a時(shí)期囊胚期發(fā)生孵化現(xiàn)象，B錯(cuò)誤；C、桑葚胚細(xì)胞尚未分化，實(shí)驗(yàn)證實(shí)，這一階段前的每一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整胚胎的潛能，a是囊胚期，此時(shí)細(xì)胞開始出現(xiàn)分化，C正確；D、判斷卵子是否受精的標(biāo)志是在卵細(xì)胞膜和透明帶的間隙觀察到兩個(gè)極體，D正確。故選B。9.下圖是利用體細(xì)胞核移植技術(shù)克隆優(yōu)質(zhì)奶牛的簡易流程圖，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.①過程需在通入較高氧氣的培養(yǎng)箱培養(yǎng)，培養(yǎng)液中需要CO2維持pHB.②過程的細(xì)胞通常是次級卵母細(xì)胞，常使用顯微操作去核C.可通過電融合法使細(xì)胞融合，③過程可用Ca2+載體激活重構(gòu)胚D.分割囊胚時(shí)要保證內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，應(yīng)取滋養(yǎng)層細(xì)胞鑒定性別〖答案〗A〖祥解〗分析圖解：圖示過程為體細(xì)胞克隆過程，取甲牛體細(xì)胞，對處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞去核，然后進(jìn)行細(xì)胞核移植；融合后的細(xì)胞激活后培養(yǎng)到早期胚胎，再進(jìn)行胚胎移植，最終得到克隆牛?！驹斘觥緼、①過程需需要向CO2培養(yǎng)箱中通入95%的空氣和5%的CO2，培養(yǎng)液中需要CO2維持pH，A錯(cuò)誤；B、過程②常使用顯微操作去核法對處于減數(shù)第二次分裂中期的卵母細(xì)胞進(jìn)行去核處理，B正確；C、去核的卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞通過電融合法融合，供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞，形成重構(gòu)胚，重構(gòu)胚需要用物理或化學(xué)的方法進(jìn)行激活，使其完成細(xì)胞分裂和發(fā)育進(jìn)程，C正確；D、對囊胚階段的胚胎進(jìn)行分割時(shí)，要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，若不能將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，則會出現(xiàn)含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)多的部分正常發(fā)育的能力強(qiáng)，含內(nèi)細(xì)胞團(tuán)少的部分發(fā)育受阻或發(fā)育不良，甚至不能發(fā)育等問題，取滋養(yǎng)層細(xì)胞鑒定性別，D正確。故選A。10.關(guān)于生物技術(shù)與工程的應(yīng)用，下列不符合人類倫理道德觀念的是（）A.利用克隆技術(shù)為不孕不育患者克隆人B.利用試管嬰兒提供骨髓造血干細(xì)胞，救治病人C.利用現(xiàn)代生物技術(shù)有效確認(rèn)身份和偵破案件D.設(shè)計(jì)試管嬰兒，避免遺傳病患兒的出生〖答案〗A〖祥解〗轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題：食物安全（滯后效應(yīng)、過敏源、營養(yǎng)成分改變）、生物安全（對生物多樣性的影響）、環(huán)境安全（對生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的影響）。對待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的正確做法是趨利避害，不能因噎廢食。【詳析】A、克隆人可沖擊現(xiàn)有的婚姻、家庭和兩性關(guān)系等傳統(tǒng)倫理道德觀念，不符合人類倫理道德觀念，A符合題意；B、利用試管嬰兒提供骨髓造血干細(xì)胞，救治病人合乎道德規(guī)范，B不符合題意；C、利用PCR技術(shù)可以有效確認(rèn)身份和偵破案件，符合人類倫理道德觀念，C不符合題意；D、設(shè)計(jì)嬰兒性別可以避免某些伴性遺傳病如紅綠色盲、抗維生素D佝僂病等患兒的出生，符合人類倫理道德觀念，D不符合題意。故選A。11.下面是幾種不同限制性內(nèi)切核酸酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.以上DNA片段由4種限制酶切割后產(chǎn)生B.②片段是在識別序列為的限制酶作用下形成的C.①和④兩個(gè)片段在Ｔ4DNA連接酶的作用下不能連接形成重組DNA分子D.限制酶、DNA連接酶和DNA聚合酶作用的部位都是磷酸二酯鍵〖答案〗B〖祥解〗1、基因工程的工具有限制酶、DNA連接酶、基因的載體。限制酶識別DNA分子中特定核苷酸序列，在特定的部位將兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、圖中①②④是黏性末端，③是平末端。【詳析】A、堿基序列具有方向性，圖中①④的黏性末端不能互補(bǔ)配對，是兩種種限制酶切割的產(chǎn)物；②是第三種限制酶切割的部分產(chǎn)物；③是第四種限制酶切割的部分產(chǎn)物，共是由4種限制酶切割后產(chǎn)生的，A正確；B、②片段是在酶切位點(diǎn)為的限制酶作用下形成的，B錯(cuò)誤；C、堿基序列具有方向性，圖中①④的黏性末端不能互補(bǔ)配對，在Ｔ4DNA連接酶的作用下不能連接形成重組DNA分N子，C正確；D、限制酶識別DNA分子中特定核苷酸序列，在特定的部位將兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開；DNA聚合酶和DNA連接酶是催化磷酸二酯鍵的形成，都是作用于磷酸二酯鍵，D正確。故選B。12.質(zhì)粒是基因工程中最常用的運(yùn)載體，它存在于許多細(xì)菌體內(nèi)。質(zhì)粒上有標(biāo)記基因如圖所示，通過標(biāo)記基因可以推知外源基因（目的基因）是否轉(zhuǎn)移成功。外源基因插入的位置不同，細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長情況也不同，下表是外源基因插入位置（插入點(diǎn)有a、b、c），請根據(jù)表中提供細(xì)菌的生長情況，推測①②③三種重組后細(xì)菌的外源基因插入點(diǎn)，正確的一組是（）細(xì)菌在含青霉素培養(yǎng)基上生長情況細(xì)菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基上生長情況①能生長能生長②能生長不能生長③不能生長能生長A.①是c；②是b；③是a B.①是a和b；②是a；③是bC.①是a和b；②是b；③是a D.①是c；②是a；③是b〖答案〗A〖祥解〗分析圖形可知：（1）a是抗青霉素基因，如果外源基因插入到a中，此基因結(jié)構(gòu)被破壞，細(xì)菌無抗氨芐青霉素能力。將細(xì)菌放入含有氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長，則會死亡；相反，會存活。（2）b是抗四環(huán)素基因，如果外源基因插入到b中，抗四環(huán)素基因結(jié)構(gòu)被破壞，細(xì)菌無抗四環(huán)素能力。將細(xì)菌放入含有四環(huán)素培養(yǎng)基上生長，則會死亡；相反，會存活?！驹斘觥康冖俳M：細(xì)胞能在含青霉素培養(yǎng)基上生長，說明抗青霉素基因沒有被破壞；細(xì)菌能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗四環(huán)素基因沒有被破壞。由此可知，外源基因插入的位置不是a、b，而是c；第②組：細(xì)胞能在含青霉素培養(yǎng)基上生長，說明抗青霉素基因沒有被破壞；細(xì)菌不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗四環(huán)素基因被破壞。說明了外源基因插入位置是b，不是a；第③組：細(xì)胞不能在含青霉素培養(yǎng)基上生長，能在含四環(huán)素培養(yǎng)基上的生長，說明抗青霉素基因被破壞，抗四環(huán)素基因沒有被破壞，由此可知，外源基因插入的位置是a，而不是b。故選A?！尽狐c(diǎn)石成金』】13.下圖是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖，質(zhì)粒P0有四環(huán)素抗性基因（tetr）和氨芐青霉素抗性基因（ampr），ECoRV酶切位點(diǎn)為。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.ECoRV酶切出來的線性載體P1兩端為平末端B.載體P1需要添加與目的基因片段兩端互補(bǔ)的脫氧核苷酸才能與其連接C.目的基因與P2可能反向連接會導(dǎo)致目的基因產(chǎn)物不能合成D.只有成功導(dǎo)入P3的受體細(xì)胞才能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上增殖〖答案〗D〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是鈣離子處理法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測；①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳析】A、由題干可知，ECoRV酶切位點(diǎn)為，可推知其酶切出來的線性載體P1兩端為平末端，A正確；B、由圖可知，目的基因兩側(cè)是黏性末端，質(zhì)粒P0經(jīng)ECoRV酶切后獲得的載體P1為平末端，因此載體P1需要添加與目的基因片段兩端互補(bǔ)的脫氧核苷酸才能與其連接，B正確；C、目的基因和載體P1兩端若都是用同種限制酶進(jìn)行酶切，其兩側(cè)黏性末端相同，這會導(dǎo)致目的基因與P2可能反向連接，則目的基因產(chǎn)物不能合成，C正確；D、導(dǎo)入P3的受體細(xì)胞以及導(dǎo)入空白載體P2的受體細(xì)胞都含有氨芐青霉素抗性基因（ampr），因此都能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上增殖，D錯(cuò)誤。故選D。14.RT-PCR是以提取的RNA為模板，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄獲得與之互補(bǔ)的DNA（cDNA）序列，再以cDNA序列為模板進(jìn)行目的片段的擴(kuò)增。具體過程如圖所示。以下有關(guān)RT-PCR的敘述正確的是（）A.過程1需要使用耐高溫的DNA聚合酶B.過程2中的引物B可與mRNA互補(bǔ)配對C.游離的脫氧核苷酸只能加到引物的5'端D.RT-PCR可用于對RNA病毒的檢測與鑒定〖答案〗D〖祥解〗PCR原理：在解旋酶作用下，打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4種游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈?！驹斘觥緼、過程①是由mRNA形成單鏈DNA的過程，為逆轉(zhuǎn)錄，該過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶，A錯(cuò)誤；B、引物可以在DNA分子過程中起作用，過程2中的引物B可與DNA互補(bǔ)配對，進(jìn)行DNA分子的復(fù)制，B錯(cuò)誤；C、游離的脫氧核苷酸只能從引物的3'端開始連接，C錯(cuò)誤；D、利用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR技術(shù)對某些微量RNA病毒進(jìn)行檢測，并可提高檢測的靈敏度（因?yàn)樵黾恿舜郎yRNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量，便于檢測），D正確。故選D。15.基因工程提供了新的育種方法?？鼓孓D(zhuǎn)基因作物的培育與推廣帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)和社會效益。下列說法錯(cuò)誤的是（）A.在一定程度上使作物擺脫了土壤和氣候條件的限制B.減少了化肥的制造和使用量，有利于環(huán)境保護(hù)C.減少了化學(xué)農(nóng)藥對環(huán)境的污染和人畜的危害D.使得作物在不良環(huán)境下更好地生長，提高產(chǎn)量〖答案〗B〖祥解〗抗逆轉(zhuǎn)基因植物：各種抗逆基因包括①調(diào)節(jié)細(xì)胞滲透壓的基因，使作物抗鹽堿、抗旱；②魚的抗凍蛋白基因使作物耐寒；③抗除草劑基因，使作物抗除草劑。【詳析】A、抗逆轉(zhuǎn)基因作物技術(shù)使農(nóng)作物具有抗逆(如抗除草劑、抗蟲、抗病毒、抗干旱、抗鹽堿等)能力，因此，抗逆轉(zhuǎn)基因作物的培育和推廣在一定程度上可以使農(nóng)作物擺脫土壤和氣候條件的限制，A正確；B、抗逆轉(zhuǎn)基因作物不具有不具有固氮等特性，不會使土壤中無機(jī)鹽含量增加，因此仍需要施加化肥等，并不能減少了化肥的制造和使用量，B錯(cuò)誤；C、某些抗逆轉(zhuǎn)基因作物具有抗蟲、抗病毒、抗干旱等特性，減少了化學(xué)農(nóng)藥的使用，因此對環(huán)境的污染和人畜的危害也隨之降低，C正確；D、大多數(shù)抗逆轉(zhuǎn)基因作物具有許多抗逆特性，例如抗旱、抗鹽堿等，使得作物在不良環(huán)境下更好地生長，提高產(chǎn)量，D正確。故選B。二、不定項(xiàng)選擇題16.泡菜古稱“菹”，制作工藝歷史悠久。在制作傳統(tǒng)泡菜時(shí)，可以向泡菜壇中加入一些“陳泡菜水”，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.“泡菜壇”裝置可以進(jìn)行果酒的發(fā)酵B.制作泡菜時(shí)加入的“陳泡菜水”需要煮沸，目的是減少雜菌C.發(fā)酵過程中泡菜水的表面出現(xiàn)“白膜”可能是由于乳酸菌大量繁殖所致D.腌制方法、時(shí)間長短和溫度高低均會影響泡菜中亞硝酸鹽的含量〖答案〗BC〖祥解〗