2022-2023學(xué)年山東省日照市高二下學(xué)期期中校際聯(lián)合考試生物試題（解析版）

高中生物名校試卷PAGEPAGE1山東省日照市2022-2023學(xué)年高二下學(xué)期期中校際聯(lián)合考試試題一、選擇題：1.《說文解字》中提到“菹菜者，酸菜也”。泡菜是我國的傳統(tǒng)食品，下列敘述正確的是（）A.為了減少雜菌污染，發(fā)酵前需要對(duì)器具和蔬菜進(jìn)行消毒B.為了保證泡菜壇內(nèi)的無氧環(huán)境，腌制時(shí)應(yīng)將泡菜壇裝滿C.加入煮沸過的鹽水可減少其中的溶氧量并除去部分雜菌D.泡菜壇內(nèi)出現(xiàn)了一層白膜可能是乳酸菌大量繁殖形成的〖答案〗C〖祥解〗泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗?。泡菜的制作流程是：選擇原料、配置鹽水、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵?！驹斘觥緼、為了降低雜菌污染的風(fēng)險(xiǎn)，發(fā)酵前需要對(duì)器具進(jìn)行消毒，對(duì)蔬菜不需要消毒，A錯(cuò)誤；B、泡菜腌制時(shí)應(yīng)裝至八成滿，以防止發(fā)酵液溢出，B錯(cuò)誤；C、泡菜制作過程中，需要加入煮沸冷卻后的水，目的是減少其中的溶氧量并除去部分雜菌，C正確；D、在泡菜壇內(nèi)液體表面有時(shí)會(huì)出現(xiàn)一層白膜，這層白膜是由酵母菌大量繁殖所致，D錯(cuò)誤。故選C。2.釀酒用的酒曲是以谷物為原料，破碎加水壓制而成的。酒曲富含酵母菌和霉菌等多種微生物，經(jīng)水浸泡活化后加入蒸熟的米即可用于釀酒。下列敘述正確的是（）A.酒曲中的酵母菌等微生物，可以將糖徹底分解成酒精B.夏季氣溫升高，需要用沸水浸泡酒曲以防止雜菌污染C.酒曲經(jīng)水浸泡活化有利于提高酶的活性和酵母菌的代謝D.釀酒過程中密封的時(shí)間越長，產(chǎn)生的酒精量就越多〖答案〗C〖祥解〗制作果酒的過程中，除酵母菌之外，還會(huì)有其他雜菌生長，它們會(huì)在酒精發(fā)酵中污染發(fā)酵液，而避免發(fā)酵液污染需要從發(fā)酵制作的過程全面考慮?！驹斘觥緼、酒曲中的酵母菌等微生物，無氧呼吸都只在第一階段釋放出少量的能量，生成少量ATP。葡萄糖分子中的大部分能量則存留在不徹底的氧化產(chǎn)物的酒精中，A錯(cuò)誤；B、沸水浸泡酒曲，會(huì)殺死酒曲中含有的酵母菌和霉菌等多種微生物，B錯(cuò)誤；C、酒曲中的酵母菌處于休眠狀態(tài)，經(jīng)水浸泡活化有利于提高酶的活性和酵母菌的代謝，C正確；D、因?yàn)榉磻?yīng)物有限，酒精濃度高時(shí)酵母菌等微生物會(huì)失活，產(chǎn)生酒精的量不會(huì)一直增多，D錯(cuò)誤。故選C。3.科研人員設(shè)計(jì)了青霉素生產(chǎn)菌——產(chǎn)黃青霉菌的誘變育種方案，步驟為：①配制中性偏酸的培養(yǎng)基，準(zhǔn)備相關(guān)的培養(yǎng)皿，稀釋用水；②進(jìn)行菌種的紫外線誘變；③用接種環(huán)蘸取誘變后的產(chǎn)黃青霉菌孢子懸液，在固體培養(yǎng)基上劃線以分離并計(jì)數(shù)；④放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)到長出單菌落；⑤挑取單菌落，接種至均勻分布野生型金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基上，進(jìn)行生產(chǎn)青霉素性能的測定。上述設(shè)計(jì)存在不當(dāng)之處，下列修改合理的是（）A.步驟①中配制的培養(yǎng)基應(yīng)為中性偏堿B.步驟③中應(yīng)使用稀釋涂布平板法C.步驟②、③的順序應(yīng)該調(diào)換D.步驟⑤中應(yīng)將單菌落接種至含剛果紅的培養(yǎng)基上〖答案〗B〖祥解〗培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽。培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。如培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性。液體狀態(tài)的培養(yǎng)基稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的稱為固體培養(yǎng)基，在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂后，就制成固體培養(yǎng)基?！驹斘觥緼、培養(yǎng)霉菌時(shí)，步驟①中配制的培養(yǎng)基應(yīng)為酸性，A不符合題意；B、平板劃線法不能進(jìn)行計(jì)數(shù)，步驟③中應(yīng)使用稀釋涂布平板法，B符合題意；C、步驟②先進(jìn)行誘變育種，再進(jìn)行③接種，不需要調(diào)換，C不符合題意；D、步驟⑤挑取單菌落，接種至均勻分布野生型金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基上，進(jìn)行生產(chǎn)青霉素性能的測定，青霉素能抑制金黃色葡萄球菌的生存，D不符合題意。故選B。4.轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品是指利用基因工程技術(shù)獲得的生物制品，其安全性問題一直是大眾關(guān)注和爭論的熱點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.通過轉(zhuǎn)基因育種可增加或消除原有生物品種的某些性狀B.轉(zhuǎn)基因食品風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)還需考慮目的基因的安全性問題C.轉(zhuǎn)基因抗蟲作物的長期種植會(huì)誘導(dǎo)害蟲產(chǎn)生變異，出現(xiàn)超級(jí)害蟲D.嚴(yán)格選擇種植區(qū)域可降低轉(zhuǎn)基因作物發(fā)生外源基因擴(kuò)散的可能性〖答案〗C〖祥解〗基因工程是指按照人們的愿望，通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和產(chǎn)品。從技術(shù)操作層面來看，由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做重組DNA技術(shù)；轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品是指利用基因工程技術(shù)而獲得的生物制品?！驹斘觥緼、基因工程是指按照人們的愿望，通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和產(chǎn)品；轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品是指利用基因工程技術(shù)而獲得的生物制品，故通過轉(zhuǎn)基因育種，按照人們的需要，可增加或消除原有生物品種的某些性狀，A正確；B、在基因表達(dá)載體上，除了有目的基因、啟動(dòng)子、終止子等外，還需要標(biāo)記基因，故轉(zhuǎn)基因食品風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)還需考慮標(biāo)記基因的安全性問題，B正確；C、轉(zhuǎn)基因作物的長期、大規(guī)模種植，可能將具有抗性的害蟲選擇出來，可能使目標(biāo)害蟲或非目標(biāo)害蟲對(duì)轉(zhuǎn)基因作物的適應(yīng)在群體水平上產(chǎn)生抗性，有可能產(chǎn)生侵染力更強(qiáng)的“超級(jí)害蟲”，造成更大的危害，并不是抗蟲作物誘導(dǎo)害蟲產(chǎn)生變異，C錯(cuò)誤；D、轉(zhuǎn)基因作物所攜帶的外源基因在使得作物高產(chǎn)的同時(shí)，也可能會(huì)向自然界擴(kuò)散，從而打破自然界原有的物種平衡，嚴(yán)格選擇種植區(qū)域可減少轉(zhuǎn)基因作物發(fā)生外源基因擴(kuò)散的可能性，D正確。5.體外條件下，DNA復(fù)制需要有引物。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.用于PCR擴(kuò)增的引物的長度通常為20～30個(gè)核苷酸B.引物制備的前提是已知目的基因的部分脫氧核苷酸序列C.進(jìn)行體外DNA復(fù)制時(shí)，引物要有兩種且不能互補(bǔ)配對(duì)D.脫氧核苷酸作為擴(kuò)增的原料會(huì)依次連接到引物的5′端〖答案〗D〖祥解〗PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，原理是DNA的復(fù)制。PCR擴(kuò)增時(shí)需要兩種引物、模板DNA、四種游離的脫氧核昔酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶。【詳析】A、引物的長度通常為20～30個(gè)核苷酸，能與模板鏈結(jié)合，A正確；B、引物制備的前提是已知目的基因兩端的核苷酸序列，B正確；C、進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，引物要與擴(kuò)增DNA片段兩端互補(bǔ)，有兩種，這兩種引物不能互補(bǔ)，避免DNA擴(kuò)增失敗，C正確；D、PCR擴(kuò)增時(shí)，脫氧核苷酸作為擴(kuò)增的原料會(huì)依次連接到3'端，D錯(cuò)誤。故選D。6.檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑，工業(yè)上可以以玉米為原料，通過黑曲霉發(fā)酵制得，工藝流程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.種子培養(yǎng)是在發(fā)酵前對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)B.蒸煮有利于酶的進(jìn)一步作用并對(duì)糖漿滅菌C.發(fā)酵液pH降低到一定值后可進(jìn)行過濾純化D.利用廢渣為原料可進(jìn)一步獲得單細(xì)胞蛋白〖答案〗B〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的洗育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面。【詳析】A、種子培養(yǎng)是在發(fā)酵前對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，增加菌體的數(shù)量，A正確；B、蒸煮的作用是終止酶的作用，并進(jìn)一步對(duì)糖漿滅菌，B錯(cuò)誤；C、發(fā)酵產(chǎn)物為檸檬酸，呈酸性，故發(fā)酵液pH降低到一定值后可進(jìn)行過濾純化，C正確；D、微生物含有豐富的蛋白質(zhì)，廢渣中含有大量的發(fā)酵菌體，故利用廢渣為原料可進(jìn)一步獲得單細(xì)胞蛋白，D正確。故選B。7.某研究性學(xué)習(xí)小組擬培育一種名貴花卉的脫毒苗，其技術(shù)路線為“取材—消毒—愈傷組織培養(yǎng)—生芽、生根—移栽”。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.取材部位一般選擇植物頂端分生區(qū)附近B.外植體接種前需要用酒精、次氯酸鈉等進(jìn)行消毒C.接種時(shí)需要將消毒后的外植體的形態(tài)學(xué)下端插入培養(yǎng)基中D.將試管苗移栽后，需要進(jìn)行病毒接種實(shí)驗(yàn)來篩選出脫毒苗〖答案〗D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過程為：離體的植物組織、器官或細(xì)胞經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，愈傷組織經(jīng)過再分化過程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株?！驹斘觥緼、植物頂端分生區(qū)細(xì)胞代謝旺盛，含病毒少，甚至不含病毒，因此取材部位一般選擇植物頂端分生區(qū)附近，A正確；B、植物組織培養(yǎng)時(shí)所用的外植體需消毒，可以用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，同時(shí)也可以用流水沖洗或次氯酸鈉進(jìn)行處理，B正確；C、植物組織培養(yǎng)時(shí)，常需要誘導(dǎo)外植體生根發(fā)芽，故接種時(shí)要將外植體的形態(tài)學(xué)下端插入培養(yǎng)基中，C正確；D、脫毒苗是不含病毒的植株，不具有抗病毒的能力，進(jìn)行病毒接種實(shí)驗(yàn)是篩選出抗毒苗，D錯(cuò)誤。故選D。8.從中國倉鼠卵巢組織分離、培養(yǎng)的CHO細(xì)胞是生物制品領(lǐng)域最主要的生產(chǎn)細(xì)胞，廣泛應(yīng)用于各種藥物蛋白的生產(chǎn)。CHO細(xì)胞可以在培養(yǎng)基中高密度生長，能夠分泌胞外蛋白且自身的分泌蛋白比較少。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)CHO細(xì)胞時(shí)所需的CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pHB.與培養(yǎng)普通動(dòng)物細(xì)胞相比，CHO細(xì)胞兩次分瓶之間的間隔時(shí)間較短C.利用CHO細(xì)胞作為受體細(xì)胞生產(chǎn)外源蛋白，有利于后期蛋白質(zhì)的純化D.與大腸桿菌相比，CHO細(xì)胞表達(dá)的外源蛋白與天然蛋白更加相似〖答案〗B〖祥解〗動(dòng)物培養(yǎng)條件：（1）無菌無毒環(huán)境：無菌——對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；無毒——定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害。（2）營養(yǎng)成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）。（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。O2：是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH?！驹斘觥緼、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，其中5%CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，A正確；B、CHO細(xì)胞可以在培養(yǎng)基中高密度生長，因此，與培養(yǎng)普通動(dòng)物細(xì)胞相比，CHO細(xì)胞兩次分瓶之間的間隔時(shí)間較長，B錯(cuò)誤；C、CHO細(xì)胞能夠分泌胞外蛋白且自身的分泌蛋白比較少，因此，利用CHO細(xì)胞作為受體細(xì)胞生產(chǎn)外源蛋白，有利于后期蛋白質(zhì)的純化，C正確；D、大腸桿菌屬于原核細(xì)胞，CHO細(xì)胞為真核細(xì)胞，與大腸桿菌相比，CHO細(xì)胞具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可以對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行更完善加工，D正確。故選B。9.傳統(tǒng)鼠源單抗可被人體免疫系統(tǒng)識(shí)別而產(chǎn)生免疫反應(yīng)，導(dǎo)致單抗的治療效果下降。科研人員對(duì)小鼠的相關(guān)基因進(jìn)行改造，制備了人源化的Her2（人表皮生長因子受體2）單克隆抗體，該單克隆抗體可特異性結(jié)合乳腺癌細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.乳腺癌細(xì)胞細(xì)胞膜表面的Her2的表達(dá)量要低于正常細(xì)胞B.鼠源化Her2單抗進(jìn)入人體后可能會(huì)誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗單抗抗體C.人源化Her2單抗制備利用了重組DNA技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞融合等技術(shù)D.熒光標(biāo)記的人源化Her2單克隆抗體可用于乳腺癌的定位診斷〖答案〗A〖祥解〗（1）單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的特點(diǎn)。（2）單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選?！驹斘觥緼、制備了人源化的Her2（人表皮生長因子受體2）單克隆抗體，該單克隆抗體可特異性結(jié)合乳腺癌細(xì)胞，說明乳腺癌細(xì)胞細(xì)胞膜表面的Her2的表達(dá)量要高于正常細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、傳統(tǒng)鼠源性單抗對(duì)人體來說是抗原，可能會(huì)引起人體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，使得單抗藥物療效減弱，并且引起嚴(yán)重的不良反應(yīng)，而人源化單抗能夠克服人抗鼠抗體反應(yīng)避免單抗分子被免疫系統(tǒng)當(dāng)作異源蛋白而被快速清除，提高單抗藥物的藥效，因此鼠源化Her2單抗進(jìn)入人體后可能會(huì)誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗單抗抗體，B正確；C、人源化Her2單抗制備利用了重組DNA技術(shù)（要對(duì)小鼠的相關(guān)基因進(jìn)行改造）、動(dòng)物細(xì)胞融合（骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合）等技術(shù)，C正確；D、熒光標(biāo)記的人源化Her2單克隆抗體可用于乳腺癌的定位診斷，因?yàn)樵搯慰寺】贵w可特異性結(jié)合乳腺癌細(xì)胞，D正確。故選A。10.我國科研人員利用小鼠獲得了單倍體胚胎干細(xì)胞，流程如下圖所示。目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞，其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無包含Y染色體的細(xì)胞。已知小鼠Y染色體比X染色體短小。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.精子頭部入卵后，透明帶迅速發(fā)生生理反應(yīng)拒絕其它精子進(jìn)入透明帶B.為得到只含精子染色體的胚胎干細(xì)胞需在核融合前剔除卵子的雌原核C.由圖可知，單倍體胚胎干細(xì)胞來自小鼠囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞D.Y染色體比X染色體短小，可能缺少支持單倍體胚胎干細(xì)胞存活的基因〖答案〗A〖祥解〗聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列的細(xì)胞，稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞，它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤。【詳析】A、在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，卵細(xì)胞膜外的透明帶會(huì)迅速發(fā)生生理反應(yīng)，阻止后來的精子進(jìn)入透明帶。然后，精子入卵。精子入卵后，卵細(xì)胞膜也會(huì)立即發(fā)生生理反應(yīng)，拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)，A錯(cuò)誤；B、精子入卵后，尾部脫離，原有的核膜破裂并形成一個(gè)新的核膜，最后形成一個(gè)比原來精子的核還大的核，叫作雄原核。與此同時(shí)，精子入卵后被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核。為得到只含精子染色體的胚胎干細(xì)胞需在核融合前剔除卵子的雌原核，B正確；C、聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胎兒的各種組織，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞具有全能性，所以單倍體胚胎干細(xì)胞可以來自小鼠囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，C正確；D、Y染色體比X染色體短小，所以Y染色體上的基因相對(duì)較少，可能缺少支持單倍體胚胎干細(xì)胞存活的基因，D正確。故選A11.奶牛活體采卵—體外胚胎生產(chǎn)（OPU-IVP）技術(shù)的誕生標(biāo)志著奶牛繁育技術(shù)進(jìn)入“5G”時(shí)代。該技術(shù)包括奶?；铙w采卵及體外培養(yǎng)、體外受精、性別控制、胚胎移植等操作。已知奶牛Y染色體上有一段雄性特異的高度重復(fù)序列，依據(jù)該重復(fù)序列設(shè)計(jì)引物，建立了用于奶牛胚胎性別鑒定的PCR體系（SRY-PCR）。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.通過OPU-IVP技術(shù)獲得優(yōu)良奶牛的過程屬于有性生殖B.活體采卵前可對(duì)供體母牛注射促性腺激素促使其超數(shù)排卵C.采集的精子需要經(jīng)過獲能處理才能與培養(yǎng)成熟的卵子完成受精D.取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行SRY-PCR，應(yīng)選擇結(jié)果為陽性的胚胎進(jìn)行移植〖答案〗D〖祥解〗體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)：①主要方法是用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后從輸卵管中沖取卵子。②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞或直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞。（2）精子的采集和獲能：①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。②對(duì)精子進(jìn)行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。（3）受精：在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程?！驹斘觥緼、OPU-IVP技術(shù)包括體外受精過程，故其獲得優(yōu)良奶牛的過程屬于有性生殖，A正確；B、為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，可對(duì)供體母牛注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵，B正確；C、采集的精子需要經(jīng)過獲能處理，才具備受精的能力，才能與培養(yǎng)成熟的卵子完成受精，C正確；D、結(jié)果為陽性的胚胎說明其含有Y染色體，為雄性，為獲得可以產(chǎn)生牛奶的奶牛應(yīng)選擇結(jié)果為陰性的胚胎進(jìn)行移植，D錯(cuò)誤。故選D。12.基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行的設(shè)計(jì)施工，需要有專門的工具。下列關(guān)于基因工程所需基本工具的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.限制酶識(shí)別雙鏈DNA中的特定序列，并在其中一條鏈的特定部位切割B.當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA切開時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端C.DNA連接酶和DNA聚合酶連接的是同一化學(xué)鍵，但它們催化的底物不同D.質(zhì)粒DNA分子上有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供外源DNA片段插入其中〖答案〗A〖祥解〗限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂?！驹斘觥緼、限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，A錯(cuò)誤；B、當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開，得到的是黏性末端，B正確；C、DNA連接酶和DNA聚合酶連接的都是磷酸二酯鍵，但DNA連接酶連接的是兩個(gè)DNA片段，DNA聚合酶催化單個(gè)的脫氧核苷酸聚合到子鏈的3'端，故它們催化的底物不同，C正確；D、質(zhì)粒能攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，質(zhì)粒DNA分子上有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供外源DNA片段插入其中，D正確。故選A。13.某小組利用菜花進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.將研磨液在4℃冰箱中放置幾分鐘可以降低DNA酶的活性B.加入酒精后用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，可減少DNA分子斷裂C.向上清液中加入2mol/L的NaCl溶液有利于DNA的析出D.用二苯胺試劑對(duì)白色絲狀物進(jìn)行鑒定時(shí)，需要進(jìn)行沸水浴加熱〖答案〗C〖祥解〗根據(jù)DNA的溶解性提取DNA：（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl中的溶解度不同；（2）DNA不溶于酒精，但是某些蛋白質(zhì)則溶液酒精；（3）DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同．【詳析】A、低溫能夠降低酶的活性，將研磨液在4℃冰箱中放置幾分鐘可以降低DNA酶的活性，A正確；B、加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上，用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌可減少DNA分子斷裂，B正確；C、DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，在0.14mol/L溶解度最低，在0.14mol/L的NaCl溶液有利于DNA的析出，C錯(cuò)誤；D、在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此用二苯胺試劑對(duì)白色絲狀物進(jìn)行鑒定時(shí)，需要進(jìn)行沸水浴加熱，D正確。故選C。14.某研究小組用葉盤法培育轉(zhuǎn)基因耐鹽毛白楊，主要操作環(huán)節(jié)如下：①獲取葉盤（用消毒過的打孔器從葉子上取下圓形小片）；②遺傳轉(zhuǎn)化（將毛白楊葉盤與重組農(nóng)桿菌共培養(yǎng)）；③篩選培養(yǎng)（在含卡那霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選并進(jìn)行組織培養(yǎng)）；④檢測與鑒定。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒會(huì)整合到毛白楊葉盤細(xì)胞的染色體上B.培養(yǎng)基中卡那霉素的作用是篩選出被重組農(nóng)桿菌感染的葉盤C.組織培養(yǎng)時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加細(xì)胞分裂素和生長素等激素D.可用抗原—抗體雜交的方法檢測毛白楊提取液中有無耐鹽蛋白〖答案〗A〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣?！驹斘觥緼、農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有Ti質(zhì)粒，當(dāng)它侵染植物細(xì)胞后，能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA（可轉(zhuǎn)移的DNA）轉(zhuǎn)移到毛白楊葉盤細(xì)胞，并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上，A錯(cuò)誤；B、卡那霉素屬于抗生素，葉盤接種在含卡那霉素的培養(yǎng)基上，若含有目的基因和卡那霉素抗性基因的重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入了葉盤且正確表達(dá)，則被重組農(nóng)桿菌感染的葉盤培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上生長，故卡那霉素的主要作用是篩選出被重組農(nóng)桿菌感染的葉盤，B正確；C、植物組織培養(yǎng)過程中需要加入植物激素，其中最主要的是生長素和細(xì)胞分裂素，它們是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素，C正確；D、抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，耐鹽基因進(jìn)入細(xì)胞后，可以通過抗原—抗體雜交方法來檢測轉(zhuǎn)基因毛白楊提取液中有無相應(yīng)的耐鹽蛋白，D正確。故選A。15.膽汁鹽水解酶（BSH）對(duì)小鼠糖尿病的治療有明顯的效果。天然大腸桿菌對(duì)外來DNA的入侵具有一定的抵抗力。科研人員從實(shí)驗(yàn)小鼠的糞便樣本中提取出一種遺傳上易馴化（對(duì)DNA入侵抵抗力弱）的大腸桿菌菌株M，構(gòu)建BSH基因的表達(dá)載體（如下圖）并導(dǎo)入菌株M體內(nèi)，再將菌株M重新導(dǎo)入小鼠腸道。一段時(shí)間后，在小鼠的腸道中出現(xiàn)了能持續(xù)分泌BSH的大腸桿菌，小鼠糖尿病癥狀得到緩解。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.天然大腸桿菌對(duì)DNA入侵具有一定抵抗力可能與細(xì)胞內(nèi)的限制酶有關(guān)B.構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)該選用限制酶B和C切割質(zhì)粒和目的基因C.轉(zhuǎn)化前常用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于能吸收外源DNA分子的狀態(tài)D.轉(zhuǎn)基因菌株M導(dǎo)入小鼠腸道后，BSH基因在其腸道細(xì)胞中穩(wěn)定復(fù)制并表達(dá)〖答案〗D〖祥解〗基因工程技術(shù)的步驟有：獲取目的基因、構(gòu)建基因表達(dá)載體（核心步驟）、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定?！驹斘觥緼、根據(jù)題意“天然大腸桿菌對(duì)外來DNA的入侵具有一定的抵抗力”，推測可能是天然大腸桿菌的細(xì)胞內(nèi)有能將外來DNA切割的限制酶，A正確；B、由圖可知，使用酶A會(huì)將氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因這兩個(gè)標(biāo)記基因破壞，且酶B和C在目的基因和質(zhì)粒上都有識(shí)別位點(diǎn)，故構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)該選用限制酶B和C切割質(zhì)粒和目的基因，B正確；C、轉(zhuǎn)化前常用Ca2+處理大腸桿菌，目的是使其處于能吸收外源DNA分子的狀態(tài)，以利于將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞中，C正確；D、根據(jù)題意“構(gòu)建BSH基因的表達(dá)載體并導(dǎo)入菌株M（大腸桿菌菌株）體內(nèi)，再將菌株M重新導(dǎo)入小鼠腸道。一段時(shí)間后，在小鼠的腸道中出現(xiàn)了能持續(xù)分泌BSH的大腸桿菌，小鼠糖尿病癥狀得到緩解”可知，轉(zhuǎn)基因菌株M導(dǎo)入小鼠腸道后，BSH基因在能持續(xù)分泌BSH的大腸桿菌細(xì)胞中穩(wěn)定復(fù)制并表達(dá)，D錯(cuò)誤。故選D。二、選擇題：16.櫻桃中含有豐富的礦質(zhì)元素，具有補(bǔ)血、抗氧化等多種保健功能。某興趣小組用帶蓋的瓶子制作櫻桃酒和櫻桃醋，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.榨取櫻桃汁裝入發(fā)酵瓶后需要用濕熱滅菌法進(jìn)行滅菌B.利用櫻桃酒釀制櫻桃醋的過程中需要略微降低溫度C.櫻桃醋制作過程中每隔一段時(shí)間需要將瓶蓋擰松一次D.向發(fā)酵液中倒入一些糙米陳醋可以縮短果醋制作時(shí)間〖答案〗ABC〖祥解〗1、參與果酒制作的微生物是酵母菌，其新陳代謝類型為異養(yǎng)兼性厭氧型。2、參與果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陳代謝類型是異養(yǎng)需氧型。果醋制作的原理:當(dāng)氧氣、糖源都充足時(shí)，醋酸菌將葡萄汁中的果糖分解成醋酸。當(dāng)缺少糖源時(shí)，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰賹⒁胰┳優(yōu)榇姿?。【詳析】A、榨取櫻桃汁裝入發(fā)酵瓶后不需要滅菌，否則將會(huì)殺死野生型酵母菌，A錯(cuò)誤；B、釀制果醋所需的菌種是醋酸菌，溫度是30-35℃，需要持續(xù)通入空氣；果酒制備的菌種是酵母菌，條件是18-25℃，密封，所以利用櫻桃酒制作櫻桃果醋，需要適當(dāng)升高溫度，并且及時(shí)通氣，B錯(cuò)誤；C、釀制果醋所需的菌種是醋酸菌，需要持續(xù)通入空氣，所以制作過程不需要每隔一段時(shí)間將瓶蓋擰松一次，C錯(cuò)誤；D、向發(fā)酵液中倒入一些糙米陳醋，增加了醋酸菌的數(shù)量，可以縮短果醋制作時(shí)間，D正確。故選ABC。17.紫草寧是從紫草細(xì)胞中提取的一種藥物和色素，具有抗菌、消炎和抗腫瘤等活性。在工業(yè)化生產(chǎn)中，可通過裂解紫草愈傷組織細(xì)胞獲得大量的紫草寧。下列敘述正確的是（）A.紫草寧具有抗菌作用，因此生產(chǎn)時(shí)不需要進(jìn)行無菌操作B.誘導(dǎo)紫草愈傷組織形成期間需要適當(dāng)時(shí)間和強(qiáng)度的光照C.可用射線誘變紫草愈傷組織后從突變體中篩選高產(chǎn)細(xì)胞株D.可將紫草愈傷組織細(xì)胞置于低滲溶液中漲破以提取紫草寧〖答案〗C〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，其過程為：離體的植物組織、器官或細(xì)胞，經(jīng)過脫分化過程形成愈傷組織(高度液泡化，無定形狀態(tài)薄壁細(xì)胞組成的排列疏松、無規(guī)則的組織)，愈傷組織經(jīng)過再分化過程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育成為植株?！驹斘觥緼、紫草素雖具有抗菌作用，但其產(chǎn)生的過程涉及植物組織培養(yǎng)技術(shù)，植物組織培養(yǎng)的過程中仍需進(jìn)行無菌操作，A錯(cuò)誤；B、誘導(dǎo)紫草愈傷組織形成期間要避光，B錯(cuò)誤；C、愈傷組織分裂旺盛，易產(chǎn)生突變，因而可用射線誘變紫草愈傷組織后從突變體中篩選高產(chǎn)細(xì)胞株，C正確；D、可將紫草愈傷組織細(xì)胞含有細(xì)胞壁，置于低滲溶液中不會(huì)漲破，D錯(cuò)誤。故選C。18.為研究抗生素X對(duì)甲、乙、丙三種細(xì)菌的抑菌效果，研究人員將三種細(xì)菌分別均勻涂布到三個(gè)平板上，然后在培養(yǎng)基上打出直徑為3mm的小孔，在小孔中加入不同濃度的抗生素X。培養(yǎng)一段時(shí)間后測量小孔周圍抑菌圈的直徑，結(jié)果如下表。下列敘述正確的是（）細(xì)菌不同濃度抗生素X條件下抑菌圈直徑（mm）5μg/mL7.5μg/mL10μg/mL15μg/mL20μg/mL甲710141516乙﹣581317丙5791419A.本實(shí)驗(yàn)中涂布平板時(shí)的菌液濃度應(yīng)低于對(duì)其進(jìn)行平板計(jì)數(shù)時(shí)的菌液濃度B.X濃度為5μg/mL時(shí)，對(duì)甲、丙有抑制作用，對(duì)乙無抑制作用C.三種細(xì)菌中對(duì)低濃度抗生素X最敏感的是甲，最不敏感的是乙D.本實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)基的厚度以及小孔孔徑都屬于實(shí)驗(yàn)的無關(guān)變量〖答案〗BCD〖祥解〗培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽。培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。選擇培養(yǎng)基是指允許特定種類的微生物生長，同時(shí)抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。獲得純凈的培養(yǎng)物關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。微生物接種常用的方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法?！驹斘觥緼、本實(shí)驗(yàn)中涂布平板時(shí)的菌液濃度應(yīng)接近對(duì)其進(jìn)行平板計(jì)數(shù)時(shí)的菌液濃度，此時(shí)菌落數(shù)目和實(shí)際菌的數(shù)目接近，使實(shí)驗(yàn)更準(zhǔn)確，A錯(cuò)誤；B、據(jù)圖，X濃度為5μg/mL時(shí)，乙的抑菌圈直徑是0，對(duì)甲、丙有抑制作用，對(duì)乙無抑制作用，B正確；C、5μg/mL、7.5μg/mL時(shí)，甲細(xì)菌的抑菌圈直徑比乙、丙大，三種細(xì)菌中對(duì)低濃度抗生素X最敏感的是甲，最不敏感的是乙，C正確；D、培養(yǎng)基的厚度會(huì)影響抗生素的濃度、小孔孔徑也會(huì)影響抗生素的數(shù)量，培養(yǎng)基的厚度以及小孔孔徑都屬于實(shí)驗(yàn)的無關(guān)變量，D正確。故選BCD。19.我國科學(xué)家成功地用iPS細(xì)胞克隆出了活體小鼠，部分流程如下圖所示，其中Kdm4d為組蛋白去甲基化酶，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑。下列敘述正確的是（）A.過程①中小分子化合物誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞突變?yōu)閕PS細(xì)胞B.過程②中的卵母細(xì)胞需要在體外培養(yǎng)到MⅡ期再除去細(xì)胞核C.過程③中可使用電融合法誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合，進(jìn)而形成重構(gòu)胚D.組蛋白去甲基化和脫乙?；赡苡欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育〖答案〗BC〖祥解〗生物體基因的堿基序列保持不變，但基因表達(dá)和表型發(fā)生可遺傳變化的現(xiàn)象，叫作表觀遺傳；除了DNA甲基化，構(gòu)成染色體的組蛋白發(fā)生甲基化、乙?；刃揎椧矔?huì)影響基因的表達(dá)?！驹斘觥緼、過程①中小分子化合物誘導(dǎo)成纖維細(xì)胞脫分化為iPS細(xì)胞，并未發(fā)生突變，A錯(cuò)誤；B、MⅡ期卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)含有促使細(xì)胞核全能性表現(xiàn)的物質(zhì)，故要選用MⅡ期卵母細(xì)胞去除細(xì)胞核，B正確；C、過程③為動(dòng)物細(xì)胞融合過程，可使用電融合法誘導(dǎo)兩細(xì)胞融合，C正確；D、由圖可知，重構(gòu)胚在加入中Kdm4d的mRNA和TSA后，發(fā)育成克隆鼠，而Kdm4d的mRNA表達(dá)產(chǎn)物為組蛋白去甲基化酶，可以使組蛋白去甲基化，TSA為組蛋白脫乙酰酶抑制劑，抑制組蛋白脫乙酰酶的作用，保持組蛋白乙?；唇M蛋白乙?；腿ゼ谆欣谥貥?gòu)胚后續(xù)的胚胎發(fā)育過程，D錯(cuò)誤。故選BC。20.熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測樣本中的DNA含量，其原理是：在PCR反應(yīng)體系中加入引物的同時(shí)，加入與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)耐高溫的DNA聚合酶催化子鏈延伸至探針處會(huì)水解探針并生成熒光分子，即每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成（如圖），熒光監(jiān)測系統(tǒng)接收到熒光信號(hào)變化，每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)達(dá)到設(shè)定閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)，稱為Ct值（循環(huán)閾值）。下列說法正確的是（）A.PCR反應(yīng)體系中需要加入樣本DNA、引物、原料、ATP等物質(zhì)B.一個(gè)DNA分子經(jīng)過3次循環(huán)后，會(huì)產(chǎn)生2個(gè)雙鏈等長的DNA分子C.Ct值越大表示被檢測樣本中病毒數(shù)目越多，被檢測者的患病風(fēng)險(xiǎn)越大D.一定時(shí)間內(nèi)，監(jiān)測的熒光強(qiáng)度與初始樣本中DNA的含量呈正相關(guān)〖答案〗BD〖祥解〗PCR的原理是DNA雙鏈復(fù)制，步驟包括高溫變性、復(fù)性、延伸，該過程需要耐高溫的DNA聚合酶催化，需要四種游離的脫氧核苷酸做原料?！驹斘觥緼、PCR反應(yīng)體系中不需要加入ATP，A錯(cuò)誤；B、一個(gè)DNA分子經(jīng)過3次循環(huán)后，共得到8個(gè)DNA分子，到第三輪時(shí)，才會(huì)產(chǎn)生2個(gè)雙鏈等長的DNA分子，B正確；C、Ct值越小，說明所需循環(huán)的次數(shù)越少，可以理解為樣本中的病毒含量相對(duì)較高，越容易被檢測到，而Ct值越大，說明所需循環(huán)的次數(shù)越多，檢測到時(shí)需要更多的時(shí)間與循環(huán)，〖提示〗樣本中病毒的含量相對(duì)較少，即新冠病毒含量越少，被檢測者的患病風(fēng)險(xiǎn)越小，C錯(cuò)誤；D、題干中提出"加入一個(gè)與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針"，并且"每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成"，因此反應(yīng)最終的熒光強(qiáng)度與起始狀態(tài)模板DNA含量呈正相關(guān)，D正確。故選BD。三、非選擇題：21.滾管培養(yǎng)法是培養(yǎng)厭氧微生物的常用方法，其過程為：將樣品稀釋液注入盛有50℃左右培養(yǎng)基的密封試管中，然后將試管平放于盛有冰塊的盤中迅速滾動(dòng)，帶菌的培養(yǎng)基在試管內(nèi)壁凝固成薄層，培養(yǎng)一段時(shí)間后即可獲得單菌落。研究人員利用上述方法從深海沉積物樣品中分離獲得了一株異養(yǎng)厭氧菌（zth2），所用培養(yǎng)基的部分成分如下：NH4Cl、NaHCO3、醋酸鈉、硫酸鎂、KH2PO4、半胱氨酸（抗氧化劑）、刃天青（氧氣指示劑，無氧條件呈無色，有氧條件呈紅色）、過濾海水。（1）除上述物質(zhì)外，分離獲得zth2單菌落所用的培養(yǎng)基，還應(yīng)該含有的成分是______。（2）配制好的培養(yǎng)基通常采用________法進(jìn)行滅菌，滅菌后的培養(yǎng)基是否適合于分離厭氧微生物的判斷依據(jù)是________。（3）研究人員用1mL無菌注射器各吸取1×106倍稀釋的樣品稀釋液0.1mL分別注入三個(gè)試管中，用滾管培養(yǎng)法對(duì)zth2菌株進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)所得的菌落數(shù)分別為144、157、164，則1mL樣品溶液中zth2菌的數(shù)目為________。上述統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)偏低，原因是________?！即鸢浮剑?）碳源和瓊脂（2）①.高壓蒸汽滅菌②.培養(yǎng)基顏色為無色時(shí)適合，紅色時(shí)不適合（3）①.1.55×109②.當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，觀察到的只是一個(gè)菌落〖祥解〗各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求，例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無氧的條件?！拘?詳析】因?yàn)閦th2為異養(yǎng)微生物，培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基，故除上述物質(zhì)外，分離獲得zth2單菌落所用的培養(yǎng)基，還應(yīng)該含有的成分是碳源和瓊脂?！拘?詳析】配制好的培養(yǎng)基通常采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。因?yàn)閦th2為厭氧菌，培養(yǎng)基中加入了刃天青（氧氣指示劑，無氧條件呈無色，有氧條件呈紅色），故滅菌后的培養(yǎng)基若為無色則符合條件，紅色則不符合條件?！拘?詳析】研究人員用1mL無菌注射器各吸取1×106倍稀釋的樣品稀釋液0.1mL分別注入三個(gè)試管中，用滾管培養(yǎng)法對(duì)zth2菌株進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)所得的菌落數(shù)分別為144、157、164，則1mL樣品溶液中zth2菌的數(shù)目為（144+157+164）÷3÷0.1×1×106=1.55×109個(gè)。由于當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，觀察到的只是一個(gè)菌落，故上述統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)偏低。22.不對(duì)稱體細(xì)胞雜交是指利用射線破壞供體染色質(zhì)，與未經(jīng)射線照射的受體融合，所得融合產(chǎn)物含受體全部遺傳物質(zhì)及供體部分遺傳物質(zhì)?？蒲腥藛T使用大劑量的X射線處理擬南芥（2n=10）的原生質(zhì)體，然后誘導(dǎo)其與柴胡（2n=12）的原生質(zhì)體融合，獲得了不對(duì)稱雜種植株。（1）將懸浮培養(yǎng)的擬南芥、柴胡細(xì)胞，經(jīng)________處理獲得游離的原生質(zhì)體。采用二乙酸熒光素（FAD）法測定原生質(zhì)體活力，F(xiàn)AD本身無熒光，當(dāng)其進(jìn)入細(xì)胞后可被酯酶分解為無毒、具有熒光的物質(zhì)，該熒光物質(zhì)不能透過細(xì)胞膜，會(huì)留在細(xì)胞內(nèi)發(fā)出熒光。據(jù)此應(yīng)選擇________的原生質(zhì)體用于融合。（2）獲得的原生質(zhì)體可使用聚乙二醇、________等化學(xué)方法誘導(dǎo)融合。融合后得到的雜種細(xì)胞經(jīng)________過程，最終發(fā)育成完整植株。（3）科研人員對(duì)獲得的部分植株的細(xì)胞進(jìn)行染色體觀察、計(jì)數(shù)和DNA分子標(biāo)記鑒定，統(tǒng)計(jì)結(jié)果如下表所示：后代植株類型愈傷組織形態(tài)染色體數(shù)目、形態(tài)DNA分子標(biāo)記鑒定甲柴胡表型12，與柴胡染色體相似含雙親DNA片段乙柴胡表型12，與柴胡染色體相似無擬南芥DNA片段丙柴胡表型12，與柴胡染色體相似含雙親DNA片段和新的DNA片段由表可知，后代植株中________類型一定不是雜種植株?？蒲腥藛T推測雜種植株的染色體主要由柴胡親本來源的染色體組成，擬南芥親本的遺傳物質(zhì)可能不是以染色體的形式存在于雜種植株細(xì)胞中，而是以遺傳物質(zhì)重組的方式整合進(jìn)柴胡的基因組，作出以上推測的依據(jù)是________。〖答案〗（1）①.纖維素酶和果膠酶②.發(fā)熒光（2）①.高Ca2+-高pH②.脫分化、再分化（3）①.乙②.甲、丙類型植株與柴胡細(xì)胞中的染色體數(shù)目相同、形態(tài)相似，且含有雙親的DNA片段〖祥解〗植物原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)：首先用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁得到原生質(zhì)體，然后向原生質(zhì)體中導(dǎo)入抗病基因或含有抗病基因的染色體片段，轉(zhuǎn)移至合適的環(huán)境中，在高爾基體的作用下再生細(xì)胞壁、形成愈傷組織、得到胚狀體，最終發(fā)育成完整的植株?！拘?詳析】原生質(zhì)體為去除了植物細(xì)胞壁后的結(jié)構(gòu)，要獲得原生質(zhì)體，需要用纖維素酶和果膠酶處理植物細(xì)胞。根據(jù)題干信息可知，綠色熒光的強(qiáng)度與原生質(zhì)體的活力呈正相關(guān)，因此應(yīng)選擇發(fā)熒光的原生質(zhì)體用于融合?！拘?詳析】誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的化學(xué)方法有聚乙二醇融合法和高Ca2+-高pH融合法。融合后的雜種細(xì)胞經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，再分化形成胚狀體，最后發(fā)育成完整植株?！拘?詳析】根據(jù)表格信息可知，植株后代乙無擬南芥DNA片段，說明其不是雜種植株。甲、丙類型植株與柴胡細(xì)胞中的染色體數(shù)目相同、形態(tài)相似，且含有雙親的DNA片段，說明甲、丙植株屬于雜種植株，它們的染色體主要由柴胡親本來源的染色體組成，擬南芥親本的遺傳物質(zhì)可能不是以染色體的形式存在于雜種植株細(xì)胞中，而是以遺傳物質(zhì)重組的方式整合進(jìn)柴胡的基因組。23.癌癥已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人類健康的頑疾。研究人員從寄主為夾竹桃的紅花桑寄生葉中提取了一種物質(zhì)—Xwp（不溶于水，需用正丁醇溶解），并對(duì)其抗腫瘤的效果進(jìn)行了研究。（1）在獲取腫瘤組織后常用________酶處理成單個(gè)細(xì)胞。與培養(yǎng)普通動(dòng)物細(xì)胞相比，腫瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)除無限增殖外，還表現(xiàn)出的特點(diǎn)有________（答兩點(diǎn)）。（2）試驗(yàn)人員通過體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法來研究Xwp的抗腫瘤的作用。首先在各組相同的培養(yǎng)瓶中裝入等量的腫瘤細(xì)胞懸浮液，實(shí)驗(yàn)組分別加入等量的不同濃度的Xwp溶液，對(duì)照組的處理方式為________；然后放在適宜環(huán)境下培養(yǎng)，一段時(shí)間后觀察腫瘤細(xì)胞的生長速度和并計(jì)算細(xì)胞凋亡率。（3）進(jìn)一步的體內(nèi)試驗(yàn)表明，Xwp在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害，研究人員制備抗體—藥物偶聯(lián)物對(duì)患癌小鼠進(jìn)行治療，主要過程如下：①用癌胚抗原免疫小鼠獲取B淋巴細(xì)胞，然后誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，經(jīng)特定的選擇培養(yǎng)基篩選獲得________，再進(jìn)行________，經(jīng)多次篩選就可獲得足夠數(shù)量的分泌所需抗體的細(xì)胞，進(jìn)而通過細(xì)胞培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。②將獲取的識(shí)別癌胚抗原的單克隆抗體與Xwp進(jìn)行連接制成抗體—藥物偶聯(lián)物，然后輸入小鼠體內(nèi)進(jìn)行治療。該治療方法的優(yōu)點(diǎn)是________?！即鸢浮剑?）①.胰蛋白（或膠原蛋白）②.貼壁能力下降，無接觸抑制現(xiàn)象（2）加入等量的正丁醇（3）①.雜交瘤細(xì)胞②.克隆化培養(yǎng)和抗體檢測③.實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，減輕了Xwp對(duì)健康細(xì)胞的傷害〖祥解〗1、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！拘?詳析】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理成單個(gè)細(xì)胞；腫瘤細(xì)胞的特點(diǎn)可以無限增殖，細(xì)胞膜上糖蛋白減少所以沒有接觸抑制現(xiàn)象，貼壁能力下降?！拘?詳析】實(shí)驗(yàn)的自變量為是否含有Xwp，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組除了自變量外完全一致，都需要添加溶解Xwp的等量的正丁醇?！拘?詳析】①制備單克隆抗體過程中，經(jīng)選擇培養(yǎng)得到的雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。②抗體—藥物偶聯(lián)物的治療優(yōu)點(diǎn)：實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷，減輕了Xwp對(duì)健康細(xì)胞的傷害。24.水蛭素為水蛭蛋白的重要成分之一，具有良好的抗凝血作用。研究人員運(yùn)用蛋白質(zhì)工程對(duì)水蛭素基因進(jìn)行改造，獲得了抗凝血能力較高的水蛭素。（1）蛋白質(zhì)工程是指以________及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。蛋白質(zhì)工程的基本思路如下圖所示，在生產(chǎn)過程中，物質(zhì)b可能不同，卻合成了相同的物質(zhì)a，原因是________。（2）在未知水蛭素三維結(jié)構(gòu)和功能關(guān)系的情況下，可以通過易錯(cuò)PCR技術(shù)引入隨機(jī)突變，再進(jìn)行定向篩選，易錯(cuò)PCR與普通PCR相似，每次循環(huán)也包括了________三步，但可通過改變PCR反應(yīng)條件來提高堿基錯(cuò)配的幾率。在PCR反應(yīng)體系中，Mg2+可以提高已發(fā)生錯(cuò)配區(qū)域的穩(wěn)定性，Mn2+可以降低DNA聚合酶對(duì)底物的專一性，據(jù)此分析，與普通PCR相比，易錯(cuò)PCR的反應(yīng)體系中應(yīng)________。通過多輪的易錯(cuò)PCR及篩選，可以獲取所需的水蛭素基因。（3）研究人員對(duì)比改造前后的兩種水蛭素，發(fā)現(xiàn)改造后的水蛭素的第35位氨基酸發(fā)生了替換，其抗凝血能力升高，推測原因是________?！即鸢浮剑?）①.蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律②.密碼子具有簡并性（2）①.變性、復(fù)性、延伸②.提高M(jìn)g2+和Mn2+濃度（3）組成水蛭素的氨基酸種類改變導(dǎo)致其空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變〖祥解〗PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù)，利用的原理是DNA復(fù)制，需要條件有模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），過程包括：①高溫變性：DNA解旋過程（PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開）；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。【小問1詳析】蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上，延伸出來的第二代基因工程，是指以蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過改造或合成基因，來改造現(xiàn)有蛋白質(zhì)，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。蛋白質(zhì)工程的基本途徑是：從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā)→設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因），據(jù)此推測，圖中的物質(zhì)a是多肽鏈，物質(zhì)b是mRNA，由于密碼子的簡并性，即一種氨基酸可能由一個(gè)或多個(gè)密碼子決定，故在生產(chǎn)過程中，mRNA可能不同，卻合成了相同的多肽鏈。【小問2詳析】PCR每次循環(huán)包括：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。易錯(cuò)PCR與普通PCR相似，每次循環(huán)也包括了變性、復(fù)性、延伸三步。DNA聚合酶負(fù)責(zé)將堿基與模板鏈正確地互補(bǔ)配對(duì)，Mn2+可以降低DNA聚合酶對(duì)底物的專一性，也就是說Mn2+能提高堿基與模板鏈的錯(cuò)配，增加其突變率；非互補(bǔ)的堿基對(duì)由于氫鍵不易形成，穩(wěn)定性差，Mg2+可以提高已發(fā)生錯(cuò)配區(qū)域的穩(wěn)定性，因此與普通PCR相比，易錯(cuò)PCR的反應(yīng)體系中應(yīng)適當(dāng)提高M(jìn)g2+濃度，提高M(jìn)n2+濃度?！拘?詳析】改造后的水蛭素的第35位氨基酸發(fā)生了替換，即組成水蛭素的氨基酸種類發(fā)生了改變，進(jìn)而導(dǎo)致水蛭素的空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，功能也就發(fā)生改變。25.工業(yè)生產(chǎn)奶酪需要添加凝乳酶使牛奶中的蛋白質(zhì)凝聚固化。傳統(tǒng)的制備凝乳酶的方法是通過殺死未斷奶的小牛，然后將第四胃的黏膜取出來進(jìn)行提取，目前此法已不能滿足日益增長的市場需求。研究人員制備了一種膀胱生物反應(yīng)器來生產(chǎn)牛凝乳酶，下圖為所用載體及牛凝乳酶cDNA示意圖。（1）牛凝乳酶cDNA中P1的左側(cè)有RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，為實(shí)現(xiàn)牛凝乳酶基因與載體定向連接，PCR擴(kuò)增設(shè)計(jì)引物時(shí)需在引物的5′端添加相應(yīng)的限制酶識(shí)別序列。據(jù)圖分析，應(yīng)選擇的引物及其對(duì)應(yīng)的限制酶為：應(yīng)選擇的引物對(duì)應(yīng)的限制酶①_______EcoRV②_______③________（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，先用________切割質(zhì)粒，然后用________（填“E.coliDNA連接酶”或“T4DNA連接酶”）進(jìn)行連接。（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要選擇的啟動(dòng)子是膀胱上皮細(xì)胞蛋白基因的啟動(dòng)子，目的是________?！即鸢浮剑?）①.P3②.P2③.Sau3AⅠ（2）①.EcoRV和BamHⅠ②.T4DNA連接酶（3）使凝乳酶基因在膀胱上皮細(xì)胞中特異性表達(dá)〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。（4）目的基因的檢測與鑒定?！拘?詳析】PCR過程需要兩種引物，能分別與目的基因兩條鏈的3'端通過堿基互補(bǔ)配對(duì)結(jié)合，游離的磷酸基團(tuán)連接在脫氧核糖的5號(hào)碳上，所在位置表示脫氧核苷酸鏈的5'端，-OH端為3'端，故應(yīng)選擇引物P2與P3。BamHⅠ能識(shí)別目的基因中的核苷酸序列，破壞目的基因的完整性，不能選擇該酶；而在載體上存在EcoRⅠ、BamHⅠ、EcoRⅤ三種酶切位點(diǎn)，EcoRⅠ會(huì)破壞抗性基因，故應(yīng)選擇EcoRV和BamHⅠ切割質(zhì)粒，BamHⅠ和Sau3AⅠ的識(shí)別序列相同，因此可以選擇Sau3AⅠ和EcoRV切割目的基因，若要目的基因正方向插入質(zhì)粒，引物P3的5′端添加的限制酶為EcoRV，引物P2的5′端添加的限制酶為Sau3AⅠ?！拘?詳析】由（1）可知，構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，先用EcoRV和BamHⅠ切割質(zhì)粒。E?coliDNA連接酶、T4DNA連接酶都能連接黏性末端，此外，T4DNA連接酶還可以連接平末端，由于限制酶EcoRV能產(chǎn)生平末端，因此，用T4DNA連接酶進(jìn)行連接。【小問3詳析】膀胱上皮細(xì)胞蛋白基因的啟動(dòng)子能使使凝乳酶基因在膀胱上皮細(xì)胞中特異性表達(dá)。山東省日照市2022-2023學(xué)年高二下學(xué)期期中校際聯(lián)合考試試題一、選擇題：1.《說文解字》中提到“菹菜者，酸菜也”。泡菜是我國的傳統(tǒng)食品，下列敘述正確的是（）A.為了減少雜菌污染，發(fā)酵前需要對(duì)器具和蔬菜進(jìn)行消毒B.為了保證泡菜壇內(nèi)的無氧環(huán)境，腌制時(shí)應(yīng)將泡菜壇裝滿C.加入煮沸過的鹽水可減少其中的溶氧量并除去部分雜菌D.泡菜壇內(nèi)出現(xiàn)了一層白膜可能是乳酸菌大量繁殖形成的〖答案〗C〖祥解〗泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下乳酸菌能夠?qū)⑹卟酥械钠咸烟茄趸癁槿樗?。泡菜的制作流程是：選擇原料、配置鹽水、調(diào)味裝壇、密封發(fā)酵?！驹斘觥緼、為了降低雜菌污染的風(fēng)險(xiǎn)，發(fā)酵前需要對(duì)器具進(jìn)行消毒，對(duì)蔬菜不需要消毒，A錯(cuò)誤；B、泡菜腌制時(shí)應(yīng)裝至八成滿，以防止發(fā)酵液溢出，B錯(cuò)誤；C、泡菜制作過程中，需要加入煮沸冷卻后的水，目的是減少其中的溶氧量并除去部分雜菌，C正確；D、在泡菜壇內(nèi)液體表面有時(shí)會(huì)出現(xiàn)一層白膜，這層白膜是由酵母菌大量繁殖所致，D錯(cuò)誤。故選C。2.釀酒用的酒曲是以谷物為原料，破碎加水壓制而成的。酒曲富含酵母菌和霉菌等多種微生物，經(jīng)水浸泡活化后加入蒸熟的米即可用于釀酒。下列敘述正確的是（）A.酒曲中的酵母菌等微生物，可以將糖徹底分解成酒精B.夏季氣溫升高，需要用沸水浸泡酒曲以防止雜菌污染C.酒曲經(jīng)水浸泡活化有利于提高酶的活性和酵母菌的代謝D.釀酒過程中密封的時(shí)間越長，產(chǎn)生的酒精量就越多〖答案〗C〖祥解〗制作果酒的過程中，除酵母菌之外，還會(huì)有其他雜菌生長，它們會(huì)在酒精發(fā)酵中污染發(fā)酵液，而避免發(fā)酵液污染需要從發(fā)酵制作的過程全面考慮。【詳析】A、酒曲中的酵母菌等微生物，無氧呼吸都只在第一階段釋放出少量的能量，生成少量ATP。葡萄糖分子中的大部分能量則存留在不徹底的氧化產(chǎn)物的酒精中，A錯(cuò)誤；B、沸水浸泡酒曲，會(huì)殺死酒曲中含有的酵母菌和霉菌等多種微生物，B錯(cuò)誤；C、酒曲中的酵母菌處于休眠狀態(tài)，經(jīng)水浸泡活化有利于提高酶的活性和酵母菌的代謝，C正確；D、因?yàn)榉磻?yīng)物有限，酒精濃度高時(shí)酵母菌等微生物會(huì)失活，產(chǎn)生酒精的量不會(huì)一直增多，D錯(cuò)誤。故選C。3.科研人員設(shè)計(jì)了青霉素生產(chǎn)菌——產(chǎn)黃青霉菌的誘變育種方案，步驟為：①配制中性偏酸的培養(yǎng)基，準(zhǔn)備相關(guān)的培養(yǎng)皿，稀釋用水；②進(jìn)行菌種的紫外線誘變；③用接種環(huán)蘸取誘變后的產(chǎn)黃青霉菌孢子懸液，在固體培養(yǎng)基上劃線以分離并計(jì)數(shù)；④放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)到長出單菌落；⑤挑取單菌落，接種至均勻分布野生型金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基上，進(jìn)行生產(chǎn)青霉素性能的測定。上述設(shè)計(jì)存在不當(dāng)之處，下列修改合理的是（）A.步驟①中配制的培養(yǎng)基應(yīng)為中性偏堿B.步驟③中應(yīng)使用稀釋涂布平板法C.步驟②、③的順序應(yīng)該調(diào)換D.步驟⑤中應(yīng)將單菌落接種至含剛果紅的培養(yǎng)基上〖答案〗B〖祥解〗培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽。培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。如培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性。液體狀態(tài)的培養(yǎng)基稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的稱為固體培養(yǎng)基，在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂后，就制成固體培養(yǎng)基?！驹斘觥緼、培養(yǎng)霉菌時(shí)，步驟①中配制的培養(yǎng)基應(yīng)為酸性，A不符合題意；B、平板劃線法不能進(jìn)行計(jì)數(shù)，步驟③中應(yīng)使用稀釋涂布平板法，B符合題意；C、步驟②先進(jìn)行誘變育種，再進(jìn)行③接種，不需要調(diào)換，C不符合題意；D、步驟⑤挑取單菌落，接種至均勻分布野生型金黃色葡萄球菌的培養(yǎng)基上，進(jìn)行生產(chǎn)青霉素性能的測定，青霉素能抑制金黃色葡萄球菌的生存，D不符合題意。故選B。4.轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品是指利用基因工程技術(shù)獲得的生物制品，其安全性問題一直是大眾關(guān)注和爭論的熱點(diǎn)。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.通過轉(zhuǎn)基因育種可增加或消除原有生物品種的某些性狀B.轉(zhuǎn)基因食品風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)還需考慮目的基因的安全性問題C.轉(zhuǎn)基因抗蟲作物的長期種植會(huì)誘導(dǎo)害蟲產(chǎn)生變異，出現(xiàn)超級(jí)害蟲D.嚴(yán)格選擇種植區(qū)域可降低轉(zhuǎn)基因作物發(fā)生外源基因擴(kuò)散的可能性〖答案〗C〖祥解〗基因工程是指按照人們的愿望，通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和產(chǎn)品。從技術(shù)操作層面來看，由于基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)和施工的，因此又叫做重組DNA技術(shù)；轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品是指利用基因工程技術(shù)而獲得的生物制品?！驹斘觥緼、基因工程是指按照人們的愿望，通過轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物新的遺傳特性，創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和產(chǎn)品；轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品是指利用基因工程技術(shù)而獲得的生物制品，故通過轉(zhuǎn)基因育種，按照人們的需要，可增加或消除原有生物品種的某些性狀，A正確；B、在基因表達(dá)載體上，除了有目的基因、啟動(dòng)子、終止子等外，還需要標(biāo)記基因，故轉(zhuǎn)基因食品風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估時(shí)還需考慮標(biāo)記基因的安全性問題，B正確；C、轉(zhuǎn)基因作物的長期、大規(guī)模種植，可能將具有抗性的害蟲選擇出來，可能使目標(biāo)害蟲或非目標(biāo)害蟲對(duì)轉(zhuǎn)基因作物的適應(yīng)在群體水平上產(chǎn)生抗性，有可能產(chǎn)生侵染力更強(qiáng)的“超級(jí)害蟲”，造成更大的危害，并不是抗蟲作物誘導(dǎo)害蟲產(chǎn)生變異，C錯(cuò)誤；D、轉(zhuǎn)基因作物所攜帶的外源基因在使得作物高產(chǎn)的同時(shí)，也可能會(huì)向自然界擴(kuò)散，從而打破自然界原有的物種平衡，嚴(yán)格選擇種植區(qū)域可減少轉(zhuǎn)基因作物發(fā)生外源基因擴(kuò)散的可能性，D正確。5.體外條件下，DNA復(fù)制需要有引物。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.用于PCR擴(kuò)增的引物的長度通常為20～30個(gè)核苷酸B.引物制備的前提是已知目的基因的部分脫氧核苷酸序列C.進(jìn)行體外DNA復(fù)制時(shí)，引物要有兩種且不能互補(bǔ)配對(duì)D.脫氧核苷酸作為擴(kuò)增的原料會(huì)依次連接到引物的5′端〖答案〗D〖祥解〗PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)，原理是DNA的復(fù)制。PCR擴(kuò)增時(shí)需要兩種引物、模板DNA、四種游離的脫氧核昔酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶。【詳析】A、引物的長度通常為20～30個(gè)核苷酸，能與模板鏈結(jié)合，A正確；B、引物制備的前提是已知目的基因兩端的核苷酸序列，B正確；C、進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí)，引物要與擴(kuò)增DNA片段兩端互補(bǔ)，有兩種，這兩種引物不能互補(bǔ)，避免DNA擴(kuò)增失敗，C正確；D、PCR擴(kuò)增時(shí)，脫氧核苷酸作為擴(kuò)增的原料會(huì)依次連接到3'端，D錯(cuò)誤。故選D。6.檸檬酸是一種廣泛應(yīng)用的食品酸度調(diào)節(jié)劑，工業(yè)上可以以玉米為原料，通過黑曲霉發(fā)酵制得，工藝流程如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.種子培養(yǎng)是在發(fā)酵前對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)B.蒸煮有利于酶的進(jìn)一步作用并對(duì)糖漿滅菌C.發(fā)酵液pH降低到一定值后可進(jìn)行過濾純化D.利用廢渣為原料可進(jìn)一步獲得單細(xì)胞蛋白〖答案〗B〖祥解〗發(fā)酵工程是指采用現(xiàn)代工程技術(shù)手段，利用微生物的某些特定功能，為人類生產(chǎn)有用的產(chǎn)品，或直接把微生物應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)過程的一種新技術(shù)。發(fā)酵工程的內(nèi)容包括菌種的洗育、培養(yǎng)基的配制、滅菌、擴(kuò)大培養(yǎng)和接種、發(fā)酵過程和產(chǎn)品的分離提純等方面。【詳析】A、種子培養(yǎng)是在發(fā)酵前對(duì)菌種進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，增加菌體的數(shù)量，A正確；B、蒸煮的作用是終止酶的作用，并進(jìn)一步對(duì)糖漿滅菌，B錯(cuò)誤；C、發(fā)酵產(chǎn)物為檸檬酸，呈酸性，故發(fā)酵液pH降低到一定值后可進(jìn)行過濾純化，C正確；D、微生物含有豐富的蛋白質(zhì)，廢渣中含有大量的發(fā)酵菌體，故利用廢渣為原料可進(jìn)一步獲得單細(xì)胞蛋白，D正確。故選B。7.某研究性學(xué)習(xí)小組擬培育一種名貴花卉的脫毒苗，其技術(shù)路線為“取材—消毒—愈傷組織培養(yǎng)—生芽、生根—移栽”。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.取材部位一般選擇植物頂端分生區(qū)附近B.外植體接種前需要用酒精、次氯酸鈉等進(jìn)行消毒C.接種時(shí)需要將消毒后的外植體的形態(tài)學(xué)下端插入培養(yǎng)基中D.將試管苗移栽后，需要進(jìn)行病毒接種實(shí)驗(yàn)來篩選出脫毒苗〖答案〗D〖祥解〗植物組織培養(yǎng)的過程為：離體的植物組織、器官或細(xì)胞經(jīng)過脫分化形成愈傷組織，愈傷組織經(jīng)過再分化過程形成胚狀體，進(jìn)一步發(fā)育形成植株?！驹斘觥緼、植物頂端分生區(qū)細(xì)胞代謝旺盛，含病毒少，甚至不含病毒，因此取材部位一般選擇植物頂端分生區(qū)附近，A正確；B、植物組織培養(yǎng)時(shí)所用的外植體需消毒，可以用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精消毒，同時(shí)也可以用流水沖洗或次氯酸鈉進(jìn)行處理，B正確；C、植物組織培養(yǎng)時(shí)，常需要誘導(dǎo)外植體生根發(fā)芽，故接種時(shí)要將外植體的形態(tài)學(xué)下端插入培養(yǎng)基中，C正確；D、脫毒苗是不含病毒的植株，不具有抗病毒的能力，進(jìn)行病毒接種實(shí)驗(yàn)是篩選出抗毒苗，D錯(cuò)誤。故選D。8.從中國倉鼠卵巢組織分離、培養(yǎng)的CHO細(xì)胞是生物制品領(lǐng)域最主要的生產(chǎn)細(xì)胞，廣泛應(yīng)用于各種藥物蛋白的生產(chǎn)。CHO細(xì)胞可以在培養(yǎng)基中高密度生長，能夠分泌胞外蛋白且自身的分泌蛋白比較少。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.培養(yǎng)CHO細(xì)胞時(shí)所需的CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pHB.與培養(yǎng)普通動(dòng)物細(xì)胞相比，CHO細(xì)胞兩次分瓶之間的間隔時(shí)間較短C.利用CHO細(xì)胞作為受體細(xì)胞生產(chǎn)外源蛋白，有利于后期蛋白質(zhì)的純化D.與大腸桿菌相比，CHO細(xì)胞表達(dá)的外源蛋白與天然蛋白更加相似〖答案〗B〖祥解〗動(dòng)物培養(yǎng)條件：（1）無菌無毒環(huán)境：無菌——對(duì)培養(yǎng)液和所有培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理；在細(xì)胞培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素；無毒——定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成危害。（2）營養(yǎng)成分：所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然成分。培養(yǎng)基類型：合成培養(yǎng)基（將細(xì)胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)按其種類和所需數(shù)量嚴(yán)格配制而成的培養(yǎng)基）。（3）溫度和pH值：哺乳動(dòng)物多以36.5±0.5℃為宜，多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。（4）氣體環(huán)境：通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5%CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。O2：是細(xì)胞代謝所必需的，CO2主要作用是維持培養(yǎng)液的pH?！驹斘觥緼、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要一定的氣體環(huán)境，其中5%CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH，A正確；B、CHO細(xì)胞可以在培養(yǎng)基中高密度生長，因此，與培養(yǎng)普通動(dòng)物細(xì)胞相比，CHO細(xì)胞兩次分瓶之間的間隔時(shí)間較長，B錯(cuò)誤；C、CHO細(xì)胞能夠分泌胞外蛋白且自身的分泌蛋白比較少，因此，利用CHO細(xì)胞作為受體細(xì)胞生產(chǎn)外源蛋白，有利于后期蛋白質(zhì)的純化，C正確；D、大腸桿菌屬于原核細(xì)胞，CHO細(xì)胞為真核細(xì)胞，與大腸桿菌相比，CHO細(xì)胞具有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，可以對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行更完善加工，D正確。故選B。9.傳統(tǒng)鼠源單抗可被人體免疫系統(tǒng)識(shí)別而產(chǎn)生免疫反應(yīng)，導(dǎo)致單抗的治療效果下降?？蒲腥藛T對(duì)小鼠的相關(guān)基因進(jìn)行改造，制備了人源化的Her2（人表皮生長因子受體2）單克隆抗體，該單克隆抗體可特異性結(jié)合乳腺癌細(xì)胞。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.乳腺癌細(xì)胞細(xì)胞膜表面的Her2的表達(dá)量要低于正常細(xì)胞B.鼠源化Her2單抗進(jìn)入人體后可能會(huì)誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗單抗抗體C.人源化Her2單抗制備利用了重組DNA技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞融合等技術(shù)D.熒光標(biāo)記的人源化Her2單克隆抗體可用于乳腺癌的定位診斷〖答案〗A〖祥解〗（1）單克隆抗體：由單個(gè)B淋巴細(xì)胞進(jìn)行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的抗體，具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的特點(diǎn)。（2）單克隆抗體的制備過程：首先用特定抗原注射小鼠體內(nèi)，使其發(fā)生免疫，小鼠體內(nèi)產(chǎn)生具有免疫能力的B淋巴細(xì)胞。利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，單克隆抗體制備過程中的兩次篩選?！驹斘觥緼、制備了人源化的Her2（人表皮生長因子受體2）單克隆抗體，該單克隆抗體可特異性結(jié)合乳腺癌細(xì)胞，說明乳腺癌細(xì)胞細(xì)胞膜表面的Her2的表達(dá)量要高于正常細(xì)胞，A錯(cuò)誤；B、傳統(tǒng)鼠源性單抗對(duì)人體來說是抗原，可能會(huì)引起人體產(chǎn)生相應(yīng)抗體，使得單抗藥物療效減弱，并且引起嚴(yán)重的不良反應(yīng)，而人源化單抗能夠克服人抗鼠抗體反應(yīng)避免單抗分子被免疫系統(tǒng)當(dāng)作異源蛋白而被快速清除，提高單抗藥物的藥效，因此鼠源化Her2單抗進(jìn)入人體后可能會(huì)誘導(dǎo)人體產(chǎn)生抗單抗抗體，B正確；C、人源化Her2單抗制備利用了重組DNA技術(shù)（要對(duì)小鼠的相關(guān)基因進(jìn)行改造）、動(dòng)物細(xì)胞融合（骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞融合）等技術(shù)，C正確；D、熒光標(biāo)記的人源化Her2單克隆抗體可用于乳腺癌的定位診斷，因?yàn)樵搯慰寺】贵w可特異性結(jié)合乳腺癌細(xì)胞，D正確。故選A。10.我國科研人員利用小鼠獲得了單倍體胚胎干細(xì)胞，流程如下圖所示。目前構(gòu)建成功的單倍體胚胎干細(xì)胞，其細(xì)胞核內(nèi)包含的性染色體全部都是X染色體，而無包含Y染色體的細(xì)胞。已知小鼠Y染色體比X染色體短小。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.精子頭部入卵后，透明帶迅速發(fā)生生理反應(yīng)拒絕其它精子進(jìn)入透明帶B.為得到只含精子染色體的胚胎干細(xì)胞需在核融合前剔除卵子的雌原核C.由圖可知，單倍體胚胎干細(xì)胞來自小鼠囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞D.Y染色體比X染色體短小，可能缺少支持單倍體胚胎干細(xì)胞存活的基因〖答案〗A〖祥解〗聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胎兒的各種組織；而沿透明帶內(nèi)壁擴(kuò)展和排列的細(xì)胞，稱為滋養(yǎng)層細(xì)胞，它們將來發(fā)育成胎膜和胎盤?！驹斘觥緼、在精子觸及卵細(xì)胞膜的瞬間，卵細(xì)胞膜外的透明帶會(huì)迅速發(fā)生生理反應(yīng)，阻止后來的精子進(jìn)入透明帶。然后，精子入卵。精子入卵后，卵細(xì)胞膜也會(huì)立即發(fā)生生理反應(yīng)，拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)，A錯(cuò)誤；B、精子入卵后，尾部脫離，原有的核膜破裂并形成一個(gè)新的核膜，最后形成一個(gè)比原來精子的核還大的核，叫作雄原核。與此同時(shí)，精子入卵后被激活的卵子完成減數(shù)分裂Ⅱ，排出第二極體后，形成雌原核。為得到只含精子染色體的胚胎干細(xì)胞需在核融合前剔除卵子的雌原核，B正確；C、聚集在胚胎一端的細(xì)胞形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，將來發(fā)育成胎兒的各種組織，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞具有全能性，所以單倍體胚胎干細(xì)胞可以來自小鼠囊胚期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，C正確；D、Y染色體比X染色體短小，所以Y染色體上的基因相對(duì)較少，可能缺少支持單倍體胚胎干細(xì)胞存活的基因，D正確。故選A11.奶?；铙w采卵—體外胚胎生產(chǎn)（OPU-IVP）技術(shù)的誕生標(biāo)志著奶牛繁育技術(shù)進(jìn)入“5G”時(shí)代。該技術(shù)包括奶?；铙w采卵及體外培養(yǎng)、體外受精、性別控制、胚胎移植等操作。已知奶牛Y染色體上有一段雄性特異的高度重復(fù)序列，依據(jù)該重復(fù)序列設(shè)計(jì)引物，建立了用于奶牛胚胎性別鑒定的PCR體系（SRY-PCR）。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.通過OPU-IVP技術(shù)獲得優(yōu)良奶牛的過程屬于有性生殖B.活體采卵前可對(duì)供體母牛注射促性腺激素促使其超數(shù)排卵C.采集的精子需要經(jīng)過獲能處理才能與培養(yǎng)成熟的卵子完成受精D.取滋養(yǎng)層細(xì)胞進(jìn)行SRY-PCR，應(yīng)選擇結(jié)果為陽性的胚胎進(jìn)行移植〖答案〗D〖祥解〗體外受精主要包括：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精。（1）卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)：①主要方法是用促性腺激素處理，使其超數(shù)排卵，然后從輸卵管中沖取卵子。②第二種方法：從已屠宰母畜的卵巢中采集卵母細(xì)胞或直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞。（2）精子的采集和獲能：①收集精子的方法：假陰道法、手握法和電刺激法。②對(duì)精子進(jìn)行獲能處理：包括培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法。（3）受精：在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程?！驹斘觥緼、OPU-IVP技術(shù)包括體外受精過程，故其獲得優(yōu)良奶牛的過程屬于有性生殖，A正確；B、為獲取更多的卵（母）細(xì)胞，可對(duì)供體母牛注射促性腺激素，使其超數(shù)排卵，B正確；C、采集的精子需要經(jīng)過獲能處理，才具備受精的能力，才能與培養(yǎng)成熟的卵子完成受精，C正確；D、結(jié)果為陽性的胚胎說明其含有Y染色體，為雄性，為獲得可以產(chǎn)生牛奶的奶牛應(yīng)選擇結(jié)果為陰性的胚胎進(jìn)行移植，D錯(cuò)誤。故選D。12.基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行的設(shè)計(jì)施工，需要有專門的工具。下列關(guān)于基因工程所需基本工具的敘述，錯(cuò)誤的是（）A.限制酶識(shí)別雙鏈DNA中的特定序列，并在其中一條鏈的特定部位切割B.當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA切開時(shí)，產(chǎn)生的是黏性末端C.DNA連接酶和DNA聚合酶連接的是同一化學(xué)鍵，但它們催化的底物不同D.質(zhì)粒DNA分子上有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供外源DNA片段插入其中〖答案〗A〖祥解〗限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂。【詳析】A、限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，A錯(cuò)誤；B、當(dāng)限制酶在它識(shí)別序列的中心軸線兩側(cè)將DNA的兩條鏈分別切開，得到的是黏性末端，B正確；C、DNA連接酶和DNA聚合酶連接的都是磷酸二酯鍵，但DNA連接酶連接的是兩個(gè)DNA片段，DNA聚合酶催化單個(gè)的脫氧核苷酸聚合到子鏈的3'端，故它們催化的底物不同，C正確；D、質(zhì)粒能攜帶目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，質(zhì)粒DNA分子上有一個(gè)至多個(gè)限制酶切割位點(diǎn)，供外源DNA片段插入其中，D正確。故選A。13.某小組利用菜花進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)，下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.將研磨液在4℃冰箱中放置幾分鐘可以降低DNA酶的活性B.加入酒精后用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌，可減少DNA分子斷裂C.向上清液中加入2mol/L的NaCl溶液有利于DNA的析出D.用二苯胺試劑對(duì)白色絲狀物進(jìn)行鑒定時(shí)，需要進(jìn)行沸水浴加熱〖答案〗C〖祥解〗根據(jù)DNA的溶解性提取DNA：（1）DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl中的溶解度不同；（2）DNA不溶于酒精，但是某些蛋白質(zhì)則溶液酒精；（3）DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性不同．【詳析】A、低溫能夠降低酶的活性，將研磨液在4℃冰箱中放置幾分鐘可以降低DNA酶的活性，A正確；B、加入體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌，使絮狀物纏繞在玻璃棒上，用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌可減少DNA分子斷裂，B正確；C、DNA在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同，在0.14mol/L溶解度最低，在0.14mol/L的NaCl溶液有利于DNA的析出，C錯(cuò)誤；D、在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色，因此用二苯胺試劑對(duì)白色絲狀物進(jìn)行鑒定時(shí)，需要進(jìn)行沸水浴加熱，D正確。故選C。14.某研究小組用葉盤法培育轉(zhuǎn)基因耐鹽毛白楊，主要操作環(huán)節(jié)如下：①獲取葉盤（用消毒過的打孔器從葉子上取下圓形小片）；②遺傳轉(zhuǎn)化（將毛白楊葉盤與重組農(nóng)桿菌共培養(yǎng)）；③篩選培養(yǎng)（在含卡那霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行篩選并進(jìn)行組織培養(yǎng)）；④檢測與鑒定。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒會(huì)整合到毛白楊葉盤細(xì)胞的染色體上B.培養(yǎng)基中卡那霉素的作用是篩選出被重組農(nóng)桿菌感染的葉盤C.組織培養(yǎng)時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加細(xì)胞分裂素和生長素等激素D.可用抗原—抗體雜交的方法檢測毛白楊提取液中有無耐鹽蛋白〖答案〗A〖祥解〗基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成；（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等；（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。【詳析】A、農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)含有Ti質(zhì)粒，當(dāng)它侵染植物細(xì)胞后，能將Ti質(zhì)粒上的T-DNA（可轉(zhuǎn)移的DNA）轉(zhuǎn)移到毛白楊葉盤細(xì)胞，并且將其整合到該細(xì)胞的染色體DNA上，A錯(cuò)誤；B、卡那霉素屬于抗生素，葉盤接種在含卡那霉素的培養(yǎng)基上，若含有目的基因和卡那霉素抗性基因的重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入了葉盤且正確表達(dá)，則被重組農(nóng)桿菌感染的葉盤培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基上生長，故卡那霉素的主要作用是篩選出被重組農(nóng)桿菌感染的葉盤，B正確；C、植物組織培養(yǎng)過程中需要加入植物激素，其中最主要的是生長素和細(xì)胞分裂素，它們是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵激素，C正確；D、抗原與抗體的結(jié)合具有特異性，耐鹽基因進(jìn)入細(xì)胞后，可以通過抗原—抗體雜交方法來檢測轉(zhuǎn)基因毛白楊提取液中有無相應(yīng)的耐鹽蛋白，D正確。故選A。15.膽汁鹽水解酶（BSH）對(duì)小鼠糖尿病的治療有明顯的效果。天然大腸桿菌對(duì)外來DNA的入侵具有一定的抵抗力。科研人員從實(shí)驗(yàn)小鼠的糞便樣本中提取出一種遺傳上易馴化（對(duì)DNA入侵抵抗力弱）的大腸桿菌菌株M，構(gòu)建BSH基因的表達(dá)載體（如下圖）并導(dǎo)入菌株M體內(nèi)，再將菌株M重新導(dǎo)入小鼠腸道。一段時(shí)間后，在小鼠的腸道中出現(xiàn)了能持續(xù)分泌BSH的大腸桿菌，小鼠糖尿病癥狀得到緩解。下列敘述錯(cuò)誤的是（）A.天然大腸桿菌對(duì)DNA入侵具有一定抵抗力可能與細(xì)胞內(nèi)的限制酶有關(guān)B.構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)該選用限制酶B和C切割質(zhì)粒和目的基因C.轉(zhuǎn)化前常用Ca2+處理大腸桿菌，使其處于能吸收外源DNA分子的狀態(tài)D.轉(zhuǎn)基因菌株M導(dǎo)入小鼠腸道后，BSH基因在其腸道細(xì)胞中穩(wěn)定復(fù)制并表達(dá)〖答案〗D〖祥解〗基因工程技術(shù)的步驟有：獲取目的基因、構(gòu)建基因表達(dá)載體（核心步驟）、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測與鑒定。【詳析】A、根據(jù)題意“天然大腸桿菌對(duì)外來DNA的入侵具有一定的抵抗力”，推測可能是天然大腸桿菌的細(xì)胞內(nèi)有能將外來DNA切割的限制酶，A正確；B、由圖可知，使用酶A會(huì)將氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因這兩個(gè)標(biāo)記基因破壞，且酶B和C在目的基因和質(zhì)粒上都有識(shí)別位點(diǎn)，故構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，應(yīng)該選用限制酶B和C切割質(zhì)粒和目的基因，B正確；C、轉(zhuǎn)化前常用Ca2+處理大腸桿菌，目的是使其處于能吸收外源DNA分子的狀態(tài)，以利于將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞中，C正確；D