二手液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的特點(diǎn)和應(yīng)用范圍 液相色譜常見問題解決方法

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二手液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀是用于多而雜樣品中化合物牢靠識別和定量的篩選儀器，系統(tǒng)具有高辨別率，精準(zhǔn)質(zhì)量數(shù)，以及快速掃描本領(lǐng)。

一、特點(diǎn)

1、高辨別本領(lǐng)———除去同位素干擾，加添多而雜樣品分析的牢靠性。

2、精準(zhǔn)質(zhì)量———使全掃描和AIF掃描精度優(yōu)于1ppm，質(zhì)量校正程序供應(yīng)牢靠識別。

3、掃描速度———12Hz掃描頻率與U—HPLC完全兼容，為快速色譜應(yīng)用確保精準(zhǔn)明確的質(zhì)量測量。

4、快速極性切換———1次正極和1次負(fù)極的完整掃描周期可在1秒內(nèi)完成，辨別率設(shè)置為35,000，無需犧牲質(zhì)量精準(zhǔn)度。

5、全離子裂解（AIF）———具有r種裂解技術(shù)：源內(nèi)裂解誘導(dǎo)裂解（CID）和高能碰撞裂解（HCD），供應(yīng)MS和MS/MS數(shù)據(jù)。

6、質(zhì)譜全掃描，AIF掃描，數(shù)據(jù)倚靠AIF，交替全掃描和AIF掃描。

質(zhì)譜聯(lián)用儀是以液相色譜作為分別系統(tǒng)，質(zhì)譜為檢測系統(tǒng)，樣品在色譜部分分別后在質(zhì)譜部分被離子化，經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開，經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。液質(zhì)聯(lián)用體現(xiàn)了色譜和質(zhì)譜的互補(bǔ)，將LC對多而雜樣品的高分別本領(lǐng)，具有高選擇性、高靈敏度及能夠供應(yīng)相對分子質(zhì)量與結(jié)構(gòu)信息的優(yōu)點(diǎn)結(jié)合起來，在藥物分析、食品分析和環(huán)境分析等很多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。

二、二手液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀應(yīng)用范圍

1、不揮發(fā)性化合物分析測定；

2、化合物的分析測定；

3、熱不穩(wěn)定化合物的分析測定；

4、大分子量化合物（包括蛋白，多肽，多聚物等）的分析測定。

1、基線波動的原因？

基線波動有可能與試驗(yàn)室的溫度及濕度變化有關(guān)系。需確保室溫及濕度穩(wěn)定，將安捷倫液相色譜儀從通風(fēng)櫥中取出，并將色譜柱和毛細(xì)管進(jìn)行隔熱保溫。

2、安捷倫液相色譜儀—什么原因?qū)е禄€毛刺？

這很有可能是流動池內(nèi)有氣泡。請先停泵來進(jìn)行確認(rèn),假如毛剌消失，則很有可能是由于流動池內(nèi)有氣泡。需要沖洗流動池。假如毛剌仍舊存在，則需檢查檢測器本身的電噪音有關(guān)。

3、如何削減基線噪音？

無規(guī)律噪音可能與污染有關(guān)。請沖洗色譜柱，對樣品做合適的前處理以避開污染，并使用HPLC級別的溶劑。連續(xù)噪音有可能由檢測器或泵造成。要確定問題是否發(fā)生在檢測器還是在泵，請先關(guān)泵停掉流量，監(jiān)測基線。假如此時基線平穩(wěn)，則噪音可能與泵有關(guān)系。使用ChemStation在線診斷或LC手持掌控器檢查泵方面的故障。假如停泵后噪音連續(xù)存在，則說明噪音與檢測器有關(guān)。首先，請嘗試更換燈。假如問題仍舊存在，則請廠家聯(lián)系聯(lián)系。

4、如何避開液相基線飄移？

基線向上飄移表明系統(tǒng)中有污染。請沖洗色譜柱，凈化樣品，然后使用新溶劑。向下飄移通常是由于檢測室或柱箱中的溫度波動的原因。減小室溫變化，將儀器從通風(fēng)櫥中取出，并將色譜柱和毛細(xì)管保溫隔熱。向下飄移也可能由于溶劑的純度不是HPLC級別的溶劑而且此純度低的溶劑在紫外有吸取。

5、如何排出流動相/流動池中的氣泡？

避開流動相中產(chǎn)生氣泡的方式是將流動相經(jīng)脫氣裝置進(jìn)行脫氣。假如沒有脫氣裝置，則可以在流動相溶劑瓶中通入氦氣進(jìn)行脫氣。也可以在檢測器的出口端加一根細(xì)管線以調(diào)整流動池中的背壓，但必需注意不要超過流動池的最大壓力，否則會造成流動池漏液或流動池?fù)p壞。假如流動池中顯現(xiàn)氣泡，則先摘下色譜柱，用一根管線直接將流動相接入檢測器的入口。將異丙醇以較大的流速注入流動池。直到基線上看不到尖峰為止。氣泡就應(yīng)當(dāng)清除掉了。

與液相色譜柱的性能相關(guān)的因素很多，基質(zhì)（matrix）或者說擔(dān)體、載體的化學(xué)性質(zhì)、鍵合相（固定液）的化學(xué)性質(zhì)、填料形狀大小粒度分布、碳量和鍵合度等等。

色譜柱填料可以由基質(zhì)直接構(gòu)成，如硅膠、氧化鋁、高交聯(lián)度的苯乙烯—二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等；也可以在這些基質(zhì)的基礎(chǔ)上涂布或化學(xué)鍵合固定液來構(gòu)成，如：經(jīng)典的各種ODS柱、氨基柱、氰基柱等。

一、基質(zhì)的特點(diǎn)：

1、硅膠

硅膠是陶瓷性質(zhì)的無機(jī)物基質(zhì)，剛性大，不易變形。化學(xué)性質(zhì)較穩(wěn)定，但對于水溶液尤其堿性水溶液仍舊是不穩(wěn)定的，即使表面經(jīng)過良好的化學(xué)鍵合，覆蓋了固定液，還是要注意水、堿性溶液、酸性溶液對硅膠的溶解作用，基質(zhì)或者說是柱床（packedbed）溶解對色譜柱的影響是致命的。以硅膠為基質(zhì)的填料構(gòu)成了目前絕大多數(shù)的色譜柱填料。純硅膠填料適合分別溶于有機(jī)溶劑的極性、弱極性的非強(qiáng)離解型的化合物，硅膠也可以做凝膠色譜但柱效較低。硅膠基質(zhì)鍵合固定相的高壓液相填料，有其他填料無法比擬的高分別效能。

2、二氧化鋁

二氧化鋁和硅膠相像，但對水溶液、酸性堿性水溶液溶液更加不穩(wěn)定。所以，極少用作鍵合固定相的基質(zhì)，也是適合分別溶于有機(jī)溶劑的極性、弱極性的非強(qiáng)離解型的化合物，尤其是分別芳香族碳?xì)浠衔?。酸性易離解的化合物簡單在二氧化鋁上形成死吸附。另外，氧化鋁分別幾何異構(gòu)體本領(lǐng)優(yōu)于硅膠。

3、聚合物填料

聚合物基質(zhì)受壓會變形，壓力限度低但pH使用范圍寬。苯乙烯—二乙烯苯基質(zhì)疏水性強(qiáng)，使用任何流動相，在整個pH范圍內(nèi)穩(wěn)定，可以用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿來清洗色譜柱。甲基丙烯酸酯基質(zhì)比苯乙烯—二乙烯苯疏水性更強(qiáng)，但可以通過適當(dāng)?shù)墓δ芑揎椬兂捎H水性的。由于不耐壓、有溶脹性，所以聚合物填料適合用于大分子像蛋白質(zhì)或合成的高聚物，另外還可以制成分子排阻、離子交換柱。近年進(jìn)展快速的大孔樹脂，實(shí)際上主體就是苯乙烯—二乙烯苯聚合物或仿佛的合成高聚物。

由于硅膠基質(zhì)的確定地位，以下緊要以硅膠為例。

二、形狀大小粒度分布

基質(zhì)要成為填料，首先要制成合適的形狀和大小。硅膠形狀有：薄殼型、無定形全多孔、球形全多孔，另外還有先做成微珠再聚積成球形全多孔的。通常只說不定形、球形。無定形全多孔的填料簡單制備、價格低、粒度分布較均勻，但渦流擴(kuò)散大，滲透性差，比較難填裝出穩(wěn)定的柱床，一般用來做制備柱。球形全多孔填料渦流擴(kuò)散小，滲透性好；假如是硅膠先做成珠子再聚積而成的話，具有傳質(zhì)阻抗小、載樣量大的優(yōu)點(diǎn)，柱效也更高。球形填料外形對稱，比較簡單填出穩(wěn)定的柱床。填料的大小一般不能直接測量，由于填料粒度有確定分布