腫瘤標志物檢測與臨床

腫瘤標志物檢測與臨床

發(fā)布時間03年03月28日10時54分

在腫瘤的研究和臨床實踐中，早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷、早期治療是

關鍵。腫瘤標志物(TumorMarkerTM)在腫瘤普查、診斷、判斷預后

和轉歸、評價治療療效和高危人群隨訪觀察等方面都具有較大的實用

價值。自80年代以來，隨著應用B淋巴細胞雜交瘤制備腫瘤單克隆技

術的不斷成熟，出現(xiàn)了大量的抗腫瘤的單克隆抗體，并與同時出現(xiàn)且

日新月異的免疫學檢測技術(RIA、IRMA、ELISA、CLIA、IFA、TRFIA

等)相結合，發(fā)展了眾多的腫瘤標志物檢測項目并不斷地應用于臨床,

已成為腫瘤患者的一個重要檢查指標。

1、概述

1.1一般而論，腫瘤標志物主要是指癌細胞分泌或脫落到體液或

組織中的物質，或是縮主對體內新生物反應而產(chǎn)生并進入到體液或組

織中的物質。這些物質有的不存在于正常人體內只見于胚胎中，有的

在腫瘤病人體內含量超過正常人體內含量。通過測定其存在或含量可

輔助診斷腫瘤、分析病程、指導治療，監(jiān)測復發(fā)或轉移、判斷預后，

這類TM稱為體液TMo隨著分子生物學技術的發(fā)展，從分子水平發(fā)現(xiàn)

基因結構或功能的改變以及具有一定生物學功能的基因產(chǎn)物的非正常

表達均與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展密切相關，所以測定癌基因、抑癌基因及

其產(chǎn)物也屬TM之列。由于這些物質存在于細胞膜上或細胞內如激素受

體、生長因子受體、白血病表型、分子基因等，故把這類物質稱為細

胞TM。由于腫瘤發(fā)生發(fā)展的原因至今不明，因此，的定義還有待于

進一步的完善。

1.2〃理想〃的腫瘤標志物的特點：所謂〃理想〃的腫瘤標志物，一

般認為應具有下列特點：（1）敏感性高，能早期測出所有腫瘤患者；（2）

特異性好，鑒別腫瘤和非腫瘤患者應100%準確；（3）有器官特異性，

能對腫瘤定位；（4）血清中濃度與瘤體大小、臨床分期相關，可用以判

斷預后；（5）半衰期短，能反映腫瘤的動態(tài)變化，監(jiān)測治療效果、復發(fā)

和轉移；（6）測定方法精密度、準確性高，操作簡便，試劑盒價廉。但

至今為止，尚無一種〃理想〃的TM。由于腫瘤基因的復雜性，沒有一種

腫瘤是單一類型的，故發(fā)現(xiàn)〃理想”的TM就十分困難。

2、腫瘤標志物的分類及臨床應用

腫瘤標志物用于臨床診斷的有許多種，粗粗分類有癌胚抗原類、

酶類、激素類、糖蛋白類、癌基因類和細胞表面腫瘤抗原類等6大類。

前4類稱為血清腫瘤標志物，后兩類稱細胞腫瘤標志物，目前大都已可

用于臨床檢測。

2.1血清腫瘤標志物

2.1.1胚胎性蛋白

2.1.1.1甲胎蛋白（AFP）：

AFP在胚胎期是功能蛋白，合成于卵黃囊、肝和小腸，臍帶血含

量為1000—5000ug/L,1年內降為成人水平V40ug/L,終生不變。AFP

在臨床上用于以下輔助診斷：（1）產(chǎn)前診斷胎兒宮內死亡、神經(jīng)管畸形、

無腦兒和脊柱裂。（2）急慢性肝炎，在1100例肝炎患者測定中發(fā)現(xiàn)

16.7%AFP20-90ng/L,8.7%90-400ug/L,2.8%400-1000ug/L,

其中1例維持lOOORg/L以上達6周，后逐步下降。（3）原發(fā)性肝細胞癌

約70%以上AFP在400ug/L以上，多逐漸升高，亦有不高于400ug/L,

甚至在正常水平的患者。

AFP異質體，是指肝細胞癌產(chǎn)生的AFP與新生肝合成的在糖基鏈

的量上有區(qū)別，因此可用Con-A（刀豆凝集素-A）來區(qū)別，異質體親和

力大，胚胎AFP則親和力小，可用電泳方法來區(qū)別肝細胞來源與肝癌

細胞來源的AFP。

2.1.1.2.癌胚抗原（CEA）：

CEA是一種酸性糖蛋白，胚胎期在小腸、肝臟、胰腺合成，成人

血清含量極低（＜5ug/L,29如吸煙者為15-20ug/L,6.5%可達

20-40ug/L）oCEA1965年被發(fā)現(xiàn)時，認為是結腸癌的標志物

（60%-90%患者升高），但以后發(fā)現(xiàn)胰腺癌（80%）、胃癌（60%）、肺癌

（75%）和乳腺癌（60%）也有較高表達。

2.1.2糖蛋白抗原

是由于細胞膜成分異常糖基化而形成的抗原。

2.1.2.1糖蛋白抗原CA50：

是一種唾液酸酯和唾液酸糖蛋白，正常組織中一般不存在，當細

胞惡變時，糖基化酶被激活，造成細胞表面糖基結構改變而成為CA50

標志物。正常血＜20Ug/L,許多惡性腫瘤患者血中皆可升高,如66.6%

的肺癌、88.2%的肝癌、68.9%的胃癌、88.5%的卵巢或子宮頸癌、

94.4%胰或膽管癌，其他如直腸癌、膀臟癌等皆有70%以上是升高的。

2.1.2.2CA125：

最初認為是卵巢癌特異的，但深入研究，它也是一種廣譜的標志

物。正常值以35U/ml為界，82.2%卵巢癌、58%胰腺癌、32%肺癌,

及其他非婦科腫瘤皆有不同程度的升高，但作為卵巢癌的輔助診斷是

個重要的標志物，與病程有關。

2.1.2.3CA15-3：

是乳腺細胞上皮表面糖蛋白的變異體，近年推出作為乳腺癌標志

物，正常V40U/ml哺乳期婦女或良性乳腺腫瘤皆低于此值。乳腺癌

晚期100%,其他期75%此值明顯升高。同樣，該標志物也是廣譜的，

可見于50%肝細胞癌、53%肺癌、34%卵巢癌患者。由于CEA在乳腺

癌中也有診斷價值，如兩者聯(lián)合將可提高10%陽性率。

2.1.2.4.CA19-9：

CA19-9為唾液酸化的乳-N-巖藻戊糖II,是一種類粘蛋白的糖蛋

白成分，與Lewis血型成分有關。血清內正常值V37U/mL(>95%),

異常升高也是在多種腫瘤出現(xiàn)，如79%胰腺癌、58%結腸癌、49%肝癌、

67%胃癌、67如膽囊癌、肺癌、乳腺癌皆有10%左右是升高的。

2.1.2.5.CA549：

CA549也是乳腺癌的標志物，它是一種酸性糖蛋白，大部分健康

女性VllU/ml,異常升高者比例并不高，可見于50%乳腺癌、卵巢癌、

40%前列腺癌、33%肺癌患者。由此，作為乳腺癌的早期診斷，CA則

還較欠缺，應聯(lián)合應用其它TM。

2.1.2.6CA72-4：

CA72-4是一種高分子量糖蛋白，正常人血清中含量V6U/ml,異

常升高在各種消化道腫瘤、卵巢癌均可產(chǎn)生。對于胃癌的檢測特異性

較高，以＞6U/ml為臨界值。良性胃病僅＜1%者升高，而胃癌升高

者比例可達42.6%,如與CA19-9同時檢測，陽性率可達56%。

2.1.2.7鱗狀細胞相關抗原(SCC)

是由宮頸癌細胞中提純的，是宮頸癌較好的腫瘤標志物。SCC在

正常鱗狀上皮細胞內也存在，隨著鱗狀上皮細胞的增殖(惡性)而釋放

入血。正常人血清水平V2ug/L。異常升高可見于宮頸鱗癌，21%宮

頸腺癌也有升高。肺鱗癌有較高的陽性率，各家報告從40%-100%不

等，而小細胞肺癌陽性率則較低(3.7%)。食道鱗狀上皮癌、口腔鱗

狀上皮癌皆有較高的陽性率，且隨腫瘤的分期呈現(xiàn)不同變化(20%

-80%)o可見SCC是鱗狀上皮癌的重要標志物。

2.1.2.8CA242：

是一種粘蛋白型糖抗原，可作為胰腺癌和結腸癌校好的腫瘤標志

物，其靈敏度與CA19-9相仿，但特異性、診斷效率則優(yōu)于CA19-9。

2.1.2.9NMP22：

系核基質蛋白(nuclearmatrixprotein)是膀胱癌的一種新的標

志物，檢測尿NMP22可鑒別良惡性膀胱疾病。

2.1.3蛋白質抗原

2.1.3.1細胞角蛋白19(CYFRA21-1):

細胞角蛋白是細胞體的中間絲，根據(jù)其分子量和等電點不同可分為

20種不同類型，其中細胞角蛋白19在肺癌診斷中有很大價值，是小細

胞肺癌的重要標志物。在肺癌的血清濃度閾值為2.211g/L,其敏感性、

特異性及準確性分別為57.7%、91.9%和64.9%。從組織學角度看,

鱗癌的敏感性(76.5%)較腺癌(47.8%)為高，也高于SCC對兩者的

診斷率。細胞角蛋白19與CEA聯(lián)合應用，診斷非小細胞肺癌符合率已

可達到78%。

2.1.3.2P2-microglobulin：

表達在大多數(shù)有核細胞表面，是HLA-A.B和-C抗原的一分子量

為11800鏈。臨床上多用于證實淋巴增殖性疾病，如白血病、淋巴瘤及

多發(fā)性骨髓瘤。其水平與腫瘤細胞數(shù)量、生長速率、預后及疾病活動

性有關。例如骨髓瘤B2-microglobulin水平高于4.Omg/L時，預

示生存時間短，高于6.Omg/L時，對化療反應不敏感。此外，根據(jù)

此水平還可為骨髓瘤患者分期。

2.1.3.3Ferritin：

是一種鐵結合蛋白，存在于各種組織，病理狀態(tài)下，釋放到血液

增加，不是腫瘤特異的標志，在多種癌癥患者血中均有不同程度的陽

性率，肝癌患者的陽性率在70%以上，所以可輔助肝癌診斷。此外，

在進展性乳腺癌思考Ferritin水平也有顯著升高，且與病程有關。

2.1.3.4前列腺特異性抗原(PSA)：

PSA是目前診斷前列腺癌最敏感的指標，可用于前列腺癌的早期診

斷、監(jiān)測治療及預測復發(fā)。PSA是由前列腺上皮細胞產(chǎn)生的一種大分

子糖蛋白，它具有極高的組織器官特異性。正常人體血清內PSA<

411g/L,這個正常值有隨年齡增長的趨勢。＜50歲者一般低于

4.Oug/L,50-55歲為4.4ug/L,60-69歲為6.8ug/L,＞70歲可達

7.7ixg/L,異常升高預示有患前列腺癌的可能。以＞4ug/L為臨界

值，早期前列腺癌63%-70%陽性，總陽性率可達69-92.5%。有報告,

PSA值如為40To.Oug/L,特異性相對較低,只有25%確診前列腺

癌；但＞10.Oug/L者，往往又是晚期前列腺癌，失去早期治療時機,

這是個急待解決的問題。PSA在血清中以多種形式存在，它主要與蛋

白酶抑制物形成復合物。然而，另一種PSA即游離PSA(f-PSA),不與

蛋白酶抑制物結合。由于未知的原因，前列腺癌患者血清f-PSA百分

比比正常人和前列腺良性疾患為低。因此，測定PSA的類型和百分比

有利于鑒定前列腺良性和惡性疾患，f-PSA百分比較低可能是前列腺

癌惡性度較高。而f-PSA百分比受年齡、前列腺大小和總PSA(tPSA)

水平影響,據(jù)報告，50-55歲f-PSA臨界值應＜20%,60-69歲應V

20%,70-75歲〈28%,固定臨界值應是＜25%(占PSA的量).有報告

773例經(jīng)組織學證實的患者(379例前列腺癌,394例良性前列腺

病)f-PSA在0.2-5.Oug/L,百分比從20%-52%,而前列腺癌組為

12%,良性組為18%。國內報告，如以t-PSA＞4.2ug/L為診斷標準,

其敏感性為100%,特異性僅68%,符合率為74%；如以fPSA/tPSA(F

/T)值V0.11為診斷標準，其敏感性為85%,特異性98%,符合率96%；

如以tPSA＞4.2ng/L,同時F/TVO.2為診斷標準，其敏感性為86臨

特異性為99%,符合率97吼可見，最后一個指標為最佳。

2.1.4酶類

2.1.4.1神經(jīng)原特異性烯醇化酶(NSE)：

血清NSE是神經(jīng)內分泌腫瘤的特異性標志，如神經(jīng)母細胞瘤、甲

狀腺髓質癌和小細胞肺癌(70%升高)。正常人血清NSE水平V12.5U

/ml目前，NSE已作為小細胞肺癌重要標志物之一。

2.1.4.2前列腺酸性磷酸酶(PACP)：

主要用于診斷前列腺癌，但診斷價值不及PSA。

2.1.5激素類

2.1.5.1B-HCG：

是一存在于胎盤中的糖蛋白激素，分于量為45000,當懷孕時血與

尿中水平上升，正常血中只含微量。以特殊的免疫試驗可測定HCG的

6亞單位。由于60%以上的非精原細胞瘤患者體內HCG上升，所以

B-HCG的測定可監(jiān)視非精原細胞瘤的治療反應及復發(fā)狀況，甚至有些

腫瘤復發(fā)可在臨床體征出現(xiàn)前兒周或兒個月通過測定HCG查出。對于

婦科惡性腫瘤，除了測定完整的HCG、游離的B亞單位外，還可測定

尿與血中的促性腺激素的片段，稱之為B核心(B-core)。聯(lián)合測定

尿中B-core與血中CA12.5可對臨床卵巢癌的診斷提供有意義的信

息。

2.1.5.2人胎盤催乳素(HPL)

2.1.5.3促腎上腺皮質激素(ACTH)

2.1.5.4生長激素(GH)

2.1.5.5甲狀旁腺激素激素)

2.2組織腫瘤標志物

檢測細胞與組織內的腫瘤標志對于認識腫瘤的類型及形成治療的

生物靶位均有幫助。組織腫瘤標志可粗略分為以下4類：(1)分化標志：

激素受體，如：唯二醇受體(ER)、孕酮受體(PR)等。(2)增殖標志：細

胞周期相關抗原(Ki67)、PCNA、生長因子及其受體，周期素(cyclin),

周期素依賴的蛋白激酶(CDKs)及CDKs的抑制蛋白(CKIs)等。(3)轉移

潛在性標志：蛋白酶-胭激酶一血纖維蛋白溶酶原激活劑與組織蛋白酶

D,nn)23基因產(chǎn)物一一種核甘酸二磷酸激酶，以及細胞粘附因子等。(4)

癌基因及抗癌基因：癌基因如：myc、H-ras、erbB2等，抗癌基因如：

p53、bcl-2、視網(wǎng)膜母細胞瘤克隆出的基因(Rb)及結腸癌抑癌基因

(DCC)等。雖然，這些組織腫瘤標志將來有希望在腫瘤臨床中成為診

斷、預后判斷及調整治療的工具，但絕大多數(shù)在目前還僅處于研究觀

察階段。目前，正式用于臨床的只有乳腺激素受體的測定。對決定乳

腺癌的治療方案具有重要意義。80年代初就有報道：ER(-)/PR(-)采

用內分泌治療有效率為9%,ER(十)/PR(-)為32%,ER(-)/PR(十)

為53%,ER(十)/PR(十)為71%,因此，測定乳腺組織中的ER與PR

對于預示內分泌治療的效果、決定治療方案是極其重要的。

2.3腫瘤標志物的臨床應用價值

2.3.1普查：

如果一種能滿足上述〃理想TM〃標準的第1、2點，則該標志物

可用于普查，但實際上沒有一種TM的特異性和靈敏度均能達到

100%,從而使TM用于普查受到限制。以癌胚抗原(CEA)普查一組結腸

癌為例，發(fā)病率為37/10萬，假陽性數(shù)高達4998人，而檢出的結腸癌

患者只有26人。因此,這一類TM一般不適宜對無癥狀的人群進行普查。

但某些TM用于高危人群的普查。如在乙型肝炎表面抗原（HBsAg）攜帶

者和肝硬化患者中檢測甲胎蛋白。

用IM進行普查應考慮下列原則：（1）應十分清楚該腫瘤的發(fā)病率,

⑵該腫瘤標志物應能檢測早期腫瘤，（3）該腫瘤的早期治療應比晚期

治療更經(jīng)濟有效，（4）測定方法的靈敏度、特異性和重復性良好，（5）

普查所需費用能被接受。

2.3.2定位：

TM基本上不能對腫瘤定位，因為絕大多數(shù)TM無器官特異性，只有

極少數(shù)的TM如前列腺特異抗原（PSA）,前列腺酸性磷酸酶（PAP）,具有

器官特異性，只可惜這些指標雖能進行器官定位，但不具腫瘤特異性。

2.3.3.確診：

由于TM無足夠的靈敏度，不能排除假陰性結果，同時還有假陽性

的可能，因此，通常不能單憑TM進行確診。但本周蛋白、AFP、P-HCG）

和降鈣素等有助于確診。

2.3.4.分期：

大多數(shù)TM與疾病分期有關，且濃度與腫瘤大?。ㄈ缃Y腸癌CEA濃

度與腫瘤大小有關）或分期（如兒乎所有的TM在腫瘤晚期時呈現(xiàn)較高

的濃度）之間通常存在著關聯(lián)，但這只是總體而言。由于各期TM的濃

度范圍極廣，且互相重疊，因此，并不能根據(jù)個體測得值來判斷腫瘤

大小，也不能以TM的濃度來精確地指示各期腫瘤。

2.3.5.療效監(jiān)測：

TM最重要的價值，是能明確手術、放療或藥物治療是否有效。有

的TM可反映腫瘤殘存量，這種定量關系十分重要，如用B-HCG監(jiān)測

絨毛膜癌的療效、檢測抗藥性和推斷〃零腫瘤細胞〃（檢測極限以下），

以決定何時停止治療的報道就是最好的例子。

任何標志物半壽期顯著超過“正常〃半壽期，均與殘留腫瘤不斷產(chǎn)

生TM有關，表示手術切除得不完全，或腫瘤抗藥，或腫瘤復發(fā)。雖然

目前尚無一種能被普遍認可的、用TM濃度來評價治療有效性的標準，

但Beastall提出的方案是值得重視的，即：無效：則濃度與治療前相

比下降＜50%；改善：TM濃度與治療前相比下降＞50如；有效：TM

濃度與治療前相比下降＞90%；顯效：TM濃度下降至非惡性腫瘤的參

考值內。

治療中或治療后TM濃度變化有3種基本類型：（1）濃度下降到正常

水平，提示腫瘤全部除去或病情緩解；（2）濃度明顯下降但仍持續(xù)在正

常水平以上，或短期下降到正常水平后又重新增高，提示有腫瘤殘留

和（或）腫瘤轉移；（3）濃度下降到正常水平一段時間（約數(shù)月）后，又重

新增加，提示復發(fā)或轉移。應注意，如化療、放療或手術后立即測定

TM濃度，可能會有短暫的升高，這是由于腫瘤壞死所致。另外，化療、

放療或手術后TM濃度重新恒定升高，可能表示治療無效，應盡可能改

用其他治療方式。并不是同一器官的腫瘤均表達相同的TM,為了確定

何種TM適宜監(jiān)測療效，最好在手術前檢測一組TM,然后選擇升高的

TM作為監(jiān)測指標。但是，即使某些TM在手術前濃度并不增加，也可

能可以作為預示復發(fā)和轉移的指標。少數(shù)腫瘤也可采用組合TM來進行

監(jiān)測，如AFP和HCG監(jiān)測睪九癌o

2.3.6.預后：

術前TM濃度增加，術后濃度降低，表示這些TM對此腫瘤具有預

后價值。特別在病程監(jiān)測中，TM的濃度增加或降低與疾病的預后密切

相關。如睪九癌時以HCG和AFP作為預后指標，HCG<50KU/LAFP

<500ng/ml的4年生存率為96%,HCO50KU/L或AFP>500ng/ml

的4年生存率為56%。另外，結腸癌時CEA濃度、非何杰金淋巴瘤(特

別是多發(fā)性骨髓瘤)時B微球蛋白、卵巢癌時CA125等都有預后的價

值。

2.3.7.預測：

TM另一重要的特性就是預測價值，其依據(jù)是Bayes'法則。可用陽

性預期值(PPV)和陰性預期值(NPV)來表示。PPV與NPV不僅與靈敏度

與特異性有關，還與人群的患病率有關。某一TM的靈敏度、特異性、

PPV、NPV不是固定不變的，而是依賴于選定的臨界值。將臨界值提高,

可增加特異性，但靈敏度隨之降低；反之，將臨界值降低，則靈敏度

提高，但特異性下降。對TM而言，以正常參考值表示已基本無意義，

通常以臨界值來表示。因為，在實際應用中考慮的是最佳臨界值，即

區(qū)分〃正常的分界限。它不同于正常參考值的運用，正常參考值來自

一組對照人群，而臨界值是根據(jù)金標準確診為患者和正常對照組兩組

人群所確定的。

3、腫瘤標志物測定方法及影響因素

3.1TM的測定方法

3.1.1血清TM的測定方法：

RIA、IRMA、ELISA>CLIA、IFA、TRFIAo特別是CLIA的應用,使

TM的測定更加準確、快速、結果穩(wěn)定。

3.1.2細胞TM的測定方法：

免疫組織細胞化學法、流式細胞術、放射免疫顯像。特別是流式

細胞術的應用，使定量檢測細胞TM方面發(fā)揮了較大的優(yōu)勢。

3.2TM測定的影響因素

3.2.1體內因素：

肝、腎功能異常和膽汁淤滯等均可造成TM濃度增高，如CEA,AFPo

風濕病時CA19-9濃度可增高，強烈的治療作用(手術、放療、化療)和

連續(xù)的細胞死亡、腫瘤部位供血障礙等均可導致TM濃度變化。某些藥

物會影響TM的濃度，如前列腺癌抗雄激素治療可抑制PSA產(chǎn)生。另外,

已發(fā)現(xiàn)屢次進行直腸檢查后，PSA和PAP值可升高，因此采血前不應

進行直腸檢查。

3.2.2體外因素：

血清是測定腫瘤標志物最常用的樣品，但由于血液的稀釋作用，檢

測的陽性率有一定的局限性，若能直接收集腫瘤組織或其附近組織分

泌的體液進行測定，可提高檢測靈敏度和特異性。例如，經(jīng)內窺鏡采

集胰液測定以19-9、CA72-4含量，可明顯提高胰腺癌的檢出率。同樣,

如用乳汁作為CA15-3和CEA的測定樣品，則乳腺癌的陽性檢出率也比

用血樣品大大提高。汗液、唾液和其他體液中均含有鱗狀上皮細胞癌

抗原(SCC),因此，檢測SCC抗原時，如污染上述體液可造成假性升高

結果。紅細胞、漿細胞和血小板中存在神經(jīng)特異性烯醇化酶（NSE）,因

此樣本在離心前放置一段時間（60-90min）,血液中NSE濃度可能增高。

另外，血清保存于室溫中，PAP可因抗原不穩(wěn)定而在幾小時內降解。

有些TM如CA15-3對蛋白酶和神經(jīng)酰胺酶很敏感，因此，血清樣本應

避免微生物污染，以免影響測定結果。

引起假陽性的因素（1）在良性疾病時,如炎癥性疾病會使一些腫

瘤標志表達增加。肝臟良性疾病時，AFP、CA19-9,CEA和腫瘤多肽

抗原及腎功能衰竭的B2-微球蛋白及CA15-3、19-9、CEA和PSA水平

均會升高。（2）有一些生理變化，如妊娠時AFP、CA125、人絨毛膜

促性腺激素和月經(jīng)時一CA125也會升高。（3）在腫瘤手術治療、化療和

放療過程中，由于腫瘤組織受到破壞或腫瘤壞死時某些腫瘤標志產(chǎn)生

增加，從而影響腫瘤標志的測定，造成假陽性。引起假陰性的因素（1）

產(chǎn)生腫瘤標志的腫瘤細胞數(shù)目少。（2）細胞或細胞表面被封閉。（3）

機體體液中一些抗體與腫瘤標志（腫瘤抗原）形成免疫復合物。（4）腫

瘤組織本身血循環(huán)差，其所產(chǎn)生腫瘤標志物不能分泌到外周血中。此

外，血標本的采集，貯存不當也會影響腫瘤標志測定的結果。

4、腫瘤標志物的合理應用及注意事項

4.1動態(tài)記錄IM的濃度變化：

TM測定的臨床價值在于動態(tài)觀察，有時即使在參考值范圍內的濃

度變化，可能也是有價值的。某些腫瘤如術后CEA濃度快速增高（每6

個月＞4ug/L）表示骨和肝轉移，而術后CEA濃度緩慢增加（每6個月

2-4ug/L）表示腦、軟組織和皮膚轉移。因此，每個患者總是最佳的自

身對照。但為了保證結果的可靠性，當測得的TM濃度增加時，應在短

期內（14-30d）進行重復測定。

4.2定期測定濃度：

應根據(jù)不同的患者，不同的腫瘤制定不同的測定時間表。一般而

言，治療前應測定每個患者TM的原始值，治療后第1-2年，應每月測

定（測定時間應根據(jù)TM的半衰期，通常在2T4d完成），至則濃度明顯

下降后，每3個月測定1次。第3-5年，應每年測定1-2次。第6年起，每

年1次。但每次改變治療之前、TM濃度增加或懷疑復發(fā)和轉移時，均

應及時測定TM濃度。

4.3合理選用TM：

同一腫瘤可含有一種或多種TM,而不同或同種腫瘤的不同組織類

型既可有共同的TM,也可有不同的TM。因此，選擇一些特異性較高的

TM聯(lián)合測定某一腫瘤，有利于提高檢出的陽性率，而且，合理選用TM,

?？稍谂R床癥狀出現(xiàn)之前數(shù)月鑒別出復發(fā)和轉移。

1.4.4TM組合測定：可提高檢測的靈敏度，但常導致特異性下降，NPV

增高，PPV降低。因此，TM的組合測定應同時考慮靈敏度、特異性、

NPV和PPV。兒種常見腫瘤的常用聯(lián)合檢測〃譜〃如下：結腸癌：CEA、

CA19-9是首選，其特異性達到80%以上。如CEA、CA19-9加。a1酸性

糖蛋白（AGG）、C反應蛋白、肌型肌酸激酶同功酶，其敏感性、特異性

皆較為理想。胰腺癌：CA19-9對胰腺癌的診斷已較好，如加上CA125、

CA50及DU-PAN-2（一種胰腺癌標志物）則可把診斷率提到90%以上。

肺癌：單用CEA對肺癌診斷已有較高的特異性，但如加上NSE、唾液

酸、CEA、SCC則特異性更高。細胞角蛋白19加CEA對小細胞腺癌診斷

率達78%,可與AFP診斷肝癌媲美。乳腺癌：以粘蛋白型糖蛋白分子

CAM26+CAM29+腦型肌酸激酶同功酶(CK-BB)和CAM26+CAM29+CA15-3兩

個組合最好，敏感度可達94%和96%。卵巢癌：CA125加CA19-9和鐵

蛋白等皆是較好的聯(lián)合，其他許多檢查尚不成熟。胃癌：由于尚無更

特異的標志物，以19-9加CEA仍是目前較好的聯(lián)合，有條件時可加

CA72-4,則陽性率更高。以上介紹的各種聯(lián)合也不是十全十美，有時

聯(lián)合檢測的增加，提高了敏感性，反而降低了特異性。因此，在聯(lián)合

應用時，一定選準特異性較強的標志物，作不同標志物的聯(lián)合，再作

仔細的分析，才能使聯(lián)合檢查達到盡可能〃完美〃的程度。

摘自：《檢驗與臨床》

腫瘤科專家教你讀懂腫瘤標志物

2009年02月01日06:57］我來說兩句］［字號：大史史I

曲

來源：解放網(wǎng)-新聞晨報作者：李進

不少患者都有一個共同的煩惱，手拿體檢報告，往往因為讀不懂

其中的一些數(shù)據(jù)和指標而焦急萬分。比如，當發(fā)現(xiàn)兒個腫瘤標志物的

指標高出了參考值，就異?；艔?，主觀地認為自己得了腫瘤。那么，

腫瘤標志物究竟是什么意思？該如何讀懂與它有關的指標呢？我們今

天就來談談這個問題。

作為參考依據(jù)，擁有特殊性質

腫瘤標志物是指在腫瘤發(fā)生和增殖的過程中，由腫瘤細胞合成、

釋放或者是機體對腫瘤細胞反應而產(chǎn)生的一類物質。當機體發(fā)生腫瘤

時，血液、細胞、組織或體液中的某些腫瘤標志物就可能會相應的升

晨JO

通過腫瘤標志物的檢查可以在腫瘤普查中早期發(fā)現(xiàn)腫瘤病人，幫

助觀察抗腫瘤治療療效以及判斷預后。目前主要發(fā)現(xiàn)的腫瘤標志物有:

甲胎蛋白（AFP）、癌胚抗原（CEA）、糖原125（CA125）、糖原153

（CA153）>糖原19-9（CA19-9）、糖原724（CA724）、糖原211（CA211）、

鐵蛋白（Fer）、神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）、前列腺特異性抗原

（PSA）、組織多肽抗原（TPA）、糖原242（CA242）、人絨毛膜促性

腺激素（HCG）、B—人絨毛膜促性腺激素（B—HCG）、性激素和甲

狀腺激素、甲狀腺球蛋白（TG）、抗甲狀腺球蛋白（ATG）、甲狀腺結

合球蛋白（TBG）、抗甲狀腺過氧化物酶（ATPO）o

指標輕度升高，不要輕下結論

通常來說，醫(yī)生會根據(jù)不同的腫瘤檢查不同的標志物。但是，現(xiàn)

今所知的腫瘤標志物絕大多數(shù)不僅存在于惡性腫瘤中，也存在于良性

腫瘤、胚胎組織、甚至正常組織中。因此，某些腫瘤標志物的特異性

比較差，也就是假陽性和假陰性率比較高。

由此可見，腫瘤的診斷不能單獨依靠腫瘤標志物的檢查，只有持

續(xù)觀察腫瘤標志物的動態(tài)變化才能作為判斷依據(jù)。如果體檢發(fā)現(xiàn)某個

或某幾個腫瘤標志物持續(xù)升高，那么應提高警惕，需要進一步進行CT、

B超等方法檢查。特別是要通過病理檢查才能明確診斷。如果只是單

次輕度升高或每次檢查的結果沒有大的變化，就不必那么緊張了。

此外，針對不同的疾病和不同的患者可以有不同的腫瘤標志物作

為其療效監(jiān)測的指標。當腫瘤經(jīng)治療有好轉或因腫瘤復發(fā)轉移而病情

惡化時，這些腫瘤標志物水平的變化可以作為參考。

綜上所述，各種腫瘤標志物僅僅只能作為輔助診斷的指標之一，

在沒有明確病理組織學診斷前，千萬不要因為見到某項指標輕度升高

就肯定患了癌癥，甚至進行抗腫瘤治療，以免造成不必要的傷害和損

失，而應該提高警惕，進一步檢查和觀察。

腫瘤標志物臨床應用的指導原則

簡介

腫瘤標志物的定義：腫瘤標志物是可以在血清、血漿、其他體液、組

織提取物或石蠟固定的組織中檢測到的自然生長的分子，用于確定腫

瘤存在、評價病人預后以及對病人的治療效果進行監(jiān)測。腫瘤標志物

存在于細胞漿和細胞核中，與細胞表面膜相連，在血液中進行循環(huán)。

大多數(shù)腫瘤標志物可以用免疫學的技術進行檢測。

1998年5月，NACB（美國臨床生物化學學會）召開研討會，起草了

腫瘤標志物的分析檢測以及臨床應用的指導原則。1997年EGTM（歐

洲腫瘤標志物組織）正式成立，進行臨床相關的腫瘤標志物及其檢測

質量控制和標準化管理。質量要求和質量控制

腫瘤標志物檢測前的要求

對病人的信息進行充分了解，確保實驗結果的準確性。腫瘤標志

物分析檢測的要求滿意的測試結果來自于符合要求的標本以及經(jīng)過

室內質控（IQC）和實驗室間質量評價（EQA）監(jiān)測評價的有效的實驗

方法。室內質控和室間質控的監(jiān)測評價包括實驗的重復性、采用的標

準、所用基質的影響、動力學范圍、參考品、穩(wěn)定性、分析結果的理

論數(shù)據(jù)、實驗方法（具體內容見表1）。自動化的免疫分析儀器所得

實驗結果的分析內和分析間變異系數(shù)分別＜5%和＜10%,這是手工分析難

以達到的。各實驗室還應注意影響實驗特異性的因素。表2總結了三

個最重要的可能引起腫瘤標志物檢測結果錯誤的原因。腫瘤標志物分

析檢測后的要求表3列出了EGTM對腫瘤標志物分析檢測后的要求。用

EQC進行實驗室間檢測結果的評價和比較非常重要。

表1：與腫瘤標志物檢測質量控制相關的實驗因素

室內質量控制（IQC）的要求

重復性建立測定認可的標準理想的分析批內誤差應＜5%；批間誤

樣品與病人血清盡可能相似差＜10%。選擇合適的IQC標準。僅

IQC樣品的濃度適合臨床應用僅采用試劑盒所附的質控品是不夠

評價實驗的干擾因素的，還應包括獨立來源的可靠的血

清基質質控品。應包括腫瘤標志物

的陰性和低值陽性質控品。需要較

寬的濃度范圍，評價高濃度樣本稀

釋后的測定準確度要求對實驗的

干擾因素（嗜異性和其他抗體、血

凝試管中的凝血試劑等）進行檢查

實驗室間質量評價（EQA）的要求

適宜濃度的EQA樣本實驗EQA樣本應具有適宜的工作濃度范

“穩(wěn)定性”的評價驗證靶值圍，但有時會需要較高濃度的EQA

的精確度和穩(wěn)定性實驗說明樣本來評價實驗的稀釋步驟。對于

某些分析（如：AFP、hCG）用無分

析物血清檢查基線的可靠性是很重

要的。在一定時間內（6-12個月）

重復進行相同樣本的測試，對實驗

室內實驗結果的重復性進行評價。

指無現(xiàn)成參考方法時，需要對所使

用的方法進行以下驗證：1.穩(wěn)定

性：對同一樣本進行重復測定。

2.用已知濃度的相關國際標準品

進行回收率實驗。3.對不同實驗

室間的檢測結果進行比較。對實驗

室間的實驗比較（參考值范圍、結

果累計報告等）很有價值。

表2.引起腫瘤標志檢測錯誤結果的潛在因素

高濃度hook效應通常情況下，腫瘤標志物的濃度

范圍會有好幾個數(shù)量級的差別，

因此有可能需要確認高濃度的樣

本產(chǎn)生的hook效應，以避免低值

結果的錯誤報告。這對于首次進

樣本間的攜帶行腫瘤標志物檢測的病人猶為重

要。（可以通過使用高結合力的

嗜異性或人抗鼠抗體（HAMA）的固相抗體、分析兩個稀釋度的樣

干擾本、或通過后續(xù)的分析步驟包括

清洗步驟來減少hook效應。）

檢測高濃度的樣本會產(chǎn)生樣本間

攜帶的潛在問題，因此有必要對

此進行隨時檢查。

IgG抗體可以和測定中使用的抗

體進行反應。通常情況下，由于

進行影像檢查和治療而使病人接

觸鼠單克隆抗體，由此而產(chǎn)生的

人抗鼠抗體會使腫瘤標志物的檢

測出現(xiàn)錯誤結果。（可以通過使

用阻斷劑對樣本進行前處理、在

反應基質中加入非免疫的鼠血清

或對樣本進行稀釋后再進行分析

的方法來減少HAMA的干擾。）

表3.腫瘤標志物檢測分析后的重點要求

通過詢問醫(yī)生獲取病人的臨床信有必要鼓勵臨床醫(yī)生提供帶有說

息明的簡短的臨床信息（如手術后、

化療后等），這有助于確認偶然

參考值范圍的有效性誤差（如可能出現(xiàn)的儀器上加錯

標本等）。

通常來自相應的健康人群的參考

值范圍與初始治療前的腫瘤病人

有很好的相關性。因此，病人自

了解顯著變化或臨床相關變化的己的“基線”值對于腫瘤標志物

組成因素的測定結果具有非常重要的參考

意義。只有基于有效的參考范圍，

改變方法時應進行方案確認增高甚至在參考范圍增高才有臨

床顯著性意義。

應包括生物學變異和分析數(shù)據(jù)的

了解腫瘤標志物的半壽期變異。確定的±25%的升高或降低

認為具有臨床意義，但須進行進

腫瘤標志物臨床應用的比較一步的工作。

有助于確認由于改變方法而引起

的腫瘤標志物檢測結果的差異。

（可能需要對以前檢測過的樣本

再用新的方法進行檢測來確認結

果的差異。）

確定完全去除腫瘤組織后體循環(huán)

中腫瘤標志物減少50%所用的時

間。

首先需要得到有關腫瘤標志物臨

床應用的信息，再由有關的專業(yè)

組織進行考察比較。

乳腺癌

美國2002年診斷出203,500多例乳腺癌新增病例,39,600名婦

女死于乳腺癌。美國婦女在一生中大約有11%的機會患乳腺癌。目前，

美國超過1000,000的婦女患有n、in、IV期乳腺癌。雖然目前的醫(yī)學

水平還不能預防和完全治愈乳腺癌，但隨著醫(yī)學診斷和治療水平的發(fā)

展，越來越多患者的病情都能得到有效控制。另外，乳腺癌的早期診

斷(包括病人乳房的自我檢查、乳房x射線檢查、和臨床檢查)能夠

顯著降低病人的死亡率。雖然腫瘤標志物不能代替影像檢查，但可以

為病人的臨床診治提供有用的信息。腫瘤標志物臨床上主要用于選擇

治療方案、預測疾病進程和復發(fā)以及對治療效果進行監(jiān)測。以下為正

在使用或建議使用的腫瘤標志物：雌激素和孕激素受體CA15-3

BR27.29(CA27.29)CEAHER-2/neu(c-erbB2)oncoprotein

雌激素和孕激素受體

雌激素和孕激素受體是主要的乳腺癌組織腫瘤標志物，包括

p53,c-erbB2(HER-2/neu)等類固醇受體。類固醇受體是目前納入標準

細則(14-17)中唯一的組織標志物。雖然NACB或EGTM在起草指導原

則時還來不及考慮其他的指標，但現(xiàn)在HER-2/neu的檢測結果已經(jīng)用

于決定乳腺癌轉移的病人是否應該接受單克隆抗體

Herceptin(trastuzumab)的治療。

雌激素和孕激素受體的臨床應用

除了乳腺癌的一般特征，如腫瘤大小、病理學類型、腋窩淋巴結

狀況外，蛋白質生物標志物在評價腫瘤的生長速度、侵襲力和惡變可

能的差異上也是很有價值的。雌激素和孕激素受體已經(jīng)用作激素［如：

tamoxifen,toremifene,droloxifene（"抗雌激素"）、

medroxyprogesteroneacetate和megestrolacetate］治療反應的預

測指標。雌激素和孕激素受體的水平還作為預測指標用于評價激素治

療的么應和副反應。另外，性激素受體也是診斷評價乳腺癌或類似病

例的預后因子。

總的來說，雌激素受體陽性的腫瘤病人至少在短期內預后良好，

而雌激素受體陰性的病人通常為惡性腫瘤患者。大約30%腫瘤雌激素受

體陰性或大于75%腫瘤雌激素受體陽性的乳腺癌病人會發(fā)生腫瘤轉移

并且在10年內死亡。雌激素和孕激素受體已經(jīng)和其他因子一起作為預

后的檢測指標以區(qū)別高復發(fā)危險（預后不良）和低復發(fā)危險（預后良

好）乳腺癌病人的腫瘤類型。美國臨床腫瘤協(xié)會（ASCO）的臨床實踐

指導原則同意根據(jù)雌激素和孕激素受體的水平確定絕經(jīng)前和絕經(jīng)后乳

腺癌病人的腫瘤是否轉移以及對臨床治療進行指導。

參考值范圍

由于很少對不患有乳腺腫瘤的婦女進行雌激素和孕激素受體的檢

測，因此參考值范圍還不確定。配體結合技術和酶免疫分析技術的測

定結果表明，沒有腫瘤的乳腺組織中性激素受體含量很低（＜15fmol/mg

蛋白質）或檢測不出性激素受體，這已被用免疫組織化學檢測的許多

研究所確認。通常以10fmol/mg提取的蛋白質（通過配體結合）或

15fmol/mg蛋白質（通過酶免疫分析）作為Cut-off值。未知病理來

源的轉移的腫瘤中雌激素和孕激素受體的存在提示有原發(fā)性激素應答

的乳腺癌或其他性激素應答的腫瘤?；顧z組織中雌激素和孕激素受體

的分布受病人年齡和絕經(jīng)狀況的影響。一般情況下，絕經(jīng)前的乳腺癌

女性患者的受體水平比絕經(jīng)后低。由于乳腺癌患者的激素治療方案是

由其激素應答決定的，而激素應答又與她們活檢的腫瘤組織中雌激素

和孕激素受體含量有關，因此需要對病人的受體水平進行檢測。

雌激素B受體和其他性激素受體的變異

調查表明，調控蛋白表現(xiàn)出多態(tài)性。例如，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的一個新的

雌激素受體基因-雌激素6受體(ER-B)和已經(jīng)過廣泛研究的雌激素

a受體(ER-a)在DNA和配體結合區(qū)域顯示出一定程度的同源性(同

源性分別為96%和58%),但這兩個異構體的配體鍵合比例和生物活性

不同。ER-B跟ER-a和孕激素受體(PR)共同表達伴隨一些低生物

侵襲性的乳腺癌腫瘤指標提示，ER-B陽性的腫瘤傾向于對抗雌激素

治療產(chǎn)生應答，但還需要進一步建立獨立的ER-B預測值。在過去10

年發(fā)現(xiàn)的大約20種性激素受體變異體由于斷裂、外顯子刪除和點突變

而顯出缺陷，因此有必要進一步研究出新的試劑和參考樣本，以調查

這些自然產(chǎn)生的異構和變異的臨床意義。

分析前注意事項和標本保存

不論選擇何種分析技術，正確選擇和處理乳房組織的活檢樣本對

于檢測結果的重復性是非常必要的。首先，外科手術切除組織后，應

在最短的時間內將其冷凍于-20。。，并在冰凍狀態(tài)下運送至實驗室。

必須在進行組織提取前完全取出用于制作冰凍切片的最適切片溫度

(OCT)復合物；如果使用了染料(諸如市售的Davidson染料藥盒)，

應去除帶有染料的組織；且避免使用出血組織和連帶有大量正常部分

的活檢組織。組織提取物中的性激素受體在室溫下不穩(wěn)定，4C下

2?4小時-內失活。組織提取物應在提取后立即置于-70。。冷凍。冰凍

組織提取物中受體的穩(wěn)定性取決于腫瘤的種類、組織包含的血和正常

組織以及一些其他因素。如果提取物在48小時內未使用，應用剩余的

組織重新進行組織提取。

分析中的注意事項

現(xiàn)有的放射配體結合分析和酶免疫分析（使用標準化的試劑和穩(wěn)

定的參比樣本）方法的精密度（CV%為4?15%）高于臨床診斷的要求。

在雌激素和孕激素水平為30?50fmol/mg提取蛋白時，臨床診斷治療

所要求的總不精確度為10?20%,而當雌激素和孕激素水

平＞10Ofmol/mg提取蛋白時,，臨床診斷所要求的總不精確度則為30?

40%o

分析后結果報告的注意事項

來自臨床協(xié)作試驗（cooperativeclinicaltrials）的資料提示:

人乳腺癌活檢組織中雌激素和孕激素受體水平小于10?15fmol/mg提

取蛋白時無臨床意義。Kd值為1-9x10-10M至1-9x10-11M,指示

高親和性的雌激素a受體，而Kd值為1-9X10-9M至1-9x10T0M,

則指示高親和性的孕激素受體。雌激素B受體和其他性激素受體異構

體的配體結合特性也已研究清楚。應根據(jù)分析方法報告出Cut-off值。

有些機構還建議報告年齡段的受體分布狀況，因為受體水平是和年齡

相關的（圖1）。

CA15-3

CA15-3是高分子量的粘蛋白(糖蛋白)，稱為MUC-lo已經(jīng)由分

離出的乳腺癌轉移到肝臟中的腫瘤膜純化提取物的單克隆抗體(clone

DF3)和抗人脂肪球抗體(clone115D8)對其進行了鑒定。乳腺癌粘

蛋白類的腫瘤標志物包括BR27.29,CA-549,MCA,CA-M26和CA-M29。

這些粘蛋白具有相似的靈敏度和特異性，使用一種以上的粘蛋白腫瘤

標志物并不能提供更多的信息。FDA只批準了CA15-3和BR27.29用于

乳腺癌和乳腺癌轉移病人的臨床診斷。

臨床應用

盡管癌胚抗原(CEA)已經(jīng)用于乳腺癌轉移的檢測，但近期大量的

研究結果確立了CA15-3的相對優(yōu)勢。簡而言之，CA15-3的水平和病人

的臨床狀態(tài)以及腫瘤治療的應答有關，現(xiàn)已用于60?80%乳腺癌轉移病

人的評價。研究結果表明，CA15-3腫瘤標志物可用于乳腺癌病人治療

過程中病情的進程和消退的監(jiān)測。EGTM的指導原則建議同時使用

CA15-3和CEA來提高臨床檢測的靈敏度。一些研究小組報導，在臨床

上同時使用CA15-3和CEA比單獨使用CA15-3能夠檢測出更多的早期復

發(fā)腫瘤患者。腫瘤的肝臟和骨轉移病人的早期檢查，使用系列腫瘤標

志物具有更高的靈敏度，而腫瘤的早期診斷對于病人的治療和存活都

具有極其重要的意義。目前CA15-3主要用于監(jiān)測乳腺癌的活動。以后

的工作是要制訂出CA15-3對治療和預后隨訪監(jiān)測臨床意義的指導原

則。

分析測試前準備和樣本貯存

進行CA15-3的檢測可以采用新鮮分離的血清樣本。CA15-3在4℃

下可以穩(wěn)定24小時一。建議將血清貯存于-20℃（短期）或-70℃（長

期），以備復試時使用。若需長期貯存，則不能使用變性膠（CA15-3

在變性膠的存在下表現(xiàn)出明顯的不穩(wěn)定）。

分析中的注意事項

每個實驗室都應對CA15-3的分析方法、分析精密度和參考值范圍

進行驗證，以確定臨床診斷的界限值。

分析后結果報告的注意事項

應進行進一步的研究來確認性別、種族、年齡和絕經(jīng)情況對正常

人和乳腺癌病人CA-153表達的影響，制訂出腫瘤標志物的參考值范圍

文獻。

BR27.29CCA27.29）

BR27.29是新近研究出的粘蛋白類乳腺癌腫瘤標志物家族（包括

CA15-3）的成員，是由粘蛋白抗原（MUC-1）產(chǎn)生的不同類型的抗體。

BR2Z29單克隆抗體的反應序列和用于CA15-3分析的DF3抗體的反應

序列在抗原決定簇圖譜中相重疊。

臨床應用

已有大量關于BR27.29用于乳腺癌的檢查和診斷方面的研究。同

CA15-3一樣，BR27.29可用于乳腺癌的常規(guī)檢查，但也缺乏靈敏度和特

異性。有報導認為，BR27.29比CA15-3靈敏度高但特異性較低?？傊?

許多機構都用BR27.29的水平來評價高復發(fā)危險的乳腺癌病人病情復

發(fā)情況并對晚期病人的病情發(fā)展進行監(jiān)測。這些應用研究認為

BR27.29的水平反映出腫瘤的活性，為晚期腫瘤轉移病人的檢查提供了

臨床證據(jù)。已有報導將BR27.29用于預測H期或HI期乳腺癌患者的病

情復發(fā)。近期的研究也提示BR27.29的水平可以預測患有骨骼疾病的

乳腺癌病人的腫瘤骨轉移。

分析前注意事項和標本的保存

因為BR27.29是含糖抗原MUC-1家族的成員，所以可以和其他腫瘤

相關抗原一樣，用經(jīng)過處理的血清或血漿進行BR27.29的測定，但須

主要考慮分析過程中抗體的酶裂解。使用新鮮分離的血清樣本測定

BR27.29o樣本在4℃下可穩(wěn)定24小時,為保證其穩(wěn)定性，建議將其

貯存于-20℃（短期）和-70℃（長期），以備復試之用。凍融對

BR27.29穩(wěn)定性的影響需要進行進一步的研究。

分析中的注意事項

每個實驗室應對BR27.29的分析方法、精密度、參考值范圍和臨

床診斷界線值進行驗證，BR27.29分析測試的靈敏度和特異性應符合臨

床規(guī)范的要求。沒有常用分析基質對BR27.29分析測試影響的報導，

但對此需進行進一步的研究。應對分析方法靈敏度的研究進行重點質

量控制。建議建立BR27.29的參考樣本并將其作為室內質控對測試結

果進行評價。

分析后結果報告注意事項

建議結果報告中聲明BR27.29的臨床應用限于對有進一步病變的乳腺

癌患者的隨訪。

NACB和EGTM關于乳腺癌腫瘤標志物臨床應用的建議

1.雌激素和孕激素受體的狀況被用于判斷乳腺癌病人是否對激素治

療（如tamoxifen）產(chǎn)生應答。ASCO（美國臨床腫瘤協(xié)會）臨床實踐

指導原則同意對絕經(jīng)前和絕經(jīng)后的乳腺癌病人初次就診時就定量檢測

這些受體的水平。只有在活檢組織的樣品量不可能進行受體定量檢測

的情況下才進行免疫組織化學分析。不能提供新鮮組織時，也可使用

石蠟包埋的組織進行免疫化學分析。

2.雌激素和孕激素受體水平為30?35fmol/mg提取蛋白時，制訂臨

床治療方案對測定結果總不精確度的要求是10?20%；而雌激素和孕激

素受體水平＞100fmol/mg提取蛋白時一，測定結果總不精確度的要求則

為30?40%。

3.ASCO臨床實踐指導原則認為應對絕經(jīng)前和絕經(jīng)后的乳腺癌轉移病

人進行雌激素和孕激素受體的定量測定，以幫助制訂臨床治療方案。

只有當活檢組織不可能進行受體定量檢測時才能進行免疫組織化學分

析。

4.CA15-3或BR27.29的測定對于經(jīng)治療后無癥狀的II期和HI期乳腺

癌患者病情復發(fā)的早期診斷具有重要意義。乳腺癌病人的高CA15-3水

平指示存在腫瘤轉移。

5.體循環(huán)中CA15-3濃度的降低指示病人的治療應答良好；而CA15-3

濃度的持續(xù)或升高則指示患者病情發(fā)展或治療應答不佳。因此建議用

CA15-3跟蹤乳腺癌病人的臨床情況。另外，EGTM還建議同時檢測CEA

進行腫瘤轉移的早期診斷。

6.由于在其他的惡性和非惡性疾病中也可見CA15-3水平的升高，因

此ASCO臨床實踐指導原則規(guī)定不能僅使用CA15-3進行乳腺癌的診斷

和病情確定。

7.BR27.29的臨床應用僅限于有進一步病變的乳腺癌患者的隨訪。

8.應在分離出血清后立即進行CA15-3的檢測。血清樣本貯存于4℃

可穩(wěn)定24小時?。建議將血清貯存于-20。。（短期）或-70℃（長期），

以備復試時使用。若需要長期貯存，則不應使用分離膠（CA15-3在分

離膠的存在下表現(xiàn)出明顯的不穩(wěn)定）。

新發(fā)現(xiàn)的乳腺癌標志物

表皮生長因子受體

表皮生長因子（EGF）是分子量為6000的單鏈多肽，三個二硫橋結

構使之具有高度的熱穩(wěn)定性。EGF受體蛋白是一個復雜的分子，它具

有能和EGF相連的細胞外區(qū)域、一個使該受體固定于細胞質膜上的跨

膜部分和一個包含ATP結合位點和呈酪氨酸轉氨酶激酶活性的內部區(qū)

域。EGF受體存在于某些乳房、子宮和卵巢的腫瘤中，可以通過與放

射標記的EGF用結合的方法進行檢測。由于放射標記的EGF很昂貴，

許多實驗室更愿意使用配體競爭分析方法，同時檢測特異性結合能力

和EGF親和力。乳腺癌活檢標本中EGF受體的過表達（即數(shù)目增加）

與較短的無癥狀期以及病人總存活率的下降密切相關。和類固醇性激

素受體不同，乳腺癌活檢樣本中高水平的EGF受體指示預后不良。雖

然ASCO的臨床實踐指導原則中沒有納入EGF受體的應用，但EGF受體

作為預后因子和預測試驗針對EGF受體陽性的治療乳腺癌新藥的應答

顯示出越來越高的價值。

HER-2/neu(c-erbB2)腫瘤蛋白

neu腫瘤基因最初從鼠神經(jīng)母細胞瘤中分離得到，編碼一個被命

名為“pl85neu”的分子量為185-kDa的表面糖蛋白，呈酪氨酸轉氨酶

激酶活性，結構類似于EGF受體。對各種分子的特性和染色體定位的

研究揭示出EGF受體和pl85neu的區(qū)別。pl85neu天然配體正成為許

多實驗室研究的熱點。命名為c-erbB2的基因是人c-neu基因的同

系物，已報道從人乳腺腫瘤中進行了擴增(即增加了拷貝數(shù))，它與

較短的無癥狀期和病人總存活率的下降相關。c-erbB2也稱為

HER-2/neiioHER-2/neu腫瘤蛋白水平與乳腺癌病人預后有關，指示

HerceptinR(trastuzumabR)治療的應答。1997年，ASCO的專家組認為，

現(xiàn)有的數(shù)據(jù)對于推薦c-erbB2(HER-2/neu)的基因擴增和過表達用于

乳腺癌病人的診治尚不夠充分。評價c-erbB2(HER-2/neu)分析測試結

果的臨床應用時，理論上的困難在于分析方法的變異大以及缺乏國際

認可的參考品。最新版的ASC02000中建議，對原發(fā)性乳腺癌的初診病

人和復發(fā)病人進行HER2/neu的檢測以及HER2/neu基因的擴增是很有

價值的。新版的ASC02000勘誤中也有關于腫瘤蛋白檢測方法和檢測結

果用于指導trastuzumabR治療、選擇化學療法以及評價治療應答的內

容?？梢杂媚[瘤提取物或循環(huán)的細胞外區(qū)域進行HER2/neu腫瘤蛋白的

檢測，但不建議用于預后。

組織蛋白酶D

組織蛋白酶D屬于酸性溶酶體蛋白酶，存在于所有細胞中。組織

蛋白酶D的分解方式類似于乳腺癌和正常乳腺，在培養(yǎng)的乳腺癌細胞

中是由雌激素介導分泌的一個52KDa的前體物質。前-組織蛋白酶D是

一個磷糖蛋白，可分解為三個分子量分別為48-KDa、34-KDa和14-KDa

的分子，它們的單克隆抗體已經(jīng)研制出來并用于生產(chǎn)放射免疫分析試

劑盒。酶免分析（EIA）和酶聯(lián)免疫吸附分析（ELISA）試劑盒也已研

制出來并用于乳腺癌提取物中的組織蛋白酶D的分析。有證據(jù)表明，

在乳腺癌結節(jié)陰性的病人中，組織蛋白酶D的過表達與較短的無癥狀

期和總存活率的下降相關。然而，ASCO的專家組認為，現(xiàn)有的數(shù)據(jù)對

于推薦組織蛋白酶D用于乳腺癌病人的診治尚不夠充分。

尿激酶型纖溶酶原激活劑及其受體和抑制劑

尿激酶型纖溶酶原激活劑（uPA）和組織型纖溶酶原激活劑（tPA）

為絲氨酸蛋白酶，其功能是使纖溶酶原轉變?yōu)槔w溶酶。在生理學和病

理學情況下的細胞遷移和組織重建過程中，tPA主要參與血管內血栓

溶解，而uPA則介導細胞周的蛋白分解。uPA的酶前體（pro-uPA無

活性）由細胞分泌，并在細胞表面與其受體（uPAR）相結合。特定的

蛋白酶（纖溶酶、胰蛋白酶、激肽釋放酶、組織蛋白酶）可使pro-uPA

轉化為其活性形式。pro-uPA活性形式的分子量很大（MW=52,000）,

由兩個二硫鍵相連的多肽鏈組成［A鏈（158個氨基酸，MW=32,000）,

B鏈（253個氨基酸，MW=20,000）］?；罨膗PA可使纖溶酶原轉變

為纖溶酶。纖溶酶是一個廣譜蛋白酶，在細胞外基質中催化降解多種

蛋白質（可以是侵入或轉移的蛋白質）。纖溶酶原激活劑抑制劑（PAIT

和PAI-2）,由正常細胞和腫瘤細胞產(chǎn)生，與其受體結合可抑制uPA

的活性。在癌癥中，uPA介導腫瘤細胞的入侵。對許多腫瘤的組織提

取物（包括乳腺癌、卵巢癌、子宮癌、宮頸癌、前列腺癌、腸癌）中

uPA、PAI-l和PAI-2水平的評估都有報導。如果在同一活檢標本中uPA、

PAI-1和PAI-2均過表達，就可能準確預測疾病的復發(fā)和患者總體存活

率的降低。uPA和PAI-1作為生物學診斷指標用于