項(xiàng)目17-7 胰蛋白酶消化法制備蛋白胨

項(xiàng)目17-7胰蛋白酶消化法制備蛋白胨(一)加工工藝流程

項(xiàng)目17-7胰蛋白酶消化法制備蛋白胨（二）加工技術(shù)要點(diǎn)1．胰漿處理

胰蛋白酶原和糜蛋白酶原共存于胰臟細(xì)胞中，必須用搗碎機(jī)破碎細(xì)胞，使胰蛋白酶原和糜蛋白酶原從細(xì)胞中分離，然后用胰酶自身激活，生成具有生物活性的胰蛋白酶和糜蛋白酶。胰漿在開始激活后5小時內(nèi)，每隔1小時要求輕度并按一定的順序方向攪拌和調(diào)整pH值。由于酶是生物活性物質(zhì)，在胰漿制作過程中，要盡量減少酶活力的損失，操作需在0～5℃下進(jìn)行，防止過度攪拌。項(xiàng)目17-7胰蛋白酶消化法制備蛋白胨（二）加工技術(shù)要點(diǎn)2．原料預(yù)處理

廢蛋液用單層紗布過濾，去除雜質(zhì)。以過濾后1kg廢蛋液汁，加水lkg，用氨水調(diào)pH至9.5～10.0，攪拌均勻后，置沸水浴加熱40min，然后冷卻至50℃左右即可。項(xiàng)目17-7胰蛋白酶消化法制備蛋白胨（二）加工技術(shù)要點(diǎn)3．水解

廢蛋液經(jīng)預(yù)處理后，每千克廢蛋液加水1kg，搗碎成糊狀，再加水0.5kg，攪拌成為渾濁液，加胰漿350g，以氨水調(diào)pH值8.5左右，置46℃左右水浴鍋中進(jìn)行水解，每半時攪拌一次，并加氨水維持pH在8.5左右。當(dāng)溶液由暗綠色轉(zhuǎn)為黃色時(約需6時)，進(jìn)行水解程度檢驗(yàn)。方法同胃蛋白酶消化法，不過要用酸調(diào)pH值至4.6～5.0。項(xiàng)目17-7胰蛋白酶消化法制備蛋白胨（二）加工技術(shù)要點(diǎn)4．過濾

水解液經(jīng)檢驗(yàn)合格后即可停止水解，進(jìn)行第一次過濾，以除去堿性條件下的凝聚物。濾渣取1倍量水洗濾，合并濾液。項(xiàng)目17-7胰蛋白酶消化法制備蛋白胨（二）加工技術(shù)要點(diǎn)5．排氨、中和

濾液煮沸15min以上，直至溶液pH值接近于7.0，以排除溶液中的堿性氨并起到濃縮作用。在保持沸騰的情況下，緩慢加入冰醋酸，使料液pH值達(dá)到蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)4.6～5.0，以使尚未水解的蛋白質(zhì)沉淀。然后繼續(xù)煮沸15min，趁熱過濾，以除去熱凝聚性雜質(zhì)。濾渣加水煮沸再濾，合并濾液。項(xiàng)目17-7胰蛋白酶消化法制備蛋白胨（二）加工技術(shù)要點(diǎn)6．冷卻、低溫冷藏處理

待濾液冷卻至室溫后，置冰箱0℃左右冷藏24～48小時使料液中的酪氨酸和硬脂油等結(jié)晶較充分地析出，以免影響產(chǎn)品的透明度。項(xiàng)目17-7胰蛋白酶消化法制備蛋白胨（二）加工技術(shù)要點(diǎn)7．小樣檢驗(yàn)

為了比較有把握地控制成品質(zhì)量，可借助感官檢驗(yàn)和小樣試驗(yàn)。方法如下：取少量濾液至比色管中，在亮光處觀察應(yīng)呈深黃色澄明無沉淀；用試管取少量濾液，加熱至沸，再倒入比色管，感官檢查也應(yīng)證明無沉淀；用5%NaOH溶液調(diào)節(jié)至pH9.2煮沸，再觀察也應(yīng)澄明；否則，應(yīng)作相應(yīng)處理后再濃縮。項(xiàng)目17-7胰蛋白酶消化法制備蛋白胨（二）加工技術(shù)要點(diǎn)8．濃縮