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動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)練習(xí)一、選擇題1.一般來(lái)說(shuō),在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)時(shí),需要滿(mǎn)足以下哪些條件()①無(wú)毒、無(wú)菌的環(huán)境②適宜的滲透壓③合成培養(yǎng)基需加血清等④溫度與動(dòng)物體溫相近⑤需要O2,不需要CO2A.①②③④⑤B.①②③④C.①③④⑤D.①②④⑤2.在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中,使用胰蛋白酶的目的是()A.使動(dòng)物組織分散為單個(gè)細(xì)胞B.去掉細(xì)胞壁,使其成為原生質(zhì)體C.去掉細(xì)胞膜,暴露出原生質(zhì)體便于細(xì)胞融合D.促進(jìn)蛋白質(zhì)水解為多肽3.干細(xì)胞是一種尚未充分分化的未成熟細(xì)胞,醫(yī)學(xué)家們正在嘗試?yán)酶杉?xì)胞治療一些頑疾,下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是()A.各種組織干細(xì)胞分化形成不同組織細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果B.利用干細(xì)胞治療某些頑疾,是因?yàn)楦杉?xì)胞具有再生各種組織、器官的潛能C.同一生物個(gè)體中,神經(jīng)細(xì)胞與干細(xì)胞所含有的遺傳物質(zhì)不同D.干細(xì)胞可分為成體干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞等4.某興趣小組開(kāi)展小鼠原代神經(jīng)元培養(yǎng)的研究,結(jié)果發(fā)現(xiàn)其培養(yǎng)的原代神經(jīng)元生長(zhǎng)緩慢,其原因不可能的是()A.實(shí)驗(yàn)材料取自小鼠胚胎的腦組織B.為了防止污染將培養(yǎng)瓶瓶口密封C.血清經(jīng)過(guò)高溫處理后加入培養(yǎng)基D.所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性5.某年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予了在“細(xì)胞感知和適應(yīng)氧氣供應(yīng)”研究中做出貢獻(xiàn)的科學(xué)家。此項(xiàng)研究以能夠表達(dá)人類(lèi)促紅細(xì)胞生成素的小鼠模型為材料,并借助動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行研究。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,以便清除細(xì)胞代謝產(chǎn)物B.培養(yǎng)過(guò)程中,要在培養(yǎng)基中加入一定量的血清,以防止培養(yǎng)過(guò)程中的污染C.培養(yǎng)過(guò)程中,添加適量CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pHD.通過(guò)該技術(shù)培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可以用于篩選抗癌藥物6.如圖為動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中細(xì)胞增殖情況的變化曲線(xiàn),圖中b、e兩點(diǎn)表示經(jīng)篩選、分裝后繼續(xù)培養(yǎng)。下列有關(guān)敘述正確的是()A.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)選用的培養(yǎng)材料大多為動(dòng)物的受精卵B.原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的分界點(diǎn)是曲線(xiàn)中b點(diǎn)C.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中通常在培養(yǎng)液中通入5%的CO2刺激細(xì)胞呼吸D.在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞在培養(yǎng)瓶壁上可形成多層細(xì)胞7.研究人員常用飼養(yǎng)層細(xì)胞(與胚胎干細(xì)胞共同培養(yǎng)的失去分裂能力的細(xì)胞,用于支持胚胎干細(xì)胞的生長(zhǎng))分離培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞,研究表明,胚胎干細(xì)胞高度未分化,具有形成畸胎瘤的可能性。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.在體外培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞可以不斷增殖而不發(fā)生分化B.胚胎干細(xì)胞可由早期胚胎中分離得到,具有組織特異性C.飼養(yǎng)層細(xì)胞可為胚胎干細(xì)胞提供各種細(xì)胞因子與貼附面D.先將胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為某特異組織,再用于治療,可防止形成畸胎瘤8.如圖為小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)培養(yǎng)的過(guò)程圖,下列敘述不正確的是()A.可以用膠原蛋白酶或胰蛋白酶來(lái)分散組織塊中的細(xì)胞B.MEF細(xì)胞可能產(chǎn)生某種物質(zhì)抑制胚胎干細(xì)胞的分化C.加入培養(yǎng)液中的MEF細(xì)胞最好是來(lái)自傳代培養(yǎng)的細(xì)胞D.細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可能出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象9.有研究表明漸凍癥是由于突變的基因?qū)е律窠?jīng)元合成了某種毒蛋白,從而阻礙了軸突內(nèi)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的流動(dòng)。研究發(fā)現(xiàn),利用誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)制作前驅(qū)細(xì)胞,然后移植給漸凍癥實(shí)驗(yàn)鼠,能延長(zhǎng)其壽命。下列相關(guān)敘述不正確的是()A.誘導(dǎo)iPS細(xì)胞分化成的多種細(xì)胞中核酸相同,蛋白質(zhì)卻不完全相同B.誘導(dǎo)iPS細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),細(xì)胞種類(lèi)增多C.將控制合成破壞運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的毒蛋白基因替換,可能會(huì)起到一定的治療作用D.植入神經(jīng)干細(xì)胞,使受損的運(yùn)動(dòng)功能得到恢復(fù),可以一定程度改善漸凍癥10.如圖所示是某動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)液中活細(xì)胞和死亡細(xì)胞的細(xì)胞密度統(tǒng)計(jì)結(jié)果,下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是()A.實(shí)驗(yàn)中要控制胰蛋白酶溶液濃度和處理時(shí)間,以免損傷細(xì)胞B.培養(yǎng)液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素,以避免雜菌污染C.曲線(xiàn)bc段變化的主要原因可能是培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等D.培養(yǎng)至第6d時(shí),新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)等于死亡細(xì)胞數(shù)11.為了初步檢測(cè)藥物X和Y的抗癌活性,在細(xì)胞培養(yǎng)板的每個(gè)孔中加入相同數(shù)量的肝癌細(xì)胞,使其貼壁生長(zhǎng),實(shí)驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬(溶劑)的藥物X或Y,培養(yǎng)過(guò)程及結(jié)果如圖所示。下列有關(guān)敘述不正確的是()A.細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清B.可用胰蛋白酶處理使肝癌細(xì)胞脫落下來(lái)并進(jìn)行計(jì)數(shù)C.對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的無(wú)菌蒸餾水D.根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可以初步判斷藥物X的抗癌效果較好二、非選擇題12.如圖1是培養(yǎng)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF細(xì)胞)的示意圖,圖2是在用MEF細(xì)胞制成的飼養(yǎng)層上培養(yǎng)胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)的示意圖。請(qǐng)據(jù)圖回答問(wèn)題:(1)圖1所示制備細(xì)胞懸液時(shí),常用______________酶來(lái)消化剪碎的組織塊。配制培養(yǎng)液時(shí),通常需要在合成培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加血清等一些天然成分,目的是__________________________________。(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中添加抗生素是為了抑制細(xì)菌生長(zhǎng),但要注意選擇抗生素的________________,以保證對(duì)所培養(yǎng)的細(xì)胞無(wú)害。培養(yǎng)過(guò)程中每天更換培養(yǎng)液的目的是______________________________________________。(3)當(dāng)MEF細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到____________________________時(shí)就停止分裂,這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的接觸抑制。(4)ES細(xì)胞是由____________中分離出來(lái)的一類(lèi)細(xì)胞,ES細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的______________。13.科學(xué)家僅使用小分子化合物的組合對(duì)體細(xì)胞進(jìn)行處理,成功地將已高度分化的小鼠成纖維上皮細(xì)胞誘導(dǎo)成多潛能干細(xì)胞,并將其命名為誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)。如圖是利用iPS細(xì)胞對(duì)鐮狀細(xì)胞貧血小鼠進(jìn)行基因治療的技術(shù)流程:(1)從小鼠體內(nèi)獲得成纖維上皮細(xì)胞后,對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱(chēng)為_(kāi)_______,培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至貼滿(mǎn)瓶壁時(shí)停止分裂,這種現(xiàn)象稱(chēng)為_(kāi)_____________。(2)胚胎干細(xì)胞存在于__________________中,具有分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的________________________的細(xì)胞,并進(jìn)一步形成機(jī)體的__________________和________________甚至____________的潛能。(3)過(guò)程①的培養(yǎng)液中除合成培養(yǎng)基的成分外,還需添加______________等天然成分。(4)iPS的誘導(dǎo)成功具有重要的醫(yī)學(xué)價(jià)值,又因?yàn)檎T導(dǎo)過(guò)程無(wú)須__________________,而且iPS細(xì)胞可以來(lái)源于人____________的體細(xì)胞,將它移植回病人體內(nèi)后,理論上可以避免______________,所以科學(xué)家普遍認(rèn)為iPS的應(yīng)用前景優(yōu)于胚胎干細(xì)胞。14.下圖是“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造流程圖,請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)回答下列問(wèn)題:(1)生物制造“細(xì)胞培養(yǎng)肉”的第一步,就是要獲取肌肉干細(xì)胞,所謂的干細(xì)胞是指動(dòng)物和人體內(nèi)仍保留著少數(shù)具有____________能力的細(xì)胞。(2)“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造的關(guān)鍵技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。①進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要用________________酶將從動(dòng)物體內(nèi)取出的組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞。在適宜環(huán)境中培養(yǎng),細(xì)胞懸液中的細(xì)胞很快貼附在瓶壁上,這種現(xiàn)象稱(chēng)為_(kāi)_____________。②在適宜條件下,培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,數(shù)量不斷增多,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí),細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱(chēng)為細(xì)胞的____________。(3)“細(xì)胞培養(yǎng)肉”生物制造過(guò)程中,肌肉細(xì)胞培養(yǎng)需要利用合適的支架體系,請(qǐng)推測(cè)其原因:________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案:1.B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)菌、無(wú)毒環(huán)境,適宜的溫度、pH和滲透壓,溫度與動(dòng)物體溫相近,①②④正確;用于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的合成培養(yǎng)基需加入糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等,還需加入血清等天然物質(zhì),③正確;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)所需氣體環(huán)境為95%空氣和5%的CO2,⑤錯(cuò)誤。2.A胰蛋白酶的作用是消化組織細(xì)胞間的物質(zhì),使組織分散成單個(gè)細(xì)胞,可以促進(jìn)蛋白質(zhì)水解為氨基酸;動(dòng)物細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞壁和原生質(zhì)體,A正確。3.C細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果,A正確;干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性,可以分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的各種組織、器官,故可利用干細(xì)胞治療某些頑疾,B正確;同一個(gè)體的神經(jīng)細(xì)胞和干細(xì)胞均是由受精卵通過(guò)細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化形成的,故它們的遺傳物質(zhì)相同,C錯(cuò)誤;干細(xì)胞可分為成體干細(xì)胞、胚胎干細(xì)胞等,D正確。4.A小鼠胚胎腦組織中含有豐富的原代神經(jīng)元,細(xì)胞增殖能力強(qiáng),不會(huì)造成生長(zhǎng)緩慢,A符合題意;培養(yǎng)瓶瓶口密封會(huì)使培養(yǎng)液中缺氧,影響細(xì)胞有氧呼吸,造成供能不足,可能使細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,B不符合題意;血清經(jīng)過(guò)高溫處理后,其中活性成分變性,失去原有功能,可能使細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,C不符合題意;小鼠內(nèi)環(huán)境為弱堿性,所使用的培養(yǎng)基呈弱酸性,可能造成細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,D不符合題意。5.B培養(yǎng)過(guò)程中,應(yīng)定期更換培養(yǎng)液,以便清除細(xì)胞代謝產(chǎn)物,A正確;培養(yǎng)過(guò)程中,加入血清的目的是提供細(xì)胞所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),B錯(cuò)誤;培養(yǎng)過(guò)程中,添加適量CO2的目的是維持培養(yǎng)液的pH,C正確;通過(guò)該技術(shù)培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞可以用于篩選抗癌藥物,D正確。6.B動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)選用材料多為早期胚胎組織或幼齡動(dòng)物的組織器官,A錯(cuò)誤;ab段細(xì)胞幾乎生長(zhǎng)停滯,可能發(fā)生了接觸抑制,b點(diǎn)之后細(xì)胞繼續(xù)增殖,則原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)的分界點(diǎn)是曲線(xiàn)中b點(diǎn),B正確;細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,培養(yǎng)液中通入5%的CO2是為了維持培養(yǎng)液的pH,C錯(cuò)誤;在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞接觸抑制,不會(huì)形成多層細(xì)胞,D錯(cuò)誤。7.B在一定條件下,體外培養(yǎng)的胚胎干細(xì)胞可不斷增殖而不發(fā)生分化,A正確;胚胎干細(xì)胞來(lái)源于早期胚胎,可分化為各種類(lèi)型的細(xì)胞,不具有組織特異性,B錯(cuò)誤;胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的飼養(yǎng)層細(xì)胞為胚胎干細(xì)胞提供營(yíng)養(yǎng)與貼附面,C正確;胚胎干細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的全能性,可分化為成年動(dòng)物體內(nèi)的任何一種組織細(xì)胞,因此先將胚胎干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為某特異組織后再用于治療,可防止形成畸胎瘤,D正確。8.C將動(dòng)物組織細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞,可以用膠原蛋白酶或胰蛋白酶處理,A正確。在胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)液中加入MEF細(xì)胞后,不分化,但未加的一組,易分化,對(duì)比分析可以推出:MEF細(xì)胞可能產(chǎn)生某種物質(zhì)抑制胚胎干細(xì)胞的分化,B正確。加入培養(yǎng)液中的MEF細(xì)胞最好是來(lái)自原代培養(yǎng)的細(xì)胞,C錯(cuò)誤。在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中可能出現(xiàn)細(xì)胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象,D正確。9.A誘導(dǎo)多能干細(xì)胞分化成多種細(xì)胞是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果,細(xì)胞核中遺傳物質(zhì)DNA不變,但mRNA有所差異,使翻譯形成的蛋白質(zhì)也不完全相同,A錯(cuò)誤;誘導(dǎo)多能干細(xì)胞分化的實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá),分化的結(jié)果是細(xì)胞種類(lèi)增多,B正確;將控制合成破壞運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元的毒蛋白基因替換,細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的毒蛋白減少,對(duì)漸凍癥可能會(huì)起到一定的治療作用,C正確;由題干信息“研究發(fā)現(xiàn),利用誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(iPS細(xì)胞)制作前驅(qū)細(xì)胞,然后移植給漸凍癥實(shí)驗(yàn)鼠,能延長(zhǎng)其壽命”可知,植入神經(jīng)干細(xì)胞,能使受損的運(yùn)動(dòng)功能得到恢復(fù),可以一定程度改善病癥,D正確。10.D動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),需要用胰蛋白酶處理動(dòng)物組織,因此實(shí)驗(yàn)中要控制胰蛋白酶溶液濃度和處理時(shí)間,以免損傷細(xì)胞,A正確;動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境,因此培養(yǎng)液中應(yīng)適當(dāng)加入青霉素、鏈霉素等抗生素,以避免雜菌污染,B正確;曲線(xiàn)bc段表示活細(xì)胞密度減少而死細(xì)胞密度增加,產(chǎn)生的主要原因可能是培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足及有害代謝產(chǎn)物積累等,C正確;圖示第6d時(shí),活細(xì)胞密度等于死細(xì)胞密度,但新產(chǎn)生的細(xì)胞數(shù)小于死亡細(xì)胞數(shù),D錯(cuò)誤。11.C培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞時(shí),細(xì)胞培養(yǎng)液中通常需要加入血清,A正確;對(duì)于已經(jīng)貼壁生長(zhǎng)的動(dòng)物細(xì)胞,可用胰蛋白酶處理,使肝癌細(xì)胞分散并脫落下來(lái),有利于計(jì)數(shù),B正確;實(shí)驗(yàn)組加入等體積相同濃度的溶于二甲基亞礬(溶劑)的藥物X或Y,對(duì)照組中應(yīng)加入等體積的二甲基亞礬(溶劑),C錯(cuò)誤;由圖可知,添加藥物X的組別肝癌細(xì)胞數(shù)目最少,可以初步確定藥物X的抗癌效果較好,D正確。12.(1)胰蛋白補(bǔ)充細(xì)胞所需的未知的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(2)種類(lèi)和劑量補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和去除代謝廢物,有利于細(xì)胞增殖(3)細(xì)胞表面相互接觸(4)早期胚胎全能性13.(1)原代培養(yǎng)接觸抑制(2)早期胚胎任何一種類(lèi)型所有組織器官個(gè)體(3)血清(4)破壞胚胎自身免疫排斥反應(yīng)14.(1)分裂和分化(2)①胰蛋白酶或膠原蛋白細(xì)胞貼壁②接觸抑制(3)模擬體
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