2022高中生物第四章基因工程測(cè)評(píng)浙科版選擇性必修3

第四章測(cè)評(píng)

（時(shí)間：90分鐘滿分：100分）

一、選擇題（本大題共25小題,每小題2分，共50分。每小題列出的四個(gè)備選項(xiàng)中只有一項(xiàng)是符合

題目要求的,不選、多選、錯(cuò)選均不得分）

1.下列關(guān)于基因工程基本工具的描述,錯(cuò)誤的是（）

A.只有用相同的限制酶處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒,才能形成重組質(zhì)粒

B.不同的核昔酸序列被不同的限制酶識(shí)別也有可能切出相同的黏性末端

C.限制酶識(shí)別的序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大

D.限制酶、DNA連接酶都是工具酶

ggA

畫(huà)用不同的限制酶處理含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒,也可能形成相同的黏性末端,進(jìn)而形成重

組質(zhì)粒,A項(xiàng)錯(cuò)誤,B項(xiàng)正確；限制酶識(shí)別的序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的概率就越大,C項(xiàng)正確;

重組DNA技術(shù)的基本工具有限制酶、DNA連接酶和載體，其中限制酶、DNA連接酶是工具酶,D項(xiàng)正

確。

2.下列所示的末端至少是由幾種限制酶作用產(chǎn)生的？（）

5,AATTC-3,5AATTG-3'5'CTA—3'5'-TAG3’

3'G-5'3'C-5'3,GAT-5,3,-ATC5,

①②③④

A.1種B.2種

C.3種D.4種

答案c

畫(huà)圖中③④為相同的平末端,可能由同一種限制酶切割所得,故圖示4種末端至少是由3種限制

酶作用產(chǎn)生的。

3.下圖為DNA分子在不同酶的作用下所發(fā)生的變化，圖中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA連接

酶、解旋酶作用的正確順序是（）

A.①②③④B.①②④③

C.①④②③D.①④③②

lgc

睚責(zé)限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子上特定的核甘酸序列,并催化其中特定的兩個(gè)核甘酸之間的磷酸

二酯鍵斷裂,因此作用于①過(guò)程;DNA聚合酶用于DNA分子的復(fù)制，能在單鏈上將一個(gè)個(gè)脫氧核昔酸

連接起來(lái),形成新的子鏈因此作用于④過(guò)程;DNA連接酶能在具有相同堿基末端的兩個(gè)DNA片段之間

形成磷酸二酯鍵,因此作用于②過(guò)程;解旋酶能夠?qū)NA分子的雙螺旋解開(kāi)，因此作用于③過(guò)程。

4.若要利用某目的基因（圖甲）和Pi噬菌體載體（圖乙）構(gòu)建重組DNA分子（圖丙），限制性內(nèi)切核酸酶

的酶切位點(diǎn)分別是（5，-%ATCT-3，）、6coRI（5,-GAATTC-^z）Sat/3AI（S-'GATC-M。下列分析合

理的是（）

A.用EccRI切割目的基因和Pl噬菌體載體

B.用為7II和EcoRI切割目的基因和Pl噬菌體載體

C.用BglU和Sau3AI切割目的基因和Pi噬菌體載體

D.用EcdRI和Sau3Al切割目的基因和Pi噬菌體載體

解如解答本題的關(guān)鍵是要看清切割后目的基因插入的方向，只有用EcoRI和Sau3AI切割目的基因

和Pi噬菌體載體,才能保證構(gòu)建的重組DNA分子中目的基因的方向與圖丙相同。

5.下列關(guān)于基因工程應(yīng)用的敘述，錯(cuò)誤的是（）

A.可將外源生長(zhǎng)激素基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞內(nèi)，提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率

B.向植物體內(nèi)轉(zhuǎn)入Bt毒蛋白基因來(lái)培育抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物

C.可以利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為器官移植的供體

D.利用乳腺生物反應(yīng)器可使哺乳動(dòng)物的產(chǎn)奶量增加

ggD

畫(huà)可將外源生長(zhǎng)激素基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞(受精卵)內(nèi)，提高動(dòng)物的生長(zhǎng)速率,A項(xiàng)正確；向植物體內(nèi)

轉(zhuǎn)入Bt毒蛋白基因來(lái)培育抗蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物，如抗蟲(chóng)棉的培育,B項(xiàng)正確;可以利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作為器

官移植的供體,避免免疫排斥現(xiàn)象的出現(xiàn),C項(xiàng)正確;利用乳腺生物反應(yīng)器可使哺乳動(dòng)物的乳汁中含

有目的基因產(chǎn)物等,而不是提高產(chǎn)奶量,D項(xiàng)錯(cuò)誤。

6.下列有關(guān)質(zhì)粒的敘述，正確的是()

A.質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子

B.質(zhì)粒是廣泛存在于細(xì)菌細(xì)胞中的一種顆粒狀細(xì)胞器

C.質(zhì)粒攜帶了外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后，只能停留在該細(xì)胞內(nèi)獨(dú)立復(fù)制

D.在進(jìn)行基因工程操作中，被用作載體的質(zhì)粒都是天然質(zhì)粒

畫(huà)質(zhì)粒是細(xì)菌細(xì)胞質(zhì)中能自主復(fù)制的小型環(huán)狀DNA分子,A項(xiàng)正確;質(zhì)粒是存在于細(xì)菌中的一種環(huán)

狀DNA分子,不是細(xì)胞器,B項(xiàng)錯(cuò)誤;質(zhì)粒攜帶了外源基因進(jìn)入受體細(xì)胞后,能在細(xì)胞中進(jìn)行自我復(fù)制,

也可以整合到受體DNA上隨受體DNA同步復(fù)制,C項(xiàng)錯(cuò)誤;天然的質(zhì)粒需要經(jīng)過(guò)改造后才可作為基因

工程的載體,D項(xiàng)錯(cuò)誤。

7.某鏈狀DNA分子含有5000個(gè)堿基對(duì)(bp),先將其用限制酶a切割,再把得到的產(chǎn)物用限制酶b

切割,得到的DNA片段大小如下表所示。限制酶a、b的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)如下圖所示。下列有

關(guān)說(shuō)法正確的是()

限制酶a切割

限制酶b切割產(chǎn)物

產(chǎn)物

長(zhǎng)度(bp)

長(zhǎng)度(bp)

2100;1400;11900;200;800;600;1

000;500000;500

限制酶a限制酶b

5-AGATCT-3'5-GGATCC-3/

3'-TCIAGA-5'3'_CCTAGG-5'

A.該DNA分子中限制酶a與限制酶b的切割位點(diǎn)分別有3個(gè)和2個(gè)

B.限制酶a與限制酶b切割產(chǎn)生的黏性末端不能相互連接

C.限制酶a與限制酶b切割的化學(xué)鍵不相同

D.若僅用限制酶a切割與該鏈狀DNA分子的核昔酸序列相同的質(zhì)粒,得到的切割產(chǎn)物有4種

ggA

畫(huà)由題表可知，限制酶a可以把該DNA切成4段,說(shuō)明該DNA分子上限制酶a的切割位點(diǎn)有3個(gè)；

限制酶b把長(zhǎng)度為2100bp的DNA片段切成長(zhǎng)度分別為1900bp和200bp的兩個(gè)片段，把長(zhǎng)度為

1400bP的DNA片段切成長(zhǎng)度分別為800bp和600bP的兩個(gè)片段,說(shuō)明限制酶b在該DNA分子上有2

個(gè)切割位點(diǎn),A項(xiàng)正確。由題圖可以看出，限制酶a和限制酶b切割產(chǎn)生的黏性末端相同,它們之間

能依據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則連接,B項(xiàng)錯(cuò)誤。限制酶作用的化學(xué)鍵都是磷酸二酯鍵,C項(xiàng)錯(cuò)誤。在該

DNA分子中限制酶a的切割位點(diǎn)有3個(gè),僅用限制酶a切割與該DNA分子序列相同的質(zhì)粒,得到的切

割產(chǎn)物有3種,D項(xiàng)錯(cuò)誤。

8.下表列出了幾種限制酶的識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn),

下列敘述正確的是（）

限

制BanRI歷力dinEccRISmaI

酶

識(shí)

別

寧

列

5，-hcTT-3

5/-GGATCC-3/5/-GAATTC-3z5'-CCCCiGG-3?

及3'-CCTAGG-5'3'-TTCGAA-53'-CTTAAG-5'-GG(KCC-5,

ttt

切

割

位

點(diǎn)

EcoRIEcoRI

］目解基因］

—外源

DNA

BamHlSma\HindiW

圖2

A.一個(gè)圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaI切割前后,分別含有0個(gè)和4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)

B.若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造,插入的SmaI酶切位點(diǎn)越多,質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高

C.用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒,可以使用SmaI切割

D.使用I限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA可防止質(zhì)粒和外源DNA發(fā)生自身環(huán)化

畫(huà)由于質(zhì)粒在切割前是一個(gè)環(huán)狀DNA分子,因此不含有游離的磷酸基團(tuán)；當(dāng)質(zhì)粒被SmaI切割后，

兩個(gè)末端各有1個(gè)游離的磷酸基團(tuán),故共有2個(gè)游離的磷酸基團(tuán),A項(xiàng)錯(cuò)誤。SmaI酶切位點(diǎn)越多,表

示G和C這一對(duì)堿基對(duì)在質(zhì)粒中所占的比例就越高,而G和C之間含有三個(gè)氫鍵,故質(zhì)粒的熱穩(wěn)定

性越高,B項(xiàng)正確。質(zhì)粒中的抗生素抗性基因?yàn)闃?biāo)記基因，由圖可知，標(biāo)記基因和目的基因中均含有

SmaI酶切位點(diǎn),都可以被SmaI破壞,故不能使用該酶剪切質(zhì)粒和含有目的基因的DNA,C項(xiàng)錯(cuò)誤。

構(gòu)建含目的基因的重組質(zhì)粒時(shí)，使用EcoRI限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA,會(huì)產(chǎn)生相同的黏性末

端,質(zhì)粒和外源DNA可能會(huì)發(fā)生自身環(huán)化,D項(xiàng)錯(cuò)誤。

9.PCR是一種體外擴(kuò)增DNA的技術(shù),模擬了體內(nèi)的DNA復(fù)制過(guò)程。下圖為PCR技術(shù)原理示意圖，下列

關(guān)于圖中物質(zhì)和過(guò)程的說(shuō)明，錯(cuò)誤的是（）

物質(zhì)a

72℃??

DNA

A.物質(zhì)a:游離的脫氧核甘酸

B.過(guò)程①:氫鍵斷裂

C.過(guò)程②:邊解旋邊復(fù)制

D.過(guò)程③:嚴(yán)格遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則

ggc

畫(huà)PCR模擬了體內(nèi)的DNA復(fù)制,所以物質(zhì)a是DNA復(fù)制的原料一一游離的脫氧核甘酸,A項(xiàng)正確;

在95℃的高溫條件下,DNA分子雙螺旋解開(kāi),形成單鏈，此時(shí)氫鍵斷裂,B項(xiàng)正確;體外模擬DNA的復(fù)

制依據(jù)了DNA的熱變性原理,在該過(guò)程中,DNA分子先解旋后復(fù)制,C項(xiàng)錯(cuò)誤;DNA復(fù)制需要嚴(yán)格遵循

堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,D項(xiàng)正確。

10.PCR技術(shù)中，如何設(shè)計(jì)引物？（）

A.PCR引物要根據(jù)需要擴(kuò)增的目標(biāo)DNA的堿基序列來(lái)設(shè)計(jì)

B.PCR引物要根據(jù)已知的DNA序列對(duì)應(yīng)的RNA序列來(lái)設(shè)計(jì)

C.PCR引物要根據(jù)已知的DNA序列對(duì)應(yīng)的tRNA序列來(lái)設(shè)計(jì)

D.以上都不是正確方法

畫(huà)設(shè)計(jì)引物就是直接根據(jù)基因序列來(lái)設(shè)計(jì),即根據(jù)需要擴(kuò)增的目標(biāo)DNA的堿基序列來(lái)設(shè)計(jì)。

11.利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因,其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似。從理論推測(cè),循環(huán)產(chǎn)物中開(kāi)始出現(xiàn)

兩條脫氧核昔酸鏈等長(zhǎng)的DNA雙鏈片段是在第幾輪循環(huán)？（）

A.1B.2C.3D.4

H]c

畫(huà)第1、2輪循環(huán)合成的子鏈長(zhǎng)度均不同,根據(jù)DNA半保留復(fù)制特點(diǎn)可知,前兩輪循環(huán)產(chǎn)生的4個(gè)

DNA分子的兩條鏈均不等長(zhǎng),第3輪循環(huán)產(chǎn)生的DNA分子存在等長(zhǎng)的兩條核甘酸鏈。

12.下列關(guān)于PCR操作過(guò)程的敘述,錯(cuò)誤的是（）

A.PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸儲(chǔ)水等在使用前必須進(jìn)行高壓滅菌

B.PCR利用了DNA的熱變性原理

C.PCR所用的緩沖液和酶從冰箱拿出之后,迅速融化

D.在向微量離心管中添加反應(yīng)組分時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭都必須更換

gl]c

畫(huà)為避免外源DNA等因素的污染,PCR實(shí)驗(yàn)中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸儲(chǔ)水等在

使用前必須進(jìn)行高壓滅菌,A項(xiàng)正確;PCR利用了DNA的熱變性原理,B項(xiàng)正確;PCR所用的緩沖液和

酶應(yīng)分裝成小份,在-20C溫度下儲(chǔ)存,使用前,將所需試劑從冰箱取出，放在冰塊上緩慢融化,C項(xiàng)錯(cuò)

誤;在向微量離心管中添加反應(yīng)組分時(shí),每吸取一種試劑后,移液器上的槍頭都必須更換，以免污染

其他成分,D項(xiàng)正確。

13.下圖為重組DNA分子的模式圖。下列有關(guān)基因工程重組DNA分子的說(shuō)法，錯(cuò)誤的是（）

A.基因工程操作的第二步是重組DNA分子的構(gòu)建

B.重組DNA分子的構(gòu)建并不一定相同

C.圖中啟動(dòng)子位于目的基因的首端,是核糖體識(shí)別和結(jié)合的部位

D.抗生素抗性基因的作用是作為標(biāo)記基因,用于鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因

H］c

畫(huà)由于受體細(xì)胞有植物、動(dòng)物、微生物之分，以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法不同，因此重組

DNA分子的構(gòu)建也會(huì)有所差別，不可能是千篇一律的;啟動(dòng)子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段，位

于目的基因的“上游”，它是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,有了它才能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。

14.利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)竣酸酯酶(CarE)制劑的流程如下圖所示,下列有關(guān)敘述正確的是()

fjmRNA?方函當(dāng)Ca］基岡［表達(dá)苦體］

|工程菌用大腸桿菌卜當(dāng)重組!質(zhì)粒|

［CarE制劑卜-U降解馬拉硫磷殘回

A.過(guò)程①需使用逆轉(zhuǎn)錄酶

B.過(guò)程②利用PCR擴(kuò)增%"基因需使用解旋酶和耐高溫的TaqDNA聚合酶

C.過(guò)程③可用NaCl溶液處理大腸桿菌,使之成為感受態(tài)細(xì)胞

D.過(guò)程④可利用抗原-抗體雜交鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞

解加過(guò)程①表示逆轉(zhuǎn)錄,需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化,A項(xiàng)正確;過(guò)程②表示目的基因的獲取,在利用PCR技

術(shù)對(duì)獲取的目的基因進(jìn)行擴(kuò)增的過(guò)程中,解旋是通過(guò)高溫解鏈實(shí)現(xiàn)的,不需要使用解旋酶,B項(xiàng)錯(cuò)誤；

過(guò)程③表示將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,若受體細(xì)胞為大腸桿菌細(xì)胞,則需要用CaCL溶液處理，使之

成為感受態(tài)細(xì)胞,C項(xiàng)錯(cuò)誤;過(guò)程④可利用DNA分子雜交技術(shù),鑒定目的基因是否已導(dǎo)入受體細(xì)胞,D

項(xiàng)錯(cuò)誤。

15.菊花是一種雙子葉植物，易感桃魴。桃魴不但直接影響植物生長(zhǎng),還是多種植物病毒的傳播媒介。

雪花蓮凝集素基因頻的表達(dá)產(chǎn)物能有效抑制桃場(chǎng)生長(zhǎng)。某科研團(tuán)隊(duì)運(yùn)用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得了轉(zhuǎn)

腿基因菊花。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.受體細(xì)胞可以選擇菊花葉片細(xì)胞或桃蛇細(xì)胞

B.將目的基因GNA插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上構(gòu)建重組DNA分子

C.菊花外植體產(chǎn)生的酚類化合物能吸引農(nóng)桿菌移向受體細(xì)胞

D.應(yīng)用抗蟲(chóng)接種實(shí)驗(yàn),檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)桃蠣的抗性及抗性程度

解詞分析題意可知,要想獲得轉(zhuǎn)GNA基因菊花,應(yīng)選擇菊花的細(xì)胞作為受體細(xì)胞,A項(xiàng)錯(cuò)誤;Ti質(zhì)粒

上的T-DNA片段可以轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞中,并且整合到植物染色體DNA上,因此將目的基因GNA插入

到Ti質(zhì)粒的T-DNA上,B項(xiàng)正確;菊花外植體產(chǎn)生的酚類化合物能吸引農(nóng)桿菌移向受體細(xì)胞,有利于

目的基因成功導(dǎo)入,C項(xiàng)正確；已知雪花蓮凝集素基因GNA的表達(dá)產(chǎn)物能有效抑制桃蠟生長(zhǎng),故應(yīng)用

抗蟲(chóng)接種實(shí)驗(yàn),檢測(cè)轉(zhuǎn)基因菊花對(duì)桃蠣的抗性及抗性程度,D項(xiàng)正確。

16.下圖是利用基因工程培育抗蟲(chóng)植物的示意圖。下列相關(guān)敘述正確的是（）

導(dǎo)

構(gòu)建重組入

樓

物

細(xì)

孥。胞

含重組Ti質(zhì)

粒的農(nóng)桿菌

DNA

(D②③

A.⑤只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀,就表明植株發(fā)生了可遺傳變異

B.③侵染植物細(xì)胞后,重組Ti質(zhì)粒整合到④的染色體上

C.④的染色體上若含抗蟲(chóng)基因，則⑤就表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀

D.②的構(gòu)建需要限制性內(nèi)切核酸酶和DNA聚合酶參與

ggA

畫(huà)⑤為轉(zhuǎn)基因植物,只要表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀,就說(shuō)明轉(zhuǎn)入的目的基因成功表達(dá),基因工程的原理是基

因重組,屬于可遺傳變異,A項(xiàng)正確;③侵染植物細(xì)胞后,重組Ti質(zhì)粒上的T-DNA片段整合到棉花細(xì)

胞的染色體上,B項(xiàng)錯(cuò)誤;受體細(xì)胞的染色體上可能含抗蟲(chóng)基因，但不代表該基因一定能成功表達(dá)，因

此不能確定⑤是否表現(xiàn)出抗蟲(chóng)性狀,C項(xiàng)錯(cuò)誤;重組DNA分子的構(gòu)建需要限制性內(nèi)切核酸酶和DNA連

接酶參與,D項(xiàng)錯(cuò)誤。

17.某研究所的研究人員將生長(zhǎng)激素基因通過(guò)質(zhì)粒介導(dǎo)進(jìn)入大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)，使其表達(dá)產(chǎn)生生長(zhǎng)激

素。已知質(zhì)粒中存在兩個(gè)抗性基因:A是抗鏈霉素基因,B是抗青霉素基因,且目的基因要插入基因B

中,而大腸桿菌不帶有任何抗性基因。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.大腸桿菌中可能未導(dǎo)入質(zhì)粒

B.導(dǎo)入大腸桿菌的可能是重組質(zhì)粒,也可能是質(zhì)粒

C.可用含青霉素的培養(yǎng)基檢測(cè)大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒

D.在含青霉素的培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng),但在含鏈霉素的培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的可能是符合生產(chǎn)要求的大腸

桿菌

ggc

畫(huà)大腸桿菌中可能導(dǎo)入質(zhì)粒,也可能沒(méi)有導(dǎo)入質(zhì)粒,A項(xiàng)正確;導(dǎo)入大腸桿菌的質(zhì)?？赡転橹亟M質(zhì)

粒,也可能為普通質(zhì)粒,B項(xiàng)正確；目的基因要插入基因B中，導(dǎo)致抗青霉素基因被破壞，即符合生產(chǎn)

要求的大腸桿菌不能抗青霉素,而大腸桿菌不帶有任何抗性基因,不能抗青霉素,因此不能用含青霉

素的培養(yǎng)基檢測(cè)大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒,C項(xiàng)錯(cuò)誤；由于含目的基因的重組質(zhì)粒中的抗青霉

素基因被破壞,因此在含青霉素的培養(yǎng)基中不能生長(zhǎng)，但在含鏈霉素的培養(yǎng)基中能生長(zhǎng)的可能是符

合生產(chǎn)要求的大腸桿菌,D項(xiàng)正確。

18.在基因工程操作過(guò)程中,科研人員利用識(shí)別兩種不同序列的限制酶（R和時(shí)處理基因載體,進(jìn)行

聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)，結(jié)果如下圖所示。以下相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

A.該載體最可能為環(huán)狀DNA分子

B.兩種限制酶在載體上各有一個(gè)酶切位點(diǎn)

C.限制酶Ri與R?的切點(diǎn)最短相距約200bp

D.限制酶作用于酶切位點(diǎn)會(huì)導(dǎo)致氫鍵和肽鍵斷裂

ggD

畫(huà)當(dāng)用一種限制酶切割載體時(shí),僅產(chǎn)生一種長(zhǎng)度的DNA片段,說(shuō)明該載體最有可能為環(huán)狀DNA分

子,A項(xiàng)正確;當(dāng)分別用限制酶R、R,切割載體時(shí),兩種限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段等長(zhǎng),而用兩種限

制酶同時(shí)切割時(shí)則產(chǎn)生兩種長(zhǎng)度的DNA片段,說(shuō)明兩種限制酶在載體上各有一個(gè)酶切位點(diǎn),B項(xiàng)正確;

用兩種限制酶同時(shí)切割時(shí)可產(chǎn)生600bp和200bp兩種長(zhǎng)度的DNA片段,說(shuō)明兩種限制酶的酶切位點(diǎn)

至少相距200bp,C項(xiàng)正確;用限制酶切割DNA分子,破壞的是酶切位點(diǎn)上兩個(gè)脫氧核糖核甘酸之間

的磷酸二酯鍵,D項(xiàng)錯(cuò)誤。

19.乙烯生物合成酶基因可以控制乙烯的合成,科學(xué)家將該基因的反義基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)，培育轉(zhuǎn)

基因延熟番茄，延長(zhǎng)其儲(chǔ)藏期。反義基因的作用機(jī)制如下圖所示，下列說(shuō)法錯(cuò)誤的是（）

A.有意義mRNA和反義mRNA是通過(guò)相應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄而來(lái)的

B.乙烯生物合成酶基因的模板鏈的序列與反義基因的模板鏈的序列是互補(bǔ)的

C.乙烯是乙烯生物合成酶基因的表達(dá)產(chǎn)物,可促進(jìn)果實(shí)成熟

D.因?yàn)閙RNA形成雙鏈后無(wú)法進(jìn)行翻譯,所以無(wú)乙烯生物合成酶生成

ggc

解近由題圖可以看出，有意義mRNA和反義mRNA是通過(guò)相應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄而來(lái)的,A項(xiàng)正確;反義mRNA能

夠與有意義mRNA進(jìn)行雜交形成雙鏈,并且有意義mRNA和反義mRNA是通過(guò)相應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄而來(lái)的,所

以乙烯生物合成酶基因的模板鏈的序列與反義基因的模板鏈的序列是互補(bǔ)的,B項(xiàng)正確；乙烯生物合

成酶基因的表達(dá)產(chǎn)物可以控制乙烯的合成，乙烯不是其表達(dá)產(chǎn)物,C項(xiàng)錯(cuò)誤;翻譯過(guò)程是以mRNA為模

板合成蛋白質(zhì)的過(guò)程,題圖中兩種mRNA雜交形成雙鏈,進(jìn)而阻斷了有意義mRNA的翻譯過(guò)程,D項(xiàng)正

確。

20.以下有關(guān)蛋白質(zhì)工程的敘述,不正確的是（）

A.蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸

B.蛋白質(zhì)工程的原理是從預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)出發(fā),最終找到脫氧核甘酸序列的過(guò)程

C.干擾素結(jié)構(gòu)中改變某個(gè)氨基酸提高了它的保存時(shí)間是蛋白質(zhì)工程應(yīng)用的體現(xiàn)

D.蛋白質(zhì)工程不是對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的直接改造

畫(huà)蛋白質(zhì)工程是基因工程的延伸,A項(xiàng)正確;蛋白質(zhì)工程的原理是從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā),最終

找到脫氧核昔酸序列的過(guò)程,B項(xiàng)錯(cuò)誤;干擾素結(jié)構(gòu)中改變某個(gè)氨基酸提高了它的保存時(shí)間是蛋白質(zhì)

工程應(yīng)用的體現(xiàn),C項(xiàng)正確;蛋白質(zhì)工程不是對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的直接改造,而是對(duì)基因進(jìn)行改造或合

成,D項(xiàng)正確。

21.蛋白質(zhì)工程是新崛起的一項(xiàng)生物工程，又稱第二代基因工程。下圖為蛋白質(zhì)工程流程圖。下列

有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）

改造或合成蛋白質(zhì)工程85④

基因氨基酸序列蛋白質(zhì)■預(yù)期功能

DNA（多肽鏈）（三維結(jié)構(gòu)）大生物功能

③

“中心法則”

A.蛋白質(zhì)工程就是根據(jù)人們需要,直接對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行加工改造

B.蛋白質(zhì)工程是通過(guò)基因改造或基因合成等方法,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造

C.①②過(guò)程為轉(zhuǎn)錄和翻譯

D.蛋白質(zhì)工程是從④開(kāi)始的

ggA

畫(huà)蛋白質(zhì)工程并不是直接對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,A項(xiàng)錯(cuò)誤；由概念可知,蛋白質(zhì)工程是通過(guò)基因改造

或基因合成等方法,對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造,B項(xiàng)正確;基因通過(guò)①轉(zhuǎn)錄形成mRNA,之后經(jīng)過(guò)②翻譯

形成多肽鏈,C項(xiàng)正確;蛋白質(zhì)工程是從預(yù)期蛋白質(zhì)功能開(kāi)始的，即④,D項(xiàng)正確。

22.下列表示抗凝血酶乳腺生物反應(yīng)器的制備過(guò)程,下列說(shuō)法正確的是（）

--------------）導(dǎo)入------------_移植----------

抗凝血酶基因—>受體細(xì)胞①一②一受體母牛

A.其中①表示受精卵

B.其中②表示性別為雄性的胚胎

C.常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將基因?qū)胧荏w細(xì)胞

D.在②發(fā)育的任何階段都可以進(jìn)行胚胎移植

畫(huà)圖中的受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞,故①表示受精卵,A項(xiàng)正確;該過(guò)程是為了制備乳腺生物反應(yīng)器,故

②表示性別為雌性的胚胎,B項(xiàng)錯(cuò)誤;常用顯微注射法將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞,C項(xiàng)錯(cuò)誤;早期胚胎

培育至桑甚胚或囊胚期時(shí),可以進(jìn)行胚胎移植,D項(xiàng)錯(cuò)誤。

23.科學(xué)家成功地把人的抗病毒干擾素基因“嫁接”到煙草的DNA分子上，從而使煙草獲得了抗病

毒的能力。下列與此實(shí)驗(yàn)相關(guān)的分析，不正確的是（）

A.“嫁接”的成功，說(shuō)明人和煙草共用一套遺傳密碼

B.“嫁接”之所以能成功,是因?yàn)閮烧逥NA分子的構(gòu)成物質(zhì)相同

C.“嫁接”到煙草中的人抗病毒干擾素基因，將不能再自我復(fù)制

D.“嫁接”后的煙草,體內(nèi)將會(huì)產(chǎn)生抗病毒干擾素

ggc

迦自然界中所有的生物都共用一套遺傳密碼,A項(xiàng)正確;人和植物的DNA都是由脫氧核甘酸組成的,

都是規(guī)則的雙螺旋結(jié)構(gòu)，這是轉(zhuǎn)基因技術(shù)的物質(zhì)基礎(chǔ),B項(xiàng)正確；“嫁接”到煙草中的人抗病毒干擾

素基因?yàn)槟康幕?能自我復(fù)制,C項(xiàng)錯(cuò)誤；“嫁接”后的煙草，體內(nèi)含有抗病毒干擾素基因，目的基

因可以正常表達(dá),所以體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生抗病毒干擾素,D項(xiàng)正確。

24.科學(xué)家通過(guò)利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,提高了光合作用過(guò)程中Rubisco酶對(duì)

CO?的親和力，從而顯著提高了植物的光合作用速率。下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.PCR定點(diǎn)突變技術(shù)使Rubisco酶基因發(fā)生定向突變

B.PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因的過(guò)程中必須添加兩種引物

C.PCR擴(kuò)增過(guò)程需要加入解旋酶和耐高溫的Ta<7DNA聚合酶

D.PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程的范疇

答案C

25.基因編輯是指將外源DNA片段導(dǎo)入到細(xì)胞染色體特定位點(diǎn)或刪除基因內(nèi)部的片段,定點(diǎn)改造基

因,獲得預(yù)期的生物體基因序列發(fā)生遺傳改變的技術(shù)。下圖是對(duì)某生物B基因進(jìn)行編輯的過(guò)程,該

過(guò)程中用sgRNA可指引Cas9酶（一種能切割DNA的酶）結(jié)合到特定的切割位點(diǎn)。下列敘述正確的是

（）

=====f水解

二二二一被剪下的DNA片段

\?___/、?,1.，、:/

-IUIH一.I.UI,

編輯前的B基因編輯后的B基因

A.sgRNA是合成Cas9酶的模板

B.sgRNA的堿基序列與靶基因堿基序列能夠全部互補(bǔ)

C.Cas9酶可在特定切割位點(diǎn)斷裂核甘酸之間的磷酸二酯鍵

D.B基因被編輯后因不能轉(zhuǎn)錄而無(wú)法表達(dá)相關(guān)蛋白質(zhì)

ggc

畫(huà)據(jù)題干和圖示可知,sgRNA是一段單鏈RNA,可指引Cas9酶結(jié)合到特定的切割位點(diǎn),不是合成

Cas9酶的模板,A項(xiàng)錯(cuò)誤;靶基因的部分堿基序列與sgRNA的堿基序列互補(bǔ),B項(xiàng)錯(cuò)誤;Cas9酶可在

特定切割位點(diǎn)進(jìn)行切割,使相應(yīng)部位的核甘酸之間的磷酸二酯鍵斷裂,C項(xiàng)正確;被編輯后的B基因

仍能進(jìn)行轉(zhuǎn)錄,D項(xiàng)錯(cuò)誤。

二、非選擇題（本大題共5小題,共50分）

26.（9分）圖a中的三個(gè)DNA片段上依次表示出了&oRI、BanRI和Sau3KI三種限制性內(nèi)切核酸

酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)，圖b為某種表達(dá)載體的示意圖（載體上的EcdRI、Sadi卜I的切點(diǎn)是唯一

的）。

5,-GAATTC-3,5'-（ijATCC-3'5/-GATC-3,

3'-CTTAAG-5'3'-CCTAGG-5'3'-CTAG-5'

圖a

啟動(dòng)子EcoRi

Sau3AI

復(fù)制起點(diǎn)終止子

抗生素抗性基因

圖b

根據(jù)基因工程的有關(guān)知識(shí)，回答下列問(wèn)題。

(1)經(jīng)Ba源I酶切后得到的目的基因可以與上述表達(dá)載體被酶切后的產(chǎn)物連接，

理由是o

(2)若某人利用圖b所示的表達(dá)載體獲得了甲、乙、丙三種含有目的基因的重組DNA分子，如圖c

所示,這三種重組DNA分子中，不能在宿主細(xì)胞中表達(dá)目的基因產(chǎn)物的有,不能表達(dá)

的原因

是______________________________________________________________________________________

(3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有

和,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的

是O

置圉(l)Sa〃3Al兩種酶切割后產(chǎn)生的片段具有相同的黏性末端(2)甲、丙甲中目的基因插入

啟動(dòng)子的“上游”，丙中目的基因插入終止子的“下游”，二者的目的基因均不能被轉(zhuǎn)錄

(3)E.coliDNA連接酶T4DNA連接酶T4DNA連接酶

解析|(1)由于限制酶SaiQKI與艮川U酶切產(chǎn)生的黏性末端相同,所以經(jīng)BanRI酶切后得到的目的

基因可以與圖(b)表達(dá)載體被Sau3Al酶切后的產(chǎn)物連接。(2)在重組DNA分子中，啟動(dòng)子應(yīng)位于目

的基因的“上游”，終止子應(yīng)位于目的基因的末端，這樣目的基因才能表達(dá)。圖中甲、丙均不符合

此特征,所以不能表達(dá)目的基因的產(chǎn)物。(3)常見(jiàn)的DNA連接酶有￡.coLDNA連接酶和T4DNA連接

酶,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是T4DNA連接酶。

27.(10分)某質(zhì)粒上有Sail、HindIILBaniAI三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和

抗氨葦青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過(guò)程如下圖所示。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。

HindUIBamHISalI

含抗鹽基=

因的DNA]重組

Sall抗鹽基因質(zhì)粒

Sall/

二抗四環(huán)素基因

抗氨節(jié)青—BamHI

霉素基因,

轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草細(xì)胞

煙草幼苗

(1)將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞,采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其中用到的質(zhì)粒是O

該質(zhì)粒含有一段特殊的DNA片段,稱為o該方法中農(nóng)桿菌的作用

是。

(2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),和只用一種酶切割目的基因的兩端及質(zhì)粒相比,選用小〃dill和SalI兩種酶

的好處

是______________________________________________________________________________________

O

(3)含有目的基因的農(nóng)桿菌可根據(jù)標(biāo)記基因進(jìn)行篩選。若農(nóng)桿菌在含有氨革青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)

基上都可以生長(zhǎng)繁殖，農(nóng)桿菌中是否已含有目的基因?(填"是”或“否”)。為什

么？。

(4)將已經(jīng)轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌進(jìn)行如下操作,篩選出符合要求的農(nóng)桿菌。先把轉(zhuǎn)化的農(nóng)桿菌接種到A培

養(yǎng)基中培養(yǎng),長(zhǎng)出菌落后,用無(wú)菌牙簽挑取A上的單個(gè)菌落,分別接種到B(含氨葦青霉素)和C(含四

環(huán)素和氨革青霉素）兩個(gè)培養(yǎng)基的相同位置上,一段時(shí)間后,菌落的生長(zhǎng)狀況如下圖所示。含目的基

因的菌落位于B或C上的哪些菌落中?請(qǐng)?jiān)趫D中相應(yīng)的位置上圈出來(lái)。

含四環(huán)素和含氨芳青霉素

氨節(jié)青霉素

答案（l）Ti質(zhì)粒T-DNA感染煙草細(xì)胞，把目的基因插入到煙草細(xì)胞的染色體DNA上（2）防止目

的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化，以提高帶有目的基因的重組質(zhì)粒的合成效率（3）否含有目的基因的

質(zhì)粒中抗四環(huán)素基因被破壞

⑷如下圖

G?A

O

菌落ooO

OoO

?OO

含四環(huán)素和含氨節(jié)青霉素

氨節(jié)青霉素

28.（10分）某一質(zhì)粒載體如圖所示,外源DNA插入到颯/或杷/中會(huì)導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活（颯/表示

氨茉青霉素抗性基因，加/表示四環(huán)素抗性基因）。有人將此質(zhì)粒載體用Ba血I酶切后,與用BanRI

酶切獲得的目的基因混合,加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng),用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌,結(jié)果

大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化,有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種,分別是含有環(huán)狀目的基因、含有

質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉?wèn)題。

（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具,應(yīng)具備的基本條件有.

（答出兩點(diǎn)即可），而作為表達(dá)載體,除滿足上述基本條件外,還需具有啟動(dòng)子和終止子等。

（2）如果用含有氨茉青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選,在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中,未被轉(zhuǎn)化的和僅含環(huán)狀

目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的,其原因

是；并且

和的細(xì)胞也是不能區(qū)分的,其原因

是o在上述篩選的基礎(chǔ)上,若要篩

選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落,還需使用含有的固體培養(yǎng)

基。

（3）基因工程中,某些噬菌體經(jīng)改造后可以作為載體,其DNA復(fù)制所需的原料來(lái)

自。

還（1）含有復(fù)制起點(diǎn)、具有標(biāo)記基因（2）二者均不含有氨葦青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不

生長(zhǎng)含有質(zhì)粒載體含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒（或含有重組質(zhì)粒）二者均含有氨葦青霉

素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長(zhǎng)四環(huán)素（3）受體細(xì)胞

畫(huà)（1）作為載體必須具備如下特點(diǎn):①含有復(fù)制起點(diǎn)，能夠獨(dú)立自主復(fù)制并穩(wěn)定存在;②含標(biāo)記基

因，以便重組DNA的篩選;③具有一種或多種限制酶的識(shí)別序列,供外源DNA片段插入其中。⑵在

含有氨葦青霉素的培養(yǎng)基上,只有具有a磔，的大腸桿菌才能夠生長(zhǎng)。而a磔,位于質(zhì)粒上,故未被轉(zhuǎn)

化的和僅含環(huán)狀目的基因的大腸桿菌細(xì)胞中無(wú)amp,不能在此培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。而僅含有質(zhì)粒載體的

和含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌均具有amp,因而能在培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。目的基因的插

入破壞了質(zhì)粒載體的tef,故含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能在含有四環(huán)素的平板

上生長(zhǎng),從而與僅含有質(zhì)粒載體的大腸桿菌得以區(qū)分。（3）噬菌體是病毒,無(wú)細(xì)胞結(jié)構(gòu),無(wú)法自主合

成DNA,需借助宿主細(xì)胞完成DNA復(fù)制。

29.（11分）中國(guó)T2DM（胰島8細(xì)胞功能衰退型糖尿病）的發(fā)病率由1979年的1.00%上升到2019年

的4.37%,補(bǔ)充胰島素是控制和緩解病情的重要途徑。胰島素（由a、B兩條多肽鏈組成）的生產(chǎn)方

式由提取動(dòng)物胰島素發(fā)展到了利用基因工程生產(chǎn)重組人胰島素。

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)（如下圖所示），為避免目的基因任意連接和載體的自身環(huán)化,應(yīng)選用

酶切處理目的基因和載體。構(gòu)建完成的重組DNA分子除了含有目的基因、標(biāo)記基因以外，還必須有一

等調(diào)控組件。

（2）利用大腸桿菌生產(chǎn)重組人胰島素時(shí),構(gòu)建重組DNA分子的目的基因應(yīng)從文庫(kù)中

獲取,重組大腸桿菌合成的人胰島素原沒(méi)有活性,需用酶將其加工成含a、B兩條多肽鏈

的胰島素。

（3）利用奶牛設(shè)計(jì)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素時(shí),為使人胰島素基因在奶牛乳腺中特異表達(dá),構(gòu)建

重組DNA分子時(shí)應(yīng)將目的基因與的啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起，

并選用為受體細(xì)胞。

（4）重組人胰島素分子容易發(fā)生聚合而影響作用效果,可將胰島素分子的氨基酸序列及結(jié)構(gòu)進(jìn)行局

部調(diào)整,形成胰島素類似物加以避免。請(qǐng)根據(jù)上述設(shè)想,補(bǔ)充完善其基本研發(fā)流程:預(yù)期蛋白質(zhì)功能

一設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)一推測(cè)氨基酸序列一

一構(gòu)建重組DNA分子,轉(zhuǎn)基因獲得胰島素類似物。

罵⑴6al、戶s4啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制起點(diǎn)（2）cDNA蛋白（3）奶牛乳腺蛋白基因受

精卵（4）找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核甘酸序列（基因）

迦⑴外源DNA分子中含有限制酶痂I、Pst\、Alu\的識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，其中限制酶/加

I的切割位點(diǎn)位于目的基因中，因此不能用該酶進(jìn)行切割;若只用尸stI切割會(huì)導(dǎo)致目的基因和載體

自身環(huán)化和反向連接，因此構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用限制酶物al、心力1處理目的基因和載體。重

組DNA分子中含有目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制起點(diǎn)等。（2）將真核基因?qū)朐?/p>

生物時(shí),一般從cDNA文庫(kù)中獲取目的基因。重組大腸桿菌合成的人胰島素原沒(méi)有活性,需用蛋白酶

將其加工成含a、B兩條多肽鏈的胰島素。（3）利用奶牛設(shè)計(jì)乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)人胰島素時(shí)，為

使人胰島素基因在奶牛乳腺中特異表達(dá)，構(gòu)建重組DNA分子時(shí)應(yīng)將目的基因與奶牛乳腺蛋白基因的

啟動(dòng)子等調(diào)控組件重組在一起,并選用受精卵為受體細(xì)胞。（4）題述設(shè)想需要采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)，

因此基本研發(fā)流程為:預(yù)期蛋白質(zhì)功能一設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)一推測(cè)氨基酸序列一找到相對(duì)

應(yīng)的脫氧核甘酸序列（基因）一構(gòu)建重組DNA分子,轉(zhuǎn)基因獲得胰島素類似物。

30.（10分）如果已知一小段DNA的序列,可采用PCR的方法,簡(jiǎn)捷地分析出已知序列兩側(cè)的序歹U,具

體流程如下圖所示（以A。RI酶切為例）：

染色體DNA

I酶切［.（就郭總官:）

混合的DNA片段

」未知序列|已知序列|未知序列、片段F

II連接|DNA連接酶

已知序列、

（（PCR弓I物））環(huán)狀DNA