(高清版)GBT 41710-2022 化妝品中禁用物質(zhì)林可霉素和克林霉素的測定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

化妝品中禁用物質(zhì)林可霉素和克林霉素的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法2022-10-12發(fā)布2023-05-01實施國家標準化管理委員會I本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由中國輕工業(yè)聯(lián)合會提出。本文件由全國香料香精化妝品標準化技術(shù)委員會(SAC/TC257)歸口。本文件起草單位：江蘇省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院、蘇州綠葉日用品有限公司、上海相宜本草化妝品股份有限公司、揚州完美日用品有限公司、蘇州世譜檢測技術(shù)有限公司、歐詩漫生物股份有限公司、蘇州質(zhì)量檢測科學研究院、廣州質(zhì)量監(jiān)督檢測研究院、無限極(中國)有限公司、上海香料研究所、河北省食品檢驗研究院、江蘇省食品藥品監(jiān)督檢驗研究院。ⅡGB/T41710—2022本文件的被測物質(zhì)是我國《化妝品安全技術(shù)規(guī)范(2015年版)》規(guī)定的禁用原料。禁用原料是指不得作為化妝品原料使用的物質(zhì)?！痘瘖y品安全技術(shù)規(guī)范(2015年版)》規(guī)定：若技術(shù)上無法避免禁用物質(zhì)作為雜質(zhì)帶入化妝品時，國家有限量規(guī)定的應符合其規(guī)定；未規(guī)定限量的，應進行安全性風險評估，確保在正常、合理及可預見的使用條件下不得對人體健康產(chǎn)生危害。目前我國尚未規(guī)定這些物質(zhì)的限量值，本文件的制定，僅對化妝品中測定這些物質(zhì)提供檢測方法。1化妝品中禁用物質(zhì)林可霉素和克林霉素的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法警示——使用本文件的人員應有正規(guī)實驗室工作的實踐經(jīng)驗。本文件并未指出所有可能的安全問題。使用者有責任采取適當?shù)陌踩徒】荡胧?，并保證符合國家有關(guān)規(guī)定的條件。本文件描述了化妝品中林可霉素和克林霉素的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定方法的原理、試劑和材料、本文件適用于水劑類、非蠟基膏霜類、乳液類化妝品中林可霉素和克林霉素的測定。本文件中林可霉素和克林霉素的方法檢出限和定量限：檢出限均為0.1mg/kg,定量限均為0.3mg/kg。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。4原理試樣用酸化乙腈水溶液提取，提取液經(jīng)正己烷凈化、離心、過濾后，用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定，外標法定量。5試劑和材料除非另有規(guī)定，所用試劑均為色譜純。5.3正已烷。5.50.1%甲酸溶液：準確量取1mL甲酸(5.4)至1000mL容量瓶中，用水稀釋并定容至刻度。5.60.1%甲酸乙腈溶液：準確量取1mL甲酸(5.4)至1000mL容量瓶中，用乙腈(5.2)稀釋并定容至刻度。5.750%乙腈溶液(含1%甲酸):準確量取250mL乙腈(5.2)至500mL容量瓶中，加入5.0mL甲酸2(5.4),用水稀釋并定容至刻度。5.8乙腈飽和的正己烷：分別量取20mL乙腈(5.2)和50mL正己烷(5.3)至100mL具塞錐形瓶5.9標準物質(zhì)：林可霉素和克林霉素標準物質(zhì)的英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量及化學結(jié)構(gòu)式見附錄A中表A.1,各標準物質(zhì)純度均不小于98%。5.10混合標準中間溶液：分別準確稱取適量標準物質(zhì)(5.9)(精確至0.1mg),用乙腈(5.2)配制成質(zhì)量濃度為1000μg/mL的單標標準儲備液(于4℃避光保存，可保存3個月)。準確移取各單標標準儲備液0.1mL,置于10mL棕色容量瓶中，用乙腈(5.2)定容，制得混合標準中間溶液(各為10.0μg/mL,臨用前現(xiàn)配)。6.1液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀：配有電噴霧電離源和三重四極桿質(zhì)量分析器。6.2分析天平：精度0.001g和0.0001g。6.3渦旋混合器。6.4超聲波清洗儀：工作頻率不低于40kHz。6.5離心機：最高轉(zhuǎn)速不低于4000r/min。6.6濾膜：孔徑為0.22μm的聚四氟乙烯濾膜。7試驗步驟7.1試樣處理稱取0.5g(精確至0.001g)試樣，置于25mL具塞比色管中，準確加入8mL50%乙腈溶液(含1%甲酸)(5.7),具塞后于渦旋混合器上振蕩混勻后，超聲提取15min,冷卻至室溫，用50%乙腈溶液(含1%甲酸)(5.7)定容至10.0mL,然后加入5mL乙腈飽和的正己烷(5.8),渦旋振蕩1min,然后4000r/min離心2min,下層清液經(jīng)濾膜過濾后供液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀測定。平行做兩份試驗。7.2.1液相色譜參考條件液相色譜參考條件如下：b)流動相：0.1%甲酸乙腈溶液(5.6)和0.1%甲酸溶液(5.5),梯度洗脫條件見表1;表1液相色譜梯度洗脫條件時間/min0.1%甲酸乙腈溶液/%0.1%甲酸溶液/%3表1液相色譜梯度洗脫條件(續(xù))時間/min0.1%甲酸乙腈溶液/%0.1%甲酸溶液/%7.2.2質(zhì)譜參考條件質(zhì)譜參考條件如下：a)離子源：電噴霧離子源(ESI)。b)掃描方式：正離子掃描。c)噴霧電壓：5500V。h)檢測方式：多反應監(jiān)測(MRM)。j)化合物母離子、子離子、保留時間及碰撞電壓見表2。表2林可霉素和克林霉素的質(zhì)譜參數(shù)化合物保留時間/min母離子m/z子離子m/z碰撞電壓/V林可霉素克林霉素“定量離子。7.2.3標準工作曲線繪制腈(5.2)稀釋至10mL,得到質(zhì)量濃度分別為15.0μg/L、30.0μg/L、50.0μg/L、100μg/L、200μg/L和300μg/L的系列混合標準工作溶液(現(xiàn)用現(xiàn)配)。將混合標準工作溶液按液相色譜和質(zhì)譜參考條件(7.2.1和7.2.2)進行測定，以目標物定量離子色譜峰的峰面積為縱坐標，其對應的溶液質(zhì)量濃度為橫坐標作圖，繪制標準工作曲線。林可霉素和克林霉素標準物質(zhì)溶液的多反應監(jiān)測色譜圖見附錄B中圖B.1。按液相色譜和質(zhì)譜參考條件(7.2.1和7.2.2)測定試樣溶液(7.1)。如果試樣中待測物質(zhì)的色譜峰保留時間與標準溶液的一致，在扣除背景后的試樣質(zhì)譜圖中所選擇的離子均出現(xiàn)，而且選擇離子的相對豐度與標準物質(zhì)的進行比較，最大允許偏差不超過表3規(guī)定的范圍，可判定為試樣中含有對應的待測物。4記錄目標化合物定量離子色譜峰的峰面積，以外標法定量。試樣溶液中被測物的響應值均應在標準曲線的線性范圍之內(nèi)，超出線性范圍的試樣溶液可用50%乙腈溶液(含1%甲酸)(5.7)稀釋后進行測定。表3定性確證時相對離子豐度的最大允許偏差相對離子豐度K/%K>5050≥K>2020≥K>10K≤10最大允許偏差/%土20士507.3空白試驗除不稱取試樣外，均按7.1～7.2步驟進行測定。8試驗數(shù)據(jù)處理試樣中被測組分含量按式(1)計算。 (1)X;——試樣中被測組分的含量，單位為毫克每千克(mg/kg);c;——從標準曲線得到的試樣溶液中被測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每升(μg/L)c?——從標準曲線得到的空白樣品溶液中被測組分的質(zhì)量濃度，單位為微克每升(μg/L);V—-50%乙腈溶液(含1%甲酸)定容體積，單位為毫升(mL);k——稀釋倍數(shù)。結(jié)果以兩次平行測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。9回收率在添加濃度為0.3mg/kg～3.0mg/kg范圍內(nèi)，回收率在80%～110%之間。10精密度在重復性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值不應超過算術(shù)平均值的10%。5(資料性)林可霉素和克林霉素標準物質(zhì)的信息林可霉素和克林霉素的英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量及化學結(jié)構(gòu)式見表A.1。表A.1林可霉素和克林霉素標準物質(zhì)的信息序號中文名稱英文名稱CAS號分子式相對分子質(zhì)量化學結(jié)構(gòu)式1林可霉素154-21-22克林霉素18323-44-9C?8H??CIN?O?S6GB/T(資料性)林可霉素和克林霉素標準物質(zhì)溶液的多反應監(jiān)測色譜圖林可霉素和克林霉素標準物質(zhì)溶液的多反應監(jiān)測色譜圖見圖B.1。林可容素0.02.0×105克林毒素5.00×102.7×10?4.610.00.51.01.52.02.53.03.54.04