G -B- 17378.7-2007 海洋監(jiān)測規(guī)范 第7部分 近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測（正式版）

A45中華人民共和國國家標準海洋監(jiān)測規(guī)范第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測Thespecificationformarinemonitoring—part7：EcologicalsurveyforoffshorepollutionandbiologicalmonitoringⅠ3室內(nèi)標本處理163室內(nèi)標本處理16前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4一般規(guī)定 5浮游生物生態(tài)調(diào)查 .51調(diào)查內(nèi)容和方法 .. ..53樣品整理與分析 .6大型底棲生物生態(tài)調(diào)查 .61調(diào)查內(nèi)容和方法 .. ..64資料整理與保存 .7潮間帶生物生態(tài)調(diào)查 .71調(diào)查內(nèi)容和方法 . 73室內(nèi)標本整理鑒定和保存 . .8葉綠素-a的測定 8.1熒光分光光度法 .82分光光度法 .9糞大腸菌群檢測 10細菌總數(shù)測定 . .10.2熒光顯微鏡直接計數(shù)法 11生物毒性試驗 12魚類回避反應(yīng)實驗 13濾食率測定 赤潮毒素—麻痹性貝毒的檢測 15海水增養(yǎng)殖區(qū)監(jiān)測 附錄A（規(guī)范性附錄）記錄表 附錄B（資料性附錄）污染生態(tài)調(diào)查資料常用評述方法 附錄D（規(guī)范性附錄）弧菌數(shù)附錄C（資料性附錄）受試動物的親體產(chǎn)卵和幼蟲階段培養(yǎng)條件 附錄D（規(guī)范性附錄）弧菌數(shù)量檢測—平板計數(shù)法 Ⅱ附錄E（規(guī)范性附錄）沉積物糞大腸菌群數(shù)—發(fā)酵法 附錄F（規(guī)范性附錄）沉積物異養(yǎng)細菌總數(shù)—平板計數(shù)法 附錄G（資料性附錄）異養(yǎng)細菌總數(shù)評價等級 附錄H（規(guī)范性附錄）水質(zhì)、沉積物質(zhì)量評價資料匯總 附錄I（規(guī)范性附錄）海水增養(yǎng)殖區(qū)監(jiān)測報告內(nèi)容與格式 表1淺水Ⅰ型浮游生物網(wǎng)規(guī)格 表2淺水Ⅱ型浮游生物網(wǎng)規(guī)格 表3淺水Ⅲ型浮游生物網(wǎng)規(guī)格 表4內(nèi)標簽式樣 表5采泥標簽 表6拖網(wǎng)標簽 表7定量標簽 表8定性標簽 表9大腸菌群檢數(shù)表 表10百分率與概率單位換算表 表11小白鼠死亡時間與鼠單位關(guān)系表 表12水質(zhì)監(jiān)測項目分析方法 表13沉積物監(jiān)測項目分析方法 表14有機污染評價分級表 表A.1浮游生物采集記錄表 表A.2浮游動物垂直分層拖網(wǎng)采集記錄表 表A.3浮游生物標本登記表 表A.4浮游植物細胞數(shù)量計數(shù)記錄表 表A.5浮游動物生物量測定表 表A.6型浮游動物個體計數(shù)記錄表 表A.7夜光藻數(shù)量計數(shù)記錄表 表A.8浮游植物數(shù)量統(tǒng)計表 表A.9浮游動物數(shù)量統(tǒng)計表 表A.10大型底棲生物海上采集記錄表 表A.11主要種的各種生物學參數(shù) 表A.12大型底棲生物定量采集記錄表 表A.13大型底棲生物定性采集記錄表 表A.14大型底棲生物密度統(tǒng)計表 表A.15大型底棲生物生物量統(tǒng)計表 表A.16大型底棲生物采集種類分布表 表A.17大型底棲生物定性采集種類分布表 表A.18潮間帶生物野外采集記錄表 表A.19潮間帶生物定量采集記錄表 表A.20潮間帶生物定性采集記錄表 表A.21潮間帶主要生物類群種類組成統(tǒng)計表 表A.22潮間帶生物定量種類分布表 表A.23葉綠素a熒光分光光度法測定記錄表 Ⅲ表A.24葉綠素a、b、c分光光度法測定記錄表 表A.25糞大腸菌群記錄表（發(fā)酵法） 表A.26糞大腸菌群記錄表（濾膜法） 表A.27細菌平板計數(shù)記錄表 表A.28熒光顯微鏡直接計數(shù)海洋細菌總數(shù)記錄表 表A.29毒性試驗記錄表 表A.30毒性試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計換算登記表 表A.31魚類回避反應(yīng)實驗記錄表 表A.32濾食實驗記錄表 表A.33污染水樣檢測記錄表 表A.34貝類赤潮毒素的毒性檢測記錄表 表A.35海水增養(yǎng)殖區(qū)水質(zhì)監(jiān)測結(jié)果報表 表A.36海水增養(yǎng)殖區(qū)沉積物監(jiān)測結(jié)果報表 表A.37浮游植物細胞數(shù)量計數(shù)記錄表 表C.1受試動物的親體產(chǎn)卵及幼蟲培養(yǎng)條件 表G.1異養(yǎng)細菌總數(shù)評價等級表 表H.1水質(zhì)各項污染因子的污染指數(shù)報表 表H.2沉積物各項污染因子的污染指數(shù) 表H.3水質(zhì)營養(yǎng)指數(shù) 表H.4水質(zhì)有機污染評價指數(shù) 表H.5水質(zhì)營養(yǎng)狀態(tài)質(zhì)量指數(shù) Ⅴ本部分的全部技術(shù)內(nèi)容為強制性?！?部分：數(shù)據(jù)處理與分析質(zhì)量控制；—第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測。態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測》。本部分與GB17378.7—1998相比主要變化如下：—增加了記錄表（見附錄A);附錄B);—將受“試動物的親體產(chǎn)卵和幼蟲階段的培養(yǎng)條件”調(diào)整為資料性附錄(1998年版的附錄B;本版的附錄C);—增加了“弧菌數(shù)量檢測—平板計數(shù)法”（見附錄D);—增加了“沉積物糞大腸菌群數(shù)—發(fā)酵法”（見附錄E);—增加了“沉積物異養(yǎng)細菌總數(shù)—平板計數(shù)法”（見附錄F);—增加了“異養(yǎng)細菌總數(shù)評價等級”（見附錄G);—增加了“海水增養(yǎng)殖區(qū)監(jiān)測報告內(nèi)容與格式”（見附錄I)。為資料性附錄。本部分由國家海洋局提出。本部分由全國海洋標準化技術(shù)委員會(SAC/TC283)歸口。本部分起草單位：國家海洋環(huán)境監(jiān)測中心。本部分所代替標準的歷次版本發(fā)布情況為：1海洋監(jiān)測規(guī)范第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測GB17378的本部分規(guī)定了近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測的樣品采集、實驗、分析、資料整理等方法的技術(shù)要求。本部分適用于近海環(huán)境污染的生物學調(diào)查、監(jiān)測和評價。2規(guī)范性引用文件件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本部分，然而，鼓勵根據(jù)本部分達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件部分。GB3097—1997海水水質(zhì)標準GB/T12763.4海洋調(diào)查規(guī)范GB17378.2海洋監(jiān)測規(guī)范第2部分：數(shù)據(jù)處理與分析質(zhì)量控制GB17378.5海洋監(jiān)測規(guī)范GB17378.6海洋監(jiān)測規(guī)范GB18668—2002海洋沉積物質(zhì)量3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于GB17378的本部分。浮游生物plankton體型細小懸浮于水層中，無或僅有微弱游泳能力隨水流移動的水生生物。大型底棲生物macrobenhthos底棲生物的一類，不能通過0.5mm孔徑網(wǎng)篩的底棲生物。大型浮游生物macroplankton個體在(5~10)mm之間的浮游生物。水母、大型橈足類、磷蝦類、櫻蝦類、被囊類、毛顎動物、翼足類軟體動物和異足類軟體動物等的統(tǒng)稱。指標生物indexorganism對某種污染物質(zhì)有很強的忍受能力或?qū)δ撤N污染物敏感的生物種類。2毒性試驗toxicitytest將生物體置于試驗條件下，施加污染物的影響，然后觀察、測定生物異?；蛩劳鲂?yīng)，包括急性、亞急性、慢性毒性試驗。試液testsolution用作毒性試驗的毒物溶液或排污口水樣的不同濃度的稀釋液。稀釋度dilution受試生物testorganism用作毒性試驗的生物。受試驗時間testingtime受試生物直接接觸試液的起止時間范圍。半數(shù)致死濃度halflethalconcentration在一定觀察期內(nèi)，造成50%的受試生物死亡的毒物濃度。半數(shù)效應(yīng)濃度halfeffectconcentration在一定觀察期內(nèi)，導致50%的受試生物出現(xiàn)某種異常反應(yīng)（如回避、攝食率和呼吸率改變、平衡喪失等）的毒物濃度。4一般規(guī)定4.1近岸污染生態(tài)調(diào)查近岸污染生態(tài)調(diào)查內(nèi)容如下：—浮游生物生態(tài)調(diào)查；—大型底棲生物生態(tài)調(diào)查；—潮間帶生物生態(tài)調(diào)查。生物監(jiān)測內(nèi)容如下：—葉綠素a;—糞大腸菌群；—細菌總數(shù)；—生物毒性試驗；—魚類回避反應(yīng)實驗；—濾食率測定；—赤潮毒素—麻痹性貝毒的檢測。4.3調(diào)查和監(jiān)測項目的選擇近岸污染生態(tài)調(diào)查和監(jiān)測項目選擇應(yīng)遵循以下原則：—在調(diào)查和監(jiān)測中，應(yīng)依據(jù)目的、任務(wù)和性質(zhì)考慮生物調(diào)查和監(jiān)測的內(nèi)容。通常，在基線（背景）調(diào)查和環(huán)境質(zhì)量綜合評價中，浮游生物生態(tài)調(diào)查、大型底棲生物生態(tài)調(diào)查、潮間帶生物生態(tài)調(diào)3查、葉綠素a、糞大腸菌群和細菌總數(shù)等是應(yīng)測項目；—在危害調(diào)查和排污口、傾廢區(qū)、海上石油開發(fā)區(qū)等的監(jiān)視監(jiān)測中，應(yīng)選測生物毒性試驗、魚類回避反應(yīng)實驗和濾食率測定等項目；—赤潮毒素（麻痹性貝毒）的檢測，應(yīng)在赤潮發(fā)生區(qū)和赤潮多發(fā)季節(jié)定期監(jiān)測，或發(fā)現(xiàn)可疑的麻痹性貝毒(PSP)中毒事件時應(yīng)用；—運用污染生態(tài)調(diào)查資料常用評述方法（參見附錄B)時應(yīng)慎重，應(yīng)比較幾種方法所得的結(jié)果，并與傳統(tǒng)的生態(tài)描述方法結(jié)合，進行綜合分析；—幾種受試動物的親體產(chǎn)卵和幼蟲階段培養(yǎng)條件（參見附錄C),因生物地區(qū)性很強，各地用其進行毒性試驗時，應(yīng)進行必要的試養(yǎng)；—在生物監(jiān)測中，對生物體內(nèi)污染物質(zhì)累積量的測定，也是主要內(nèi)容之一。其分析測定方法見5浮游生物生態(tài)調(diào)查5.1調(diào)查內(nèi)容和方法調(diào)查浮游植物的種類組成和數(shù)量分布；浮游動物的生物量、種類組成和數(shù)量分布。根據(jù)污染調(diào)查的目的、類型及污染源的性質(zhì)，確定調(diào)查和監(jiān)測項目。赤潮的環(huán)境調(diào)查和監(jiān)測，特別掌握調(diào)查海域浮游生物的種類組成、數(shù)量分布、季節(jié)變化等生態(tài)學現(xiàn)狀，為調(diào)查海域的污染生態(tài)監(jiān)測和評價，提供背景資料。調(diào)查站位的布設(shè)應(yīng)與環(huán)境監(jiān)測設(shè)站相一致。若站位較密，工作量太大，浮游生物可考慮間隔站取樣。調(diào)查時間每月一次，根據(jù)需要于大潮期和小潮期間進行。掌握污染海域，尤其是赤潮頻發(fā)區(qū)的浮游生物（特別是赤潮生物種）的動態(tài)及其與環(huán)境的關(guān)系。通過長期資料積累，為環(huán)境和赤潮的預(yù)測、預(yù)報做好必要的準備工作。此類調(diào)查，站位布設(shè)不宜過多，可在現(xiàn)狀調(diào)查的基礎(chǔ)上，選擇若干“熱點”設(shè)站定期取樣分析。一旦發(fā)現(xiàn)異常，應(yīng)密切注意其動向，適當增加調(diào)查次數(shù)，并按現(xiàn)狀調(diào)查的站位，進行一次較全面的調(diào)查。每月大潮期間進行一次，在赤潮常發(fā)期(4月~10月5d調(diào)查監(jiān)測一次，并設(shè)置對照測站。應(yīng)急跟蹤調(diào)查是在發(fā)生突發(fā)性污染事故（如溢油）或發(fā)生赤潮時所采取的應(yīng)急性行動。調(diào)查、監(jiān)測應(yīng)盡快趕赴現(xiàn)場取樣，并持續(xù)到直觀跡象消失。每天或隔天采樣一次。站位布設(shè)應(yīng)根據(jù)污染或赤潮發(fā)生范圍，按梯度變化酌情而定。同時應(yīng)在事故范圍之外，選取1個~2個站作為對照。浮游植物調(diào)查，一般只需采水樣。測站水深在15m以內(nèi)的淺海，采表、底兩層；水深大于15m的有必要進行晝夜連續(xù)觀測時，可每間隔2h或3h按上述層次采樣一次。通常用于浮游動物采樣。浮游植物拖網(wǎng)采樣，可考慮在需要詳細分析種類組成時采用。一般使用4規(guī)定的網(wǎng)具自海底至水面作垂直拖網(wǎng)采樣。若需了解其垂直分布，可按5m~0m、10m~5m、底至10m等層次作垂直分層拖網(wǎng)。若需進行晝夜連續(xù)觀測，應(yīng)與浮游植物采水樣的時間間隔一致。以下為浮游植物樣品常用采水器：—顛倒采水器；—卡蓋式采水器。使用以下類型的網(wǎng)具：—淺水Ⅰ型浮游生物網(wǎng)：用于采集大型浮游動物及魚卵、仔稚魚等。規(guī)格見表1;—淺水Ⅱ型浮游生物網(wǎng)：用于采集中、小型浮游動物。規(guī)格見表2;—淺水Ⅲ型浮游生物網(wǎng)：用于采集浮游植物樣品，供分析種類組成時采用。規(guī)格見表3。表1淺水Ⅰ型浮游生物網(wǎng)規(guī)格部位內(nèi)徑50cm,網(wǎng)口面積0.20m2,網(wǎng)圈用直徑10mm的圓鋼條過濾部1長5cm,細帆布2網(wǎng)底部3直徑9cm,長5cm,細帆布全長表2淺水Ⅱ型浮游生物網(wǎng)規(guī)格部位頭錐部1長35cm,細帆布，中圈直徑50cm,網(wǎng)圈用直徑10mm的圓鋼條過濾部2網(wǎng)底部3直徑9cm,長5cm,細帆布全長表3淺水Ⅲ型浮游生物網(wǎng)規(guī)格部位內(nèi)徑37cm,網(wǎng)口面積0.1m2,網(wǎng)圈用直徑10mm的圓鋼條過濾部1長5cm,細帆布2長130cm,JF62或JP80篩絹網(wǎng)底部3直徑9cm,長5cm,細帆布全長一致。分層采集時控制浮游生物網(wǎng)網(wǎng)口關(guān)閉的裝置。5測量浮游生物網(wǎng)濾水量裝置，使用時安裝于網(wǎng)口半徑的中點，通過水流驅(qū)動其葉輪轉(zhuǎn)動，記錄器記錄轉(zhuǎn)數(shù)，經(jīng)必要的換算，可求出流經(jīng)網(wǎng)具的實際水量。未經(jīng)檢定的流量計，使用前應(yīng)檢定或在平靜海區(qū)經(jīng)現(xiàn)場標定后方可使用。標定方法是將流量計按實際使用時的位置，安裝在不帶網(wǎng)衣的網(wǎng)圈上，并按實際采樣時的拖網(wǎng)速度從一定深度(10m或30m)垂直拖至表層，記錄其轉(zhuǎn)數(shù)。如此反復(fù)5次~10次，取得平均值，再計算每轉(zhuǎn)的流量，則為流量計標定值。此值至少需保留三位有效數(shù)字。以下設(shè)備為船上常備設(shè)備：—絞車、吊桿及鋼絲繩：絞車應(yīng)配有變速(0.3m/s~1.5m/s)排纜裝置和計數(shù)器的電動絞車。若缺乏該設(shè)備，可用建筑用的升降機或手搖絞車代替。鋼線繩直徑一般為4.8mm左右。吊桿安裝需高出船舷3m,跨舷距約1m;—照明設(shè)備。裝箱上船并放于適當位置，避免撞擊和丟失；5.2.2.1.2認真檢查船上設(shè)備是否運轉(zhuǎn)正常，若遇故障，應(yīng)及時排除或更換；浮游植物用碘液固定。其配制方法是將碘片(I2)溶于5%的碘化鉀(KI)溶液中，使成飽和溶液。需要量按每升水樣加該碘液6mL~8mL準備。浮游動物用5%甲醛固定。不必事先配制，只須按標本瓶容量的5%左右加入甲醛溶液即可。5.2.2.2.1采集人員應(yīng)提前到達工作崗位，再次檢查網(wǎng)具及其附件、記錄表及其他有關(guān)配備是否完善，發(fā)現(xiàn)問題及時處理；5.2.2.2.2船只到站時，應(yīng)先核對站位，待船停穩(wěn)后，測其實際水深，確定采樣層次及鋼絲繩應(yīng)放長度。浮游植物水樣采集應(yīng)按以下要求進行：—用顛倒采水器或卡蓋式采水器，其使用方法及操作步驟與水質(zhì)項目采樣相同；—采樣層次視調(diào)查需要、計劃規(guī)定和海區(qū)各站實際水深而定；—水樣采集務(wù)必與葉綠素a和水質(zhì)項目的采水同步進行；—所需水樣量一般為500mL;—采樣后，應(yīng)及時按每升水樣加6mL~8mL碘液固定。分別用淺水Ⅰ、Ⅱ型浮游生物網(wǎng)自底至表垂直拖曳采集浮游動物。若需網(wǎng)采浮游植物，則用淺水Ⅲ型網(wǎng)。其操作步驟如下：—每次下網(wǎng)前應(yīng)檢查網(wǎng)具有否破損，發(fā)現(xiàn)破損應(yīng)及時修補或更換網(wǎng)衣；檢查網(wǎng)底管和流量計是否處于正常狀態(tài)，并把流量計指針撥至指零；放網(wǎng)入水，當網(wǎng)口貼近水面時，需調(diào)整計數(shù)器指針于零的位置；網(wǎng)口入水后，下網(wǎng)速度一般不能超過1m/s,以鋼絲繩保持緊直為準；當網(wǎng)具接近海底時，絞車應(yīng)減速，當沉錘著底，鋼絲繩出現(xiàn)松弛時，應(yīng)立即停車，記下繩長；—網(wǎng)具到達海底后可立即起網(wǎng)，速度保持在0.5m/s左右；網(wǎng)口未露出水面前不可停車；網(wǎng)口離6開水面時應(yīng)減速并及時停車，謹防網(wǎng)具碰刮船底或卡環(huán)碰撞滑輪，使鋼絲繩絞斷，網(wǎng)具失落；—把網(wǎng)升至適當高度，用沖水設(shè)備自上而下反復(fù)沖洗網(wǎng)衣外表面（切勿使沖洗的海水進入網(wǎng)口使粘附于網(wǎng)上的標本集中于網(wǎng)底管內(nèi)；將網(wǎng)收入甲板，開啟網(wǎng)底管活門，把標本裝入標本瓶，再關(guān)閉網(wǎng)底管活門，用洗耳球吸水沖洗篩絹套，如此反復(fù)多次，直至殘留標本全部收入標本瓶中；—按樣品體積的5%,加入甲醛溶液進行固定。分層采集，應(yīng)在網(wǎng)具上裝置閉鎖器，按規(guī)定層次逐一采樣。操作步驟為：—下網(wǎng)前應(yīng)使網(wǎng)具、閉鎖器、鋼絲繩、攔腰繩等處于正常采樣狀態(tài)，下網(wǎng)時按垂直拖網(wǎng)方法；—網(wǎng)具降至預(yù)定采樣水層下界時應(yīng)立即起網(wǎng)，速度如垂直拖網(wǎng)；當網(wǎng)將達采樣水層上界時，應(yīng)減慢速度（避免停車，以防樣品的外溢提前打下使錘（提前量每10m水深約1m);當鋼絲繩出現(xiàn)瞬間松弛或振動時，說明網(wǎng)已關(guān)閉（記錄此時的繩長可適當加快起網(wǎng)速度直至網(wǎng)具露出水面；之后，將閉鎖狀態(tài)的網(wǎng)具恢復(fù)成采樣狀態(tài)，并按垂直拖網(wǎng)法沖網(wǎng)和收集、固定標本；—各項樣品采樣完畢，應(yīng)及時將采樣記錄詳細記入表A.1或表A.2。采樣后應(yīng)進行以下工作：—所有樣品應(yīng)裝入牢固的標本箱內(nèi)搬運；—用過的網(wǎng)具、閉鎖器和流量計等需用淡水沖洗，晾干后收藏；采樣時應(yīng)注意以下事項：—遇傾角超過45°時，應(yīng)加重沉錘重新采樣；—遇網(wǎng)口刮船底或海底，應(yīng)重新采樣。5.3樣品整理與分析根據(jù)采樣記錄表，認真核對采取的全部樣品，若發(fā)現(xiàn)不符應(yīng)及時查找原因，不得任意更改原始記錄。依據(jù)海上采樣記錄，按序?qū)Ω黝悩悠愤M行總編號，并記入表A.3中。總編號力求簡明，由能表示樣品的采樣海區(qū)、采集方式、采集網(wǎng)具、采集年份及標本序號的字母或代號表示，其規(guī)定如下：—采集海區(qū)：用調(diào)查海區(qū)漢語拼音第一個字母表示；—Ⅰ表示淺水Ⅰ型浮游生物網(wǎng)垂直拖網(wǎng)樣品；—Ⅱ表示淺水Ⅱ型浮游生物網(wǎng)垂直拖網(wǎng)樣品；—Ⅲ表示淺水Ⅲ型浮游生物網(wǎng)垂直拖網(wǎng)樣品；—L表示晝夜連續(xù)觀測樣品；—ch表示垂直分層采集樣品；—S表示浮游植物采水樣品；—年份用阿拉伯數(shù)字表示。按以下要求對采集的樣品貼標簽：—外標簽：按總編號順序編寫，貼于各號標本瓶外，并涂臘或樹脂保護；7表4內(nèi)標簽式樣年月日站號海上編號5.3.2浮游植物樣品的處理與分析浮游植物水樣的種類鑒定與計數(shù)，一般需按采樣層次逐一分析。若時間不允許，在不影響計劃要求前提下，可采用混合樣計數(shù)，即各層取等量(50mL或100mL)混合，再按下述方法處理和分析。使用的主要儀器和設(shè)備如下：—倒置顯微鏡；100mL等不同容量。若無上述沉降器，可自己制作簡易沉降器，只需取內(nèi)徑為25mm（外徑10mL),可制作其他規(guī)格的簡易沉降器，但使用前需對其容積和底面積進行準確標定，并逐一編號；—蓋玻片； —計數(shù)器。每個水樣取三個分樣計數(shù)，取平均值。計數(shù)操作過程如下：—取三個等容量的沉降器，分別注滿經(jīng)搖勻的水樣，蓋上蓋玻片使不留氣泡，靜置24h以上。分樣體積大小需視水樣渾濁度和浮游植物的豐度而定；可一次性準備幾個待計數(shù)的樣品；—輕移上述沉降器于倒置顯微鏡下鑒定、計數(shù)。浮游植物數(shù)量較少時，應(yīng)計全數(shù)；—若數(shù)量較大或計數(shù)微型藻類時，可于高倍鏡下計算一定面積上的細胞數(shù)，再依所計面積，換算為整個底面積上的總細胞數(shù)；儀器和設(shè)備如下：—顯微鏡；—計數(shù)框：取0.25mm厚的蓋玻片，切割成細條狀（寬約2.5mm),粘貼于普通載玻片上，務(wù)使框—取樣管；可直接采用0.25mL的微型注射針筒，或取2mL分析用的移液管，截去上端，磨平，并裝上小橡皮球即成；每份水樣計數(shù)三個分樣，取平均值。按以下步驟操作：—將待計數(shù)水樣搖勻，準確吸取0.25mL置于計數(shù)框內(nèi)，蓋上蓋玻片使不留氣泡；—移計數(shù)框于顯微鏡下鑒定計數(shù)。通常應(yīng)按序計全數(shù)，若數(shù)量大，可考慮間行計數(shù)（若水樣為未加固定劑的新鮮海水，計數(shù)前應(yīng)向框內(nèi)噴射少許醋酸蒸汽8—本法適于赤潮發(fā)生期間或浮游植物細胞數(shù)量達每升105個以上時的計數(shù)；—將計數(shù)結(jié)果記入表A.4中。按以下步驟操作：—將靜置24h以上的水樣，用包扎有JF62或JP80號篩絹的吸管，輕輕吸去上清液，使水樣濃縮至10mL。濃縮時切勿攪動沉淀樣品，否則需重新靜置24h后再濃縮。通常一次不可能濃縮成10mL,需把濃縮到一定體積的水樣移至50mL左右的指形管中，經(jīng)24h以上靜置后再濃縮；—將濃縮后的樣品全部移入已經(jīng)標記10mL容積的指形管中，靜置24h后，用吸管輕吸多余的清液，使液面凹處恰在標記上；—計數(shù)取樣時，水樣務(wù)必充分搖勻，用取樣管迅速吸取0.25mL于計數(shù)框內(nèi)，加蓋蓋玻片使不留氣泡。之后的計數(shù)方法與直接計數(shù)法相同。計數(shù)結(jié)果記入表A.4中；—網(wǎng)采樣品，可適當濃縮（或稀釋按本法計數(shù)。計數(shù)過程中應(yīng)注意以下事項：—計數(shù)時一般以種為單位分別計數(shù)。優(yōu)勢種、常見種、赤潮生物種應(yīng)力求鑒定到種；—凡失去色素或不足一半的殘體，不在計數(shù)之列；—膠質(zhì)團大群體和浮游蘭藻類等不易計數(shù)的種類，可用數(shù)量等級符號、、表示；—對進入浮游生物中的底棲種類，均按細胞記數(shù)，并將它們作為單項列入浮游植物總量中；—填表時，應(yīng)特別注意不同計數(shù)方法的水樣量、沉降量、濃縮量（或稀釋量）、計數(shù)面積或計數(shù)量，并進行必要的換算。5.3.3浮游動物樣品的處理與分析浮游動物樣品靜置沉淀后進行必要濃縮，按序分別移入已備好內(nèi)外標簽的標本瓶中，測定其生物量及計數(shù)。儀器及設(shè)備如下：—布氏漏斗；—抽濾瓶；—吸水紙；—吸管；測定步驟如下：—篩絹標定：將上述篩絹剪成與漏斗內(nèi)徑等大，浸濕后鋪于漏斗中，用真空泵抽去篩絹上多余水分，稱取篩絹濕重并記錄于表A.5中。該標定后的篩絹可反復(fù)使用；—樣品測定：把標定過的篩絹鋪于漏斗中，開動真空泵，倒入已剔除雜質(zhì)的欲測樣品；待水分濾干后關(guān)閉真空泵；小心取出帶樣品的篩絹放在吸水紙上，吸去多余水分；將樣品（連同篩絹）置于扭力天平稱重，并將結(jié)果填于表A.6中的相應(yīng)欄目中。9儀器及設(shè)備如下：—浮游生物體積測量器；—抽濾瓶；—吸管；—鑷子。測定操作過程如下：—測量器體積標定：將一定體積的水（如50.0mL)注入測量器中，排除底蓋與篩絹之間的氣泡；旋轉(zhuǎn)測量器頂端指針使針尖恰好接觸液面，用固定螺絲固定好指針位置。打開底蓋，倒出注入的水。—樣品測定：將經(jīng)除去雜質(zhì)的樣品倒入打開底蓋的體積測量器中，用真空泵抽去樣品中的水分；然后扭緊底蓋，用滴定管（裝有50.0mL5%甲醛海水固定液）從測量器加水孔注入該固定液，排除底蓋與篩絹之間的氣泡（用小吸管吸?。┦挂好媲『门c指針針尖接觸為止。此時滴定管中剩余的固定液量即為被測樣品的體積。測定結(jié)果記錄于表A.5中。淺水Ⅰ、Ⅱ型浮游生物網(wǎng)采集的樣品分別用于大型和中、小型浮游動物（包括夜光藻）的種類鑒定和計數(shù)。儀器及設(shè)備如下：—體視顯微鏡；—普通顯微鏡；—計數(shù)器；—鑷子；—解剖針；—計數(shù)框：取直徑為8cm左右的培養(yǎng)皿，于其內(nèi)粘上若干玻璃條即可。玻璃條間距根據(jù)體視顯微鏡視野而定；0.7cm橡皮塞，做成直徑與管子內(nèi)徑相等的隔板；分別于兩隔板的圓心和兩側(cè)打二個小孔，于圓心處套入一根內(nèi)徑2.5mm的玻璃管；將隔板裝入上述管子中，使下隔板與管子下端的體積恰為10mL或5mL;另取一細銅棒（直徑約2mm)做提柄，于下端連接一塊略大于管子直徑的圓銅板，板上粘上與銅板等大的橡皮墊；將此提柄插入管內(nèi)，即構(gòu)成取樣管。取樣時，將取樣管插入已知體積的標本容器中，通過提柄的上下運動使樣品混勻，然后迅速使橡皮墊封閉管子的下端再移出取樣管，將取出的樣品全部置于浮游動物計數(shù)框即可。按以下步驟操作：—標本數(shù)量較少的應(yīng)全部計數(shù)；—若數(shù)量較大，應(yīng)先將個體大的標本（如水母、蝦類、箭蟲等）全部揀出分別計數(shù)；—其余樣品稀釋成適當體積，再用浮游動物取樣管取樣計數(shù)；—計數(shù)結(jié)果記入表A.6和表A.7中。計數(shù)時應(yīng)注意以下事項：—計數(shù)時一般以種為單位分別計數(shù)；優(yōu)勢種、常見種應(yīng)力求鑒定到種；—生物量測定時，遇有含水量多的、較大型的浮游動物（如：水母、海樽等應(yīng)在所填表格相應(yīng)的備注欄里注明，以備查用；—所有浮游動物的殘損個體，按有頭部的計數(shù)；—填表或計算時，應(yīng)注意樣品體積、取樣計數(shù)量、樣品稀釋倍數(shù)及濾水量等的換算。經(jīng)鑒定、計數(shù)后的所有樣品，需收集裝回原標本瓶中妥善保存，以備復(fù)查或進一步深入研究。長期保存樣品的標本瓶密封性能應(yīng)好，必要時可封臘保存。樣品的內(nèi)外標簽應(yīng)完整。定液。定期檢查保存的樣品，以防固定液干涸或標本霉變。5.4.1浮游植物細胞數(shù)的統(tǒng)計5.4.1.1沉降計數(shù)法和直接計數(shù)法的統(tǒng)計按式(1)計算：式中：N—每升水樣的藻類細胞數(shù)，單位為個每升（個/L);n—三個分樣的總細胞數(shù)或其平均值，單位為個；V—三個分樣的總體積或其平均值，單位為毫升(mL)。5.4.1.2濃縮計數(shù)法的統(tǒng)計按式(2)計算：式中：N—每升水樣的藻類細胞數(shù)，單位為個每升（個/L);n—取樣計數(shù)所得的細胞數(shù)，單位為個；V′—水樣濃縮的體積，單位為毫升(mL);V—采水量，單位為升(L);V″—取樣計數(shù)的體積，單位為毫升(mL)。5.4.2浮游動物生物量和個數(shù)的統(tǒng)計根據(jù)流量計的轉(zhuǎn)數(shù)（r）按式(3)計算濾水量：式中：V—濾水量，單位為立方米(m3);n—實際采樣時流量計的轉(zhuǎn)數(shù)，單位為轉(zhuǎn)(r);V0—流量計的標定值，單位為立方米每轉(zhuǎn)(m3/r);S—浮游生物網(wǎng)網(wǎng)口面積，單位為平方米(m2);D—流量計標定時的平均拖曳距離，單位為米(m);n0—流量計標定時的平均轉(zhuǎn)數(shù)，單位為轉(zhuǎn)(r)。5.4.2.2根據(jù)繩長計算濾水量：若無流量計，按式(4)計算濾水量：式中：V—濾水量，單位為立方米(m3);S—浮游生物網(wǎng)網(wǎng)口面積，單位為平方米(m2);L—采樣時放出的繩長，單位為米(m)。5.4.2.3濕重生物量和體積生物量計算濕重生物量以mg/m3表示，體積生物量以mL/m3表示，按式(5)計算：式中：B—濕重生物量，單位為毫克每立方米(mg/m3)或體積生物量，單位為毫升每立方米(mL/m3);S—樣品濕重，單位為毫克(mg)或樣品體積，單位為毫升(mL);V—濾水量，單位為立方米(m3)。浮游動物個體數(shù)以個/m3表示，按式(6)計算：式中：N—每立方米水體中的個體數(shù)，單位為個每立方米（個/m3);n—取樣計數(shù)所得的個體數(shù)，單位為個；a—取樣體積與樣品總體數(shù)之比；V—濾水量，單位為立方米(m3)。將上述各種統(tǒng)計數(shù)據(jù)分別填入表A.3~表A.7。按分類系統(tǒng)，將上述各表數(shù)據(jù)分別匯總于表A.8和表A.9中。根據(jù)表A.8和表A.9統(tǒng)計數(shù)據(jù)，按以下標準繪制浮游生物平面分布圖：5×103個/L4個/L、5×104個/L、1×105個/L5×106個/L個/L和大于107個/L。b)主要種（包括夜光藻或其他赤潮生物小于102個/L、1×102個/L、5×102個/L、1×103個/L、5×103個/L、1×104個/L、5×104個/L、1×101×107個/L和大于107個/L。根據(jù)表A.8和表A.9統(tǒng)計數(shù)據(jù)，按以下標準繪制浮游生物平面分布圖：3333。3個/m3。圖表繪制應(yīng)注意以下事項：—參與資料整理，校對人員，均應(yīng)在圖表上簽名；—所有化學調(diào)查項目的分析方法和資料整理，均按GB17378.1~GB17378.6的規(guī)定進行；—報告編寫完畢，應(yīng)及時把所有資料整理報出、歸檔。6大型底棲生物生態(tài)調(diào)查6.1調(diào)查內(nèi)容和方法生物調(diào)查內(nèi)容如下：—鑒定生物種類，測定棲息密度和生物量，分析其相對豐度和群落多樣性；—確定群落中的主要種，并盡可能測量其個體大小，年齡結(jié)構(gòu)、性別比例等。有條件的可做干濕—主要種類體內(nèi)污染物質(zhì)測定。環(huán)境調(diào)查內(nèi)容如下：—環(huán)境特點調(diào)查，包括海區(qū)的地理環(huán)境、形態(tài)和沉積物、狀況、污染源的位置等；—污染物的測定項目應(yīng)根據(jù)污染源的性質(zhì)選定，分析方法按GB17378.4和GB17378.5的規(guī)定執(zhí)行。調(diào)查之前，應(yīng)對調(diào)查水域的基本狀況有所了解，包括陸上和海上污染源的位置分布、海區(qū)的沉積物類型、海流、泥沙運動和底棲生物的基本特點等。并應(yīng)進行必要的社會調(diào)查，特別應(yīng)注意沿海工業(yè)和海上工程建設(shè)對海區(qū)環(huán)境的影響，為制定調(diào)查方案提供依據(jù)。站位的布設(shè)應(yīng)根據(jù)污染源的位置和分布，結(jié)合海區(qū)的水文、水質(zhì)、沉積物等環(huán)境資料綜合考慮。特別應(yīng)注意水深、沉積類型和底棲動物區(qū)系異同。調(diào)查站位與沉積物污染調(diào)查一致。同時還應(yīng)選擇生態(tài)類型相同的非污染點或斷面作為參照，以便進行資料對比和評價。城市工業(yè)排污、海上石油平臺及海上傾廢區(qū)等點源污染的調(diào)查，應(yīng)按點源污染的濃度梯度布設(shè)直線型或輻射型的站位，站位多少可根據(jù)實際需要酌定。一般在封閉和半封閉的海灣、河口或在復(fù)雜沉積類型的水域應(yīng)密些，在淺?；虺练e類型均勻的水域可適當疏些。作為一般性的污染普查，應(yīng)按方格式布設(shè)站位，斷面的布設(shè)主要考慮水深和鹽度梯度的變化。12月~2月）一年調(diào)查4次或根據(jù)需要適當增減調(diào)查次數(shù)。6.1.2.3.2監(jiān)測性調(diào)查：根據(jù)各地實情和需要，選擇若干固定月分和若干站點定期取樣分析。所選時間和站位應(yīng)與基線調(diào)查時的時間和站位相應(yīng)。6.1.2.3.3應(yīng)急調(diào)查：若遇突發(fā)污染事故，傾廢、赤潮等，應(yīng)跟蹤監(jiān)測，并于事故后進行若干次危害評價調(diào)查。2采泥器，每次取3次；在港灣中或無動力設(shè)備的小船上，可用速間歇開車進行拖網(wǎng)。每站拖網(wǎng)時間一般為15min；半定量取樣，拖網(wǎng)時間10min（以網(wǎng)具著底始算起至起網(wǎng)止）。深水拖網(wǎng)，可適當延長時間。以下為常用的采泥器類型：a）抓斗式采泥器：由兩個可活動的顎瓣構(gòu)成，兩瓣的張口面積為0.1m2。兩顎瓣頂部由一條鐵鏈連接，當鐵鏈被掛到鋼絲繩末端的掛鉤上時，兩顎瓣呈開放狀態(tài)。采泥器一經(jīng)觸及海底，掛鉤錘即下垂與鐵鏈脫鉤。當采泥器上提時，通過掛鉤對橫梁的拉力，連接兩顎瓣的鋼絲繩拉緊，使兩顎瓣閉合，將沉積物取入。深水（500m以上）采泥，應(yīng)換上帶重錘的掛鉤，并在兩顎瓣的外面附加配重，以增加采泥器的重量。2。操作時，把采泥器放在木制框架（規(guī)格65cm×55cm×30cm）上，將負載板插入導管中，在負載板的下孔中插入一鐵銷，上孔中插入一長鐵桿，另在鐵桿下方基架臺上放一塊三角力。這時再把左右顎瓣臂向上推，使之與釋放桿上的制動栓卡在一起，兩顎瓣即成開放狀態(tài)。當采泥器平穩(wěn)地降至海底時，由兩個啟動板的觸底帶動釋放桿將導管周圍的環(huán)托起，掛鉤即脫落，在彈簧的作用于下顎瓣插入底質(zhì)內(nèi)。此時，制動栓也互相脫離。當鋼絲繩上提時，兩瓣閉合將沉積物取入。在風浪較大和遇到砂底的情況下，均宜使用彈簧采泥器，并加配重。c）“大洋-50”型采泥器：結(jié)構(gòu)基本與抓斗式采泥器相同，取樣面積為0.05m2。適于無動力設(shè)備的小船在內(nèi)灣取樣。以下為幾種常用的拖網(wǎng)類型：a）阿拖網(wǎng)：網(wǎng)架用鋼板或鋼管制成，網(wǎng)口呈長方形，兩邊皆可在著底時進行工作?？诰壍木W(wǎng)架上。為使柔軟的小動物免受損壞，可在網(wǎng)內(nèi)近尾部附加一個大網(wǎng)目的套網(wǎng)以使之與大動物隔開。該網(wǎng)網(wǎng)口寬度可根據(jù)調(diào)查船噸位及調(diào)查海區(qū)酌定。一般調(diào)查船上用1.5m寬的即可。船上起重設(shè)備差，或在內(nèi)灣調(diào)查，也可用0.7m~1m寬的小型網(wǎng)。深水調(diào)查，一般多用寬度為3m的大型網(wǎng)，其網(wǎng)架也要相應(yīng)加重。拖網(wǎng)時，應(yīng)用兩根粗繩分別扣結(jié)在網(wǎng)架兩側(cè)邊上，并將其另一端繞結(jié)在網(wǎng)袋末端，避免網(wǎng)內(nèi)泥砂多時網(wǎng)衣破裂。b）三角形拖網(wǎng)：網(wǎng)架為鋼質(zhì)材料，呈三角形，架的四周橫接三根圓鋼，起加固作用。網(wǎng)口寬度，大小及網(wǎng)衣結(jié)構(gòu)與阿拖網(wǎng)相同。三角形拖網(wǎng)適于沿岸淺水和底質(zhì)較復(fù)雜的海區(qū)。c）雙刃拖網(wǎng)：網(wǎng)架長方形，以刀刃形鐵板作網(wǎng)口的上下緣，連接網(wǎng)口的網(wǎng)叉分為兩段，其中有一段用線繩或麻繩連接，以防網(wǎng)口卡于底上巖石，荷重過大時，導致網(wǎng)具丟失或發(fā)生危險。網(wǎng)口寬度有60cm和80cm兩種，網(wǎng)袋的長度為寬度的2倍。該網(wǎng)具適于硬底、碎石或砂礫沉積物區(qū)域工作。篩）、排渣閥、支架等組成。筒體直徑50cm,高75cm（其中漏斗狀部分25cm)發(fā)生器安于漏斗部底側(cè)，由一切成鍥形的水管焊貼于近筒邊（距離1cm左右當進入的水流經(jīng)此處，即受筒邊阻擋而改變方向，并形成漩渦；分流器系控制水流強弱的裝置，具雙向流水控制閥門；生物收集器為一復(fù)合套篩和木架組成，套篩分三層，上層網(wǎng)目為2mm,中層為1mm,底層0.5mm,用時與漩渦分選裝置配套使用；分選樣品時，排渣閥封閉筒底洞口，樣品分選完畢，排渣閥開啟，將余渣排出。及繩索計數(shù)器，最好能配張力表、電子秤，以便從鋼絲繩的張力及時了解網(wǎng)具是否到達海底和拖網(wǎng)狀況，確保安全。吊桿一般裝在主甲板后部，高出船舷5m左右，舷間距約1m,可作回轉(zhuǎn)運動。用于采泥器取樣的絞車及吊桿應(yīng)能負荷500kg,使用彈簧采樣器的負荷應(yīng)為2000kg。吊桿高出船舷的程度盡量減小，以能使用為度。6.2.2.2鋼絲繩：拖網(wǎng)應(yīng)用直徑8mm~10mm的軟質(zhì)鋼絲繩。其長度按調(diào)查海區(qū)的水深確定，備有足夠用量。在專供采泥用的絞車上，一般用直徑4mm~6mm的軟質(zhì)鋼絲繩。在鋼絲繩與網(wǎng)具或采泥器相連接處應(yīng)裝有轉(zhuǎn)環(huán)，以防操作過程鋼絲繩扭曲或打結(jié)。拖網(wǎng)時，應(yīng)附加保險繩，以便網(wǎng)具在海底碰到障礙物時，保險繩斷開，不致丟失網(wǎng)具。6.2.2.3沖水設(shè)備：船上應(yīng)裝有水龍頭及橡膠水管，供采泥和拖網(wǎng)后沖洗沉積物樣品和工具。無供水設(shè)備時，應(yīng)另備小型抽水泵。6.2.3樣品采集和處理抓斗式采泥器按以下方法操作：a)投放：將采泥器活門上的鐵鏈掛在掛鉤上，慢慢開動絞車，提升采泥器。隨著鋼絲繩拉緊，兩顎瓣自動張開。采泥器上升到略超過船舷時，即轉(zhuǎn)動吊桿將其送出舷外，待穩(wěn)定后慢速下降，入水后再快速下降。放出的鋼絲繩可稍長于水深。在淺海采樣時，當放出的鋼絲繩松弛時，即采泥器已著底，應(yīng)立即停車。在深水采樣時，可根據(jù)鋼絲繩傾角的大小，加適當?shù)挠嗔?。b)提升：開始用慢速，離底后改用快中速，接近水面時，再用慢速。當采泥器超過船舷時，應(yīng)立即停車，轉(zhuǎn)動吊桿使之移近船舷或用鐵鉤將其鉤入舷內(nèi)，再慢慢下降，將采泥器放在一預(yù)先準備好的白鐵盤中。先打開采泥器兩顎瓣上方的活門，從活門處觀察沉積物的顏色、厚度和生物棲息情況等，并作好記錄。然后將活門上的鐵鏈重新掛于掛鉤上，慢慢開動絞車，使采泥器上升離開鐵盤，顎瓣即自動打開，使泥樣落盤中。彈簧采泥器按以下方法操作：a)投放：首先，在掛鉤鉤住眼環(huán)使顎瓣張開后，取下負載板，用卡環(huán)連接采泥器上的鋼絲繩與絞車上的鋼絲繩，然后慢慢開動絞車將提升起來的采泥器送出舷外，并投放。采泥器接近海底時改用慢速下降。b)提升：操作方法基本與抓斗式采泥器相同，只是在采泥器提升上來后，須停放在一個預(yù)先準備好的框架上，再打開兩個顎瓣，使泥樣落在框架下面的白鐵盤中將采到的沉積物樣品移入漩渦分選器筒體中，打開分流器的閥門進水，利用水流通過漩渦發(fā)生器攪動樣品，浮選出比重輕的生物，比重大的生物連同余渣沉底。分流器的進水不宜太大，以免較大顆粒的沉積物攪起溢出筒體上方出水口。從出水口溢出的水體和生物流到套篩，將截留在篩網(wǎng)內(nèi)的動物按體形大小及軟硬程度分別揀入盛有海水的器皿中，然后按類別或軟硬分別裝瓶，并注意勿使小動物遺漏。應(yīng)仔細揀出余渣中比重較大的動物。難挑揀的生物連同余渣帶回實驗室，在解剖鏡下挑揀。采泥標本一律用5%甲醛溶液固定保存。6.2.3.2.1網(wǎng)具的選擇：根據(jù)調(diào)查海區(qū)各站深度與沉積物狀況選擇適宜網(wǎng)具。較硬的沉積物用阿拖網(wǎng)或三角形拖網(wǎng)；巖石或礫石較多以及海藻叢生的區(qū)域，使用雙刃拖網(wǎng)。深海作業(yè)，一般使用大型阿拖網(wǎng)，在港灣中可使用小型拖網(wǎng)（網(wǎng)口寬0.7m~1m)。6.2.3.2.2投網(wǎng)：拖網(wǎng)應(yīng)在每一測站各調(diào)查項目完成后進行。調(diào)查船以低速離站開航，航向穩(wěn)定后投網(wǎng)。開動絞車將網(wǎng)具吊于舷外，理順網(wǎng)衣和網(wǎng)架，然后慢速下降。放出繩長一般為水深的三倍左右，近岸淺?？筛L些。在100m水深工作時，因鋼絲繩重量大，繩長不宜超過水深的2倍。拖網(wǎng)的航速控制在2kn左右，船速大于4kn時，可采取間歇開車，利用船體的滑行速度拖網(wǎng)。拖網(wǎng)過程中，應(yīng)有專人監(jiān)視網(wǎng)具工作情況，并根據(jù)鋼絲繩的傾角和弛張程度或張力表來判斷網(wǎng)具是否著底并正常運行。遇有異常，應(yīng)立即停車、放繩或起網(wǎng)。拖網(wǎng)時間是從放繩完畢，網(wǎng)著底始至起網(wǎng)止。6.2.3.2.3起網(wǎng)：應(yīng)先降低船速，然后起網(wǎng)。當網(wǎng)升至近水面時，應(yīng)以慢速使網(wǎng)具離開水面，網(wǎng)尾部接近船舷時停車。轉(zhuǎn)動吊桿方向（吊桿不能轉(zhuǎn)動時用鐵鉤等將網(wǎng)具拉入舷內(nèi)慢慢將網(wǎng)放下，使網(wǎng)袋后部落在備好的鐵盤內(nèi)。解開網(wǎng)袋，將捕獲物傾入盤中。網(wǎng)袋內(nèi)如有泥砂，則移入2mm套篩沖洗，并將掛夾在網(wǎng)目上的生物挑揀干凈。部分稱重，并計算各類群或各種類個體，換算成標本總數(shù)量。保留一定數(shù)量個體數(shù)（大、中、小個體作為生物學等測定，余者經(jīng)稱重后處理掉。稱重和計數(shù)結(jié)果記入表A.10中。發(fā)現(xiàn)具典型生態(tài)意義的標本，應(yīng)及時拍照并進行有關(guān)生物學的觀察及測量。需培養(yǎng)和麻醉的生物，用海水沖洗干凈，并盡量減少刺激、損傷。標本按類群分離完畢，按個體大小分裝于不同規(guī)格的標本瓶或鐵皮箱。放入鐵皮箱中的標本，用紗布包好附上竹簽。裝入容器的標本量不得超過體積的2/3。6.2.3.3.2固定和保存：標本在野外固定時，除海綿動物用85%酒精外，其余各類均可先用5%甲醛溶液（加適量硼砂或六胺）。較大魚類應(yīng)用針筒將固定液注入體腔，海膽等大型棘皮動物，應(yīng)在其圍口膜處刺一小孔，使固定液滲入。標本帶回實驗室應(yīng)及時分離，并按需要更換固定液。一般而言，藻類、海草、魚類仍用5%甲醛溶液固定保存，其余各類改換70%酒精（加入5%甘油）固定6.2.3.4污染物測定的生物樣品6.2.3.5.1填寫采樣記錄表：每站取樣時，按表A.10的各項填寫。表中采泥和拖網(wǎng)標本數(shù)是指每站所取得的各類群生物的裝瓶數(shù)和包數(shù)。記事欄記錄該站工作的情況。6.2.3.5.2標簽：每號標本瓶中須放標簽（見表5和表6式樣）。標簽在填寫采樣記錄表時一并寫好。放在鐵皮箱中的大個體生物，應(yīng)另加一個竹簽。竹簽上應(yīng)有站號、標本編號和日期等。標簽、記錄表和標本三者應(yīng)相符，切勿混淆。標本編號應(yīng)遵循以下規(guī)定：a)采泥標本編號：MjAK。M—調(diào)查船代號；j—取樣站位序號（j=1,2,3……);A—采泥標本符號；K—采泥標本序號（K=1,2,3……)。b)拖網(wǎng)標本編號：MjBi。M—調(diào)查船代號；j—取樣站位序號（j=1,2,3……);B—拖網(wǎng)標本；i—拖網(wǎng)標本序號（i表5采泥標簽標本號深度m底質(zhì)采泥器m2日期年月日種名表6拖網(wǎng)標簽站號海區(qū)標本號深度m種名6.2.4標本歸類和采集工具保養(yǎng)6.2.4.1標本歸類：標本處理、分離、投放標簽及固定完畢后，按各大類群分別裝箱。海上難分離的樣品應(yīng)帶回實驗室處理。6.2.4.2工具保養(yǎng)：每航次工作結(jié)束后，對所用工具進行清理和保養(yǎng)。網(wǎng)具、采泥器、漩渦分選器及其6.3室內(nèi)標本處理檢查全部標本編號、數(shù)量等與海上記錄表的內(nèi)容是否相符，遇有不符，應(yīng)及時查找。無論按標本編號或站號順序鑒定標本，對主要種應(yīng)盡可能鑒定到種，并按表A.12各項生物學數(shù)據(jù)計算、測定和填寫。鑒定的種類按順序在采泥或拖網(wǎng)標本序號（k或i）后另起一個新序號（如k-1,k-2…),有多少種類就編多少號，同時將種名寫在新標簽上。將標本放于吸水紙上吸去表面水分，去除底棲動物的管子、寄居蟹的寄居外殼、體表偽裝物和其他附著物，用感量0.01g扭力天平稱取濕重。若要稱量干重，應(yīng)將標本用淡水或蒸餾水沖洗，吸去表面水分，置70℃~100℃烘箱中至恒重（用感量0.0001g的天平稱量）。必要時，可分殼肉稱量和稱取灰份重。稱重結(jié)果記入表A.11中。群體生物（如：苔蘚苔、珊瑚等）和定性標本不稱重。對易斷的紐蟲，環(huán)節(jié)動物只計頭部。軟體動物死殼不計數(shù)。標本量大時，可取部分稱重計數(shù)換算，主要種體長、體寬和體高的測量，按各類群規(guī)定的測量法進行。對典型意義的指示種，有條件時可用電鏡掃描測量生長線、計算生長率。6.4資料整理與保存數(shù)據(jù)計算按以下方法計算：a)生物密度和生物量的換算：將所有站位的實測生物個體數(shù)和生物量數(shù)據(jù)按其采樣面積換算成個/m2和g/m2,分別表示生物密度和生物量；b)生物密度和生物量統(tǒng)計：將各站位各類群生物密度記入表A.14中，并對各欄數(shù)據(jù)進行累加，求得整個海區(qū)的平均值。將各站位各類群生物量記入表A.15中，并對各欄數(shù)據(jù)進行累加，求得整個海區(qū)的平均值；c)各生物類群的組成百分比：根據(jù)表A.14和表A.15匯總的數(shù)據(jù)，計算各類群的生物密度和生物量在各站位和整個海區(qū)的組成百分比。數(shù)據(jù)按以下方法進行表示：)分別填入海圖上的相應(yīng)站位，然后以內(nèi)插法繪出等值線圖，或用不同大小的圓圈表示不同量級的密度分布。b)生物量分布圖將表A.15中的數(shù)據(jù)（按總生物量或各類群）分別填在海圖上相應(yīng)的站位，用內(nèi)插c)各類群生物密度和生物量組成百分比圖：按各類群生物所占密度或生物量百分數(shù)比例繪制成圓形圖，不同類群可以不同線條或圖案裝飾，使之更直觀。也可用直方圖或其他表示法。d)種類分布圖：取主要種的有關(guān)數(shù)據(jù)繪制分布圖。這些種類可分別以不同符號表示，每張圖可畫一至數(shù)個種。e)根據(jù)表A.12和表A.13的數(shù)據(jù)，按種歸類整理并填寫附表A.16和表A.17。除按傳統(tǒng)的資料歸檔方法保存資料外，電子文檔輸入計算機，用磁盤貯存。7潮間帶生物生態(tài)調(diào)查7.1調(diào)查內(nèi)容和方法生物調(diào)查內(nèi)容如下：—不同生境動、植物的種類、數(shù)量（棲息密度、生物量或現(xiàn)存量）及其水平和垂直分布的調(diào)查；—污染生態(tài)效應(yīng)調(diào)查，例如：污染指示生物的出現(xiàn)或消失；主要種類的增減、異常、死亡；種群動態(tài)；豐度、多樣性、生長率、生殖力的改變；各生物類群比例關(guān)系的變化以及群落結(jié)構(gòu)的演替等；—主要種類體內(nèi)污染物質(zhì)的測定。環(huán)境調(diào)查內(nèi)容如下：—環(huán)境基本特征：包括港灣形態(tài)、潮夕類型、灘涂闊狹、沉積物類型、污染源分布及位置等；—化學要素：鹽度、溶解氧(DO)、化學需氧量(COD)、pH值等，并依調(diào)查區(qū)污染源性質(zhì)和調(diào)查目—沉積物要素：粒度、有機質(zhì)、硫化物、氧化還原電位等，并依調(diào)查區(qū)污染性質(zhì)和調(diào)查目的，選測其他有關(guān)項目。調(diào)查地點的選擇應(yīng)遵循以下原則：程建設(shè)b)根據(jù)調(diào)查目的，結(jié)合污染源分布狀況，考慮污染可能影響的范圍；c)調(diào)查區(qū)內(nèi)可能有巖岸、沙灘、泥沙灘、泥灘等多種海岸類型，選點應(yīng)包括有不同類型，若有困難，為保證資料的可比性，所選點的沉積物類型應(yīng)力求一致；d)應(yīng)在遠離污染源的地方，選一生態(tài)特征大體相似的清潔區(qū)（非污染區(qū)）作為對照點。a)半日潮類型按以下方法劃分：—高潮區(qū)（帶最高高潮線至小潮高潮線之間的地帶；—中潮區(qū)（帶小潮高潮線至小潮低潮線之間的地帶；—低潮區(qū)（帶小潮低潮線至最低低潮線之間的地帶。b)日潮類型按以下方法劃分：—高潮區(qū)（帶回歸潮高潮線至分點潮高潮線之間的地帶；—中潮區(qū)（帶分點潮高潮線至分點潮低潮線之間的地帶；—低潮區(qū)（帶分點潮低潮線至回歸潮低潮線之間的地帶。c)混合潮類型按以下方法劃分：—高潮區(qū)（帶高高潮線至低高潮線之間的地帶；—中潮區(qū)（帶低高潮線至高低潮線之間的地帶；—低潮區(qū)（帶高低潮線至低低潮線之間的地帶。根據(jù)生物群落在潮間帶的垂直分布來劃分，由于生物群落可隨緯度高低、沉積物類型、外海內(nèi)灣、鹽度梯度、向浪背浪、背陰向陽等復(fù)雜環(huán)境因素的不同而改變，因此，要提供一個統(tǒng)一模式是困難的。一般而言，巖石岸大體分為：濱螺帶；藤壺-牡蠣帶；藻類帶。泥沙灘可有：綠螂-沙蠶-招潮蟹灘（或南方的鹽堿植物帶蟹類-螺類灘；蛤類灘。各地在調(diào)查時可根據(jù)各區(qū)、層的群落優(yōu)勢種給于更確切的命名。斷面布設(shè)應(yīng)遵循以下原則：a)調(diào)查地點選定后，對該地生境要有宏觀概念，選取不被或少被人為破壞、具代表性的地段布設(shè)調(diào)查斷面；b)每一調(diào)查地點，通常要設(shè)主、輔兩條斷面，若生境無大差異，可只設(shè)一條主斷面；c)斷面位置應(yīng)有陸上標志，走向應(yīng)與海岸垂直。取樣站布設(shè)應(yīng)遵循以下原則：b)巖石岸布站應(yīng)密切結(jié)合生物帶的垂直分布；軟相灘涂除考慮生物的垂直分布外，應(yīng)特別注意潮區(qū)（帶）的交替、沉積物類型的變化和鑲嵌；c)各站間距離視巖岸坡度、灘涂闊狹酌定。確定站位后，應(yīng)設(shè)有固定標志，以便今后調(diào)查找到原位。為防標志物遺失，需按站序測量、記錄各站間距離；d)巖沼和灘涂水洼地是一種特殊生境，在污染調(diào)查中具有重要意義，應(yīng)另布站取樣。調(diào)查時間的確定應(yīng)遵循以下原則：a)潮間帶采樣受潮汐限制，為獲得低潮區(qū)（帶）樣品，須在大潮期間進行。若斷面或站數(shù)較多而工作量較大時，可安排大潮期間調(diào)查各斷面的低潮區(qū)（帶小潮期間再進行高、中潮區(qū)（帶）的調(diào)查；12月~2月一年最少調(diào)查4次；c)監(jiān)測性調(diào)查，可根據(jù)各地實情選擇若干月份定期進行（如枯水期、豐水期等）。但為了資料比較，所選月份應(yīng)與基礎(chǔ)調(diào)查月份一致，并應(yīng)注意避開當?shù)刂饕锓N類的繁殖期；d)急調(diào)查（偶發(fā)污染事故、赤潮等應(yīng)進行跟蹤觀測，并對事故后所造成的影響作若干次必要的調(diào)查。主要采樣工具和設(shè)備如下：—采樣器：泥、沙等軟相沉積物的生物取樣，用灘涂定量采樣器。其結(jié)構(gòu)包括框架和擋板兩部分，均用1.5mm~2.0mm厚的不銹鋼板彎制而成。規(guī)格25cm×25cm×30cm。配套工具是平頭鐵锨；—定量框：巖岸生物取樣用25cm×25cm定量框。若在高生物量區(qū)取樣，可用10cm×10cm定量框。計算覆蓋面積，則用相應(yīng)的計數(shù)框。其框架可用鍍鋅鐵皮或3mm厚的塑料板制成。配套工具有小鐵鏟（或木工鑿子）、刮刀和撈網(wǎng)；—漩渦分選裝置：用于潮間帶灘涂調(diào)查的生物樣品淘洗時，應(yīng)配備有3kW~5kW的簡易汽油抽水泵作動力；—過篩器；—其他外業(yè)調(diào)查常用設(shè)備。定量取樣按以下方法進行：a)灘涂取樣用定量采樣品，樣方數(shù)每站通常取8個（合計0.5m2)。若灘面沉積物、類型較一致、10m有一標志）于站位兩側(cè)水平拉直，各樣方位置要求嚴格取在標志繩索所標位置，無論該位置上生物多寡，均不要移位。取樣時，先將取樣器擋板插入框架凹槽，用臂力或腳力將其插入灘涂內(nèi)；繼而觀察記錄框內(nèi)表面可見的生物及數(shù)量；然后，用鐵锨清除擋板外側(cè)的泥沙再拔去擋板，以便鏟取框內(nèi)樣品。鏟取樣品時，若發(fā)現(xiàn)底層仍有生物存在，應(yīng)將取樣器再往下壓，直至采不到生物為止。若需分層取樣，可視沉積物分層情況確定；b)巖石岸取樣一般用25cm×25cm的定量框，每站取2個樣方。若生物棲息密度很高，且分布較均勻，可采用10cm×10cm的定量框。確定樣方位置應(yīng)在宏觀觀察基礎(chǔ)上選取能代表該水平高記錄優(yōu)勢種的覆蓋面積。然后再用小鐵鏟、鑿子或刮刀將框內(nèi)所有生物刮取干凈；c)對某些棲息密度很低的底棲生物（如：海星、海膽、海仙人掌等）或營穴居、跑動快的種類（沙蟹、2的大面積計數(shù)（個數(shù)或洞穴數(shù)并采集其中的部分個體，求平均個體重，再換算成單位面積(m2)的數(shù)和量。每站定量取樣的同時，應(yīng)盡可能將該站附近出現(xiàn)的動植物種類收集齊全，以作分析時參考，但定性樣品務(wù)必與定量樣品分裝，切勿混淆。7.2.2.3供分析體內(nèi)污染物質(zhì)的生物樣品的采集采集供分析生物體內(nèi)污染物質(zhì)累積情況的生物種類，應(yīng)按以下基本原則選擇：—固定生活在一定區(qū)域、個體大小和數(shù)量適于分析測定的經(jīng)濟種和優(yōu)勢種；—力求在各斷面、全年均能采到的種類；—對污染物質(zhì)有較強忍受能力和較高富集能力的種類；—為保護水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)和人體健康，對附近養(yǎng)殖品種也采樣分析。7.2.3水質(zhì)和沉積物樣品采集應(yīng)在各斷面調(diào)查的同時，于高平潮和低停潮時各采一次水樣。河口區(qū)可考慮在兩次采水期間內(nèi)增加一次。巖沼和灘涂水洼內(nèi)積水應(yīng)另行采樣。必要時，酌情對生物定量取樣站穴內(nèi)積水或沉積物間隙水采樣分析。應(yīng)與生物定量取樣同步進行，取樣站數(shù)依灘涂沉積物變化酌情而定。遇表、底層沉積類型有明顯差異時，最好應(yīng)分層取樣，并記錄其層、色、嗅味。其樣品編號必須與該站生物定量樣品編號一致。執(zhí)行。7.2.4生物樣品的淘洗與預(yù)處理本法應(yīng)在小船上，隨著潮水上漲或退落進行操作。若無船只而考慮直接在灘涂上進行淘洗，分選裝置和抽水泵應(yīng)附設(shè)防沉底板，并應(yīng)慮水源的充分供給。分選操作步驟如下：—將該裝置牢靠固定在小船（或灘涂）上，用消防水管連結(jié)裝置和抽水泵；—啟動抽水泵，待裝置的筒體內(nèi)注有約1/2海水時，調(diào)節(jié)分流器水壓使渦流適中，并及時倒入待淘洗樣品；—約經(jīng)10min渦動，大多數(shù)體輕、柔軟的生物則可以從出水口分選流出，截留于套篩（收集器）上。此時，可先取出套篩并換上另一套篩，同時調(diào)節(jié)分流器加大水壓，經(jīng)3min~5min,一些個體較重的生物也可分選出來；—當進出筒體的水色一致時，即可打開裝置的分流閥，關(guān)閉進水閥，并取一網(wǎng)篩或搪瓷盤置于筒體下，打開排渣閥排出余渣；—仔細將各套篩截留的和余渣中存留的生物挑揀干凈；—按上述步驟分選其他樣品。本法需用人力操作，費力費時，但當不具備用漩渦分選裝置時，仍是可靠方法。為了方便淘洗和減少樣品搬運，斷面應(yīng)力求布設(shè)于近水源處。按以下方法進行生物樣品的預(yù)處理：a)采得的所有定量和定性標本，應(yīng)洗凈，按種分開裝瓶（或用封口塑料袋裝）。若容器不足，應(yīng)按食性及個體軟硬分裝，以防標本損壞；b)灘涂定量調(diào)查，若因時間關(guān)系，不能將余渣中的標本揀取干凈，應(yīng)只揀出特殊標本后把余渣另行裝瓶（袋回實驗室在雙筒解剖鏡下仔細挑揀；c)謹防不同站或同一站的定量和定性標本混雜，應(yīng)按站在定量或定性標本裝瓶（袋）后，立即用鉛d)按序加入5%中性甲醛固定液（見6.2.3.3.2)。余渣固定時可依固定液水樣量，按1000mL加入1g虎紅(C20H6Cl2I4O5)的量染色，便于室內(nèi)標本挑揀；e)為方便標本鑒定，對一些受刺激易引起收縮或自切的種類（如：腔腸動物、紐形動物宜先用水合氯醛或烏來糖少許進行麻醉后再行固定；某此多毛類（如沙蠶科、吻沙蠶科可先用淡水麻醉，然后用鑷子輕夾頭部使吻伸出，再加固定液；藻類標本除用5%中性甲醛溶液固定外，最好海藻志》附錄；能帶回一些完整的新鮮藻體，制作臘葉標本，以保持原色和長久保存海藻志》附錄；f)供分析測定體內(nèi)污染物質(zhì)的生物樣品，切勿用甲醛溶液固定。而應(yīng)洗凈冰凍保鮮。每份樣品用紗布或封口塑料袋包裝，放入寫明采集地點、時間、斷面、潮區(qū)（帶）的竹制或塑料標簽。送回實驗室及時測定。外業(yè)記錄要有專人負責，認真填寫表A.18;繪制站位分布圖；記錄環(huán)境基本特征、生物分布、生物異常等現(xiàn)象；填寫標簽。外業(yè)記錄應(yīng)用鉛筆填記，字跡須清晰，禁止涂改，記后應(yīng)妥善保管，嚴防受潮或丟失。表7定量標簽項目編號地點 斷面潮區(qū)站號 樣方號標本號 沉積物取樣面積m2種名表8定性標簽項目編號地點 斷面潮區(qū)站號 標本號沉積物