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文檔簡介
精液和前列腺液檢查1.熟悉精液檢查的目的和標本送檢的注意事項2.學(xué)會精液一般性狀檢驗的方法3.能進行精液顯微鏡檢驗4.掌握精液正常參考值及臨床意義學(xué)習(xí)目標返回第十四章目錄第一節(jié)精液檢查第二節(jié)前列腺液檢查
返回第一節(jié)精液檢查
一、標本收集和送檢二、一般性狀檢查三、顯微鏡檢查四、精子功能檢查五、計算機輔助精子分析六、練習(xí)題返回精液主要由精子和精漿兩部分組成精子是男性的生殖細胞,約占精液的5%精漿是運送精子的載體,約占精液的95%概論返回概論
精漿是由精囊液、前列腺液、尿道球腺及尿道旁腺等多種腺體分泌的混合液體。精囊液中含有大量維持精子生命活動的物質(zhì),其中果糖為精子提供營養(yǎng)及活動能量,凝固酶可維持精液的粘稠度。前列腺液為弱堿性乳白色液體,含多種營養(yǎng)物質(zhì),其中纖溶酶(液化因子)可使精液在短時間內(nèi)液化為稀薄的液體,有利于精子運動。返回精液檢驗的目的①評估男性生育功能,為不育癥的診斷和療效觀察提供依據(jù);②協(xié)助診斷男性生殖系統(tǒng)疾??;③輸精管結(jié)扎術(shù)后療效觀察;④計劃生育科研;⑤為體外受精和精子庫篩選優(yōu)質(zhì)精子;⑥法醫(yī)學(xué)鑒定。返回精液標本送檢的注意事項:①采樣前禁欲3~5天;②采樣后立即送檢;③送檢時間不超過1h;④傳送時注意保溫;⑤精液標本按照潛在生物危害物質(zhì)處理。返回精液檢查項目精液常規(guī)檢查(簡便實用的傳統(tǒng)項目)精子功能檢查精漿生化分析免疫學(xué)檢查微生物學(xué)檢查遺傳基因檢查計算機輔助精子分析系統(tǒng)。(其他檢驗項目目前多只在專門的男性實驗室中進行)返回一般性狀檢查{顯微鏡檢查精液檢查項目精液常規(guī)檢驗的內(nèi)容包括
一般性狀檢查主要包括精液外觀、量、粘稠度、液化時間、酸堿度;
顯微鏡檢查主要有精子活率、精子活動力、精子計數(shù)、精子形態(tài)觀察、精液細胞學(xué)檢查等。返回精液一般性狀檢查(一)精液外觀
正常人剛排出的精液呈膠凍狀有高度的粘稠性;外觀呈灰白色或乳白色不透明的液體;自行液化后為較稀薄的半透明乳白色;久未排精者可略帶灰黃色。
血性精液見于生殖系統(tǒng)急性炎癥、結(jié)核、腫瘤等。
膿性精液見于精囊炎或前列腺炎時。返回精液一般性狀檢查(二)精液量
將液化的精液用小量筒或移液管測定全部精液量,以毫升數(shù)報告。正常人一次排出精液約為2~5ml,精液量<1ml或>8ml,即可視為異常。返回精液一般性狀檢查精液量減少:占男性不孕癥的22%。見于前列腺和精囊病變、射精管阻塞,先天性精囊缺如等。精液量增多:占男性不育癥的5%。此可因垂體前葉促性腺素的分泌功能亢進,使雄激素的水平升高所致。返回精液一般性狀檢查
(三)精液液化時間指排精后精液自行從膠凍狀轉(zhuǎn)變?yōu)榱鲃訝钏璧臅r間。液化時間觀察標本應(yīng)放在37℃,每10min觀察一次。返回精液一般性狀檢查
(三)精液液化時間正常精液是一種均勻粘稠的液體,射精后立即凝固,5~10min后開始液化,30min完全液化。超過60分鐘不液化,視為異常;24小時不液化者,為不育原因之一,可直接報告24小時不液化。返回精液一般性狀檢查
(三)精液液化時間前列腺炎癥時,因炎癥破壞纖溶酶,可導(dǎo)致精液不液化或液化不完全,抑制精子活力,從而減少受孕機會。返回(四)精液粘稠度精液一般性狀檢查
指完全液化后的粘度。在精液全部液化后,可用直接玻璃棒法測定:用玻璃棒提拉粘液絲,正常粘絲長度不超過2cm。粘稠度增加時,精液懸滴可形成長于2cm的長絲。返回精液一般性狀檢查粘稠度測定可分為3級:Ⅰ級,為30min基本液化,用玻璃棒提拉精液呈細絲狀粘液絲;Ⅱ級,為60min不液化,提拉時可見粗大粘液絲,涂片時有粘稠感;Ⅲ級,為24h仍不液化,無法用玻棒提拉起,粘稠度高,涂片困難。返回精液一般性狀檢查
精液粘稠度增高見于前列腺炎癥,常伴有不液化,可阻抑精子活動力。粘稠度減低見于先天性無精囊腺及精子濃度太低或無精子癥。返回
用精密pH試紙測定精液的pH值。正常為弱堿性,pH為7.2~8.0。精液pH值應(yīng)在射精后1小時內(nèi)測定,放置1小時以上的精液,因為代謝產(chǎn)物可成為酸性。
(五)精液酸堿度精液一般性狀檢查返回精液一般性狀檢查返回精液顯微鏡檢查(一)精子存活率(二)精子活動力(三)精子計數(shù)(四)精子形態(tài)觀察(五)精液細胞檢查返回精液顯微鏡檢查方法:待精液完全液化、充分混勻后,取適量標本涂于載玻片上,直接濕片觀察。通常先在低倍鏡下粗略觀察有無精子。如果鏡下未見精子,應(yīng)將全部精液離心,取管底沉淀物再涂片觀察,如仍無精子,則報告“查無精子”,可判定為無精子癥,不必繼續(xù)鏡檢。返回
直接涂片觀察有無精子,可判斷輸精管結(jié)扎術(shù)是否成功,一般于手術(shù)后第6周開始檢查,每周1~2次,連續(xù)觀察3次,查無精子則手術(shù)成功。精液顯微鏡檢查返回精液顯微鏡檢查(一)精子存活率以活精子所占精子總數(shù)的百分率來表示。返回精液顯微鏡檢查
(一)精子存活率檢查方法
1.直接涂片法取液化精液一滴涂于載玻片上,高倍鏡下直接觀察5~10個視野,計數(shù)活動精子百分率返回精液顯微鏡檢查
(一)精子存活率檢查方法
2.伊紅染色法在載玻片上加新鮮精液和5g/L伊紅Y染色液各1滴,混勻,30s后推成薄片高倍鏡下直接觀察?;罹硬恢?,死精子染成紅色。(精子死亡后,細胞膜的完整性受損,失去屏障功能,易于著色)返回精液顯微鏡檢查
(一)精子存活率參考值精子活率≥75%(伊紅染色法)
臨床意義主要用于男性不育癥的檢查返回精液顯微鏡檢查(二)精子活動力是指精子向前運動的能力。WHO把精子活力分為a、b、c、d四級返回精液顯微鏡檢查
(二)精子活動力結(jié)果判斷
a級:快速向前運動
b級:慢速或呆滯的向前運動
c級:非前向運動
d級:不動返回精液顯微鏡檢查
(二)精子活動力方法取10
l標本涂片,連續(xù)觀察至少5個視野,計數(shù)同一視野內(nèi)各級精子數(shù)量。(至少對200個精子進行分級)
返回精液顯微鏡檢查
(二)精子活動力參考值
a級精子≥25%
或a級+b級精子之和≥50%
(正常精液采集后60min內(nèi))返回精液顯微鏡檢查
(二)精子活動力臨床意義主要用于男性不育癥的檢查。返回精液顯微鏡檢查(三)精子計數(shù)是指每升精液中的精子數(shù)量,即精子濃度。返回精液顯微鏡檢查
(三)精子計數(shù)原理用碳酸氫鈉破壞精液的粘稠性,以甲醛固定精子,稀釋后充入計數(shù)池內(nèi)計數(shù)。返回精液顯微鏡檢查
(三)精子計數(shù)試劑精子稀釋液:碳酸氫鈉5g,40%甲醛溶液1ml,蒸餾水加至100ml,待完全溶解過濾后使用。返回精液顯微鏡檢查
(三)精子計數(shù)操作
1.取精子稀釋液0.38ml,
2.加液化并充分混勻的精液20l,搖勻。
3.充池,靜置1~2min,
4.在高倍鏡下以精子頭部做為基準計數(shù)。(計數(shù)區(qū)域一般為中央大方格內(nèi)的5個中方格)返回精液顯微鏡檢查(三)精子計數(shù)計算精子數(shù)/L=5個中方格所數(shù)精子數(shù)×5×10×20×106/L=5個中方格內(nèi)精子數(shù)×109返回精液顯微鏡檢查
第3版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》規(guī)定:如每個中央中方格內(nèi)﹥40個精子,應(yīng)計數(shù)5個中方格每個中央中方格內(nèi)10~40個精子,計數(shù)10個中方格每個中央中方格內(nèi)﹤10個精子,計數(shù)25個中方格返回精液顯微鏡檢查
(三)精子計數(shù)參考值正常精子濃度≥20×109/L返回精液顯微鏡檢查
(三)精子計數(shù)臨床意義精子計數(shù)<20×109/L為精子數(shù)量減少,可影響受孕。注意正常人精子數(shù)變化較大,出現(xiàn)一次異常結(jié)果,應(yīng)隔1周后復(fù)查,反復(fù)查2~3次方能得出比較正確的結(jié)果。在臨床實踐中少數(shù)計數(shù)偏低者,仍有生育能力,故判斷一個男性的生育能力應(yīng)經(jīng)多次檢驗后,結(jié)合精液檢驗的其他指標綜合分析。返回精液顯微鏡檢查
精子數(shù)量減少的原因:
①精索靜脈曲張;②先天性或后天性睪丸疾病,如睪丸畸形、萎縮、結(jié)核、淋病、炎癥等;③輸精管或精囊缺如;④重金屬損害,如鉛、鎘中毒或放射性損害;⑤某些藥物,如抗癌藥等;⑥50歲以上男性精子數(shù)逐年減少。返回精液顯微鏡檢查(四)精子形態(tài)檢查方法一:直接涂片高倍鏡下觀察(濕片法)方法二:瑞-姬染色法(常用的染色法)方法三:改良巴氏染色法(男性實驗室常采用)返回精液顯微鏡檢查
(四)精子形態(tài)檢查方法
1.瑞-姬染色法:取液化混勻的精液1滴涂片,干燥后行瑞-姬氏染色,油鏡下觀察并計數(shù)100~200個精子,報告正?;虍惓>影俜致剩?)。返回精液常規(guī)檢查精液顯微鏡檢查精子形態(tài)正常精子形似蝌蚪狀,分頭、體、尾三部分,頭部呈卵圓形或梨形,體部輪廓直而規(guī)則,尾部細長約50~60
m。返回精液顯微鏡檢查
異常精子包括頭部異常、體部異常、尾部異常及混合異常。頭部異常如大頭、小頭、雙頭、不規(guī)則頭、頭部邊緣不齊等;體部異常如雙體、體分支、體部短小、體消失等;返回精液顯微鏡檢查
(四)精子形態(tài)檢查2.改良巴氏染色法在載玻片上滴1滴精液,約5~20l制片,待干后,用95%乙醇和乙醚等量混合液固定5~15min;行改良巴氏染色,在油鏡下觀察100~200個精子。返回精液顯微鏡檢查
(四)精子形態(tài)檢查參考值正常形態(tài)精子為82%~94%臨床意義正常精液中異常精子應(yīng)<20%,如超過20%為不正常。感染、外傷、高溫、放射線、酒精中毒、藥物、精索靜脈曲張均可造成畸形精子數(shù)量增加。返回精液顯微鏡檢查(五)精液細胞檢查
1.未成熟生殖細胞是指各階段發(fā)育不完全的生精細胞,包括精原細胞、初級精母細胞、次級精母細胞及發(fā)育不全的精子細胞。這些細胞的形態(tài)、大小及核的形態(tài)、大小均不規(guī)則。返回精液顯微鏡檢查
(五)精液細胞檢查參考值未成熟生精細胞<1%
臨床意義正常人成熟精細胞>99%,在病理情況下,當(dāng)曲細精管受損(藥物或他因素),精液中可出現(xiàn)較多的未成熟生精細胞。返回精液顯微鏡檢查返回精液顯微鏡檢查2.紅細胞、白細胞正常精液中可存在少量的紅細胞、白細胞。精液中白細胞主要是中性粒細胞,在直接涂片鏡檢時易將生精細胞與白細胞混淆,可用過氧化物酶染色法加以鑒別,前者為陰性,后者為陽性。返回精液顯微鏡檢查
(五)精液細胞檢查參考值正常精液中紅細胞偶見、白細胞<5/HP。臨床意義精液中紅細胞、白細胞增高,可見于生殖道炎癥、結(jié)核、惡性腫瘤等。(按WHO標準,精液中白細胞>1×109/L的不育癥患者稱為白細胞精子癥)返回精液顯微鏡檢查返回精液常規(guī)檢查參考值及異常情況歸納表檢查項目參考值異常情況外觀精液量液化時間粘稠度酸堿度精子活率精子活動力(60min內(nèi))精子計數(shù)精子形態(tài)紅、白細胞精液常規(guī)檢查灰白色或乳白色膿性或血性2~5ml/1次<1ml或>8ml30min完全液化>60min不液化Ⅰ級、粘絲長度<2cmⅡ級或Ⅲ級、粘絲長度>2cmpH值7.2~7.8pH<7.0或pH>7.8≥75%(伊紅染色法)<60%a級精子≥25%,或a級+b級精子之和≥50%a級<25%;或a級+b級精子<50%≥20×109/L<20×109/L正常形態(tài)精子82%~94%異常精子>20%<5/HP>5/HP返回四、精子功能檢查(一)體內(nèi)穿透試驗在排卵期或近排卵期性交后數(shù)小時,檢查宮頸口粘液活精子數(shù)量、活率及活動力,從而評價精子穿透宮頸粘液的能力。本試驗標本的采集時間必須是女方排卵期或近排卵期?!菊⒖紖^(qū)間】性交4~6h后,可見正?;顒佣染訑?shù)>25/HPF;6~8h后,>70/HPF。返回四、精子功能檢查(一)體內(nèi)穿透試驗【臨床意義】結(jié)果取決于精子與宮頸粘液的相互關(guān)系。其中任何一方異常均可影響實驗結(jié)果。①宮頸粘液中如存在抗精子抗體或精子表面結(jié)合有抗精子抗體,精子將出現(xiàn)凝集現(xiàn)象;②精子本身若有遺傳或代謝障礙、逆行射精等,精子亦不能穿透宮頸粘液;③宮頸粘液異常,如宮頸疾?。ㄑ装Y、粘連、囊腫等)所致、或粘液粘滯度大、酸性粘液、膿性粘液等,均可導(dǎo)致本試驗異常。返回四、精子功能檢查(二)體外穿透試驗1.精子-宮頸粘液玻片穿透試驗【操作】在一塊潔凈的玻片上相距約4mm處,分別滴排卵期宮頸粘液和液化精液1滴,輕輕加上蓋玻片,使兩液滴慢慢接觸而形成交界面,然后置37℃孵育10~15min,取出鏡檢。以緊鄰界面的第一個高倍視野設(shè)為Fl,靠近Fl的第二視野為F2,分別記錄Fl和F2中活動的精子數(shù)。返回四、精子功能檢查(二)體外穿透試驗1.精子-宮頸粘液玻片穿透試驗【結(jié)果判斷】
①正常:精子穿透粘液,并90%以上精子呈直線運動;②較差:精子能穿透粘液,但運動距離小,離開粘液與精液界面<500
m;③異常:精子穿透粘液后.很快失去活力或僅有擺動;或精子不能穿透以上界面或于界面精液側(cè)出現(xiàn)凝集。
返回四、精子功能檢查(二)體外穿透試驗1.精子-宮頸粘液玻片穿透試驗【參考區(qū)間】精子穿透粘液,且90%以上精子呈直線運動?!九R床意義】由于精子-宮頸粘液玻片穿透試驗操作尚未完全標準化,所以常有一定的主觀性。如試驗結(jié)果異常,應(yīng)結(jié)合精液其他檢查結(jié)果綜合分析。返回四、精子功能檢查2.精子-宮頸粘液接觸試驗【操作】取精液及近排卵期宮頸粘液等量混合,室溫下靜置30min,觀察并計數(shù)非正常運動(擺動)精子的出現(xiàn)率,以未與宮頸粘液混合的精液作對照,求出擺動精子的出現(xiàn)率(%)。擺動精子越多,意味著精子運動功能受損越嚴重。此外,可用其他供者的精液或?qū)m頸粘液分別進行交叉試驗,以確定抗精子抗體是來自精液或?qū)m頸粘液。返回四、精子功能檢查2.精子-宮頸粘液接觸試驗【參考區(qū)間】陰性(精子擺動出現(xiàn)率0~25%)【臨床意義】試驗結(jié)果陽性(﹥25%),提示精液或?qū)m頸粘液中存在抗精子抗體。返回四、精子功能檢查3.倉鼠卵-精子穿透試驗又稱為精子穿透試驗(SPT),是評價精子功能最常用的試驗。SPT是測定精子獲能、頂體反應(yīng)和結(jié)合卵子能力的一種技術(shù)復(fù)雜而嚴格的生物學(xué)試驗。試驗結(jié)果用相差顯微鏡觀察,計算卵子受精率和受精指數(shù)。計算公式:受精率(%)=受精卵數(shù)/卵細胞總數(shù)×100%;受精指數(shù)=穿透卵細胞的精子數(shù)/卵細胞總數(shù)返回四、精子功能檢查3.倉鼠卵-精子穿透試驗【參考區(qū)間】受精率≥10%;受精指數(shù)≥5?!九R床意義】受精指數(shù)<5,示生育力下降。SPT試驗結(jié)果與體內(nèi)、外穿透實驗結(jié)果有良好的相關(guān)性,對不育癥的診斷符合率達90%,可作為測定精子功能的基礎(chǔ)試驗。SPT不僅可用于原因不明不育男子的診斷依據(jù),而且可作為評價人工授精試驗的依據(jù).但試驗影響因素較多,必須加強質(zhì)量控制。返回四、精子功能檢查4.精子低滲腫脹試驗(HOS)【試劑】膨脹液:枸櫞酸鈉0.735g,果糖1.351g,加蒸餾水至100ml。分裝,-20℃冷凍保存,使用前解凍,并充分混勻。返回四、精子功能檢查4.精子低滲腫脹試驗(HOS)【結(jié)果判斷】
a型,未出現(xiàn)腫脹;
b型,尾尖腫脹;
c型,尾尖彎曲腫脹;
d型,尾尖腫脹伴彎曲腫脹;
e型,尾彎曲腫脹;
f型,尾粗短腫脹;
g型,全尾部腫脹。返回四、精子功能檢查4.精子低滲腫脹試驗(HOS)【參考區(qū)間】尾部腫脹精子>60%?!九R床意義】
HOS試驗可以預(yù)測精子膜有無損害,由于操作簡便、快速,且與其他精子功能試驗有良好的相關(guān)性,常用來判斷精液中是否存在AsAb
。
返回五、計算機輔助精子分析
計算機輔助精子分析(CASA)技術(shù)是通過一臺高分辨率的顯微攝像系統(tǒng),采集精子形態(tài)圖象和精子運動圖象,用計算機和專用精液分析軟件對圖象進行處理和分析,能自動測試近20項精液分析指標,包括精子濃度、精子活率、活力、精子運動速度、精子運動方式、精子頭運動軌跡圖和力度等一系列“運動學(xué)”參數(shù),有些儀器還可以檢查精子形態(tài)學(xué)參數(shù)等。特別是對精子運動的分析有快速、直觀、準確的特點。返回總結(jié)
精液常規(guī)檢查包括一般性狀檢驗及顯微鏡檢驗兩大方面。具體內(nèi)容:①精液外觀;②精液量;③精液粘稠度;④精液液化時間;⑤精液酸堿度;⑥精子活動率;⑦精子活動力;⑧精子計數(shù);⑨精子形態(tài)觀察;⑩精液細胞學(xué)檢查返回總結(jié)
正常精液常規(guī)檢查報告示例:灰白色;3ml;液化時間30min;粘稠度Ⅰ級;pH值7.5;精子活率80%;精子活動力a級+b級精子占70%;精子計數(shù)60×109/L;正常形態(tài)精子85%;紅細胞1~2/HP、白細胞3~5/HP返回名詞解釋1.精液液化時間指新排出的精液從膠凍狀轉(zhuǎn)變?yōu)榱鲃訝钏璧臅r間.返回名詞解釋2.精子活動力
是指精子向前運動的能力。
WHO將其分為a、b、c、d四級。返回名詞解釋3.精子活率是指活精子占精子總數(shù)的比例.返回問答題1.簡述精液檢查的目的返回①評估男性生育功能,為不生育癥診斷和療效觀察的提供依據(jù)②輔助診斷男性生殖系統(tǒng)疾?、圯斁芙Y(jié)扎術(shù)療效觀察④計劃生育科研⑤為體外授精和精子庫篩選優(yōu)質(zhì)精子⑥法醫(yī)學(xué)鑒定問答題2.試述精子計數(shù)的原理返回用碳酸氫鈉破壞精液的粘稠性,以甲醛固定精子,稀釋后充入計數(shù)池內(nèi)計數(shù)。問答題3.試述精子計數(shù)的方法返回①于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,吸取
液化后并充分混勻的精液20μl,搖勻;②充分搖勻后,充入計數(shù)池內(nèi),靜置1~2min,以精子頭部做為基準進行計數(shù);③在高倍鏡下計數(shù)中央大方格內(nèi)5個中方格
(RBC計數(shù)區(qū))內(nèi)的精子數(shù)。精子數(shù)/L=5個中方格所數(shù)精子數(shù)
×5×10×20×106/L問答題4.試述精子計數(shù)的結(jié)果計算返回問答題5.試述精子計數(shù)的參考值精子計數(shù)≥20×109/L返回第二節(jié)前列腺液檢驗
一、一般性狀檢驗二、顯微鏡檢查三、練習(xí)題返回1.量正常前列腺液,一次量為數(shù)滴至2ml。前列腺炎癥時則顯著減少甚至無液可采。
一、一般性狀檢驗返回一、一般性狀檢驗2.顏色正常前列腺液,呈乳白色稀薄液體。
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