水質(zhì) 糞大腸菌群的測定 濾膜法（征求意見稿）

目次

前言.............................................................................................................................................ii

1適用范圍.........................................................................................................................................1

2術(shù)語和定義.....................................................................................................................................1

3方法原理.........................................................................................................................................1

4干擾和消除.....................................................................................................................................1

5試劑和材料.....................................................................................................................................1

6儀器和設(shè)備.....................................................................................................................................2

7樣品.................................................................................................................................................2

8分析步驟.........................................................................................................................................3

9結(jié)果計算與表示.............................................................................................................................4

10精密度和準(zhǔn)確度...........................................................................................................................4

11質(zhì)量保證和質(zhì)量控制...................................................................................................................5

12廢物處理.......................................................................................................................................5

i

前言

為貫徹《中華人民共和國環(huán)境保護(hù)法》和《中華人民共和國水污染防治法》，保護(hù)環(huán)境，

保障人體健康，規(guī)范水中細(xì)菌總數(shù)的測定方法，制定本標(biāo)準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定地表水、地下水和廢水中糞大腸菌群的濾膜法。

本標(biāo)準(zhǔn)是對《水質(zhì)糞大腸菌群的測定多管發(fā)酵法和濾膜法（試行）》（HJ/T347-2007）

濾膜法部分的修訂，與原標(biāo)準(zhǔn)相比主要修改內(nèi)容如下：

在干擾與消除、水樣、分析步驟、結(jié)果計算與表示、精密度和準(zhǔn)確度、質(zhì)量控制和質(zhì)量

保證等方面做了具體的要求。

本標(biāo)準(zhǔn)首次發(fā)布于2007年，原標(biāo)準(zhǔn)起草單位為中國環(huán)境監(jiān)測總站等單位。本次為第一次

修訂。

自本標(biāo)準(zhǔn)實施之日起，《水質(zhì)糞大腸菌群的測定多管發(fā)酵法和濾膜法（試行）》（HJ/T

347-2007）廢止。

本標(biāo)準(zhǔn)由環(huán)境保護(hù)部環(huán)境監(jiān)測司、科技標(biāo)準(zhǔn)司組織制訂。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草單位：遼寧省環(huán)境監(jiān)測實驗中心。

本標(biāo)準(zhǔn)驗證單位：大連市環(huán)境監(jiān)測中心、丹東市環(huán)境監(jiān)測中心站、錦州市環(huán)境監(jiān)測中心

站、遼陽市環(huán)境監(jiān)測站、鐵嶺市環(huán)境保護(hù)監(jiān)測站、沈陽市疾病預(yù)防控制中心。

本標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境保護(hù)部201□年□□月□□日批準(zhǔn)。

本標(biāo)準(zhǔn)自201□年□□月□□日起實施。

本標(biāo)準(zhǔn)由環(huán)境保護(hù)部解釋。

ii

水質(zhì)糞大腸菌群的測定濾膜法

1適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定水中糞大腸菌群的濾膜法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于地表水、地下水和廢水中糞大腸菌群的快速測定。本標(biāo)準(zhǔn)不適用于渾濁度

較高的水體。

2術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

2.1

糞大腸菌群fecalcoliforms

又稱耐熱大腸菌群。44.5℃培養(yǎng)24h，能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧及兼性厭氧革蘭氏陰

性無芽孢桿菌。

2.2

菌落形成單位Colony-FormingUnits,CFU

單位體積中的細(xì)菌群落總數(shù)。

3方法原理

水樣通過孔徑為0.45μm的濾膜過濾，細(xì)菌被截留在濾膜上，然后將濾膜置于含有乳糖

的培養(yǎng)基上，在特定的溫度（44.5℃）培養(yǎng)24h，在此培養(yǎng)溫度，不利于來自自然環(huán)境的大

腸菌群生長，而糞大腸菌群能生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在濾膜上呈藍(lán)色或藍(lán)綠色，其它非

糞大腸菌落呈灰色、淡黃色或無色。通過顏色判斷是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣，從而確定是否有糞大腸菌

群存在，并通過呈藍(lán)色或藍(lán)綠色菌落計數(shù)，來測定水樣中糞大腸菌群濃度。

4干擾和消除

氯具有氧化性，較高濃度的重金屬離子具有毒性，它們都能破壞微生物細(xì)胞內(nèi)酶的活性，

最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡?？煞謩e加入硫代硫酸鈉和乙二胺四乙酸二鈉排除氯或重金屬的干擾。

5試劑和材料

除非另有說明，分析時均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純化學(xué)試劑。

5.1MFC培養(yǎng)基

成分：

胰胨10g

蛋白胨5g

1

酵母浸膏3g

氯化鈉5g

乳糖12.5g

膽鹽三號1.5g

1%苯胺藍(lán)水溶液10ml

1%玫瑰色酸溶液（溶于8.0g/L氫氧化鈉液中）10ml

制法：將上述培養(yǎng)基中的成分（除苯胺藍(lán)和玫瑰色酸外），溶解于1000ml蒸餾水或去離

子水中，調(diào)節(jié)pH值到7.4，分裝于小燒瓶內(nèi)，每瓶100ml，于115℃高壓蒸汽滅菌20min，

儲存于冷暗處備用。臨用前，按上述配方比例，用滅菌吸管分別加入已煮沸滅菌的1%苯胺

藍(lán)溶液1ml及1%玫瑰色酸溶液（溶于8.0g/L氫氧化鈉液中）1ml，混合均勻。加熱溶解前，

加入1.2%～1.5%瓊脂可制成固體培養(yǎng)基。如培養(yǎng)物中雜菌不多，則培養(yǎng)基中不加玫瑰色酸

亦可。

MFC培養(yǎng)基可選用市售成品培養(yǎng)基。

5.2無菌濾膜：孔徑0.45μm，按無菌操作要求包扎，經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min，晾

干備用；或?qū)V膜放入燒杯中，加入蒸餾水或去離子水，煮沸滅菌3次，15min/次，前2次

煮沸后需更換水洗滌2～3次。

5.3無菌水：新制備的蒸餾水或去離子水經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min，備用。

5.4硫代硫酸鈉（Na2S2O3?5H2O）。

5.5乙二胺四乙酸二鈉（C10H14N2O8Na2?2H2O）。

5.6硫代硫酸鈉溶液：ρ（Na2S2O3?5H2O）=0.10g/ml

稱取硫代硫酸鈉10g，溶于適量蒸餾水或去離子水中，定容至100ml，現(xiàn)配。

5.7乙二胺四乙酸二鈉溶液：ρ（C10H14N2O8Na2?2H2O）=0.15g/ml

稱取乙二胺四乙酸二鈉15g，溶于適量蒸餾水或去離子水中，定容至100ml，此溶液保質(zhì)

期為30d。

6儀器和設(shè)備

6.1采樣瓶：1L或500ml帶螺旋帽或磨口塞的廣口玻璃瓶。

6.2高壓蒸汽滅菌器：121℃、101.3kpa。

6.3隔水式恒溫培養(yǎng)箱：溫度偏差±0.5℃。

6.4過濾裝置：配有砂芯濾器和真空泵，抽濾壓力勿超過-50kPa。

6.5pH計：準(zhǔn)確到0.1pH單位。

6.6一般實驗室常用儀器和設(shè)備。

注：玻璃器皿及采樣器具試驗前要按無菌操作要求包扎，121℃高壓蒸汽滅菌20min備用。

7樣品

7.1樣品采集

2

與其他項目一同采樣時，先單獨采集微生物水樣。采樣瓶不得用水樣沖洗，按無菌操作

要求采集水樣于滅菌的采樣瓶中。瓶內(nèi)須留下足夠的空間，用以搖勻水樣。

采集江、河、湖、庫等地表水水樣時，可握住瓶子下部直接將帶塞采樣瓶插入水中，距

水面10～15cm處，瓶口朝水流方向，拔瓶塞，使水樣灌入瓶內(nèi)然后蓋上瓶塞，將采樣瓶從

水中取出。如果沒有水流，可握住瓶子水平前推。水樣采好后，迅速扎上無菌包裝紙。

從水龍頭采集樣品時，不要選用漏水的龍頭，采水前可先將水龍頭打開至最大，放水3～

5min，然后將水龍頭關(guān)閉，用火焰灼燒約3min滅菌，開足龍頭，再放水1min，以充分除去水

管中的滯留雜質(zhì)。采樣時控制水流速度，小心接入瓶內(nèi)。

采集地表水、廢水樣品及一定深度的水樣時，可使用滅菌過的專用采樣裝置采樣。

在同一采樣點進(jìn)行分層采樣時，應(yīng)自上而下進(jìn)行，以免不同層次的攪擾。

如果采集的是含有余氯或經(jīng)過加氯處理的水樣，需在采樣瓶滅菌前加入硫代硫酸鈉溶液

（5.6），以除去余氯對細(xì)菌的抑制作用（每125ml容積加入0.1ml的硫代硫酸鈉溶液）；如

果采集的是重金屬離子含量較高的水樣，則在采樣瓶滅菌前加入乙二胺四乙酸二鈉溶液

（5.7），以消除干擾（每125ml容積加入0.3ml的乙二胺四乙酸二鈉溶液）。

注：10mg硫代硫酸鈉可保證去除水樣中1.5mg余氯，硫代硫酸鈉用量可根據(jù)水樣實際余氯量調(diào)整。

7.2樣品保存

采樣后2h內(nèi)檢測，否則，需10℃以下冷藏并不得超過6h。實驗室接樣后，不能立即開展

檢測的，應(yīng)將樣品放入0～4℃冰箱并2h內(nèi)測定。

8分析步驟

8.1樣品過濾

根據(jù)水樣的種類判斷水樣過濾體積，最小過濾體積為10ml，如過濾體積小于10ml時應(yīng)逐

級稀釋。理想的水樣過濾體積是濾膜上生長的糞大腸菌群菌落數(shù)為20～60個。當(dāng)最小過濾體

積為10ml時，濾膜上菌落密度仍過大，則應(yīng)對水樣進(jìn)行稀釋。參考過濾體積見表1。

表1水樣過濾體積參考表

過濾體積（ml）

水樣種類

1010.110-210-310-410-510-6

湖水、水源水▲▲▲

河水▲▲▲

生活污水▲▲▲

醫(yī)療機(jī)構(gòu)排放污水（處理后）▲▲▲

畜禽養(yǎng)殖業(yè)等排放廢水▲▲▲

用滅菌鑷子以無菌操作夾取濾膜貼放在已滅菌的過濾裝置上，固定好過濾裝置，將水樣

充分混勻后抽濾，以無菌水沖洗器壁2～3次。水樣過濾完成后，再抽氣約5s，關(guān)上開關(guān)。

3

8.2培養(yǎng)

用滅菌鑷子夾取濾膜移放在MFC培養(yǎng)基上，濾膜截留細(xì)菌面向上，濾膜應(yīng)與培養(yǎng)基完全

貼緊，兩者間不得留有氣泡，然后將培養(yǎng)皿倒置，放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，44.5±0.5℃培養(yǎng)24±2

h。

8.3結(jié)果判讀

MFC培養(yǎng)基上呈藍(lán)色或藍(lán)綠色的菌落為糞大腸菌群菌落，予以計數(shù)。

MFC培養(yǎng)基上呈灰色、淡黃色或無色的菌落非糞大腸菌群菌落，不予計數(shù)。

9結(jié)果計算與表示

9.1結(jié)果計算

計數(shù)濾膜上生長的糞大腸菌群菌落總數(shù)，按公式（1）計算1L水樣中的糞大腸菌群數(shù)：

C×1000

C1×f

Q（1）

式中：C——水樣中糞大腸菌群濃度，CFU/L；

C1——濾膜上生長的糞大腸菌群菌落總數(shù)，個；

1000——將過濾體積的單位由ml轉(zhuǎn)換為L；

Q——水樣過濾體積，ml；

f——水樣稀釋倍數(shù)。

9.2結(jié)果表示

測定結(jié)果保留兩位有效數(shù)字，大于等于100時以科學(xué)計數(shù)法表示，結(jié)果的單位為CFU/L。

平均值以幾何平均計算。若要報出“未檢出”時，過濾體積至少應(yīng)為100ml。

10精密度和準(zhǔn)確度

10.1精密度

6個實驗室對低濃度（約5.0×102CFU/L）、中濃度（約3.0×105CFU/L）和高濃度（約5.0×106

CFU/L）三個不同濃度糞大腸菌群的實際水樣和有證標(biāo)準(zhǔn)樣品（濃度為3670MPN/L，可接受

范圍為330～7710MPN/L）進(jìn)行了測定，實驗室內(nèi)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差范圍分別為5.3%～12%、

0.81%～2.1%、0.51%～4.2%和7.7%～9.8%；實驗室間相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為6.8%，3.9%，4.0%

和3.62%；實驗室間95%置信區(qū)間見表2。

4

表2實驗室間95%置信區(qū)間

低濃度（CFU/L）中濃度（CFU/L）高濃度（CFU/L）標(biāo)準(zhǔn)樣品（CFU/L）

95%置信95%置信95%置信95%置信

均值均值均值均值

區(qū)間區(qū)間區(qū)間區(qū)間

1.4×102～9.8×104～8.2×106～3.8×102～

2.0×1021.6×1051.6×1076.1×102

2.9×1022.6×1053.0×1079.9×102

10.2準(zhǔn)確度

6個實驗室對含糞大腸菌群濃度為3670MPN/L（370～7710MPN/L）的標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行了測

定，相對誤差范圍為-19%～-32%；相對誤差最終值為：-23%±10%。

注：微生物檢測數(shù)據(jù)為偏態(tài)分布，其測定結(jié)果全部經(jīng)以10為底對數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行計算。

11質(zhì)量保證和質(zhì)量控制

11.1培養(yǎng)基檢驗

更換不同批次培養(yǎng)基時要進(jìn)行陽性和陰性菌株檢驗，以確保其符合要求。

11.2培養(yǎng)基保存

配制好的培養(yǎng)基不宜保存過久，不能進(jìn)行多次融化操作，以少量勤配為宜。存放時應(yīng)避

免陽光直射，并且要避免雜菌侵入和水分蒸發(fā)。當(dāng)培養(yǎng)基顏色變化，或脫水明顯時應(yīng)廢棄不

用。

11.3空白試驗

每次試驗都要用無菌水做實驗室空白測定，培養(yǎng)后的濾膜上不得有任何菌落生長。否則，

該次樣品測定結(jié)果無效，應(yīng)查明原因后重新測定。

11.4陽性及陰性對照

糞大腸菌群測定的陽性菌株（如大腸埃希氏菌Escherichiacoli），陰性菌株（如產(chǎn)氣腸

桿菌Enterobacteraerogenes）。將標(biāo)準(zhǔn)菌株配成適宜濃度，按“8.1樣品過濾”要求使濾膜

上生長的菌落數(shù)為20～60個，然后按“8.2培養(yǎng)”要求培養(yǎng)，陽性菌株應(yīng)生長為藍(lán)色或藍(lán)

綠色菌落，陰性菌株應(yīng)生長為灰色、淡黃色、無色或無菌落生長。否則，該次樣品測定結(jié)果

無效，應(yīng)查明原因后重新測定。

12廢物處理

使用后的器皿及廢棄物須經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min后，器皿方可清洗，廢棄物作為

一般廢物處置。

5

中華人民共和國國家環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)

HJ□□□-201□

部分代替HJ/T347-2007

水質(zhì)糞大腸菌群的測定濾膜法

Waterquality-Determinationoffecalcoliform-

Membranefiltration

（征求意見稿）

水質(zhì)糞大腸菌群的測定濾膜法

1適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定水中糞大腸菌群的濾膜法。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于地表水、地下水和廢水中糞大腸菌群的快速測定。本標(biāo)準(zhǔn)不適用于渾濁度

較高的水體。

2術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。

2.1

糞大腸菌群fecalcoliforms

又稱耐熱大腸菌群。44.5℃培養(yǎng)24h，能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧及兼性厭氧革蘭氏陰

性無芽孢桿菌。

2.2

菌落形成單位Colony-FormingUnits,CFU

單位體積中的細(xì)菌群落總數(shù)。

3方法原理

水樣通過孔徑為0.45μm的濾膜過濾，細(xì)菌被截留在濾膜上，然后將濾膜置于含有乳糖

的培養(yǎng)基上，在特定的溫度（44.5℃）培養(yǎng)24h，在此培養(yǎng)溫度，不利于來自自然環(huán)境的大

腸菌群生長，而糞大腸菌群能生長并發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，在濾膜上呈藍(lán)色或藍(lán)綠色，其它非

糞大腸菌落呈灰色、淡黃色或無色。通過顏色判斷是否產(chǎn)酸產(chǎn)氣，從而確定是否有糞大腸菌

群存在，并通過呈藍(lán)色或藍(lán)綠色菌落計數(shù)，來測定水樣中糞大腸菌群濃度。

4干擾和消除

氯具有氧化性，較高濃度的重金屬離子具有毒性，它們都能破壞微生物細(xì)胞內(nèi)酶的活性，

最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡?？煞謩e加入硫代硫酸鈉和乙二胺四乙酸二鈉排除氯或重金屬的干擾。

5試劑和材料

除非另有說明，分析時均使用符合國家標(biāo)準(zhǔn)的分析純化學(xué)試劑。

5.1MFC培養(yǎng)基

成分：

胰胨10g

蛋白胨5g

1

酵母浸膏3g

氯化鈉5g

乳糖12.5g

膽鹽三號1.5g

1%苯胺藍(lán)水溶液10ml

1%玫瑰色酸溶液（溶于8.0g/L氫氧化鈉液中）10ml

制法：將上述培養(yǎng)基中的成分（除苯胺藍(lán)和玫瑰色酸外），溶解于1000ml蒸餾水或去離

子水中，調(diào)節(jié)pH值到7.4，分裝于小燒瓶內(nèi)，每瓶100ml，于115℃高壓蒸汽滅菌20min，

儲存于冷暗處備用。臨用前，按上述配方比例，用滅菌吸管分別加入已煮沸滅菌的1%苯胺

藍(lán)溶液1ml及1%玫瑰色酸溶液（溶于8.0g/L氫氧化鈉液中）1ml，混合均勻。加熱溶解前，

加入1.2%～1.5%瓊脂可制成固體培養(yǎng)基。如培養(yǎng)物中雜菌不多，則培養(yǎng)基中不加玫瑰色酸

亦可。

MFC培養(yǎng)基可選用市售成品培養(yǎng)基。

5.2無菌濾膜：孔徑0.45μm，按無菌操作要求包扎，經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min，晾

干備用；或?qū)V膜放入燒杯中，加入蒸餾水或去離子水，煮沸滅菌3次，15min/次，前2次

煮沸后需更換水洗滌2～3次。

5.3無菌水：新制備的蒸餾水或去離子水經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20min，備用。

5.4硫代硫酸鈉（Na2S2O3?5H2O）。

5.5乙二胺四乙酸二鈉（C10H14N2O8Na2?2H2O）。

5.6硫代硫酸鈉溶液：ρ（Na2S2O3?5H2O）=0.10g/ml

稱取硫代硫酸鈉10g，溶于適量蒸餾水或去離子水中，定容至100ml，現(xiàn)配。

5.7乙二胺四乙酸二鈉溶液：ρ（C10H14N2O8Na2?2H2O）=0.15g/ml

稱取乙二胺四乙酸二鈉15g，溶于適量蒸餾水或去離子水中，定容至100ml，此溶液保質(zhì)

期為30d。

6儀器和設(shè)備

6.1采樣瓶：1L或500ml帶螺旋帽或磨口塞的廣口玻璃瓶。

6.2高壓蒸汽滅菌器：121℃、101.3kpa。

6.3隔水式恒溫培養(yǎng)箱：溫度偏差±0.5℃。

6.4過濾裝置：配有砂芯濾器和真空泵，抽濾壓力勿超過-50kPa。

6.5pH計：準(zhǔn)確到0.1pH單位。

6.6一般實驗室常用儀器和設(shè)備。

注：玻璃器皿及采樣器具試驗前要按無菌操作要求包扎，121℃高壓蒸汽滅菌20min備用。

7樣品

7.1樣品采集

2

與其他項目一同采樣時，先單獨采集微生物水樣。采樣瓶不得用水樣沖洗，按無菌操作

要求采集水樣于滅菌的采樣瓶中。瓶內(nèi)須留下足夠的空間，用以搖勻水樣。

采集江、河、湖、庫等地表水水樣時，可握住瓶子下部直接將帶塞采樣瓶插入水中，距

水面10～15cm處，瓶口朝水流方向，拔瓶塞，使水樣灌入瓶內(nèi)然后蓋上瓶塞，將采樣瓶從

水中取出。如果沒有水流，可握住瓶子水平前推。水樣采好后，迅速扎上無菌包裝紙。

從水龍頭采集樣品時，不要選用漏水的龍頭，采水前可先將水龍頭打開至最大，放水3～

5min，然后將水龍頭關(guān)閉，用火焰灼燒約3min滅菌，開足龍頭，再放水1min，以充分除去水

管中的滯留雜質(zhì)。采樣時控制水流速度，小心接入瓶內(nèi)。

采集地表水、廢水樣品及一定深度的水樣時，可使用滅菌過的專用采樣裝置采樣。

在同一采樣點進(jìn)行分層采樣時，應(yīng)自上而下進(jìn)行，以免不同層次的攪擾。

如果采集的是含有余氯或經(jīng)過加氯處理的水樣，需在采樣瓶滅菌前加入硫代硫酸鈉溶液

（5.6），以除去余氯對細(xì)菌的抑制作用（每125ml容積加入0.1ml的硫代硫酸鈉溶液）；如

果采集的是重金屬離子含量較高的水樣，則在采樣瓶滅菌前加入乙二胺四乙酸二鈉溶液

（5.7），以消除干擾（每125ml容積加入0.3ml的乙二胺四乙酸二鈉溶液）。

注：10mg硫代硫酸鈉可保證去除水樣中1.5mg余氯，硫代硫酸鈉用量可根據(jù)水樣實際余氯量調(diào)整。

7.2樣品保存

采樣后2h內(nèi)檢測，否則，需10℃以下冷藏并不得超過6h。實驗室接樣后，不能立即開展

檢測的，應(yīng)將樣品放入0～4℃冰箱并2h內(nèi)測定。

8分析步驟

8.1樣品過濾

根據(jù)水樣的種類判斷水樣過濾體積，最小過濾體積為10ml，如過濾體積小于10ml時應(yīng)逐

級稀釋。理想的水樣過濾體積是濾膜上生長的糞大腸菌群菌落數(shù)為20～60個。當(dāng)最小過濾體

積為10ml時，濾膜上菌落密度仍過大，則應(yīng)對水樣進(jìn)行稀釋。參考過濾體積見表1。

表1水樣過濾體積參考表

過濾體積（ml）

水樣種類

1010.110-210-310-410-510-6

湖水、水源水▲▲▲

河水▲▲▲

生活污水▲▲▲

醫(yī)療機(jī)構(gòu)排放污水（處理后）▲▲▲

畜禽養(yǎng)殖業(yè)等排放廢水▲▲▲

用滅菌鑷子以無菌操作夾取濾膜貼放在已滅菌的過濾裝置上，固定好過濾裝置，將水樣

充分混勻后抽濾，以無菌水沖洗器壁2～3次。水樣過濾完成后，再抽氣約5s，關(guān)上開關(guān)。

3

8.2培養(yǎng)

用滅菌鑷子夾取濾膜移放在MFC培養(yǎng)基上，濾膜截留細(xì)菌面向上，濾膜應(yīng)與培養(yǎng)基完全

貼緊，兩者間不得留有氣泡，然后將培養(yǎng)皿倒置，放入恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，44.5±0.5℃培養(yǎng)24±2

h。

8.3結(jié)果判讀

MFC培養(yǎng)基上呈藍(lán)色或藍(lán)綠色的菌落為糞大腸菌群菌落，予以計數(shù)。

MFC培養(yǎng)基上呈灰色、淡黃色或無色的菌落非糞大腸菌群菌落，不予計數(shù)。

9結(jié)果計算與表示

9.1結(jié)果計算

計數(shù)濾膜上生長的糞大腸菌群菌落總數(shù)，按公式（1）計算1L水樣中的糞大腸菌群數(shù)：

C×1000

C1×f

Q（1）

式中：C——水樣中糞大腸菌群濃度，CFU/L；

C1——濾膜上生長的糞大腸菌群菌落總數(shù)，個；

1000——將過濾體積的單位由ml轉(zhuǎn)換為L；

Q——水樣過濾體積，ml；

f——水樣稀釋倍數(shù)。

9.2結(jié)果表示

測定結(jié)果保留兩位有效數(shù)字，大于等于100時以科學(xué)計數(shù)法表示，結(jié)果的單位為CFU/L。

平均值以幾何平均計算。若要報出“未檢出”時，過濾體積至少應(yīng)為100ml。

10精密度和準(zhǔn)確度

10.1精密度

6個實驗室對低濃度（約5.0×102CFU/L）、中濃度（約3.0×105CFU/L）和高濃度（約5.0×106

CFU/L）三個不同濃度糞大腸菌群的實際水樣和有證標(biāo)準(zhǔn)樣品（濃度