免疫標(biāo)記技術(shù)

免疫標(biāo)記技術(shù)

傳統(tǒng)免疫學(xué)技術(shù)一、凝集反應(yīng)已知Ag分子（未知）肉眼可見(jiàn)傳統(tǒng)免疫學(xué)技術(shù)二、沉淀反應(yīng)

可溶性Ag分子＋Ab?

Ag-Ab肉眼可見(jiàn)沉淀反應(yīng)和凝集反應(yīng)的靈敏度都較低免疫標(biāo)記技術(shù)一、將某種標(biāo)記物（*）與Ag/Ab分子連接Ag*/Ab*二、Ab*＋Ag?

Ag－Ab*

Ag*＋Ab?

Ab－Ag*用高靈敏的標(biāo)記物檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)Ag-Ab中標(biāo)記物

的有無(wú)或多少，來(lái)判斷結(jié)果常用標(biāo)記物：酶、熒光物質(zhì)、放射性同位素、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)、膠體金等免疫標(biāo)記技術(shù)的分類

一、據(jù)標(biāo)記物分

1.酶免疫分析

2.熒光免疫分析

3.放射免疫分析

4.化學(xué)發(fā)光免疫分析

5.金免疫分析免疫標(biāo)記技術(shù)的分類

二、據(jù)應(yīng)用分

1.免疫組織化學(xué)技術(shù)

2.免疫測(cè)定

免疫標(biāo)記技術(shù)的分類

三、免疫組織化學(xué)技術(shù)1.以組織或細(xì)胞作抗原2.應(yīng)用對(duì)組織細(xì)胞中的抗原作定性或定位檢測(cè)對(duì)液體標(biāo)本中抗體作定性或效價(jià)測(cè)定免疫標(biāo)記技術(shù)的分類

四、免疫測(cè)定1.用于液體標(biāo)本中可溶性抗原或抗體分子的定性、定量測(cè)定2.分類均相免疫測(cè)定非均相免疫測(cè)定免疫標(biāo)記技術(shù)的分類

四、免疫測(cè)定3.均相免疫測(cè)定Ag*+Ab?Ag*＿Ab+Ag*

Ag、Ab反應(yīng)后，不分離Ag*

－Ab和Ag*

，直接測(cè)定反應(yīng)前后標(biāo)記物活性改變免疫標(biāo)記技術(shù)的分類

四、免疫測(cè)定4.非均相免疫測(cè)定Ag※+Ab?Ag※＿Ab+Ag※Ag+Ab※?Ag＿Ab※+Ab※Ag、Ab反應(yīng)后，先將(Ag＿Ab)※與游離Ag※

/Ab※分離，再測(cè)定(Ag＿Ab)※中標(biāo)記物免疫標(biāo)記技術(shù)的分類

四、免疫測(cè)定4.非均相免疫測(cè)定固相法：Ag、Ab在固體表面反應(yīng)，如酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)等液相法：Ag、Ab在水溶液中反應(yīng)酶免疫分析基本原理

一、將酶分子與Ag/Ab分子連接：AgE/AbE

既有酶活性，又有免疫活性二、AbE＋Ag?

Ag－AbE

AgE＋Ab?

AgE－Ab

↓加酶底物

Ag-Ab中的酶催化底物進(jìn)行顯色反應(yīng)三、據(jù)顯色情況判斷結(jié)果酶免疫測(cè)定

ELISAp162固相抗原載體標(biāo)本雙抗體夾心法顯色包被酶免疫定位一、酶免疫組織化學(xué)技術(shù)p166酶免疫定位二、酶免疫印跡試驗(yàn)

p1681.SDS－PAGE電泳：將各種蛋白質(zhì)抗原分離為不同區(qū)帶2.將蛋白質(zhì)抗原區(qū)帶轉(zhuǎn)移到NC膜上3.依次與第一抗體和酶標(biāo)第二抗體反應(yīng)4.加入酶不溶性底物，使抗原區(qū)帶染色熒光免疫分析一、熒光免疫測(cè)定(FIA)p164時(shí)間分辨熒光免疫測(cè)定TrFIA1.標(biāo)記物：Eu3+等鑭系元素離子標(biāo)記抗體2.Eu3+-β-二酮體螯合物能發(fā)出長(zhǎng)壽命的高強(qiáng)度熒光3.延時(shí)測(cè)量長(zhǎng)壽命熒光，以消除背景熒光干擾Eu3+螯合物熒光特點(diǎn)及測(cè)量TrFIA雙抗體夾心法抗原抗體反應(yīng)熒光免疫分析二、熒光免疫組織化學(xué)技術(shù)p166

標(biāo)記物：異硫氰酸熒光素(FITC)等抗體芯片p171抗體芯片一、信號(hào)檢測(cè)儀器掃描檢測(cè)反應(yīng)信號(hào)及其強(qiáng)度來(lái)判斷樣品中靶分子及其量激光共聚焦掃描儀二、高通量、微型化和自動(dòng)化地對(duì)生物液體、細(xì)胞及組織中的成分進(jìn)行準(zhǔn)確、快速、大信息量的檢測(cè)抗原抗體反應(yīng)的應(yīng)用

高特異、高靈敏、高通量的抗原抗體反應(yīng)檢測(cè)技術(shù)已廣泛用于生命科學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域抗原抗體反應(yīng)的應(yīng)用一、疾病診斷與研究：感染性疾病、腫瘤、遺傳病、自身免疫病、內(nèi)分泌疾病等二、3P醫(yī)學(xué)：預(yù)防(preventive)醫(yī)學(xué)、預(yù)測(cè)(predictable)醫(yī)學(xué)和個(gè)性化(personal)醫(yī)療三、藥物研究、檢測(cè)和篩選