化妝品中間苯二酚的檢測(cè)方法

PAGE附件9：化妝品中間苯二酚的檢測(cè)方法1適用范圍本方法規(guī)定了采用液相色譜法測(cè)定化妝品中間苯二酚（CAS：108-46-3）含量的方法。本方法適用于非染發(fā)類發(fā)用產(chǎn)品中間苯二酚含量的測(cè)定。2方法提要樣品在經(jīng)過提取后，經(jīng)高效液相色譜儀分離，二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，根據(jù)峰面積定量，以標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算含量。本方法對(duì)間苯二酚的檢出限為0.001μg，定量下限為0.003g；取樣品0.25g，則檢出濃度為16g/g，最低定量濃度為45g/g。3試劑和材料除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，水為一級(jí)實(shí)驗(yàn)用水。以下操作均在避光條件下進(jìn)行。3.1間苯二酚，純度＞99.0%。3.2甲醇，色譜純。3.3甲醇水溶液，甲醇+水（20+80）。3.4間苯二酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（ρ=0.5g/L）：稱取間苯二酚0.025g，精確到0.0001g，置于50mL棕色容量瓶中，加入甲醇水溶液（3.3）溶解并定容至50mL，即得質(zhì)量濃度為0.5mg/mL的間苯二酚標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液。避光保存，5日內(nèi)穩(wěn)定。3.5系列濃度間苯二酚標(biāo)準(zhǔn)溶液：配制質(zhì)量濃度分別為1μg/mL、10μg/mL、50μg/mL、100μg/mL和200μg/mL的系列間苯二酚標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。4儀器4.1高效液相色譜儀：具有二極管陣列檢測(cè)器。4.2分析天平：感量0.0001g。4.3超聲波清洗器。4.4渦旋振蕩器。5測(cè)定步驟5.1樣品處理稱取試樣0.25g，精確至0.001g，置于25mL具塞比色管中，加入甲醇水溶液（3.3）20mL，渦旋60s分散均勻，超聲（功率：400W）提取15min，冷卻到室溫后，用甲醇水溶液（3.3）定容至25mL刻度線，渦旋振蕩搖勻，混液過0.45m有機(jī)系濾膜，濾液可根據(jù)需要用甲醇水溶液（3.3）進(jìn)行稀釋，保存于2mL棕色進(jìn)樣瓶中作為待測(cè)樣液，備用。避光保存，5日內(nèi)穩(wěn)定。5.2色譜條件色譜柱：C18柱，250mm×4.6mm，5m；或等效色譜柱；流動(dòng)相：甲醇+水（20+80）；流速：1.0mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：274nm；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：20L。5.3測(cè)定在5.2色譜條件下，取系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液（3.5）分別進(jìn)樣，進(jìn)行色譜分析，以系列標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程。取“5.1”項(xiàng)下處理得到的待測(cè)溶液進(jìn)樣，根據(jù)測(cè)定成分的峰面積，代入回歸方程計(jì)算間苯二酚的質(zhì)量濃度。按“6計(jì)算”，計(jì)算樣品中間苯二酚的含量。5.4平行實(shí)驗(yàn)按以上步驟操作，對(duì)同一樣品獨(dú)立進(jìn)行平行測(cè)定獲得的兩次獨(dú)立測(cè)試結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10%。6計(jì)算式中：w——化妝品中間苯二酚的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%；m——樣品取樣量，g；r——測(cè)定成分的峰面積代入回歸方程計(jì)算所得的間苯二酚質(zhì)量濃度，g/mL；V——樣品定容體積，mL；D——稀釋倍數(shù)（不稀釋則為1）。7回收率和精密度方法的