(高清版)GB 7411-2009 棉花種子產(chǎn)地檢疫規(guī)程

代替GB7411—1987棉花種子產(chǎn)地檢疫規(guī)程2009-04-27發(fā)布中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布I本標(biāo)準(zhǔn)的全部技術(shù)內(nèi)容為強(qiáng)制性。本標(biāo)準(zhǔn)代替GB7411—1987《棉花原(良)種產(chǎn)地檢疫規(guī)程》。本標(biāo)準(zhǔn)與GB7411—1987相比主要變化如下：——對棉花種子產(chǎn)地檢疫的程序，其調(diào)查檢測、室內(nèi)監(jiān)測及疫情處理等方面進(jìn)行了補(bǔ)充規(guī)定。附錄。本標(biāo)準(zhǔn)由全國植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會提出并歸口。本標(biāo)準(zhǔn)起草單位：全國農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心、湖北省植物保護(hù)總站。本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：1棉花種子產(chǎn)地檢疫規(guī)程1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了棉花種子產(chǎn)地檢疫的程序和方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各級植物檢疫機(jī)構(gòu)對棉花種子繁育基地實施產(chǎn)地檢疫。2術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。對植物、植物產(chǎn)品或其他限定物進(jìn)行官方的直觀檢查以確定是否存在有害生物，是否符合植物檢疫對確定是否存在有害生物或為鑒定有害生物而進(jìn)行的除目測以外的官方檢查。對受其威脅的地區(qū)具有潛在經(jīng)濟(jì)重要性、但未在該地區(qū)發(fā)生，或雖已發(fā)生但分布不廣并進(jìn)行官方防治的有害生物。3應(yīng)檢疫的有害生物3.1國務(wù)院農(nóng)業(yè)行政主管部門公布的全國農(nóng)業(yè)植物檢疫性有害生物。3.2省級農(nóng)業(yè)行政主管部門公布的補(bǔ)充農(nóng)業(yè)植物檢疫性有害生物。4原理棉田檢疫性有害生物的形態(tài)學(xué)特征及其寄主范圍、地理分布、生物學(xué)特性、危害癥狀和傳播途徑(參見附錄A)是該標(biāo)準(zhǔn)的科學(xué)依據(jù)。5.1選址受理根據(jù)棉花種子生產(chǎn)單位和個人的申請，依據(jù)常規(guī)普查和調(diào)查結(jié)果，決定是否出具產(chǎn)地選址合格檢疫證明，對種子生產(chǎn)進(jìn)行檢疫監(jiān)督指導(dǎo)(參見附錄B)。5.2產(chǎn)地檢疫受理植物檢疫機(jī)構(gòu)審核棉花種子生產(chǎn)單位和個人提出的申請和提供的相關(guān)材料，決定是否受理。決定6調(diào)查檢測6.1.1調(diào)查時間根據(jù)檢疫性有害生物發(fā)生規(guī)律、氣候條件和棉花生育期確定調(diào)查時間和次數(shù)。棉花黃萎病一般為現(xiàn)蕾開花期和花鈴期連陰雨后7d～10d分別調(diào)查1次，必要時可增加調(diào)查次數(shù)。26.1.2調(diào)查方法目測調(diào)查整個棉花種子的生產(chǎn)基地(點),確定抽樣調(diào)查田。每個品種抽樣面積不低于當(dāng)?shù)胤狈N總面積的10%。棉花黃萎病有針對性的選擇地勢低洼、易積水、連作棉田作為抽樣調(diào)查田。采用平行跳躍式方法取樣，間隔4行調(diào)查1行，田邊留5株設(shè)調(diào)查點，每點連續(xù)調(diào)查20株，間隔30株～50株再取第二點調(diào)查。每塊田取樣點數(shù)不低于5點，總調(diào)查株數(shù)不少于100株。6.2田間檢驗根據(jù)檢疫性有害生物危害狀進(jìn)行田間現(xiàn)場初步檢驗，以檢疫性有害生物田間為害特征和目測形態(tài)特征為依據(jù)，能夠直接鑒定的，將結(jié)果填入《有害生物調(diào)查抽樣記錄表》(見附錄C)和《有害生物樣本鑒可疑的有害生物取樣后妥善保存，在樣品袋上記載樣品品種名稱、種植地點、采集時間、采集人，作室內(nèi)檢測。棉花黃萎病按照附錄A中的A.2.1的癥狀描述調(diào)查，對矮化、落葉等棉花黃萎病疑似棉株選擇第三至第六盤未木質(zhì)化果枝或折斷葉柄觀察，對符合癥狀描述的棉株計數(shù)，填入《有害生物調(diào)查抽樣記錄表》(見附錄C)。疑似棉株裝入樣品袋中，妥善保存。在樣品袋上記載樣品品種名稱、種植地點、采集時6.3田間圖像保存有條件的拍攝產(chǎn)地檢疫的對象田分品種全景照片、疑似病株照片、癥狀特寫照片保存。7室內(nèi)檢測7.1檢測方法可疑的有害生物按照相應(yīng)的鑒定方法進(jìn)行室內(nèi)鑒定，有標(biāo)準(zhǔn)的按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，沒有標(biāo)準(zhǔn)的根據(jù)目標(biāo)有害生物的特點選擇常規(guī)檢測方法。棉花黃萎病疑似病株，按照附錄A、附錄E的方法對維管束變色的棉株進(jìn)行培養(yǎng)、鑒定。7.2結(jié)果判定根據(jù)檢測結(jié)果進(jìn)行檢疫結(jié)果判定，并將實驗室檢測鑒定結(jié)果填入《有害生物樣本鑒定報告》(見附錄D)和《檢疫檢驗結(jié)果通知單》。必要時保存標(biāo)本(參見附錄F)。8疫情處理經(jīng)田間調(diào)查發(fā)現(xiàn)有檢疫性有害生物的，指導(dǎo)生產(chǎn)單位和個人實施檢疫處理。對于棉花黃萎病病田種子可在植物檢疫部門的監(jiān)督下進(jìn)行種子消毒處理后(參見附錄G),限制在疫情發(fā)生區(qū)域內(nèi)使用，不得調(diào)入無病區(qū)。9.1經(jīng)田間調(diào)查或室內(nèi)檢測，未發(fā)現(xiàn)檢疫性有害生物的棉種生產(chǎn)基地(點),簽發(fā)《產(chǎn)地檢疫合格證》(見附錄H)。9.2發(fā)現(xiàn)檢疫性有害生物，經(jīng)檢疫除害處理合格的，發(fā)給《產(chǎn)地檢疫合格證》;經(jīng)檢疫除害處理不合格的，不簽發(fā)《產(chǎn)地檢疫合格證》,并告知產(chǎn)地檢疫申請單位或個人。10檔案管理對于在產(chǎn)地檢疫工作中的原始調(diào)查數(shù)據(jù)、表格、標(biāo)本等資料檔案妥善保存，保存時間不少于2年。3(資料性附錄)棉花黃萎病癥狀特征及生物學(xué)特性A.2田間癥狀和病原形態(tài)特征A.2.1田間癥狀棉花整個生育期都可受害，田間一般現(xiàn)蕾后開始發(fā)病，花鈴期達(dá)到發(fā)病高峰，病株葉片萎蔫枯死。常見癥狀可區(qū)分為以下類型：a)黃斑型。植株基部葉片先表現(xiàn)癥狀，逐步向上部發(fā)展。發(fā)病期，病葉邊緣稍向上卷，主脈間出現(xiàn)黃色斑塊，形狀不規(guī)則，后病斑擴(kuò)大，色澤加深，但主脈及附近葉肉仍保持綠色，成西瓜皮狀，病葉不脫落；b)葉枯型。病葉有褐色局部枯斑或掌狀枯斑，葉片枯死后即脫落，但一般不形成光桿；c)急性萎蔫型。在結(jié)鈴期，大雨過后出現(xiàn)急性癥狀，葉片主脈間生水浸狀褪綠斑，很快萎蔫下垂；d)落葉型。病株上部葉片先出現(xiàn)癥狀，褪綠，向下卷曲，萎垂，迅速脫落，病株枯死前即成光桿，黃萎病病株根、莖部維管束變褐色，但色澤較枯萎病淺。A.2.2病原形態(tài)特征在PAD培養(yǎng)基上菌落白色至灰色，絨毛狀，產(chǎn)生黑色顆粒狀微菌核。分生孢子梗直立，有隔，無色至淡色，(110μm～130μm)×2.5μm,梗上每節(jié)輪生3個～4個小梗(輪枝),可有1輪～4輪，頂端也生小梗(頂枝)。小梗尺度(16μm～35μm)×(1μm～2.5μm),小梗端部的產(chǎn)孢瓶體連續(xù)產(chǎn)生分生孢子，聚集成易散的頭狀孢子球。分生孢子無色，單胞，橢圓形、圓筒形，大小(2.5μm～8μm)×(1.4μm~3.2μm)。微菌核不規(guī)則球形或長形，黑褐色。大小(50μm～200μm)×(15μm～50μm)。A.3生物學(xué)特性和傳播途徑A.3.1生物學(xué)特性棉花黃萎病菌的生長最適溫度為20℃~25℃,在10℃~30℃都能生長，在33℃絕大多數(shù)菌株不生長，但也有耐高溫菌株，可緩慢生長。土壤含水量20%時有利于微菌核形成，40%以上不利于其形成。微菌核可耐80℃高溫和一30℃低溫。微菌核萌發(fā)最適溫度25℃~30℃。A.3.2傳播途徑棉花黃萎病病原菌主要以微菌核在土壤中越冬，也能在棉籽內(nèi)外、病殘體以及帶菌的棉籽殼、棉籽餅和未腐熟的土雜肥中越冬。帶菌種子是遠(yuǎn)距離傳病的重要途徑，此外帶菌土壤、糞肥、棉籽餅、棉籽殼、農(nóng)機(jī)具和流水等也是傳病途徑。4(資料性附錄)棉花種子生產(chǎn)防疫措施B.1基地的選擇基地應(yīng)建立在經(jīng)嚴(yán)格調(diào)查無棉花黃萎病發(fā)生的地區(qū)。在棉花黃萎病發(fā)生的地區(qū)，基地應(yīng)具有大面積的無病田。無病田周圍具有隔離條件(遠(yuǎn)離交通要道和村莊，周圍不與棉田相連，地勢稍高),發(fā)現(xiàn)檢疫對象后能夠進(jìn)行水旱輪作。B.2種子的來源和消毒基地種子來自無病區(qū)，有《植物檢疫證書》,并經(jīng)檢疫不帶檢疫對象。播種前使用有效種子處理劑實施消毒處理。B.3防疫措施基地不承擔(dān)各種棉花品種(品系)區(qū)試任務(wù)?；貎?nèi)確需引進(jìn)的新品種和繁殖材料，應(yīng)報請當(dāng)?shù)刂矙z部門同意。引進(jìn)材料進(jìn)行嚴(yán)格消毒處理后，在隔離觀察圃內(nèi)利于發(fā)病的環(huán)境條件下，試種2年以上，未發(fā)現(xiàn)檢疫對象方能在基地內(nèi)使用?；貎?nèi)嚴(yán)禁使用未經(jīng)熱榨的棉餅及其下腳料還田。防止病區(qū)與無病區(qū)間流水串灌。不使用帶菌土育苗移栽，營養(yǎng)缽育苗土壤要經(jīng)過棉隆消毒處理。禁止從病區(qū)引進(jìn)帶菌土的瓜、菜秧苗等?；貞?yīng)使用專用農(nóng)具管理或耕鋤、專場曬花、專倉存放、專機(jī)軋花。B.4疫情處理發(fā)現(xiàn)棉花黃萎病的棉籽不作種用。嚴(yán)格封鎖病田：作好病株標(biāo)記；拔除并集中銷毀病株及病殘體，清除雜草寄主；及時消毒處理病點5(規(guī)范性附錄)有害生物調(diào)查抽樣記錄表表C.1有害生物調(diào)查抽樣記錄表編號：生產(chǎn)/經(jīng)營者地址及郵編聯(lián)系/負(fù)責(zé)人聯(lián)系電話調(diào)查日期抽樣地點樣品編號植物名稱(中文名和學(xué)名)品種名稱植物生育期調(diào)查代表株數(shù)或面積植物來源癥狀描述：發(fā)生與防控情況及原因：抽樣方法、部位和抽樣比例：備注：抽樣單位(蓋章):填表人(簽名):生產(chǎn)/經(jīng)營者現(xiàn)場負(fù)責(zé)人注：本單一式兩聯(lián)，第一聯(lián)抽樣單位存檔，第二聯(lián)交受檢單位。6(規(guī)范性附錄)有害生物樣本鑒定報告表D.1有害生物樣本鑒定報告植物名稱品種名稱植物生育期樣品數(shù)量取樣部位樣品來源送檢日期送檢人送檢單位聯(lián)系電話檢測鑒定方法：檢測鑒定結(jié)果：備注：鑒定人(簽名):審核人(簽名):鑒定單位蓋章：注：本單一式三份，檢測單位、受檢單位和檢疫機(jī)構(gòu)各一份。7(資料性附錄)棉花黃萎病的分離培養(yǎng)與檢測E.1培養(yǎng)基2%水瓊脂平板培養(yǎng)基：瓊脂20g,水1000mL。PSA平板培養(yǎng)基：馬鈴薯200g,蔗糖15g,瓊脂20g,水1000mL。棉籽餅粉瓊脂培養(yǎng)基：棉籽餅粉10g,95%乙醇(酒精)17mL,鏈霉素40μg/mL,瓊脂7.5g,水E.2分離培養(yǎng)與檢測將維管束變色的棉花莖稈剪切成0.5cm長小段，流水沖洗24h,或用含2%～3%有效氯的次氯酸鈉液表面消毒1min～2min,無菌水沖洗后，植于2%水瓊脂培養(yǎng)基平板上，在22C～25℃下培養(yǎng)10d～15d。用解剖鏡檢查病莖稈段端部有無輪枝狀分生孢子梗產(chǎn)生。如有，則移植到PSA培養(yǎng)基平板上，繼續(xù)培養(yǎng)。若生成微菌核，則為大麗輪枝飽。也可以將表面消毒的病莖稈，植床于棉籽餅粉瓊脂培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)10d～15d,根據(jù)輪枝與微菌核形成，確定為大麗輪枝飽。E.3保濕培養(yǎng)與檢測取維管束變色的棉花莖稈若干小段，清洗干凈后用70%乙醇(酒精)浸泡表面消毒3min,獲0.1%升汞(升汞1g,濃鹽酸2.5mL,水1000mL)消毒1min～3min,并用消毒水沖洗3次。新鮮棉株可以先在95%乙醇(酒精)中預(yù)浸后在酒精燈火焰上燒去殘余乙醇(酒精),撕去表皮。將消毒處理后的莖稈剪切成3cm～5cm長小段，置于滴有無菌水滴的載玻片上，每片放3個～4個，放入墊有雙層吸水紙的培養(yǎng)皿內(nèi)，蓋好皿蓋，在22℃~22.5℃或27℃~30℃溫箱或室內(nèi)保濕培養(yǎng)2d～5d,長出白色菌絲體時，挑取少量菌絲于滴有無菌水滴的載玻片水滴中，輕輕攪動分散，在生物顯微鏡下觀察，根據(jù)輪枝狀孢子梗的形態(tài)，確定為大麗輪枝孢。8(資料性附錄)標(biāo)本制作與保存F.1干標(biāo)本檢疫性有害生物標(biāo)本晾干后，填寫標(biāo)簽，注明標(biāo)本的來源(寄主，采集時間、地點、品種名稱、采集人)以及制作時間、制作人等。標(biāo)本盒四角放置驅(qū)蟲劑，置于干燥、陰涼的木柜中保存。F.2液浸標(biāo)本昆蟲幼蟲用沸水燙死后立即轉(zhuǎn)入70%乙醇(醫(yī)用酒精)浸泡保存。9(資料性附錄)棉花種子處理方法G.1硫酸脫絨法G.1.1機(jī)械脫絨——棉籽泡沫酸脫絨技術(shù)：將濃硫酸稀釋到8%～10%的濃度后，按酸絨比1:6的硫酸用量，根據(jù)棉籽含絨率的高低，加入一定量的發(fā)泡劑并進(jìn)行充分?jǐn)嚢?，在壓縮空氣的作用下，使混合液泡沫化，依靠棉絨的毛細(xì)管作用吸收酸液?！拮严×蛩崦摻q技術(shù)：稀硫酸脫絨是將硫酸稀釋到濃度8%～10%后，加入一定量的活化劑，將棉籽與稀硫酸液按3:1左右的比例，在攪拌槽內(nèi)進(jìn)行浸泡攪拌，使棉籽全部潤濕，然后通過離心機(jī)將過剩的酸液分離出來以便重新使用；而棉籽短絨上附著的稀硫酸液只占10%左右。將與泡沫酸液混合(或與稀硫酸液混合)的棉籽經(jīng)過烘干，硫酸液中的水分蒸發(fā)，使硫酸濃度增高，碳化棉籽表面短絨；通過摩擦機(jī)內(nèi)部的強(qiáng)烈摩擦作用，磨掉棉籽表面碳化的短絨，成為光籽。脫絨后的光籽可進(jìn)行精選和拌藥包衣。G.1.2手工脫絨90%工業(yè)濃硫酸每500g可脫棉籽2.5kg～3.5kg。先將曬熱后的棉籽放在容積5倍于棉種的陶制容器(缸、盆等)內(nèi)，再將相應(yīng)量的硫酸徐徐倒入，邊倒邊拌，直至短絨全部被硫酸溶解(燒掉),棉種呈烏黑發(fā)亮即可，一般脫絨時間不超過15min。脫絨后立即用大量清水將種子漂洗干凈，直至漂洗水不顯黃色、沒有酸味(用舌尖舔無酸味、不麻舌尖為準(zhǔn))。洗凈后的種子直接播種或攤曬干后播種。G.2棉籽藥劑處理——拌種方法：選用50%多菌靈可濕性粉劑，或70%五氯硝基苯可濕性粉劑，或70%甲基托布津可濕性粉劑，按棉花種子重量0.8%的用量拌種；——浸種方法：選用50%多菌靈可濕性粉劑25g～50g或50%敵克松可濕性粉劑20g,加水400g~500g搓拌棉種500g,晾干后播種?；蛴?%菌毒清水劑300倍～500倍液浸種24h后，撈取晾干直接播種； “402”溫浸種法：先將定量的熱水倒入水缸中，并將水溫調(diào)到65℃左右，再按既定的濃度倒入“402”藥液，攪拌均勻，最后倒入經(jīng)硫酸脫絨的棉籽，每100kg干棉籽用250kg～300kg藥液 (藥液量為棉籽量的2.5倍～3倍)。用麻袋或木蓋封嚴(yán)，進(jìn)行藥液溫湯浸悶種。在浸悶過程中要攪拌2次～3次，使上下溫度一致，始終保持水溫在55℃~60℃之間，浸悶種半小時即撈出?？梢噪S處理隨播種，也可以撈出攤在曬場上晾干備用。G.3病點土壤消毒處理技術(shù)棉花生育期間或收花后拔棉桿前，將病株周圍的病殘體拾凈，表土(1.67c