反芻動(dòng)物消化道排泄物原蟲診斷技術(shù)規(guī)范

2GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)GB/T25169-2022畜禽糞便監(jiān)GB/T36195-2018畜禽糞便無(wú)害化處4.1消化道排泄物采集34.1.1選擇適當(dāng)?shù)氖占ぞ?.1.2動(dòng)物準(zhǔn)備4.1.3采集技術(shù)4.1.3.1對(duì)于牛、綿羊和山羊，最常見的方法是觀察動(dòng)物的排便。一旦動(dòng)物開始排便，輕輕地直接從直腸采集新鮮的消化道排泄物，或通過戴手4.1.3.2如動(dòng)物剛剛排便并且已知排泄物是新鮮的，則可以從地面收集消化道排4.1.4采集量4.1.5采集時(shí)注意事項(xiàng)4.1.5.3因反芻動(dòng)物原蟲的卵囊排出可能有間歇性，建議4.1.6動(dòng)物相關(guān)信息4.1.6.1應(yīng)記錄動(dòng)物相關(guān)的病史，例如動(dòng)物的癥狀、近期飲食變化以及與其他有類似癥狀的動(dòng)物接觸4.1.6.2應(yīng)記錄動(dòng)物近期是否接受了抗寄生蟲藥物治療，因?yàn)檫@可能會(huì)影響消化道排泄物中原蟲的存4.2消化道排泄物運(yùn)輸4.2.1.1將收集到的排泄物放入帶有緊密蓋子的干凈、防漏容器中。4.2.1.2在容器上貼上動(dòng)物標(biāo)識(shí)、收集日期4.2.1.3盡快將采集的消化道排泄物運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室。如果無(wú)法立即運(yùn)輸，請(qǐng)將消化道排泄物存放在冰4.3消化道排泄物檢查4.3.1直接檢查4.3.1.1在顯微鏡載玻片上，將少量排泄物與一滴生理鹽水或水混合，蓋上蓋玻片。盡快在顯微鏡下養(yǎng)體等，注意觀察其形狀、大小和運(yùn)動(dòng)及具有任何4常使用革蘭氏染色、抗酸染色、改良抗酸染色、金胺-酚染色等4.3.2.1鐵蘇木精染色法使用鐵明礬溶液進(jìn)行對(duì)比染色，通常染色1-2分鐘。再次用水沖洗掉多余染料。將涂片置于顯微鏡下，4.3.2.2改良抗酸染色法1-2分鐘。再次用水沖洗掉多余染料。將涂片置于顯微鏡下，先用低倍鏡觀察，再切換到高倍鏡觀察。4.3.2.3金胺-酚染色法金胺溶液進(jìn)行初染。將金胺溶液滴在涂片上，覆蓋整個(gè)樣本區(qū)域，染色約10-15分鐘。用水輕輕沖洗掉多余染料。使用酚溶液進(jìn)行對(duì)比染色，通常染色1-2分鐘。再次用水沖洗掉多余染料。將涂片置于顯微4.4消化道排泄物檢查后處理5.1牛羊賈第蟲5.1.1滋養(yǎng)體細(xì)胞核，位于蟲體前1/2處，每個(gè)核內(nèi)有一個(gè)核仁。蟲體具有四對(duì)鞭毛，分別位于前側(cè)、后側(cè)、腹側(cè)和5.1.2包囊5包囊呈橢圓形，長(zhǎng)度為8～14μm，寬度為7～10μm。具有較厚的包囊壁，與蟲卵囊通常呈橢圓形或圓形。卵囊的大小因球蟲種類而異，一般在10～30微米(μm）之間。卵囊壁化卵囊，內(nèi)含兩個(gè)孢子囊，每個(gè)孢子囊含有4個(gè)子孢子。子孢子呈新月形或香蕉形，一端略尖，一端較5.3羊球蟲卵囊通常呈橢圓形或圓形。卵囊的大小因球蟲種類而異，一般在10～30微米(μm）之間。卵囊壁孢子囊，每個(gè)孢子囊含有4個(gè)子孢子。子孢子呈新月形或香蕉形，一端略尖，一端較鈍圓。它們?cè)阪咦勇涯页蕡A形或橢圓形，有時(shí)略呈不對(duì)稱形狀。卵囊大小一般為4～5微米(μm），是所有動(dòng)物寄生含有4個(gè)子孢子，子孢子呈新月形或香蕉形，一端略尖，一端較鈍圓。卵囊內(nèi)還有一個(gè)較大的殘?bào)w，通5.5.1滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體呈卵圓形或略呈三角形，前端較平，后端略尖。大小約為8～20微米(μm）長(zhǎng)，4～8μm5.6纖毛蟲5.6.1.1滋養(yǎng)體槽巴克斯頓纖毛蟲的滋養(yǎng)體呈卵圓形或梨形，前端較平，后端略尖。滋養(yǎng)體的尺寸約為30～150×25～120微米(μm）。滋養(yǎng)體表面光滑，具有波動(dòng)膜，可以進(jìn)行自主運(yùn)動(dòng)。滋養(yǎng)體前端有一大的臘腸5.6.1.2包囊6包囊呈球形或卵圓形，直徑約為40～60微米(μm有兩層囊膜。囊內(nèi)包藏著一個(gè)蟲體；有時(shí)有5.6.2.1滋養(yǎng)體滋養(yǎng)體通常呈卵圓形或梨形，大小約為30～150×25～120微米(μm）。蟲體前端有一略為傾斜的5.6.2.2包囊7[1]孔繁瑤.家畜寄生蟲學(xué),第二版（修訂版）.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社:北京,2010.[2]HendrixCM,RobinsonE.Diagnosticparasitologyforveterinarytechnicians,sixth.Elsevier:Missouri,2023.[3]BowmanDD.Georg