藥物分離與純化試題庫(kù)

《藥物分離與純化技術(shù)》試卷

用題班級(jí):

題號(hào)一二三四五六七八九十合計(jì)

分?jǐn)?shù)

閱卷人得分

一、名詞解釋?zhuān)啃☆}2分，共50分）

1.相似相容原理：

2.萃取法：

3.透析法：

4.臨界溫度：

5.梯度洗脫：

6.濃差極化現(xiàn)象：

7.鹽溶現(xiàn)象：

8.生物技術(shù)：

9.生物活性物質(zhì)：

10.NDG:

11.藥物分離與純化技術(shù)：

12.鹽析：

13.凝聚作用：

14.梯度洗脫：

15.臨界壓力：

16.夾帶劑:

17.超濾法：

18.電泳法：

19.離子交換層析：

20.膜分離：

21.凝膠極化：

22.物理萃?。?/p>

23.乳化現(xiàn)象：

24.超臨界流體：

25.遷移率：

閱卷人得分

二、填空題（每空1分，共50分）

1.根據(jù)分離里混合物內(nèi)是否有相界面存在，混合物可分為和

兩大類(lèi)。

2.藥物分離與純化過(guò)程一般情況下主要分為與兩大類(lèi)。

3.按生產(chǎn)過(guò)程的性質(zhì)劃分，分離與純化工藝過(guò)程可劃分為四個(gè)階段，即分離純化前的預(yù)處理、

4.沉淀常用的方法有：、、、

及反應(yīng)沉淀法等。

5.細(xì)胞破碎主要有兩類(lèi)方法，機(jī)械法和非機(jī)械法，常用的機(jī)械法有：

高壓勻漿法等，常用的非機(jī)械法主要有：、—

、凍結(jié)法、化學(xué)滲透法等。

6.層析技術(shù)中常用的吸附劑有：_____________、______________、______________

硅酸鋁、硅藻土、聚酰胺等。

7.常用的親脂性有機(jī)溶劑主要有：、、、苯、乙酸乙酯、

二氯甲烷等。

8.常用的親水性有機(jī)溶劑主要有：、、竺寸O

9.溶劑提取中常用的提取方法有：、、、回流提取法及連

續(xù)提取法等。

10.蛋白質(zhì)鹽析常用的中性鹽，主要有硫酸鈉、—_________、___________、___________、磷酸鈉等。

11.離子交換劑有_______________和_________________（如：竣甲基纖維素；CM-纖維素）。

12.色譜法，又稱層析法。根據(jù)其分離原理，有一_________、___________、___________與排阻色譜等方

法。

13.常用的膜分離過(guò)程有：__________、__________、____________、反滲透及滲析等。

14.克服濃差極化現(xiàn)象的措施主要有：__________、__________、錯(cuò)流、切流、以及改變速度、___________、

和料液濃度等。

15.以菌體或蛋白質(zhì)濃縮為目的的膜分離一般分三種操作方式，即、和連續(xù)濃縮操

作。

16.電泳分離主要有、、等。這些電泳法又根據(jù)是否使用凝膠載體分

為凝膠電泳和自由流電泳。

17.結(jié)晶操作必須考慮、、、單晶體生長(zhǎng)4個(gè)問(wèn)題。

閱卷人得分

三、判斷（每小題1分，共20分）

1.在超臨界流體萃取時(shí)加入N,、Ar等可使萃取物在流體中的溶解度顯著升高。（）

2..以瓊脂糖作為凝膠介質(zhì)時(shí)，DNA分子構(gòu)型對(duì)其遷移率的影響為：共價(jià)閉環(huán)DNA＜直線DNA＜開(kāi)環(huán)雙鏈DNA。

（）

3.生物產(chǎn)品的特點(diǎn)之一就是穩(wěn)定性差，極易被化學(xué)或微生物降解而失活。（）

4.凝膠電泳中相對(duì)遷移率是指蛋白質(zhì)移動(dòng)的距離與指示劑移動(dòng)距離的比值。（）

5.丙烯酰胺和甲叉雙丙烯酰胺的聚合反應(yīng)應(yīng)與空氣隔絕，主要是大氣中的CO?能消滅自由基是反應(yīng)終止。

（）

6.水蒸氣蒸鐳法適用于能隨水蒸氣蒸儲(chǔ)而不被破壞，沸點(diǎn)多在100℃以下，與在水中溶解度大的成分的提取。

（）

7.對(duì)下列甲殼素及其衍生物間的相互轉(zhuǎn)換關(guān)系的連線圖進(jìn)行判斷，對(duì)的用號(hào)表示，錯(cuò)的用“X”號(hào)

表示。（6分）

8.結(jié)晶制備時(shí)，結(jié)晶溶液的濃度越高越好，因?yàn)檫@樣結(jié)晶速度快且雜質(zhì)較少。（）

9.分配層析法主要是根據(jù)組分在互不相溶的兩相溶液中分配系數(shù)之差來(lái)實(shí)現(xiàn)的。（）

10.細(xì)菌的酸性水解產(chǎn)物不能以游離態(tài)存在，常締結(jié)成大分子物質(zhì)，最著名的大分子締結(jié)物是金黃色葡萄球

菌胞壁質(zhì)。（）

11.可以用陶器、砂鍋、銅器及搪瓷等容器煎煮中藥。（）

12.蛋白質(zhì)在靜電狀態(tài)時(shí)顆粒之間的靜電斥力最小，而溶解度最大（）

13.相似相溶原理中重要的相似是指在分子極性上的相似。（）

14.選擇與目標(biāo)產(chǎn)物極性相反的有機(jī)溶劑為萃取劑，可以得到較大分配系數(shù)。（）

15.超臨界流體的密度接近液體一一萃取能力強(qiáng)，粘度接近氣體一一傳質(zhì)性能好。

（）

16.結(jié)晶在達(dá)相平衡時(shí)候，固態(tài)晶體相的化學(xué)勢(shì)與周?chē)芤合嗟幕瘜W(xué)勢(shì)相等。（）

17.溶液中含有的溶質(zhì)量，比飽和的時(shí)候更多，這種溶液稱為過(guò)飽和溶液，它在熱力學(xué)上是非常穩(wěn)定的。

（）

18.重結(jié)晶是利用雜質(zhì)和結(jié)晶物質(zhì)在不同溶劑和不同溫度下的溶解度不同，將晶體用合適的溶劑再次結(jié)晶，

以獲得高純度的晶體的操作。（）

19.干燥是利用熱能除去目標(biāo)產(chǎn)物的濃縮懸浮液或結(jié)晶產(chǎn)品中濕分的單元操作，通常是生物產(chǎn)物成品化前

的最后一個(gè)工序。（）

20.生物藥物是利用生物體、生物組織或其成分，綜合應(yīng)用生物學(xué)、生物化學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、物理

化學(xué)和藥學(xué)等原理與方法進(jìn)行加工、制成的一類(lèi)產(chǎn)品。（）

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四、選擇題（每選對(duì)一項(xiàng)1分，共20分）

1.對(duì)電泳膠板進(jìn)行染色時(shí)，應(yīng)根據(jù)不同的物質(zhì)選用不同的染色劑，一般蛋白質(zhì)選用（），糖蛋白選用

（），脂蛋白選用（）o

A氨基黑B甲苯胺藍(lán)C蘇丹黑D麗春紅E過(guò)碘酸

2.瓊脂糖是由瓊脂分離制備的鏈狀多糖，其結(jié)構(gòu)單元為（）

AD-半乳糖B『葡萄糖CD-蔗糖D3,6-脫水-L-半乳糖

3.聚丙烯酰胺凝膠是由丙烯酰胺和（）以一定的比例交聯(lián)而成。

A甲基胺基丙月青B甲叉雙丙烯酰胺C過(guò)硫酸胺

4.生物產(chǎn)品生產(chǎn)中，初步純化（除去差異性較大的雜質(zhì)）的主要方法有（）

A沉淀法B電泳法C結(jié)晶法D層析法

5.在《本草綱目》中記載的最早應(yīng)用升華法提取有效成分的是（）

A.香豆素B.樟腦C.咖啡堿D.苯甲酸

6.下列物質(zhì)親水性最強(qiáng)的為（）

A.淀粉B.蛋白質(zhì)C.氨基酸D.葡萄糖

7.溶劑提取主要應(yīng)用的方法有（)

A.浸漬法B.滲漉法C.煎煮法D.回流提取法

8.一般可以自制的透析膜有（）

A.動(dòng)物膀胱膜B.蛋白質(zhì)膜C.玻璃紙膜D.羊皮紙膜E.火棉膠膜

9.甲殼素制備過(guò)程中，用（）脫除甲殼中的CaCOs成分，而用（）脫除其中的蛋白類(lèi)及脂類(lèi)物質(zhì)。

A.稀堿溶液B.強(qiáng)酸溶液C.稀酸溶液D.強(qiáng)堿溶液

閱卷人得分

五、簡(jiǎn)答題（每題5分，共100分）

1.提高超臨界流體的選擇性應(yīng)遵從那些原則？

2.防止膜污染的具體方法有哪些？

3.什么是電泳技術(shù)？

4.為什么說(shuō)甲殼素及其衍生物是生物活性物質(zhì)？

5.評(píng)價(jià)細(xì)胞破碎程度的方法有哪兩種？并講明優(yōu)缺點(diǎn)。

6.影響蛋白質(zhì)溶解行為的因素有哪些？

7.藥物分離與純化過(guò)程有什么特點(diǎn)？

8.預(yù)處理技術(shù)主要完成的工作有哪些？

9.等電點(diǎn)沉淀法應(yīng)注意哪些事項(xiàng)？

10.怎樣選擇層析中應(yīng)用的洗脫溶劑？

11.影響電泳遷移率的因素有哪些？

12.乙醇作為親水性有機(jī)溶劑有哪些優(yōu)點(diǎn)？

13.溶劑提取中選擇溶劑應(yīng)遵從哪些原則？

14.影響鹽析的因素有哪些？

15.硫酸錠作為鹽析用鹽的優(yōu)點(diǎn)有哪些？

16.影響有機(jī)溶劑沉淀效果的因素有哪些？

17.膜分離技術(shù)具有怎樣的優(yōu)點(diǎn)？

18.影響膜分離截留率（表觀截留率）的因素，除相對(duì)分子質(zhì)量外，主要還有哪幾個(gè)方面?

19.有機(jī)溶劑作為萃取劑應(yīng)滿足怎樣的條件？

20.防止乳化現(xiàn)象的方法有哪些？

閱卷人得分

五、論述題（每題10分，共100分）

1.用高濃度的NaOH溶液與甲殼素長(zhǎng)時(shí)間反應(yīng)雖能徹底脫除其乙?；珪?huì)造成甲殼素分子主鏈的嚴(yán)重?cái)嗔?

影響殼聚糖的黏度，要想得到高脫乙?；?、高粘度的殼聚糖，應(yīng)采取什么措施？為什么？（10分）

2.實(shí)驗(yàn)室用冷凍離心機(jī)在使用時(shí)有哪些注意事項(xiàng)？（10分）

3.聚丙烯酰胺凝膠作為電泳支持物有哪些優(yōu)點(diǎn)？（10分）

4.論述蛋白質(zhì)制品的保存方法及注意事項(xiàng)。（10分）

5.蛋白質(zhì)提取時(shí)常用的濃縮方法有哪些？分別說(shuō)明優(yōu)缺點(diǎn)。（10分）

6.寫(xiě)出三種分離純化酶蛋白的方法，并簡(jiǎn)述其原理。（10分）

7.無(wú)機(jī)膜是由無(wú)機(jī)材料加工而成，是一種固態(tài)膜，論述無(wú)機(jī)膜較聚合物分離膜具有哪些優(yōu)點(diǎn)。（10分）

8.膜分離技術(shù)在分離工程中的重要作用及存在問(wèn)題。（10分）

9.論述超臨界流體萃取法具有哪些優(yōu)點(diǎn)以及在實(shí)際生產(chǎn)中的應(yīng)用，并舉例說(shuō)明具體操作過(guò)程。（10分）

10.論述等點(diǎn)聚焦電泳的優(yōu)缺點(diǎn)。（10分）

《藥物分離與純化技術(shù)》試卷答案

一、名詞解釋?zhuān)啃☆}2分，共20分）

1.相似相容原理：結(jié)構(gòu)和性質(zhì)相似的物質(zhì)之間相互助溶的現(xiàn)象。

2.萃取法：是利用混合物中的各種成分在兩種互不相容的溶劑中分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離的方法。

3.透析法：利用小分子物質(zhì)在溶液中可透過(guò)半透膜，而大分子物質(zhì)不能透過(guò)的性質(zhì)達(dá)到分離的方法。

4.臨界溫度：是指高于此溫度時(shí)，無(wú)論加多大的壓力也不能使氣體液化，此溫度稱為這種氣體的臨界溫度。

5.梯度洗脫：在對(duì)層析柱洗脫時(shí)逐漸增大溶劑的極性，是吸附在柱上的成分逐個(gè)被洗脫的一種方法。

6.濃差極化現(xiàn)象：超濾過(guò)程中，水透過(guò)膜后使膜表面形成溶質(zhì)的濃度梯度，當(dāng)達(dá)到一定平衡時(shí)，這層溶質(zhì)

濃度分布邊界阻礙水透過(guò)膜作用的現(xiàn)象。

7.鹽溶現(xiàn)象：中性鹽對(duì)蛋白質(zhì)的溶解度有顯著的影響，一般在低濃度下隨鹽濃度的升高，蛋白質(zhì)的溶解度

在增大的現(xiàn)象。

8.生物技術(shù)：是以生命科學(xué)為基礎(chǔ)，利用生物體系（組織、細(xì)胞、組分）和工程技術(shù)原理來(lái)提供商品和社

會(huì)性技術(shù)服務(wù)的綜合性科學(xué)技術(shù)。

9.生物活性物質(zhì)：是指對(duì)生命現(xiàn)象具有影響的微量或少量物質(zhì)。

10.NDG:殼聚糖，是甲殼素在堿性條件下脫乙?；玫降漠a(chǎn)物。

11.藥物分離與純化技術(shù)：從含有目的藥物成分的混合物中，經(jīng)提取、精制并加工制成高純度、符合藥典規(guī)

定的各種藥品的生產(chǎn)技術(shù)。

12.鹽析：高濃度鹽溶液中，隨著鹽濃度的升高蛋白質(zhì)的溶解度不同程度下降并先后析出的現(xiàn)象。

13.凝聚作用：在某些電解質(zhì)的作用下，膠粒之間雙點(diǎn)層的排斥作用降低，電位下降，吸引作用加強(qiáng)，破

壞膠體系統(tǒng)的分散狀態(tài)，致使膠體粒子凝聚的過(guò)程。

14.梯度洗脫：洗脫時(shí)逐漸增大溶劑的極性，使吸附在層析柱上的成分逐個(gè)被洗脫下來(lái)的一種方法。

15.臨界壓力：指在臨界溫度下，使液體氣化所用的壓力值。

16.夾帶劑:

17.超濾法:利用高壓力或離心力，強(qiáng)使水和其他小的溶質(zhì)分子通過(guò)半透膜，而蛋白質(zhì)留在膜上的一種分離

方法。

18.電泳法：各種蛋白質(zhì)在同一pH條件下，因分子量和電荷數(shù)量不同而在電場(chǎng)中的遷移率不同而得以分開(kāi)

的方法。

19.離子交換層析：利用離子交換劑作為載體這些載體在一定條件下帶有一定的電荷，當(dāng)帶相反電荷的分

子通過(guò)時(shí)，由于靜電引力就會(huì)被載體吸附，這種分離方法叫離子交換層析。

20.膜分離：利用具有一定選擇性透過(guò)特性的過(guò)濾介質(zhì)進(jìn)行物質(zhì)的分離純化。

21.凝膠極化：當(dāng)膜表面附近的濃度超過(guò)溶質(zhì)的溶解度時(shí)，溶質(zhì)會(huì)析出，形成凝膠層的現(xiàn)象。

22.物理萃?。喝苜|(zhì)根據(jù)相似相容的原理在兩相間達(dá)到分配平衡，萃取劑與溶質(zhì)間不發(fā)生化學(xué)反應(yīng)。

23.乳化現(xiàn)象：水或有機(jī)溶劑以微小液滴形式分散于有機(jī)相或水相中的現(xiàn)象。

24.超臨界流體：當(dāng)一種流體處于其臨界點(diǎn)的溫度和壓力之下，則稱之為超臨界流體。

25.遷移率：帶電粒子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的泳動(dòng)速度。

二、填空（每小題1分，共50分）

1.均相混合物、非均相混合物；

2.機(jī)械分離、傳質(zhì)分離；3.提取、精制、成品加工；

4.等電點(diǎn)沉淀法、變性沉淀法、鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法；

5.珠磨法、超聲破碎法、酶解法、滲透壓法、干燥法；

6.硅膠、氧化鋁、活性炭；7.石油酸、氯仿、乙醛；

8.乙醇、甲醇、丙酮；9.浸漬法、滲漉法、煎煮法；

10.硫酸鏤、硫酸鎂、氯化鈉；11.陰離子交換劑、陽(yáng)離子交換劑；

12.吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜；13.微濾、超濾、納濾；

14.震動(dòng)、攪拌、壓力、溫度；15.開(kāi)路循環(huán)、閉路循環(huán)；

16.區(qū)帶電泳、等電點(diǎn)電泳、等速電泳；17.飽和度、結(jié)晶提純度、晶核形成;

三、判斷（每小題1分，共15分）

1.X2.X374.V5.X6.X

7.用......>連接的為錯(cuò)誤方向。

N-乙酰-D-葡胺糖---------------->D-葡糖胺

8.X9.V10.V11.V12.X13.V14.X15.V16.V17.X18.V19.

四、選擇題（每選對(duì)一項(xiàng)1分，共20分）

1.ADBEC2.AD3.B4.A5.B6.D7.ABCD8.ADE9.C

A

五'簡(jiǎn)答題（每題5分，共30分）

1.答

A、操作溫度T與臨界溫度Tc相接近。

B、超臨界流體的化學(xué)性質(zhì)與待分離的溶質(zhì)化學(xué)性質(zhì)相接近。

2.答

1）預(yù)處理：調(diào)節(jié)pH值，加入阻止氧化反應(yīng)的試劑等。

2）開(kāi)發(fā)抗污染膜。

3）加大供給液的流速。

4）清洗已被污染的膜：化學(xué)洗一一根據(jù)吸附物的不同選擇清洗試劑；物理洗一一超聲波處理、振動(dòng)處

理等。

3.答

電泳技術(shù)是指帶電荷的供試品在惰性支持介質(zhì)中，于電場(chǎng)的作用下，向其對(duì)應(yīng)的電極方向按各自的速度進(jìn)

行泳動(dòng)，使組分分離成狹窄的區(qū)帶，用適宜的監(jiān)測(cè)方法記錄其電泳區(qū)帶圖譜或計(jì)算其百分含量的技術(shù)。

4.答

因?yàn)榧讱に丶捌溲苌锏姆肿又泻谢钚曰鶊F(tuán)：-0H和一NHz

5.答

A、直接計(jì)數(shù)法：缺點(diǎn)：難以根據(jù)不同的細(xì)胞應(yīng)用一種合適的染色劑。

死亡的細(xì)胞不被染色和計(jì)數(shù)

細(xì)胞有團(tuán)聚現(xiàn)象時(shí)無(wú)法計(jì)數(shù)

B、間接計(jì)數(shù)法：破碎率=包內(nèi)物質(zhì)釋放量X100%/此物質(zhì)的理論最大釋放量

最常用酶活性分析法

6.答

1）蛋白質(zhì)的組成：不同氨基酸的親水性有較大差異，組成不同蛋白質(zhì)的氨基酸種類(lèi)及含量的不同對(duì)其溶

解性有較大影響。

2）構(gòu)象的差異：通過(guò)共價(jià)交聯(lián)、疏水效應(yīng)及各種作用力而形成的蛋白質(zhì)四級(jí)結(jié)構(gòu)，其親水區(qū)和疏水區(qū)的

大小及分布情況影響其溶解性。

3）環(huán)境因素：主要取決于溶液的性質(zhì)，如：pH值、溫度、溶液濃度、離子強(qiáng)度等。

7.答

1）藥品種類(lèi)繁多，性質(zhì)差異較大，致使混合物復(fù)雜多樣。

2）混合物中與分離的目的藥物成分含量低，常需多步分離，致使回收率較低。

3）藥物成分的穩(wěn)定性通常較差，使分離與純化方法的選擇受到較大限制，必須嚴(yán)格控制操作條件。

4）某些藥物在分離與純化過(guò)程中，要求無(wú)菌操作。對(duì)于基因產(chǎn)品，還應(yīng)注意安全問(wèn)題。

5）藥品質(zhì)量要求較高，要確保藥品安全有效、穩(wěn)定均一，才能達(dá)到防病治病及保護(hù)健康的目的。

8.答

1）沉淀可溶性雜質(zhì)。

2）采用凝聚或絮凝技術(shù)，將膠體狀態(tài)的雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為易于分離的較大顆粒。

3）改善料液的流動(dòng)性，便于

4）固液分離。

5）將胞內(nèi)產(chǎn)物從胞內(nèi)釋放出來(lái)。

9.答

1）不同的蛋白質(zhì)具有不同的等電點(diǎn)，在生產(chǎn)過(guò)程中，應(yīng)根據(jù)分離要求出去目的產(chǎn)物之外的雜蛋白。

2）同一蛋白質(zhì)在不同條件下等電點(diǎn)不同，在鹽溶液中，一般蛋白質(zhì)結(jié)合較多的陽(yáng)離子，等電點(diǎn)的pH升

高。

3）目的藥物成分對(duì)pH值的要求，生產(chǎn)中應(yīng)盡可能避免直接應(yīng)用強(qiáng)酸或強(qiáng)堿調(diào)節(jié)pH值，以免局部過(guò)酸或

過(guò)堿引起目的藥物成分的變性。

4）各種蛋白在等電點(diǎn)處仍具有一定的溶解度，致使沉淀不完全，因此等電點(diǎn)沉淀法多與其他方法配合使

用效果更為理想。

10.答

1）被分離物質(zhì)是弱極性的，應(yīng)選擇弱極性的容積洗脫。

2）被分離物質(zhì)是強(qiáng)極性的，應(yīng)選擇強(qiáng)極性的容積洗脫。

3）吸附劑是弱極性的，而被分離物質(zhì)是強(qiáng)極性的，應(yīng)選擇極性較低的容積洗脫。

11.答

1）電場(chǎng)強(qiáng)度：電場(chǎng)強(qiáng)度增大，遷移率加快，省時(shí)；但產(chǎn)生大量的熱量，必須配備冷卻裝置以保證產(chǎn)品的

生物活性。

2）溶液的pH值：pH值決定被分離物質(zhì)的解離程度、質(zhì)點(diǎn)的帶電性質(zhì)及所帶凈電荷量。pH值離pl越遠(yuǎn)

所帶電荷越多，遷移率越大。

3）溶液的離子強(qiáng)度：電泳液中離子濃度增加會(huì)引起質(zhì)點(diǎn)遷移率的降低。

4）電滲：固體支持物吸附溶液中的“+離子，使溶液帶電，從而改變了質(zhì)點(diǎn)在電場(chǎng)中固有的移動(dòng)

速率。

12.答

1）溶解性好，對(duì)細(xì)胞的穿透力強(qiáng)。

2）除蛋白質(zhì)、果膠、粘液質(zhì)、淀粉和多糖外，多數(shù)物質(zhì)能溶于乙醇。

3）難溶于水的親脂類(lèi)物質(zhì)在乙醇中的溶解度較大。

4）可以設(shè)置不同的濃度梯度進(jìn)行溶解。

5）比水用量少，提取時(shí)間短，水溶性雜質(zhì)較少。

6）便宜且來(lái)源方便，毒性小。

13.答

1）對(duì)有效成分溶解度大，對(duì)雜質(zhì)溶解度小。

2）溶劑不能與中藥內(nèi)的成分起化學(xué)反應(yīng)。

3）經(jīng)濟(jì)實(shí)惠，容易得到，使用安全性高。

14.答

1）溫度：除對(duì)溫度敏感的蛋白質(zhì)在低溫操作外，一般可在室溫中進(jìn)行。一般溫度低蛋白質(zhì)溶介度降低。

但有的蛋白質(zhì)（如血紅蛋白、肌紅蛋白、清蛋白）在較高的溫度（25度）比0度時(shí)溶解度低，更容易鹽析。

2）pH值：大多數(shù)蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)時(shí)在濃鹽溶液中的溶介度最低。

3）蛋白質(zhì)濃度：蛋白質(zhì)濃度高時(shí)，欲分離的蛋白質(zhì)常常夾雜著其他蛋白質(zhì)地一起沉淀出來(lái)。

15.答

1）溫度系數(shù)小而溶解度大（25度時(shí)飽和溶液為4.1M,即767克/升；0度時(shí)飽和溶解度為3.9M,即676

克/升），在這一溶解度范圍內(nèi)，許多蛋白質(zhì)和酶都可以鹽析出來(lái)；

2）分段鹽析效果也比其他鹽好，不易引起蛋白質(zhì)變性。

3）硫酸鍍?nèi)芤旱膒H常在4.5-5.5之間，當(dāng)用其他pH值進(jìn)行鹽析時(shí)，需用硫酸或氨水調(diào)節(jié)。

16.答

1）溫度低溫可保持生物大分子活性，同時(shí)降低其溶解度，提高提取效率；

2）樣品濃度和PH與鹽析法中的作用基本相同；

3）金屬離子一些多價(jià)陽(yáng)離子如Zn2+和Ca2+在一定PH下能與呈陰離子狀態(tài)的蛋白質(zhì)形成復(fù)合物，這種復(fù)

合物在水中或有機(jī)溶劑中的溶解度都大大下降，而且不影響蛋白質(zhì)的生物活性。

4）離子強(qiáng)度鹽濃度太大或太低都對(duì)分離有不利影響，對(duì)蛋白質(zhì)和多糖而言鹽濃度不超過(guò)5%比較合適，

使用的乙醇量不超過(guò)二倍體積為宜。

17.答

1）高效的分離過(guò)程

2）接近室溫的工作溫度，低能耗

3）品質(zhì)穩(wěn)定性好，回收率高

4）連續(xù)化操作，靈活性強(qiáng)

5）純物理過(guò)程，環(huán)保

18.答

（1）分子特性：相對(duì)分子質(zhì)量相同時(shí)，呈線狀的分子截留率較低，有支鏈的分子截留率較高，球形分子的

截留率最大。

對(duì)于荷電膜，具有與膜相反電荷的分子截留率較低，反之則較高。

若膜對(duì)溶質(zhì)具有吸附作用時(shí)，溶質(zhì)的截留率增大。

（2）其他高分子溶質(zhì)的影響：由于①競(jìng)爭(zhēng)性抑制②濃度極化現(xiàn)象使膜表面的濃度高于主體濃度。

（3）操作條件：溫度升高，粘度下降，則截留率降低。膜面流速增大，則濃度極化現(xiàn)象減輕，截留率減

小。

19.答

（1）價(jià)廉易得；

（2）與水相不互溶；

（3）容易回收和再利用；

（4）與水相有較大的密度差，且粘度小，表面張力適中，相分散和相分離較容易；

（5）毒性低，腐蝕性小，閃電低，使用安全

（6）不與目標(biāo)產(chǎn)物發(fā)生反應(yīng)。

20.答

（1）操作前對(duì)發(fā)酵液進(jìn)行過(guò)濾或絮凝沉淀處理，除去大部分蛋白質(zhì)及固體微粒，防止乳化現(xiàn)象發(fā)生。

（2）產(chǎn)生乳化后，根據(jù)乳化的程度和乳濁液的形式采取適當(dāng)?shù)钠迫槭侄巍?/p>

①乳化現(xiàn)象不嚴(yán)重：采用過(guò)濾或離心沉降的方法；

②0/W型乳濁液：加入親油性表面活性劑；

③W/0型乳濁液：加入親水性表面活性劑；

六、論述題（每題10分，共100分）

1.答

應(yīng)采取間歇時(shí)反應(yīng)。即在甲殼素與NaOH溶液反應(yīng)過(guò)程中，隔一段時(shí)間用清水沖洗一次，以便洗除吸附在

殼聚糖表面的OfcCOONa,利于NaOH溶液的滲入，縮短脫乙?；姆磻?yīng)時(shí)間，從而減少或降低殼聚糖分子主

鏈的斷裂，抑制殼聚糖產(chǎn)品粘度的下降。

2.答

1）使用前先檢查離心機(jī)的狀態(tài)，首次使用前先認(rèn)真閱讀使用說(shuō)明書(shū)。

2）根據(jù)所提取物質(zhì)的量選擇離心用的轉(zhuǎn)子及離心管。

3）對(duì)離心的各參數(shù)進(jìn)行設(shè)置：轉(zhuǎn)子型號(hào)、轉(zhuǎn)速、溫度等。

4）冷凍離心時(shí)，使用前先開(kāi)機(jī)預(yù)冷到設(shè)定的溫度。

5）提取物以達(dá)到離心管的2/3為宜，太多容易溢出而腐蝕轉(zhuǎn)子。

6）離心機(jī)中對(duì)角放置的兩個(gè)離心管應(yīng)在精確配平的天平上配平。

7）離心后應(yīng)注意腔室內(nèi)除霜，在未完全干燥的情況下應(yīng)開(kāi)蓋放置一段時(shí)間。等充分干燥后合上蓋子。

8）離心機(jī)應(yīng)與其他電器設(shè)備隔開(kāi)一定的距離，且放于干燥、陽(yáng)光不宜直射的穩(wěn)固臺(tái)上。

3.答

1）電滲作用小，不易與樣品相互作用。

2）是一種人工合成的物質(zhì)，聚合前可調(diào)節(jié)單體的濃度以形成不同程度的膠鏈結(jié)構(gòu)，使其空隙度在一個(gè)

較大的范圍變化，因此可根據(jù)要分離物質(zhì)的分子大小選擇合適的凝膠成分。

3）在一定的濃度范圍內(nèi)對(duì)熱穩(wěn)定，且凝膠無(wú)色透明，易于觀察。

4）丙烯酰胺是比較純的化合物，可以精制，減少污染。

4.答

1）干燥的制品一般比較穩(wěn)定，在低溫情況下其活性可在數(shù)日甚至數(shù)年無(wú)明顯變化，貯藏要求簡(jiǎn)單，只要

將干燥的樣品置于干燥器內(nèi)（內(nèi)裝有干燥劑）密封，保持0—4度冰箱即可。

2）液態(tài)貯藏時(shí)應(yīng)注意以下幾點(diǎn)。

A、樣品不能太稀，必須濃縮到一定濃度才能封裝貯藏，樣品太稀易使生物大分子變性。

B、一般需加入防腐劑和穩(wěn)定劑，常用的防腐劑有甲苯、苯甲酸、氯仿、百里酚等。蛋白質(zhì)和酶常用的穩(wěn)

定劑有硫酸錢(qián)糊、蔗糖、甘油等，如酶也可加入底物和輔酶以提高其穩(wěn)定性。此外，鈣、鋅、硼酸等溶液

對(duì)某些酶也有一定保護(hù)作用。核酸大分子一般保存在氯化鈉或檸檬酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液中。

C、貯藏溫度要求低，大多數(shù)在。度左右冰箱保存，有的則要求更低，應(yīng)視不同物質(zhì)而定。

5.答

1）減壓加溫蒸發(fā)濃縮：通過(guò)降低液面壓力使液體沸點(diǎn)降低，減壓的真空度愈高，液體沸點(diǎn)降得愈低，蒸

發(fā)愈快，此法適用于一些不耐熱的生物大分子的濃縮。

2）空氣流動(dòng)蒸發(fā)濃縮：空氣的流動(dòng)可使液體加速蒸發(fā)，鋪成薄層的溶液，表面不斷通過(guò)空氣流；或?qū)⑸?/p>

物大分子溶液裝入透析袋內(nèi)置于冷室，用電扇對(duì)準(zhǔn)吹風(fēng)，使透過(guò)膜外的溶劑不沁蒸發(fā)，而達(dá)到濃縮目的，

此法濃縮速度慢，不適于大量溶液的濃縮。

3）、冰凍法：生物大分子在低溫結(jié)成冰，鹽類(lèi)及生物大分子不進(jìn)入冰內(nèi)而留在液相中，操作時(shí)先將待濃

縮的溶液冷卻使之變成固體，然后緩慢地融解，利用溶