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限時(shí)練171.絲瓜果肉中鄰苯二酚等酚類物質(zhì)在多酚氧化酶(PPO)的催化下形成褐色物質(zhì),褐色物質(zhì)在410nm可見光下有較高的吸光值(OD值),且褐色物質(zhì)越多,OD值越高。已知PPO的最適pH為5.5??茖W(xué)家用絲瓜果肉的PPO粗提液、鄰苯二酚、必需的儀器等探究溫度對(duì)PPO活性的影響,結(jié)果如圖。下列說法錯(cuò)誤的是(A)A.PPO在35℃和40℃時(shí)降低的活化能相同B.測(cè)定PPO的最適溫度需要在30~40℃范圍內(nèi)設(shè)置溫度梯度C.應(yīng)使用pH為5.5的緩沖液分別配制PPO粗提液和鄰苯二酚溶液D.絲瓜果肉PPO粗提液可以在低溫和pH為5.5的條件下保存解析:PPO在溫度為35℃和40℃時(shí)酶活性不同,因此,降低的活化能也不同;由于35℃時(shí)OD值最高,所以應(yīng)在30~40℃間設(shè)置溫度梯度以更精確測(cè)定PPO的最適溫度;由題可知,多酚氧化酶(PPO)的最適pH為5.5,pH為無關(guān)變量,在實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)該保持酶在最適pH下反應(yīng),因此應(yīng)使用pH為5.5的緩沖液配制PPO粗提液和鄰苯二酚溶液;酶在高溫下會(huì)失活,要保證多酚氧化酶(PPO)的結(jié)構(gòu)不受破壞,需要在低溫下和pH為5.5的條件下保存。2.水稻細(xì)胞中的M基因編碼的一種毒性蛋白,對(duì)雌配子沒有影響,但會(huì)導(dǎo)致同株水稻一定比例的不含該基因的花粉死亡,通過這種方式來改變后代分離比,使M基因有更多的機(jī)會(huì)遺傳下去?,F(xiàn)讓基因型為Mm的水稻自交,F1中三種基因型個(gè)體的比例為MM∶Mm∶mm=3∶4∶1,F1隨機(jī)授粉獲得F2。下列有關(guān)分析錯(cuò)誤的是(A)A.F1產(chǎn)生的雌配子與雄配子的比例為3∶1B.由F1的結(jié)果推測(cè),親本水稻產(chǎn)生的含m基因的花粉存活的概率為1/3C.該水稻種群的M基因頻率會(huì)隨著雜交代數(shù)的增加而增大D.雜交F2中三種基因型的比例為MM∶Mm∶mm=15∶14∶3解析:F1產(chǎn)生的雌配子遠(yuǎn)少于雄配子;基因型為Mm的水稻自交,子代中mm=1/8,雌配子正常,說明雌配子中含m基因的概率為1/2,花粉中含m基因的概率為1/4,因此雄配子中M∶m=3∶1,親本水稻產(chǎn)生的含m基因的花粉存活的概率為1/3;由題干可知,M基因編碼的一種毒性蛋白,對(duì)雌配子沒有影響,同株水稻一定比例的不含該基因的花粉死亡會(huì)改變后代分離比,使M基因有更多的機(jī)會(huì)遺傳下去;F1中三種基因型個(gè)體的比例為MM∶Mm∶mm=3∶4∶1,F1隨機(jī)授粉,用配子法計(jì)算,基因型MM、Mm、mm都作為母本,則產(chǎn)生的雌配子5/8M、3/8m,基因型MM、Mm、mm都作為父本,Mm產(chǎn)生的含m基因的花粉存活的概率為1/3,則產(chǎn)生的雄配子3/4M、1/4m,雜交子二代中三種基因型的比例為MM∶Mm∶mm=15∶14∶3。3.免疫訓(xùn)練是指原發(fā)感染或疫苗接種可誘導(dǎo)宿主的固有免疫細(xì)胞(參與非特異性免疫的細(xì)胞)產(chǎn)生對(duì)二次感染的增強(qiáng)抗性,且可為異源感染提供交叉保護(hù)。下列說法正確的是(C)A.免疫訓(xùn)練對(duì)特異性免疫沒有影響B(tài).免疫訓(xùn)練依賴記憶B細(xì)胞和記憶T細(xì)胞的參與C.注射卡介苗可能會(huì)提高機(jī)體對(duì)流感病毒的免疫能力D.免疫訓(xùn)練表明非特異性免疫可以轉(zhuǎn)變?yōu)樘禺愋悦庖呓馕?由題意可知,吞噬細(xì)胞能參與免疫訓(xùn)練,吞噬細(xì)胞既參與非特異性免疫,又參與特異性免疫,所以免疫訓(xùn)練對(duì)特異性免疫也有影響;免疫訓(xùn)練主要增強(qiáng)非特異性免疫,而記憶細(xì)胞參與的是特異性免疫;免疫訓(xùn)練可為異源感染提供交叉保護(hù),所以注射卡介苗可能會(huì)提高機(jī)體對(duì)流感病毒的免疫能力;由題干信息無法得出“免疫訓(xùn)練表明非特異性免疫可以轉(zhuǎn)變?yōu)樘禺愋悦庖摺钡慕Y(jié)論。4.科學(xué)家對(duì)一個(gè)結(jié)構(gòu)相對(duì)簡(jiǎn)單的天然湖泊的能量流動(dòng)進(jìn)行了一年的定量分析,能量流動(dòng)過程如圖所示。下列敘述正確的是(A)A.一年中生產(chǎn)者的凋落物有一部分可能屬于未利用的能量B.一年中第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)的同化量大部分被自身呼吸作用消耗C.圖中12.6J/(cm2·a)的能量都屬于第三營(yíng)養(yǎng)級(jí)的能量D.因多數(shù)能量未利用,所以無法體現(xiàn)能量流動(dòng)逐級(jí)遞減的特點(diǎn)解析:一年中生產(chǎn)者的凋落物有一部分沒有被利用,可能屬于未利用的能量;一年中第二營(yíng)養(yǎng)級(jí)(植食性動(dòng)物)的同化量的去向中,未被利用的能量最多;圖中肉食性動(dòng)物可能包括多個(gè)營(yíng)養(yǎng)級(jí),所以12.6J/(cm2·a)的能量不一定都屬于第三營(yíng)養(yǎng)級(jí)的能量;雖然大多數(shù)能量均未利用,但每一個(gè)營(yíng)養(yǎng)級(jí)可利用的能量中總有一部分通過呼吸作用散失,總有一部分流向分解者,剩下的才可能流向下一個(gè)營(yíng)養(yǎng)級(jí)(最高營(yíng)養(yǎng)級(jí)除外),故能量逐級(jí)遞減。5.環(huán)狀定點(diǎn)誘變技術(shù)通過設(shè)計(jì)特定引物進(jìn)行PCR,來實(shí)現(xiàn)目標(biāo)載體的單堿基突變,從而生產(chǎn)出滿足需求的質(zhì)粒載體。質(zhì)粒pUC18中含有限制酶Eam1105Ⅰ(識(shí)別序列為5′GACGGGGAGTC3′)和EcoRⅠ的識(shí)別序列。為使質(zhì)粒pUC18不能被限制酶Eam1105Ⅰ識(shí)別,但依然具有氨芐青霉素抗性,現(xiàn)對(duì)質(zhì)粒pUC18第1695個(gè)堿基(圖方框中的堿基)進(jìn)行誘變,設(shè)計(jì)了具有誘變位點(diǎn)的引物P1和不具有誘變位點(diǎn)的引物P2。具體操作流程如圖所示。(1)為使誘變后的質(zhì)粒不能被限制酶Eam1105Ⅰ識(shí)別,但依然具有氨芐青霉素抗性,選擇質(zhì)粒突變位點(diǎn)時(shí)應(yīng)注意
。
(2)進(jìn)行上述PCR反應(yīng),緩沖液中需提供pUC18質(zhì)粒,P1、P2兩種引物以及,同時(shí)通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行。至少經(jīng)過個(gè)循環(huán),會(huì)出現(xiàn)雙鏈均被誘變的線性質(zhì)粒。擴(kuò)增得到的線性質(zhì)粒需在酶的作用下才能連接成環(huán)狀質(zhì)粒。
(3)提取連接產(chǎn)物(環(huán)化后的質(zhì)粒),經(jīng)過EcoRⅠ,Eam1105Ⅰ雙酶切,然后進(jìn)行電泳,可根據(jù)結(jié)果判斷質(zhì)粒pUC18的第1695個(gè)堿基誘變是否成功,判斷的理由是
。
解析:(1)為使誘變后的質(zhì)粒不能被限制酶Eam1105Ⅰ識(shí)別,但依然具有氨芐青霉素抗性,也就是說需要破壞質(zhì)粒上限制酶Eam1105Ⅰ的識(shí)別序列,同時(shí)不影響氨芐青霉素抗性基因的正常表達(dá),因此在選擇質(zhì)粒突變位點(diǎn)時(shí)應(yīng)注意誘變的位點(diǎn)位于限制酶Eam1105Ⅰ識(shí)別序列中,誘變后編碼的氨基酸不變或不影響氨芐青霉素抗性基因的正常表達(dá)。(2)PCR是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定的DNA片段的核酸合成技術(shù),利用的原理是DNA復(fù)制,需要條件有模板DNA(pUC18質(zhì)粒)、四種脫氧核苷酸、一對(duì)引物(P1、P2兩種引物)、TaqDNA聚合酶,同時(shí)通過控制溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進(jìn)行。DNA的復(fù)制方式為半保留復(fù)制,經(jīng)過第一次復(fù)制,會(huì)出現(xiàn)一條鏈被誘變的線性質(zhì)粒,經(jīng)過第二次復(fù)制,會(huì)出現(xiàn)雙鏈均被誘變的線性質(zhì)粒,因此至少經(jīng)過2個(gè)循環(huán),會(huì)出現(xiàn)雙鏈均被誘變的線性質(zhì)粒。擴(kuò)增得到的線性質(zhì)粒為平末端,需要經(jīng)過T4DNA連接酶的作用才能連接成環(huán)狀質(zhì)粒。(3)質(zhì)粒pUC18的第1695個(gè)堿基誘變成功,則限制酶Eam1105Ⅰ的識(shí)別位點(diǎn)被破壞,經(jīng)過EcoRⅠ、Eam1105Ⅰ雙酶切,然后進(jìn)行電泳,電泳圖譜中只有1條條帶;質(zhì)粒pUC18的第1695個(gè)堿基未誘變成功,則限制酶Eam1105Ⅰ的識(shí)別位點(diǎn)沒有被破壞,經(jīng)過EcoR
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