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文檔簡(jiǎn)介
臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)試題及答案
一、名詞解釋
1.臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)(ClinicalBiochemistry)
2.組合試驗(yàn)(profiletests)
二、問(wèn)答題
1.試述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的研究領(lǐng)域。
2.試述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位及應(yīng)用。
3.簡(jiǎn)述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì)。
第一章緒論答案
—?、名詞解釋
1.臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)(ClinicalBiochemistry):臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)是在人
體正常生物化學(xué)基礎(chǔ)上,研究病理狀態(tài)下生物化學(xué)改變,尋找這些改變的
特征性標(biāo)志并建立可靠實(shí)用檢測(cè)方法,通過(guò)對(duì)這些特征性標(biāo)志物的檢測(cè),
為健康評(píng)估、疾病預(yù)防、診斷、治療、病情和預(yù)后判斷等提供生物化學(xué)信
息和決策依據(jù)的一門(mén)學(xué)科。
2.組合試驗(yàn)(profiletests):在循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)上,將某些疾病或器官
系統(tǒng)功能的有關(guān)檢驗(yàn)項(xiàng)目,進(jìn)行科學(xué)合理的組合,以便獲取更全面完整的
病理生物化學(xué)信息的方法。如了解肝臟功能的組合試驗(yàn)。
二、問(wèn)答題
1.試述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的研究領(lǐng)域。
臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的學(xué)科領(lǐng)域主要包括以下三方面:1.揭示有關(guān)疾病的病理
生物化學(xué)改變,從本質(zhì)上闡明疾病發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸的生物化學(xué)機(jī)制,為疾病的預(yù)
防、診斷、療效及預(yù)后評(píng)估,提供理論基礎(chǔ)。2.在上述研究基礎(chǔ)上,尋找具有
疾病特異性的生物化學(xué)標(biāo)志物,并建立特異度、靈敏度高,簡(jiǎn)便而高性價(jià)比的檢測(cè)
方法,從而在臨床開(kāi)展有關(guān)項(xiàng)目的檢測(cè),提供反映這些標(biāo)志物改變的客觀數(shù)據(jù)。
3.將檢測(cè)項(xiàng)目的數(shù)據(jù),轉(zhuǎn)化為預(yù)防、診斷和療效及預(yù)后評(píng)價(jià)信息。
2.試述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)在醫(yī)學(xué)中的地位及應(yīng)用。
在醫(yī)學(xué)中,臨床生物化學(xué)是闡明疾病發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸的分子機(jī)制,從本質(zhì)上
認(rèn)識(shí)病變準(zhǔn)確部位及具體環(huán)節(jié),為尋找有效的預(yù)防和治療靶點(diǎn),疾病的診斷及病情
和預(yù)后判斷,提供理論基礎(chǔ)的一門(mén)重要病理學(xué)學(xué)科。
其在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用主要包括:L揭示疾病發(fā)生的分子機(jī)制。2.通過(guò)對(duì)有關(guān)
疾病生物化學(xué)改變的特征性生物標(biāo)志檢測(cè)方法的建立和實(shí)施,為判斷有無(wú)及何種疾
病提供客觀依據(jù)。而動(dòng)態(tài)觀察這些標(biāo)志物的改變,可對(duì)病情發(fā)展、轉(zhuǎn)歸、預(yù)后及治
療方案的制定和效果判斷,提供依據(jù)。3.臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)技術(shù),涵蓋了當(dāng)前醫(yī)
學(xué)研究中常用的主要方法技術(shù)。因此,也是醫(yī)學(xué)特別是臨床醫(yī)學(xué)各個(gè)領(lǐng)域研究的一
門(mén)共同性工具學(xué)科。
3.簡(jiǎn)述臨床檢驗(yàn)生物化學(xué)的進(jìn)展及發(fā)展趨勢(shì)。
①分子診斷學(xué)迅速發(fā)展,代表了的發(fā)展方向;②深入尋找高診斷特異性和靈敏
性的新生物化學(xué)標(biāo)志,提高診斷性能;③檢測(cè)技術(shù)和方法的更新完善,更加及
時(shí)、準(zhǔn)確地提供檢驗(yàn)結(jié)果;④全程質(zhì)量管理;⑤以循證檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)為基礎(chǔ),科學(xué)
評(píng)價(jià)有關(guān)檢測(cè)項(xiàng)目的診斷性能,合理有效地開(kāi)展臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)。
一、單項(xiàng)選擇題(A型題)
1.轉(zhuǎn)氨酶的輔酶是
A.磷酸毗哆醛
B.NADPH
C.NADH
D.FAD
E.FMN
2.SI制中酶活性單位為
A.U/L
B.Katai
C.g/L
D.ml/L
E.pmol
3.酶的活性國(guó)際單位(U)是指
A.在25C及其他最適條件下,每分鐘催化Imol底物反應(yīng)所需的酶量
B.在特定的條件下,每分鐘催化1Umol底物發(fā)生反應(yīng)所需的酶量
C.在37七條件下,每分鐘催化Immol底物發(fā)生反應(yīng)所需的酶量
D.在規(guī)定條件下,每秒鐘催化Imol底物反應(yīng)所需的酶量
E.在最適條件下,每小時(shí)催化Imol底物發(fā)生反應(yīng)所需的酶量
4.目前我國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室測(cè)定酶活性濃度推薦溫度為
A.(25±0.1)℃
B.(37±0.5)℃
C.(37±0.3)℃
D.(37±0.1)℃
E.(37±1)"C
5.下列哪種酶是血漿特異酶
A.淀粉酶
B.凝血酶原
C.堿性磷酸酶
D.酸性磷酸酶
E.脂肪酶
6.下列哪一種酶只位于細(xì)胞漿
A.酸性磷酸酶
B.谷氨酸脫氫酶
C.乳酸脫氫酶
D.天冬氨酸脫氫酶
E.異檸檬酸脫氫酶
7.在正常妊娠過(guò)程中血清酶增高最明顯的是
A.LD
B.ALP
C.CK
D.AMY
E.LPS
8.下列哪一種輔因子的生成可通過(guò)測(cè)定340nm處吸光度的降低數(shù)來(lái)表示
A.FADH2
B.NAD+
C.NADH
D.FMN
E.NADPH
9.血清保存在室溫活性會(huì)升高的酶是
A.LD
B.ALP
C.ACP
D.ALT
E.AST
10.ALT在人體各組織中含量最多的是
A.腎臟
B.心臟
C.骨骼肌
D.紅細(xì)胞
E.肝臟
11.改變連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)酶活性濃度的常數(shù)K值大小最方便的途徑為
A.改變酶反應(yīng)溫度
B.改變監(jiān)測(cè)時(shí)間長(zhǎng)短
C.改變底物濃度
D.改變標(biāo)本稀釋度
E.改變酶反應(yīng)的pH值
12.酶促反應(yīng)進(jìn)程曲線通??捎糜诖_定
A.酶反應(yīng)線性范圍
B.適宜的pH
C.適宜的酶量范圍
D.反應(yīng)線性期的時(shí)間范圍
E.底物的濃度
13.目前國(guó)內(nèi)外應(yīng)用連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定血清ALT所選測(cè)定波長(zhǎng)為
A.280nm
B.340nm
C.405nm
D.450nm
E.560nm
14.進(jìn)行酶活性濃度測(cè)定時(shí),常推薦加入磷酸毗哆醛的酶是
A.ALP
B.ALT
C.CK
D.LD
E.AMY
15.連續(xù)監(jiān)測(cè)法測(cè)定ALT所用基質(zhì)通常是
A.丙氨酸-a酮戊二酸
B.丙酮酸-谷氨酸
C.門(mén)冬氨酸-a酮戊二酸
D.草酰乙酸-谷氨酸
E.谷胱甘肽-氨基酸
16.顯示“膽酶分離”前兆的疾病是
A.急性心肌梗死
B.肝癌
C.脂肪肝
D.肝壞死
E.膽石癥
17.LD催化乳酸生成丙酮酸的反應(yīng)較適當(dāng)?shù)膒H是
A10.5
B.9.0
C.7.6
D.7.0
E.4.6
18.乳酸脫氫酶一般形成的同工酶的種類有
A.2種
B.3種
C.4種
D.5種
E.6種
19.骨折時(shí)血清LD同工酶上升最高的是
A.LD1
B.LD2
C.LD3
D.LD4
E.LD5
20.CK含量最多的人體組織是
A.肝臟
B.肌肉
C.肺
D.腎臟
E.心臟
21.急性心肌梗死時(shí),最先增高的酶是
A.ALT
B.LD
C.CK
D.AST
E.a-HBD
22.在測(cè)定肌酸激酶試劑中含有疏基化合物,如N-乙酰半胱氨酸,目的是
A.使酶分子有別構(gòu)效應(yīng)
B.穩(wěn)定酶活性中心的二硫鍵
C.除去腺昔激酶(AK)的影響
D.筑基化合物是肌酸激酶底物之一
E.除去肌酸激酶抑制劑
23.對(duì)乙醇中毒最敏感的血清酶是
A.GGT
B.ALP
C.CK
D.LD
E.ALT
24.與心臟是否受損關(guān)系不大的血清酶是
A.AST
B.a-HBD
C.CK
D.LD
E.ALP
25.ACP含量最多的人體組織是
A.肝臟
B.骨骼
C.紅細(xì)胞
D.血小板
E.前列腺
26.為防止紅細(xì)胞對(duì)ACP測(cè)定的干擾,常加入下列何種抑制劑以提高檢測(cè)的特異性
A.苯丙氨酸
B.L-酒石酸
C.尿酸
D.EDTA
E.L-半胱氨酸
27.在堿性溶液中進(jìn)行醋酸纖維薄膜電泳時(shí),最接近正極(移動(dòng)最快)的ALP同工酶是
A.肝ALP
B.骨ALP
C.腸ALP
D.月臺(tái)盤(pán)ALP
E.腎ALP
28.同時(shí)測(cè)定下列哪種血清酶有助于鑒別ALP升高的來(lái)源
A.ACP
B.GGT
C.LD
D.CK
E.AST
29.在骨骼和肝臟疾病的診斷中最重要的酶是
A.LD
B.CK
C.ALP
D.ACP
E.AMY
30.人血清中的淀粉酶是
A.a淀粉酶
B.B淀粉酶
C.Y淀粉酶
D.A+B
E.A+C
31.用于輔助診斷有機(jī)磷中毒的酶是
A.AMY
B.ACP
C.LPL
D.ChE
E.ALP
32.臨床上常用來(lái)分析同工酶的方法
A.電泳法
B.層析法
C.沉淀法
D.熱失活分析法
E.蛋白酶水解法
33.患者,男,32歲,飲酒飽餐后上腹部劇痛6小時(shí),伴大汗,頻吐。查體:面色蒼白,
血壓9.3/6.7kPa(70/50mmHg),心率132次/分,左上腹肌緊張,壓痛及反跳痛,腹部移動(dòng)
性濁音陽(yáng)性,血淀粉酶740U/L(正常上限為220U/L)。該患者首先考慮的診斷為
A.急性膽囊炎
B.肝性黃疸
C.急性胰腺炎
D.溶血性黃疸
E.膽石癥
二、多項(xiàng)選擇題(B型題)
A.a-HBDB.LDC.ASTD.CKE.ACP
1.對(duì)前列腺癌診斷價(jià)值最大的血漿酶是()。
2.急性心肌梗死時(shí),最先恢復(fù)正常的血漿酶是()。
A.AST和ALTB.ALP和CKC.LPS和AMS
D.AST和AMSE.CK和CK-MB
3.多用于胰腺炎診斷的酶是()。
4.多用于肝臟疾患診斷的酶是()。
5.多用于急性心肌梗死診斷的酶是()。
6.多用于骨骼疾患診斷的酶是()。
三、多項(xiàng)選擇題(X型題)
1.影響血清酶變異的生理因素有
A.性別
B.年齡
C.進(jìn)食
D.運(yùn)動(dòng)
E.以上都不是
2.下列幅中具有酶原形式的酶有
A.胃蛋白酶
B.胰蛋白酶
C.ALT
D.ALP
E.糜蛋白酶
3.下列對(duì)酶活性濃度測(cè)定描述正確的是
A.可測(cè)定產(chǎn)物生成量
B.可測(cè)定底物消耗量
C.與底物濃度無(wú)關(guān)
D.需最適溫度
E.需最適酸堿度
4.臨床上應(yīng)用酶檢測(cè)診斷疾病時(shí);一般考慮下列哪些因素
A.組織與血清酶活性比值在100倍以上
B.組織損傷后,酶能較快地釋放到血液中
C.要有合適的生物半壽期
D.同工酶有一定組織分布特異性
E.酶的組織分布廣
5.肌酸激酶存在于
A.心肌
B.骨骼肌
C.腦組織
D.紅細(xì)胞
E.肝
6.標(biāo)本溶血對(duì)測(cè)定結(jié)果有影響的血清酶是
A.CK
B.LD
C.ALT
D.AST
E.GGT
7.CK的變異體主要是指
A.巨CK1
B.CK-MB
C.CK-MM
D.巨CK2
E.CK-BB
8.ACP與ALP作用類似,主要區(qū)別在于
A.最適pH不同
B.組織來(lái)源不同
C.所作用的底物種類相近.
D.緩沖液種類不同
E.穩(wěn)定性不同
9.連續(xù)監(jiān)測(cè)法進(jìn)行酶學(xué)測(cè)定中常見(jiàn)的干擾因素有
A.樣本本身含有其他酶和物質(zhì)干擾
B.工具酶中混有其他酶的污染
C.非酶反應(yīng)的干擾
D.分析容器的污染與沉淀形成
E.使用雙試劑
10.下列代謝物與其酶法測(cè)定所用試劑的組合,正確的是
A.尿酸-尿酸酶-過(guò)氧化氫酶
B.葡萄糖-葡萄糖氧化酶-葡萄糖-6磷酸脫氫酶
C.尿素-尿素酶-谷氨酸脫氫酶
D.甘油三酯-脂蛋白脂肪酶-甘油激酶
E.膽固醇-膽固醇氧化酶-過(guò)氧化物酶
11.下列血清酶及其測(cè)定所用試劑的組合,正確的是
A.ATP-GGT、
B,alanine-ALT
C-NAD-LD
D?p-nitrophenylphosphate-ALP
E-ADP-CK
12.堿性磷酸酶活性升高可見(jiàn)于
A.變形性骨炎
B.骨腫瘤
C.惡性貧血
D.甲狀腺功能低下
E.梗阻性黃疸
13.G6PD可用于測(cè)定
A.葡萄糖
B.淀粉酶
C.脂肪酶
D.乳酸脫氫酶
E.肌酸激酶
四、名詞解釋
1.酶2.血漿固有酶3.前的半壽期4.連續(xù)監(jiān)測(cè)法
5.工具醮6.酶活性IU定義7.同工的8.底物啟動(dòng)模式
五、問(wèn)答題
1.根據(jù)米-曼式方程計(jì)算,當(dāng)加]=31^時(shí)—,其反應(yīng)速度V為多大?
2.簡(jiǎn)述正常血漿中的酶動(dòng)態(tài)特點(diǎn)及影響酶濃度的因素
3.簡(jiǎn)述病理性血漿中酶濃度異常的機(jī)制
4.簡(jiǎn)述酶濃度的測(cè)定方法。
5.簡(jiǎn)述酶偶聯(lián)反應(yīng)法的原理。
6.簡(jiǎn)述臨床同工酶的分析方法。
7.簡(jiǎn)述體液中酶濃度測(cè)定的主要影響因素及控制
8.臨床酶學(xué)測(cè)定之前,標(biāo)本的采集、處理與貯存有何注意點(diǎn)?
9.簡(jiǎn)述自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行臨床酶學(xué)測(cè)定時(shí)系數(shù)K值的計(jì)算與應(yīng)用。
10.簡(jiǎn)述ALT測(cè)定及其臨床意義。
11.簡(jiǎn)述CK及其同工酶測(cè)定的臨床意義。
12.試述血清ACP活性測(cè)定的臨床意義。
13.試述血清淀粉醐測(cè)定有何臨床意義?
第二章生物化學(xué)檢驗(yàn)中的診斷酶學(xué)參考答案
一、單項(xiàng)選擇題(A型題)
1.A2.B3.B4.D5.B6.C7.B8.C
9.B10.E
11.D12.D13.B14.B15.A16.D17.B18.D
19.E20.B
21.C22.B23.A24.E25.E26.B27.A28.B
29.C30.A
31.D32.A33.C
二、多項(xiàng)選擇題(B型題)
1.E2.D3.C4.A5.E6.B
三、多項(xiàng)選擇題(X型題)
1.ABCD2.ABE3.ABDE4.ABCD5.ABC
6.ABCD
7.AD8.ABDE9.ABCD10.ACDE11.BCDE
12.ABE
13.AE
四、名詞解釋
1.酶是一種由活細(xì)胞產(chǎn)生,具有高度專一性、高度催化活性的物質(zhì),又稱為生物
催化劑,主要是蛋白質(zhì)。
2.血漿固有酶指屬血漿蛋白的固有成分,在血漿中發(fā)揮特定催化作用的一類酶,
也稱血漿特異酶。
3.酶失活至原來(lái)活性一半時(shí)所需時(shí)間稱為醮的半壽期(t1/2)。半壽期可用來(lái)代
表酶從血中清除的快慢。
4.連續(xù)監(jiān)測(cè)法是指每隔一定時(shí)間(2?60s),連續(xù)多次測(cè)定酶反應(yīng)過(guò)程中某一反
應(yīng)產(chǎn)物或底物量隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù),求出酶反應(yīng)初速度,間接計(jì)算酶活性濃度的方
法。
5.在醐學(xué)分析中,作為試劑用于測(cè)定化合物濃度或醐活性濃度的酶稱為工具酶。
6.酶活性IU定義為:在特定條件下,1min能轉(zhuǎn)化1mmol底物的酶量,即
1目前國(guó)內(nèi)外大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室常省略國(guó)際二字,即將IU
lIU=lmmol.min-o
簡(jiǎn)寫(xiě)為Uo
7.同一種屬中由不同基因或等位基因所編碼的多肽鏈單體、純聚體或雜化體,具
有相同的催化作用,但其分子構(gòu)成、空間構(gòu)象、理化性質(zhì)、生物學(xué)性質(zhì)以及器官分
布或細(xì)胞內(nèi)定位不同的一組酶稱為同工酶。
8.底物啟動(dòng)模式是指樣品先與缺乏某種底物的試劑1預(yù)孵育一定時(shí)間后,再加入含
這種底物的試劑2,啟動(dòng)樣品中的待測(cè)酶的酶促反應(yīng)。
五、問(wèn)答題
1.V=Vm[s]/(Km+[s])=Vm*3Km/(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm,即V/Vm=0.75。
2.正常血漿中的的動(dòng)態(tài)變化特點(diǎn):①正常血漿醐根據(jù)酶的來(lái)源及其在血漿中發(fā)揮
催化功能的情況,可將血漿酶分成血漿特異醐和非血漿特異酶兩大類,非血漿特異
酶可進(jìn)一步分為外分泌酶、細(xì)胞內(nèi)酶和其他酶。②一般認(rèn)為,血液中酶的清除方式
與其他血漿蛋白質(zhì)類似,但是具體清除途徑尚未完全明了。血漿酶主要在血管內(nèi)失
活或分解,尿液則是小分子醐排出的途徑。
影響酶濃度的因素包括影響正常血漿酶含量的自身因素和生物學(xué)因素,前者
主要有細(xì)胞內(nèi)外酶濃度的差異、酶的相對(duì)分子量、酶的組織分布、酶在細(xì)胞內(nèi)的定
位和存在形式、觸的半壽期等;后者主要是性別、年齡、食與藥物、運(yùn)動(dòng)、妊娠與
分娩、體位改變、晝夜變化及家庭因素等。
3.血漿酶的病理性變化主要包括酶合成異常、酶釋放增加、酶清除異常等。酶合
成異常包括合成減少和合成增多。酶從病變(或損傷)細(xì)胞中釋放增加是疾病時(shí)大
多數(shù)血清酉每增高的主要機(jī)制。炎癥、缺血、壞死、創(chuàng)傷和腫瘤等是細(xì)胞釋放大分子
酶蛋白的重要原因。此外,血液含抑制物、代謝紊亂、藥物、遺傳性酶缺陷等原因
也可致酶活性下降。
4.酶濃度測(cè)定方法分為絕對(duì)定量法和相對(duì)定量法兩大類。絕對(duì)定量法是直接測(cè)
定醐蛋白量或醐摩爾濃度。相對(duì)定量法是根據(jù)醵的催化活性或醐促反應(yīng)速度來(lái)間接
測(cè)定酶濃度的方法。目前臨床上所用的方法多屬相對(duì)定量法。
5.在酶活性測(cè)定時(shí),如果底物或產(chǎn)物不能直接測(cè)定或難于準(zhǔn)確測(cè)定,可采用酶偶
聯(lián)法測(cè)定,即在反應(yīng)體系中加入一個(gè)或幾個(gè)工具酶,將待測(cè)酶生成的某一產(chǎn)物轉(zhuǎn)化
為新的可直接測(cè)定的產(chǎn)物,當(dāng)加入酶的反應(yīng)速度與待測(cè)酶反應(yīng)速度達(dá)到平衡時(shí),指
示酣的反應(yīng)速度即代表待測(cè)酶的活性。
6.臨床同工酶的分析方法有電泳法、免疫分析法、色譜法、動(dòng)力學(xué)分析法、蛋白酶
水解法。
7.體液中醐濃度測(cè)定時(shí),要控制的主要影響因素包括標(biāo)本及標(biāo)本采集和處理因
素、試劑及方法學(xué)因素、儀器及操作因素,以及最適測(cè)定條件選擇與條件的優(yōu)化。
8.測(cè)定酶濃度的樣本來(lái)自不同的組織和器官,但以血清和血漿最為常用,特別是
血清,既可避免抗凝劑的影響,又可防止抗凝時(shí)因振搖所致的溶血。臨床醵學(xué)測(cè)
定之前,標(biāo)本的采集、處理與貯存應(yīng)注意:防止溶血、合理使用抗凝劑、適宜的
溫度、減少副反應(yīng)干擾。此外,采集各種體液樣本的器皿質(zhì)地和潔凈度,采血部
位,以及血清中過(guò)量的膽紅素、脂質(zhì),樣品制備過(guò)程中的振搖等,均影響的活性測(cè)
定。
9.用自動(dòng)生物化學(xué)分析儀測(cè)定酶活性,通常采用公式進(jìn)行計(jì)算。當(dāng)條件固定時(shí),
理論K值為常數(shù)。由于儀器等諸多因素的影響,在臨床實(shí)際工作中,均需用校
準(zhǔn)物定期檢查和校正實(shí)際測(cè)定K值。
10.轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定方法有許多種,以往多用比色法如賴氏法(Reitman-
Frankel)、金氏法(King)和改良穆氏法(Mohun),其中以賴氏法最常
用,由于此法操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì),一些小型實(shí)驗(yàn)室仍在使用。目前,國(guó)內(nèi)外實(shí)驗(yàn)室多
采用IFCC推薦的連續(xù)監(jiān)測(cè)方法對(duì)ALT進(jìn)行測(cè)定。
ALT主要用于肝臟疾病的診斷。由于肝細(xì)胞中ALT濃度比血液高約7000倍,
只要有1/1000肝細(xì)胞中的ALT進(jìn)入血液就足以使血中ALT升高1倍,故此酶是反映
肝損傷的一個(gè)很靈敏指標(biāo)。但應(yīng)特別注意的是,重癥肝炎時(shí)由于大量肝細(xì)胞壞
死,血中ALT可僅輕度增高,臨終時(shí)常明顯下降,但膽紅素卻進(jìn)行性升高,出現(xiàn)
所謂“酶膽分離”現(xiàn)象,常是肝壞死的前兆。
11.CK的測(cè)定方法有比色法、紫外分光光度法和熒光法等。由于以磷酸肌酸為
底物的逆向反應(yīng)速度為正向反應(yīng)速度的6倍,所以采用逆向反應(yīng)進(jìn)行測(cè)定較為普
及。如肌酸顯色法和酶偶聯(lián)法,其中后者最常用,為國(guó)內(nèi)外測(cè)定CK的參考方
法。CK同工酶多用電泳和免疫抑制法測(cè)定,但兩法均會(huì)受溶血和巨CK的干擾,
免疫抑制法還會(huì)受到CK-BB的干擾。因此現(xiàn)在推薦用免疫化學(xué)方法直接測(cè)定CK-
MBmass,可不受溶血和巨CK的干擾。CK同工酶亞型(CK-MM亞型和CK-
MB亞型)多用瓊脂糖凝膠高壓電泳和等電聚焦電泳等。
CK及其同工酣和亞型是目前臨床上測(cè)定次數(shù)最多的酶,主要用于心肌、骨骼
肌和腦疾患的診斷和鑒別診斷及預(yù)后判斷。
12.ACP的測(cè)定多是利用磷酸苯二鈉法和磷酸對(duì)硝基酚法等在酸性條件下測(cè)定
ACP=國(guó)外多推薦使用磷酸百里酚酸為底物的比色法,因?yàn)榍傲邢貯CP對(duì)此底物
親合力高,測(cè)定結(jié)果基本能反映ACP含量高低。不同方法參考值也不同。此外還可
通過(guò)用L-酒石酸這類抑制劑鑒別和估量PAP活性。由于ACP不穩(wěn)定,腦活性
測(cè)定困難,目前已發(fā)展一些免疫學(xué)方法特異而靈敏地測(cè)定ACP特別是PAPo
總ACP升高可作為前列腺癌、骨疾病或網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)疾病的診斷指標(biāo)。
13.臨床上測(cè)定血液AMY主要用于診斷急性胰腺炎,常在腹痛后2?3h開(kāi)始
升高(也有延至12h后升高者),多在12?24h達(dá)峰值,2?5d恢復(fù)正常。
峰值一般為4ULN?6ULN,最高可達(dá)40倍。此值愈高,急性胰腺炎的可能性就
愈大,但高低和疾病預(yù)后關(guān)系不大,但若持續(xù)性升高達(dá)數(shù)周,常提示胰腺炎有
反復(fù),或有并發(fā)癥發(fā)生。尿AMY約于發(fā)病后12?24h開(kāi)始升高,下降也比血液
AMY慢,因此在急性胰腺炎后期測(cè)定尿AMY更有價(jià)值。
唾液腺疾病如腮腺炎患者血AMY也可升高,但臨床表現(xiàn)迥異,且主要為S-
AMY升高,有別于胰腺炎以P-AMY升高為主。
第二章生物化學(xué)檢驗(yàn)中的診斷酶學(xué)參考答案
單項(xiàng)選擇題(A型題)
1.A2.B3.B4.D5.B6.C7.B8.C
9.B10.E
11.D12.D13.B14.B15.A16.D17.B18.D
19.E20.B
21.C22.B23.A24.E25.E26.B27.A28.B
29.C30.A
31.D32.A33.C
二、多項(xiàng)選擇題(B型題)
1.E2.D3.C4.A5.E6.B
三、多項(xiàng)選擇題(X型題)
1.ABCD2.ABE3.ABDE4ABCD5ABC
6.ABCD
7.AD8.ABDE9.ABCD10.ACDE11.BCDE
12.ABE
13.AE
四、名詞解釋
1.醵是一種由活細(xì)胞產(chǎn)生,具有高度專一性、高度催化活性的物質(zhì),又稱為生物
催化劑,主要是蛋白質(zhì)。
2.血漿固有酶指屬血漿蛋白的固有成分,在血漿中發(fā)揮特定催化作用的一類酶,
也稱血漿特異酶。
3.酶失活至原來(lái)活性一半時(shí)所需時(shí)間稱為酶的半壽期(t1/2)。半壽期可用來(lái)代
表酶從血中清除的快慢。
4.連續(xù)監(jiān)測(cè)法是指每隔一定時(shí)間(2?60s),連續(xù)多次測(cè)定酶反應(yīng)過(guò)程中某一反
應(yīng)產(chǎn)物或底物量隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù),求出酶反應(yīng)初速度,間接計(jì)算醐活性濃度的方
法。
5.在酶學(xué)分析中,作為試劑用于測(cè)定化合物濃度或酶活性濃度的酶稱為工具酶。
6.酶活性IU定義為:在特定條件下,1min能轉(zhuǎn)化1mmol底物的酶量,即
lIU=lmmol.min-1o目前國(guó)內(nèi)外大多數(shù)臨床實(shí)驗(yàn)室常省略國(guó)際二字,即將IU
簡(jiǎn)寫(xiě)為Uo
7.同一種屬中由不同基因或等位基因所編碼的多肽鏈單體、純聚體或雜化體,具
有相同的催化作用,但其分子構(gòu)成、空間構(gòu)象、理化性質(zhì)、生物學(xué)性質(zhì)以及器官分
布或細(xì)胞內(nèi)定位不同的一組酶稱為同工的。
8.底物啟動(dòng)模式是指樣品先與缺乏某種底物的試劑1預(yù)孵育一定時(shí)間后,再加入含
這種底物的試劑2,啟動(dòng)樣品中的待測(cè)酶的酶促反應(yīng)。
五、問(wèn)答題
1.V=Vm[s]/(Km+[s])=Vm*3Km/(Km+3Km)=3/4Vm=0.75Vm,即V/Vm=0.75。
2.正常血漿中酣的動(dòng)態(tài)變化特點(diǎn):①正常血漿醐根據(jù)醮的來(lái)源及其在血漿中發(fā)揮
催化功能的情況,可將血漿酶分成血漿特異酶和非血漿特異酶兩大類,非血漿特異
前可進(jìn)一步分為外分泌酶、細(xì)胞內(nèi)酶和其他酶。②一般認(rèn)為,血液中酶的清除方式
與其他血漿蛋白質(zhì)類似,但是具體清除途徑尚未完全明了。血漿酶主要在血管內(nèi)失
活或分解,尿液則是小分子酶排出的途徑。
影響的濃度的因素包括影響正常血漿酶含量的自身因素和生物學(xué)因素,前者
主要有細(xì)胞內(nèi)外酶濃度的差異、酶的相對(duì)分子量、酶的組織分布、酶在細(xì)胞內(nèi)的定
位和存在形式、酶的半壽期等;后者主要是性別、年齡、食與藥物、運(yùn)動(dòng)、妊娠與
分娩、體位改變、晝夜變化及家庭因素等。
3.血漿酶的病理性變化主要包括酶合成異常、酶釋放增加、酶清除異常等。酶合
成異常包括合成減少和合成增多。酶從病變(或損傷)細(xì)胞中釋放增加是疾病時(shí)大
多數(shù)血清酶增高的主要機(jī)制。炎癥、缺血、壞死、創(chuàng)傷和腫瘤等是細(xì)胞釋放大分子
酶蛋白的重要原因。此外,血液含抑制物、代謝紊亂、藥物、遺傳性酶缺陷等原因
也可致酶活性下降。
4.酶濃度測(cè)定方法分為絕對(duì)定量法和相對(duì)定量法兩大類。絕對(duì)定量法是直接測(cè)
定酶蛋白量或酶摩爾濃度。相對(duì)定量法是根據(jù)酶的催化活性或酶促反應(yīng)速度來(lái)間接
測(cè)定酶濃度的方法。目前臨床上所用的方法多屬相對(duì)定量法。
5.在酶活性測(cè)定時(shí),如果底物或產(chǎn)物不能直接測(cè)定或難于準(zhǔn)確測(cè)定,可采用酶偶
聯(lián)法測(cè)定,即在反應(yīng)體系中加入一個(gè)或幾個(gè)工具酶,將待測(cè)酶生成的某一產(chǎn)物轉(zhuǎn)化
為新的可直接測(cè)定的產(chǎn)物,當(dāng)加入酶的反應(yīng)速度與待測(cè)酶反應(yīng)速度達(dá)到平衡時(shí),指
示酶的反應(yīng)速度即代表待測(cè)酶的活性。
6.臨床同工酶的分析方法有電泳法、免疫分析法、色譜法、動(dòng)力學(xué)分析法、蛋白酶
水解法。
7.體液中酶濃度測(cè)定時(shí),要控制的主要影響因素包括標(biāo)本及標(biāo)本采集和處理因
素、試劑及方法學(xué)因素、儀器及操作因素,以及最適測(cè)定條件選擇與條件的優(yōu)化。
8.測(cè)定酶濃度的樣本來(lái)自不同的組織和器官,但以血清和血漿最為常用,特別是
血清,既可避免抗凝劑的影響,又可防止抗凝時(shí)因振搖所致的溶血。臨床前學(xué)測(cè)
定之前,標(biāo)本的采集、處理與貯存應(yīng)注意:防止溶血、合理使用抗凝劑、適宜的
溫度、減少副反應(yīng)干擾。此外,采集各種體液樣本的器皿質(zhì)地和潔凈度,采血部
位,以及血清中過(guò)量的膽紅素、脂質(zhì),樣品制備過(guò)程中的振搖等,均影響酶活性測(cè)
定。
9.用自動(dòng)生物化學(xué)分析儀測(cè)定酶活性,通常采用公式進(jìn)行計(jì)算。當(dāng)條件固定時(shí),
理論K值為常數(shù)。由于儀器等諸多因素的影響,在臨床實(shí)際工作中,均需用校
準(zhǔn)物定期檢查和校正實(shí)際測(cè)定K值。
10.轉(zhuǎn)氨酶的測(cè)定方法有許多種,以往
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