LC1WatersLC培訓(xùn)教材定性及定量技術(shù)

色譜峰定性鑒別每個(gè)色譜峰通過比較保留值(通常是保留時(shí)間)的方法，找到各色譜峰所對(duì)應(yīng)的組份大多數(shù)情況下用比較保留時(shí)間來定性 即所謂：保留時(shí)間相同，可能是同樣的組份保留時(shí)間不同，肯定不是同樣的組份用保留時(shí)間定性用“標(biāo)樣”的保留值定出被測(cè)組份的位置進(jìn)一步的確認(rèn)標(biāo)準(zhǔn)加入同時(shí)用其他方法其他色譜方法（改變機(jī)理，如：用不同的色譜柱）其他檢測(cè)器PDA，光譜圖比較、譜庫(kù)檢索MS，質(zhì)譜圖解析、譜庫(kù)檢索其他儀器方法標(biāo)準(zhǔn)加入法舉例

廢水樣品中五氯苯（PCP）的分析梯度曲線梯度曲線PCP4ppm3ppm2ppm1ppm峰一致性的確認(rèn)確認(rèn)色譜峰的純度保證每個(gè)色譜峰下只有一個(gè)被測(cè)的組份檢查是否有共流出的物質(zhì)（雜質(zhì)）干擾色譜峰純度確認(rèn)的方法用光電二極管矩陣檢測(cè)器比較光譜圖峰純度鑒定，雙波長(zhǎng)Ratio996的純度角理論用二極管矩陣檢測(cè)器比較光譜圖苯的色譜及光譜圖（Index）996的純度角理論996的純度角理論可快速得到純度結(jié)果定量分析的具體內(nèi)容確定樣品的類型，主要成分/痕量成分使分析條件的分離度（R）大于：1.5色譜峰的定性，峰一致性測(cè)定檢測(cè)限及定量限：確定靈敏度及線性范圍用標(biāo)樣建立標(biāo)準(zhǔn)曲線檢查方法的準(zhǔn)確度及精確度用標(biāo)樣定期檢查方法痕量分析如信/噪比不夠，定量的精確度會(huì)受影響，因此要：分析前濃縮樣品選擇高靈敏度檢測(cè)器用衍生法使色譜體系最優(yōu)化使用短的微徑柱（減少樣品的稀釋）使用高效色譜柱使k'值盡可能小增加進(jìn)樣體積和濃度使用低流速（N增加）采用梯度淋洗液相色譜定量的精度

測(cè)量的精度定量的準(zhǔn)確度

誤差∶E=O-TO∶觀測(cè)到的值T∶真值液相色譜定量精度的計(jì)算

測(cè)量精度的計(jì)算準(zhǔn)確度的衡量色譜方法是相對(duì)定量方法，如不考慮損失及雜質(zhì)干擾等的因素，其結(jié)果同“標(biāo)樣”的準(zhǔn)確程度關(guān)系密切一般的衡量方法是做回收率實(shí)驗(yàn)或不同方法之間的比較：相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù)：其中，X及Y分別代表不同方法的實(shí)驗(yàn)值及平均值準(zhǔn)確度的影響因素標(biāo)樣的可靠性及其配制的準(zhǔn)確度色譜方法的可靠性色譜泵的精確度（GPC的影響更大）進(jìn)樣器的準(zhǔn)確度，進(jìn)樣技術(shù)流速與檢測(cè)面積的關(guān)系如在不改變系統(tǒng)效率的情況下，流速降低峰高幾乎不變，然而峰面積與流速相應(yīng)成反比增加。溶劑強(qiáng)度、K'及峰高的關(guān)系柱效和峰高的關(guān)系如其他因素不變，如：K‘，a，流速等，柱效增加峰面積基本不變，而峰高增加。常用的定量方法峰面積百分比法由于檢測(cè)技術(shù)的影響，在液相色譜中不常用外標(biāo)法在液相色譜中用的最多內(nèi)標(biāo)法準(zhǔn)確，但是麻煩在標(biāo)準(zhǔn)方法中用的最多外標(biāo)法定量配制一系列已知濃度的標(biāo)樣外標(biāo)法定量（二）實(shí)際色譜圖標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量（三）計(jì)算公式特點(diǎn)無需各組份都被檢出、洗脫需要標(biāo)樣標(biāo)樣及樣品測(cè)定的條件要一致進(jìn)樣體積要準(zhǔn)確進(jìn)樣技術(shù)對(duì)定量結(jié)果的影響固定體積定量管（loop）的進(jìn)樣器精度最好，其準(zhǔn)確度取決于進(jìn)樣器的結(jié)構(gòu)可變體積進(jìn)樣器的精度取決于操作者的技術(shù)，準(zhǔn)確度通常更高，因?yàn)檫M(jìn)樣用的注射器結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)確度高，操作者的技術(shù)水平也有影響，但不大WISP自動(dòng)進(jìn)樣器精確度及準(zhǔn)確度都可達(dá)到定量管進(jìn)樣器的水平，因?yàn)槠涿恳晃⑸?7步以上。然而它又保留了可變體積進(jìn)樣器的優(yōu)點(diǎn)內(nèi)標(biāo)法定量（一）配制一系列濃度的標(biāo)樣，其中加有內(nèi)標(biāo)樣內(nèi)標(biāo)法定量（二）實(shí)際色譜圖標(biāo)準(zhǔn)曲線內(nèi)標(biāo)法定量（三）計(jì)算公式：特點(diǎn)：無需各組份都被檢出、洗脫需要標(biāo)樣，需要內(nèi)標(biāo)樣結(jié)果與進(jìn)樣體積無關(guān)內(nèi)標(biāo)法定量（四）對(duì)內(nèi)標(biāo)物的要求化學(xué)結(jié)構(gòu)與待測(cè)組分相似(同系物、異構(gòu)體)在樣品中不存在不與樣品中組份發(fā)生任何化學(xué)反應(yīng)保留值與待測(cè)組分接近濃度（響應(yīng)值）與待測(cè)組分相當(dāng)其色譜峰與其他色譜峰分離好峰面積百分比法定量公式：特點(diǎn)：各組分要全部流出、全部被檢測(cè)，并對(duì)檢測(cè)器的響應(yīng)值一樣簡(jiǎn)單，液相色譜目前很難做到這點(diǎn)與進(jìn)樣量無關(guān)不需標(biāo)樣簡(jiǎn)單可接收的檢測(cè)范圍校正曲線只有在建立這條曲線的濃度范圍內(nèi)有效，高或低于這些點(diǎn)都可能引起計(jì)算錯(cuò)誤定量校正曲線曲線A：因在零濃度時(shí)仍有色譜峰，

可能有雜質(zhì)未分開曲線B：