上海市黃浦區(qū)金陵中學高三第六次模擬考試新高考生物試卷及答案解析

上海市黃浦區(qū)金陵中學高三第六次模擬考試新高考生物試卷注意事項1．考試結(jié)束后，請將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請務必將自己的姓名、準考證號用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請認真核對監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準考證號與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對應選項的方框涂滿、涂黑；如需改動，請用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號等須加黑、加粗．一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．己亥末，庚子春，武漢發(fā)生由2019新型冠狀病毒引起的新冠肺炎。下列說法正確的是（）A．用滅菌后的培養(yǎng)基直接培養(yǎng)2019新型冠狀病毒B．2019新型冠狀病毒、藍藻和酵母菌都具有細胞壁C．在收治患者的醫(yī)院調(diào)查新冠肺炎在人群中的發(fā)病率D．以單鏈RNA作為遺傳物質(zhì)的冠狀病毒易發(fā)生突變2．若玫瑰的花色受常染色體上一對等位基因控制，紅色玫瑰與白色玫瑰交配，F(xiàn)1均為淡紅色玫瑰，F(xiàn)1隨機授粉，F(xiàn)2中紅色玫瑰：淡紅色玫瑰：白色玫瑰=1：2：1。下列敘述正確的是（）A．玫瑰花色性狀中，紅色對白色為完全顯性B．F2中出現(xiàn)紅色、淡紅色、白色是基因重組的結(jié)果C．F2中相同花色的玫瑰自交，其子代中紅色玫瑰所占的比例為3/16D．F2中淡紅色玫瑰與紅色玫瑰雜交，其子代基因型的比例與表現(xiàn)型的比例相同3．下列關(guān)于“肺炎雙球菌離體轉(zhuǎn)化實驗”的敘述，錯誤的是（）A．該實驗研究早于“T2噬菌體侵染大腸桿菌實驗”B．實驗中用細菌培養(yǎng)液對R型菌進行了懸浮培養(yǎng)C．S型菌的DNA使R型菌發(fā)生穩(wěn)定的可遺傳變異D．R型菌的轉(zhuǎn)化效率僅取決于S型菌DNA的純度4．動作電位是可興奮組織或細胞受到足夠強刺激時，在靜息電位基礎上發(fā)生的快速、可逆轉(zhuǎn)、可傳播的細胞膜兩側(cè)的電位變化。如圖所示為刺激強度與膜電位變化之間的關(guān)系。下列相關(guān)敘述正確的是（）A．神經(jīng)細胞受到刺激時，刺激位點就會出現(xiàn)大量鈉離子內(nèi)流現(xiàn)象B．圖中曲線峰值表示動作電位，該峰值大小與刺激強度呈正相關(guān)C．動作電位恢復到靜息電位時，膜外電位由負電位轉(zhuǎn)變成正電位D．神經(jīng)細胞興奮部位的Na+內(nèi)流需要消耗能量5．如圖為某植物葉肉細胞部分結(jié)構(gòu)示意圖，①是葉綠體。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）A．②是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，能對蛋白質(zhì)進行加工B．①和④中都含有光合色素C．③是線粒體，是有氧呼吸的主要場所D．①是進行光合作用的場所6．如圖描述了一種鹿的種群生長速率的變化，下列說法錯誤的是（）A．1910-1925年間。鹿種群數(shù)量上升的原因可能是食物資源非常充裕B．1925-1940年間，鹿種群數(shù)量下降的原因主要是鹿種群數(shù)量過多，導致種內(nèi)斗爭C．1925年時，鹿種群內(nèi)種內(nèi)斗爭最激烈D．1930年時，大約有12000只鹿在此環(huán)境下生存而不會因饑餓致死7．下列關(guān)于核糖體結(jié)構(gòu)與功能的敘述，正確的是（）A．核糖體由蛋白質(zhì)和tRNA組成B．抗體是由漿細胞中游離的核糖體合成C．多個核糖體串聯(lián)在一條mRNA上可快速合成多條肽鏈D．核糖體在完成一條mRNA的翻譯后兩個亞基立即被降解8．（10分）下列有關(guān)“神經(jīng)-體液-免疫調(diào)節(jié)”的相關(guān)敘述中，正確的是（）A．人在盡力憋氣后呼吸運動會加深加快，其原因是氧氣濃度過低刺激了呼吸中樞B．胰島B細胞表面有神經(jīng)遞質(zhì)、葡萄糖等物質(zhì)的受體C．當人從寒冷室外進入到溫暖室內(nèi)后，身體產(chǎn)熱量增加，散熱量減少D．漿細胞既能夠分泌抗體，也能夠增殖分化成記憶細胞二、非選擇題9．（10分）一個由英國倫敦帝國學院和芬蘭圖爾庫大學的科學家組成的研究小組日前開發(fā)出一種通過大腸桿菌制造丙烷的新技術(shù)。科研人員要對大腸桿菌進行研究和利用，需要對大腸桿菌進行培養(yǎng)、分離、鑒定與計數(shù)等，請結(jié)合所學知識，回答下列問題：（1）培養(yǎng)基配制時需要對培養(yǎng)基進行滅菌，采用的方法是_____________，實驗室常用的三種消毒方法的名稱是__________________________。在接種前通常需要檢測固體培養(yǎng)基是否被污染，檢測的方法是__________________________。（2）圖1所示的方法是_____________，對分離得到的大腸桿菌可通過觀察菌落的_____________進行形態(tài)學鑒定。在5個平板上分別接入1．1mL稀釋液，經(jīng)適當培養(yǎng)后，5個平板上菌落數(shù)分別是19、61、64，65和66，則1g土壤中的活菌數(shù)約為___________個。（3）圖2是某同學利用不同于圖1方法分離菌株的示意圖。下列對其操作的敘述正確的有_____________。a．操作前用無水乙醇對雙手進行消毒處理b．不能將第⑤區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連c．整個過程需要對接種環(huán)進行6次灼燒d．平板劃線后培養(yǎng)微生物時要倒置培養(yǎng)10．（14分）圖示pIJ732是一種常用質(zhì)粒，其中tsr為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而限制酶SacⅠ、SphⅠ，BglⅠ在pIJ732上分別只有一處識別序列?；卮鹣铝袉栴}。表1pIJ732pZHZ8BglⅡ1．7kb2．7kb表2固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（μg/mL）312113不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況+++++++++--“+”表示生長；“-”表示不生長。（1）限制性內(nèi)切核酸酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間_______的斷裂，切割形成的末端有_______兩種。（2）以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置換質(zhì)粒PIJ732上長度為3．4kb的SacⅠ/sphⅠ片段，構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒的限制酶酶切片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為_____kb，判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是____________________________。（3）導入目的基因時，首先用______處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于________中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成______過程。（4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導入pzHZ8的鏈霉菌細胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應在______μg/mL以上，挑選成功導入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是________________________。11．（14分）大腸桿菌是寄生于人和動物腸道中的細菌，是一種常用的生物學實驗材料，其代謝產(chǎn)物能與染料伊紅美藍反應，使菌落呈黑色。（1）下表是某公司研發(fā)的一種培養(yǎng)大腸桿菌菌群的培養(yǎng)基配方。成分含量蛋白胨1．4g乳糖3．4g蔗糖3．4gK3HPO43．4g顯色劑4．3g瓊脂13．4g將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到144mL根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于___________（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基，若要分離能分解尿素的細菌需將培養(yǎng)基中_________換成__________，若要鑒定分解尿素的細菌還需將伊紅美藍換成___________。（3）培養(yǎng)大腸桿菌時，常用的接種方法是_______________________。（3）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前通常需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是____________。對已使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過____________處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴散。（4）現(xiàn)有一升水樣，用無菌吸管吸取1mL水樣至盛有9mL無菌水的試管中，依次稀釋13稀釋度。各取4．1mL已稀釋13倍的水樣分別接種到三個培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為33、36、37，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為____________。（3）為檢測嚴重污染水體中大腸桿菌數(shù)量，將水樣適當稀釋后，取樣涂布在上述平板培養(yǎng)基中，應選擇顏色為____________的菌落進行計數(shù)。該方法是通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)來推測樣品中的活菌數(shù)，其原理是____________________________________。12．下圖為紅綠色盲、抗維生素D佝僂病的遺傳家系圖（不考慮基因突變與四分體中非姐妹染色單體間的交叉互換）。已知紅綠色盲是伴X染色體隱性遺傳?。ㄔO基因為A、a），抗維生素D佝僂病是伴X染色體顯性遺傳?。ㄔO基因為B、b），請據(jù)圖回答下列問題：（1）Ⅰ-1與Ⅰ-4的基因型分別為______________________________。（2）Ⅲ-2與一個只患紅綠色盲男性婚配，則他們生一兩病都不患的孩子的概率為___，他們所生的男孩中，患抗維生素D佝僂病的概率為_____。（3）經(jīng)檢查發(fā)現(xiàn)，Ⅲ-1不攜帶任何致病基因，但卻患有遺傳病，請簡要說明兩種可能原因：_______________、__________________。（4）計算人群中的紅綠色盲的發(fā)病率時，所調(diào)查的群體應_______，以保證實驗數(shù)據(jù)和結(jié)論的準確性。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、D【解析】

病毒是一類沒有細胞結(jié)構(gòu)的特殊生物，只有蛋白質(zhì)外殼和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)構(gòu)成，不能獨立的生活和繁殖，只有寄生在其他生物的活細胞內(nèi)才能生活和繁殖，一旦離開了活細胞，病毒就無法進行生命活動?！驹斀狻緼、病毒不能直接在滅菌的培養(yǎng)基上生存，A錯誤；B、2019新型冠狀病毒無細胞結(jié)構(gòu)，無細胞壁，B錯誤；C、調(diào)查發(fā)病率需在人群中隨機抽樣調(diào)查，而不能在收治患者的醫(yī)院調(diào)查，C錯誤；D、單鏈RNA不穩(wěn)定，容易發(fā)生突變，故以單鏈RNA作為遺傳物質(zhì)的冠狀病毒易發(fā)生突變，D正確。故選D。2、D【解析】

分析題中信息：“紅色玫瑰與白色玫瑰交配，F(xiàn)1均為淡紅色玫瑰，F(xiàn)1隨機授粉，F(xiàn)2中紅色玫瑰：淡紅色玫瑰：白色玫瑰=1：2：1?！笨芍ǖ念伾目刂茖儆诓煌耆@性，F(xiàn)1淡粉色玫瑰為雜合子?！驹斀狻緼、玫瑰花色性狀中，紅色對白色為不完全顯性，A錯誤；B、F2中出現(xiàn)紅色、淡紅色、白色是基因分離的結(jié)果，B錯誤；C、F2中相同花色的玫瑰自交，其子代中紅色玫瑰所占的比例為1/4+1/2×1/4＝3/8，C錯誤；D、F2中淡紅色玫瑰與紅色玫瑰雜交，其子代基因型的比例為1：1，表現(xiàn)型為淡紅色與紅色，比例為1：1，D正確。故選D。3、D【解析】

肺炎雙球菌是人類肺炎和小鼠敗血癥的病原體，肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗是證實DNA作為遺傳物質(zhì)的最早證據(jù)來源。科學家又進行了離體細菌轉(zhuǎn)化實驗，從活的S型菌中抽提DNA、蛋白質(zhì)和莢膜物質(zhì)，分別與活的R型菌混合，并進行懸浮培養(yǎng)，實驗結(jié)果表明，只有其中的DNA組分能夠把R型菌轉(zhuǎn)化為S型菌，又進一步研究表明，用DNA酶處理DNA樣品，DNA被降解后就不能使R型菌發(fā)生轉(zhuǎn)化，可見一種細菌的DNA摻入到另一種細菌中，能夠引起穩(wěn)定的遺傳變異，后來的研究不斷證實：DNA不僅可以引起細菌的轉(zhuǎn)化，而且純度越高，轉(zhuǎn)化效率就越高，對肺炎雙球菌轉(zhuǎn)化實驗的研究證實了這樣的論斷：DNA是遺傳物質(zhì)，DNA賦予了生物的遺傳特性。【詳解】A、肺炎雙球菌離體轉(zhuǎn)化實驗早于“T2噬菌體侵染大腸桿菌實驗”，A正確；B、由分析可知，肺炎雙球菌的體外轉(zhuǎn)化實驗中用細菌培養(yǎng)液對R型菌進行了懸浮培養(yǎng)，B正確；C、實驗表明，S型菌的DNA使R型菌發(fā)生穩(wěn)定的可遺傳變異，C正確；D、R型菌的轉(zhuǎn)化效率不僅取決于S型菌DNA的純度，而且還取決于培養(yǎng)條件，D錯誤。故選D。4、C【解析】

靜息時，神經(jīng)纖維膜動物為外正內(nèi)負，興奮時膜電位為外負內(nèi)正，興奮在神經(jīng)纖維上的傳導是雙向的。從圖中看出只有當刺激強度達到S5時，才產(chǎn)生了動作電位，并且刺激強度增大，動作電位的值沒有發(fā)生改變?！驹斀狻緼、從圖中看出，必須刺激達到一定的強度才出現(xiàn)動作電位，因此可以推測必須刺激達到一定的強度才會出現(xiàn)大量鈉離子內(nèi)流現(xiàn)象，A錯誤；B、從圖中看出刺激強度增大，動作電位的值沒有發(fā)生改變，B錯誤；C、動作電位是外負內(nèi)正，靜息電位是外正內(nèi)負，所以動作電位恢復到靜息電位時，膜外電位由負電位轉(zhuǎn)變成正電位，C正確；D、細胞外Na+濃度大于細胞內(nèi)，所以神經(jīng)細胞興奮部位的Na+內(nèi)流不消耗能量，D錯誤。故選C?！军c睛】本題考查了神經(jīng)調(diào)節(jié)的相關(guān)知識，掌握興奮在神經(jīng)纖維上傳導的原理，分析圖中動作電位的產(chǎn)生和刺激強度的關(guān)系，是解題的關(guān)鍵。5、B【解析】

分析題圖：該圖為植物葉肉細胞部分結(jié)構(gòu)示意圖，其中①是葉綠體、②是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、③是線粒體、④是液泡?！驹斀狻緼、②是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，能對來自核糖體的蛋白質(zhì)進行加工和運輸，A正確；B、①葉綠體中含有光合色素，④液泡中含有色素，但不屬于光合色素，B錯誤；C、③是線粒體，是細胞進行有氧呼吸的主要場所，C正確；D、①是葉綠體，含有光合色素，是植物進行光合作用的場所，D正確。故選B。【點睛】本題結(jié)合模式圖，考查細胞結(jié)構(gòu)和功能，要求考生識記細胞中各種結(jié)構(gòu)的圖象，能準確判斷圖中各結(jié)構(gòu)的名稱，再根據(jù)題干要求準確答題。6、B【解析】

分析圖形：在1905～1925年期間，環(huán)境的容納量是25000；在1925年由于鹿群的數(shù)量非常大，導致資源被過度破壞，導致鹿群的食物減少，資源被破壞，所以在1925～1930期間，環(huán)境容納量持續(xù)下降；所以在1930～1940年期間，環(huán)境容納量大約是12000?！驹斀狻緼、1910-1925年間，鹿種群數(shù)量上升的原因可能是食物資源非常充裕，A正確；B、1925-1940年間鹿種群環(huán)境容納量下降，種內(nèi)斗爭是內(nèi)源性因素，鹿種群數(shù)量下降的主要原因是：在1925年由于鹿群的數(shù)量非常大，導致資源被過度破壞，導致鹿群的食物減少，資源被破壞，所以在1925～1930期間，環(huán)境容納量持續(xù)下降，B錯誤；C、1925年時鹿種群數(shù)量最大，所以種內(nèi)斗爭最激烈，C正確；D、在1905-1925年間，環(huán)境的容納量大約是25000只；在1925年由于鹿群的數(shù)量非常大，導致資源被過度破壞，鹿群的食物減少，所以在1925-1930年間，環(huán)境容納量持續(xù)下降，由圖可知1930年，環(huán)境容納量大約是12000只，D正確。故選B?！军c睛】本題主要考查種群數(shù)量變化等知識，意在考查學生的理解與表達能力、獲取與處理信息的能力。7、C【解析】

基因表達是指將來自基因的遺傳信息合成功能性基因產(chǎn)物的過程，基因表達產(chǎn)物通常是蛋白質(zhì)?；虮磉_包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。轉(zhuǎn)錄過程由RNA聚合酶進行，以DNA為模板，產(chǎn)物為RNA。RNA聚合酶沿著一段DNA移動，留下新合成的RNA鏈。翻譯過程是以信使RNA（mRNA）為模板，指導合成蛋白質(zhì)的過程?！驹斀狻緼、核糖體由蛋白質(zhì)和rRNA組成，A錯誤；B、抗體是分泌蛋白，由漿細胞中附著的核糖體合成，B錯誤；C、多個核糖體串聯(lián)在一條mRNA上可快速合成多條肽鏈，提高翻譯的效率，C正確；D、核糖體在完成一條mRNA的翻譯后大小亞基會分離，不會立即被降解，D錯誤。故選C。8、B【解析】

血糖平衡。機體內(nèi)血糖平衡調(diào)節(jié)過程如下：當血糖濃度升高時，血糖會直接刺激胰島B細胞引起胰島素的合成并釋放，同時也會引起下丘腦的某區(qū)域的興奮發(fā)出神經(jīng)支配胰島B細胞的活動，使胰島B細胞合成并釋放胰島素，胰島素促進組織細胞對葡萄糖的攝取、利用和貯存，從而使血糖下降；當血糖下降時，血糖會直接刺激胰島A細胞引起胰高血糖素的合成和釋放，同時也會引起下丘腦的另一區(qū)域的興奮發(fā)出神經(jīng)支配胰島A細胞的活動，使胰高血糖素合成并分泌，胰高血糖素通過促進肝糖原的分解和非糖物質(zhì)的轉(zhuǎn)化從而使血糖上升，并且下丘腦在這種情況下也會發(fā)出神經(jīng)支配腎上腺的活動，使腎上腺素分泌增強，腎上腺素也能促進血糖上升。【詳解】A、人在盡力憋氣后呼吸運動會加深加快，是高濃度的CO2刺激呼吸中樞的結(jié)果，A錯誤；B、由分析可知，胰島B細胞可以直接感受血糖濃度的變化同時也接受神經(jīng)系統(tǒng)的調(diào)控，所以其表面會有血糖和神經(jīng)遞質(zhì)的受體，B正確；C、人從寒冷室外進入到溫暖室內(nèi)之后，機體的散熱量減少，機體調(diào)節(jié)的結(jié)果應該是增加散熱，減少產(chǎn)熱以維持體溫平衡，C錯誤；D、漿細胞屬于終端分化細胞，只能分泌抗體，沒有增殖能力，D錯誤。故選B。二、非選擇題9、高壓蒸汽滅菌煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)稀釋涂布平板法形狀、顏色、大小、隆起、邊緣、透明度、光澤等特征bcd【解析】

微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落；②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。菌落數(shù)計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)=（c÷V）×M，其中c代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（mL），M代表稀釋倍數(shù)。【詳解】（1）培養(yǎng)基配制時需要對培養(yǎng)基進行滅菌，采用的方法是高壓蒸汽滅菌，實驗室常用的三種消毒方法的名稱是：煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒。在接種前通常需要檢測固體培養(yǎng)基是否被污染，檢測的方法是：將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫箱中培養(yǎng)，觀察是否有菌落形成。（2）由圖1的操作流程可以看出，圖1所示方法為：稀釋涂布平板法，對分離得到的大腸桿菌可通過觀察菌落的形狀、顏色、大小、隆起、邊緣、透明度、光澤等特征進行形態(tài)學鑒定。利用稀釋涂布平板法測定細菌數(shù)時，篩選平板上的菌落數(shù)為31～311，所以1g土壤中的活菌數(shù)為個。（3）圖2是通過平板劃線接種操作。a、操作前用71%的酒精溶液對接種人員的雙手進行消毒處理，a錯誤；b、在劃線操作時不能將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連，因此不能將第⑤區(qū)域的劃線與第①區(qū)域的劃線相連，正確；c、在每次劃線前后都要對接種環(huán)進行滅菌，接種環(huán)的滅菌方法應是在火焰上灼燒，整個過程需要對接種環(huán)進行6次灼燒，c正確；d、由于正放培養(yǎng)平板蓋子上的冷凝水會順著流到培養(yǎng)基上和外面，引起雜菌污染，因此平板劃線后培養(yǎng)微生物時要倒置培養(yǎng)，并且倒置有利于菌體呼吸，d正確。故選bcd?！军c睛】本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法；掌握鑒定微生物分解菌的原理，能結(jié)合圖中信息準確答題。10、磷酸二酯鍵黏性末端和平末端4．4pIJ732上的原有BglⅡ位點被目的基因置換得到的環(huán)狀pZH28，仍能被BglⅡ切割成一條線段Ca2+緩沖液轉(zhuǎn)化4根據(jù)導入pIJ732的鏈霉菌菌落呈黑色、導入pZHZ8的鏈霉菌菌落呈白色的特點，通過觀察菌落的顏色進行挑選【解析】

該題主要考察了基因工程的相關(guān)操作，基因工程的基本操作步驟為目的基因的獲取、基因表達載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)氲绞荏w細胞、目的基因的檢測與鑒定。限制性核酸內(nèi)切酶主要作用于識別序列的磷酸二酯鍵，切割完以后可能會產(chǎn)生黏性末端或者是平末端。將目的基因?qū)胧荏w細胞時，常常使用Ca2+使得受體細胞成為感受態(tài)細胞?！驹斀狻浚?）限制性內(nèi)切核酸酶是作用于其所識別序列中剪切位點的磷酸二酯鍵，不同的限制酶可以獲得不同的末端，主要分為黏性末端和平末端；（2）由題干可知，質(zhì)粒PIJ732上具有長度為3．4kb的SacⅠ/sphⅠ片段，使用SacⅠ和SphⅠ切取質(zhì)粒會多置換下3.4kb的片段，而BglⅡ在原質(zhì)粒和重組質(zhì)粒上的切割片段相差4.3kb，介于BglⅡ的識別位點位于SacⅠ和SphⅠ之間，所以推測目的基因的片段長度應該為4.3+3.4=4.4kb；在表格中可以反應出重組質(zhì)粒可以被BglⅡ限制酶切割，切割后稱為一條線段，但原有質(zhì)粒上的相關(guān)片段已經(jīng)被SacⅠ和SphⅠ置換為目的基因，因此推測目的基因中也含有4個BglⅡ切割位點；（3）將目的基因?qū)氲绞荏w細胞之前，需要將受體細胞用Ca2+處理使得受體細胞成為感受態(tài)細胞；然后重組質(zhì)粒要溶解到緩沖液中與感受態(tài)細胞融合；從而促進鏈霉菌完成轉(zhuǎn)化的過程；（4）根據(jù)圖中的表格可知，要想對重組的鏈霉菌細胞進行篩選，應該滿足不含質(zhì)粒的鏈霉菌無法生長的要求，因此所需硫鏈絲菌素濃度至少應在4μg/mL以上；在該質(zhì)粒上存在一個mel基因，其表達的產(chǎn)物會使得白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落，所以導入pIJ732的鏈霉菌菌落呈黑色，而重組質(zhì)粒pZHZ8在構(gòu)建的時候破壞了mel基因，所以該重組質(zhì)粒導入到鏈霉菌后菌落呈白色，后通過觀察菌落的顏色進行挑選?！军c睛】該題的難點在于基因表達載體的建構(gòu)，由于切割位點及相對應的限制酶較多，所以準確分析目的基因及質(zhì)粒的長度和結(jié)構(gòu)就對學生有一個綜合性的考察。而目的基因的檢測與鑒定則需要在理解以上重組質(zhì)粒的構(gòu)建過程的基礎上分析標記基因的應用情況。11、鑒別蛋白胨尿素酚紅指示劑平板劃線法和稀釋涂布平板法將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生滅菌3．6×18黑色當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌【解析】

培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機鹽等。常用的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。常用的滅菌方法：干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法?！驹斀狻浚?）該培養(yǎng)基含有顯色劑，根據(jù)用途劃分，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。若要分離能分解尿素的細菌，培養(yǎng)基中需要以尿素作為唯一的氮源，故需要將蛋白胨換成尿素，若要鑒定分解尿素的細菌還需將伊紅美藍換成酚紅指示劑，觀察是否變紅。（3）培養(yǎng)大腸桿菌時，可以選擇平板劃線法和