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ICS65.020.30CCSB44ICS65.020.30CCSB44山 東 省 地 方 標(biāo) 準(zhǔn)DB37/T4724—2024驢駒大腸桿菌病防治技術(shù)規(guī)程Codeofpracticeforthepreventionandtreatmentofcolibacillosisindonkeyfoals2024-06-28發(fā)布 2024-07-28實(shí)施山東省場(chǎng)監(jiān)理局 發(fā)布DB37/T4724DB37/T4724—2024II前 言本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。本文件由山東省畜牧業(yè)標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口。DB37/T4724DB37/T4724—2024PAGEPAGE5驢駒大腸桿菌病防治技術(shù)規(guī)程范圍本文件適用于養(yǎng)驢場(chǎng)驢駒大腸桿菌病的防治。(GB19489實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求GB39707醫(yī)療廢物處理處置污染控制標(biāo)準(zhǔn)NY/T388畜禽場(chǎng)環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范NY5027無(wú)公害食品畜禽飲用水水質(zhì)NY/T5030無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品獸藥使用準(zhǔn)則下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件。3.1驢駒腸菌病 donkeyfoalscolibacillosis由O78、O101、O8等主要血清型的致病性大腸桿菌引起驢駒的急性、接觸性傳染病。注:病例特征呈現(xiàn)劇烈的下痢和敗血癥癥狀。病原為腸桿菌科大腸埃希氏菌屬中O78、O101、O8等主要血清型的致病性大腸桿菌。病原菌為革蘭氏陰性菌,在驢駒腸道及其糞便污染的環(huán)境中廣泛存在。傳染源發(fā)病驢駒和攜帶致病性大腸桿菌的驢。該病通過(guò)消化道傳播,糞-口傳播是主要途徑。病原菌污染糞便、圈舍、飼料、水槽及飲水等均可傳播。可通過(guò)臍帶或分娩時(shí)經(jīng)產(chǎn)道傳播。82d~31d~2胃黏膜脫落,有出血點(diǎn)和出血斑。小腸、盲腸和結(jié)腸表現(xiàn)為黏膜脫落。肝臟腫大、淤血。脾腫大,包膜下有出血點(diǎn)。心內(nèi)膜和外膜也有出血點(diǎn),腸系膜淋巴結(jié)腫大、出血。診斷見(jiàn)附錄A。采樣按NY/T541的規(guī)定執(zhí)行,主要采集肛拭子、腹瀉物等病料。243~4次。將單菌落革蘭氏染色,鏡檢,油鏡下呈現(xiàn)兩端鈍圓,單在或成對(duì)的革蘭氏陰性菌。V-P24,V-POLB240.52h,制備O抗原。取潔凈玻片,吸取O抗原滴于玻片兩端,一滴加入10μL抗30°于1minA.1進(jìn)行16SrDNADNA16SrDNAAPCR(ng/μL~50ng/μL)2μL,2×TaqPCRMasterMix12.5μL(20μmol/L)1μL,ddH2O8.5μL,共25μL反應(yīng)體系。PCR反應(yīng)程序?yàn)?55min;9515s,53s,72min,共30725min,411500PCR將PCRNCBIBLAST按照GB19489規(guī)定執(zhí)行。預(yù)防按NY/T388和NY5027的規(guī)定執(zhí)行。夏季食槽和水槽應(yīng)及時(shí)清理。生產(chǎn)區(qū)內(nèi)不得飼養(yǎng)其他動(dòng)物,不應(yīng)屠宰和解剖病死驢,不帶入其他畜產(chǎn)品。料庫(kù)應(yīng)有防鼠防鳥設(shè)施。管理驢駒3d~5治療原則NY/T5030方法采用對(duì)因治療和對(duì)癥治療。推薦藥物見(jiàn)附錄B。10.1定。10.2
病死驢及病害驢的處理見(jiàn)《病死及病害動(dòng)物無(wú)害化處理技術(shù)規(guī)范》(農(nóng)醫(yī)發(fā)[2017]25號(hào))的規(guī)廢棄物與病料處理按照GB39707規(guī)定執(zhí)行。記錄存檔各種記錄保存期限不低于兩年,分類歸檔。附錄A(規(guī)范性)主要實(shí)驗(yàn)室診斷方法原理,PH顯G+Gˉ菌:肽聚糖層薄,交聯(lián)松散,乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮,其脂含量高,乙醇將脂溶解,縫隙加大,結(jié)晶紫-碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁,沙黃復(fù)染后呈紅色。PCR(PCR)是80DNADNADNA2nDNADNADNALBTAEDNAPCRMixddH2O(10μL、200μL、1000μL)2mLEPPCR:14800RCF:21100xg:-9℃~+4028℃~+70:2~820~-4040℃~-86PCR~60243~4V-P3724hLB240.52h,制備O抗原。取潔凈玻片,吸取O抗原滴于玻片兩端,一滴加入10μL抗血清,一滴加入等量生理鹽水。輕輕晃動(dòng)玻片,傾斜玻片30°于1min和表A.1LB3720h,DNA為1SrNRNA20gL~0ngμL2μL×TqPRMateMix1.5L7(5-AGGTTGATMTGCCAG-3149('-TCGGTACCTGTTCGATT-')各18.525μLPCRPCR95℃預(yù)變性5min;9515s,5315s,722min,共3072min,41%PCR將PCR測(cè)序結(jié)果使用NCBI中的BLAST進(jìn)行檢索。表A.1O血清型鑒定判定標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)強(qiáng)度判斷依據(jù)對(duì)應(yīng)結(jié)果++++液體完全透明,出現(xiàn)大的凝集塊陽(yáng)性+++液體幾乎完全透明,有明顯凝集塊陽(yáng)性++液體不甚透明,有可見(jiàn)凝集塊陽(yáng)性+液體渾濁,有小的顆粒狀物陰性—液體渾濁,無(wú)凝集現(xiàn)象陰性DB37/T4724DB37/T4724—2024PAGEPAGE1附錄B()根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果選擇合適藥物。消化道給藥:口服或灌腸慶大霉素,磺胺
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