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人畜共患寄生蟲病的研究進(jìn)展綜述寄生蟲病是指由寄生蟲引發(fā)的寄生蟲感染。包括原發(fā)疾病、鉤端螺旋體病(線蟲病、蛔蟲病和肺線蟲病),包括對(duì)人類嚴(yán)重危害、潛在危害的寄生蟲病。包括日本血吸蟲病、豬肉絳蟲、細(xì)粒棘球絳蟲和多頭絳蟲。寄生蟲是危害人畜健康安全的三種病原微生物(病毒、細(xì)菌和寄生蟲)之一。據(jù)統(tǒng)計(jì),在許多傳染病中,7%的病原體是寄生蟲。新中國成立以來,雖然在防治寄生蟲病方面做了大量工作,但中國仍然是世界上寄生蟲病最嚴(yán)重的國家之一。其中的人畜共患寄生蟲病防治難度大。它們是人類健康安全的敵人,嚴(yán)重危害公眾健康安全,給畜牧養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的財(cái)產(chǎn)損失。這就是為什么人類對(duì)寄生蟲病的研究探索永遠(yuǎn)不放棄。下文將以血吸蟲病、弓形蟲病、豬帶絳蟲病以及三種危害性最大的人類寄生蟲病為典型案例,深度探討人類寄生蟲病的相關(guān)性研究。1血吸蟲病血吸蟲病在中國已經(jīng)蔓延了200多萬平方公里,感染了1100多萬人,傷害了1億多人。廣泛分布在湖北、湖南、江西、上海等12個(gè)省市。張漫,李志榮,王輝(2012)提出將基因測(cè)序技術(shù)應(yīng)用于人畜共患寄生蟲病的研究中,300Ic-40%的日本血吸蟲基因具有進(jìn)化變異突變表型,其中1/3可能為日本血吸蟲基因突變)。日本血吸蟲還含有與宿主細(xì)胞高度同源的激素受體結(jié)合,如垂體激素受體、胰島素受體、多巴胺受體和趨化因子受體[1]。1.1血吸蟲病的診斷目前,血吸蟲病的診斷治療已有一些研究成果。ELISA、PCR擴(kuò)增技術(shù)和銀染膠體金免疫吸附技術(shù)廣泛應(yīng)用于血吸蟲病的實(shí)驗(yàn)室診斷。其中,全血ELISA快速、簡(jiǎn)便、廉價(jià),主要用于流行病學(xué)調(diào)查和快速臨床診斷。以日本血吸蟲線粒體DNA為標(biāo)記物的PCR擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)日本血吸蟲感染。改進(jìn)后的銀膠體金免疫吸附技術(shù)是銀染色技術(shù)與膠體金免疫吸附技術(shù)相結(jié)合的產(chǎn)物。上述診斷治療技術(shù)的應(yīng)用價(jià)值可以滿足臨床工作。1.2血吸蟲病的防治血吸蟲病綜合防治的最新研究發(fā)現(xiàn),將從檳榔中提取的生物堿類與甲苯咪唑等化學(xué)原料藥一起使用,能起到大幅度降低化學(xué)滅螺藥添加劑量的標(biāo)準(zhǔn)目的,從而緩解滅螺藥對(duì)魚苗的直接傷害,并能遏制釘螺上爬,滅螺效果非常不錯(cuò)。劉孝剛(2012)年研究明確提出,為達(dá)到抑制血吸蟲病的擴(kuò)散傳播,避免出現(xiàn)滅螺藥對(duì)環(huán)境造成的惡劣影響,人們?cè)谘x病預(yù)防疫苗研究層面做了相關(guān)工作,階段劃分了全蟲疫苗到分子疫苗的演變過程,其中全蟲疫苗內(nèi)容包括減毒活疫苗、活疫苗、同種致弱活疫苗和異種活疫苗,分子疫苗主要包括基因技術(shù)亞單位疫苗、合成抗原和核酸疫苗。隨著生物高精尖技術(shù)的發(fā)展,血吸蟲疫苗候選抗原分子或抗原基因不斷探索和評(píng)估鑒定,分子疫苗己成為主研方向。合成抗原的最新研究成果,根據(jù)谷膚甘轉(zhuǎn)移酶基因((Sm28GST)序列類型,己生物合成了(P26)4-MAP和(P116)4-MAP兩種多膚,疾病免疫后能顯著大大減少蟲體負(fù)荷和蟲卵孵化數(shù)。核酸疫苗方面的最新研究成果,免疫序列類型(CpG)、IL-12與細(xì)胞表面Sj23基因構(gòu)建的核酸疫苗,利于增強(qiáng)疫苗免疫效果明顯。其他分子疫苗方面的研究成果包括:用表達(dá)曼氏血吸蟲抗原Sm14的減毒沙門氏菌口服免疫小鼠,可使特異性抗體IgG水平高于正常;己探索研究出抗血吸蟲雌蟲產(chǎn)卵、抗蟲卵發(fā)育的分子疫苗,試驗(yàn)與分析結(jié)果顯示,可大幅度降低宿主排泄物中的成熟蟲卵的總體數(shù)量,徹底切斷擴(kuò)散傳播途徑[2]。2弓形蟲病弓形蟲病是由剛地弓形蟲引起寄生蟲病。剛地弓形蟲的卵囊、絲囊或假包囊被吸收后發(fā)育成熟為非包囊,排泄后感染中間體。臨床表現(xiàn)包括嗜睡、發(fā)熱、血友病等癥狀。中國各省(區(qū)、市)均有弓形蟲病報(bào)告數(shù)據(jù)。20世紀(jì)末,我國弓形蟲感染病例達(dá)到50Ic-100Ic,13名剛果人被病毒感染。大量文獻(xiàn)表明,IFN-y是宿主抵抗剛地弓形蟲的重要細(xì)胞因子,可通過多種途徑參與防治剛地弓形蟲感染。剛地弓形蟲通過寄生表面MIC2與細(xì)胞內(nèi)有機(jī)結(jié)合分子1(ICAM-1)交互影響,通過細(xì)胞旁路通過寄生體的化學(xué)屏障而不可改變宿主細(xì)胞的生物屏障。活蟲可趨化因子STAT3磷酸化,達(dá)到抑制LPS刺激下TNF和IL-12的相互作用,而死細(xì)胞可抑制蠕蟲在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制,調(diào)節(jié)宿主的免疫反應(yīng)。2.1弓形蟲病的診斷目前弓形蟲病診斷方法主要包括血清學(xué)診斷方法和PCR診斷方法。2.1.1血清學(xué)診斷方法血清學(xué)診斷方法包括:弓形蟲特異性IgG、IgM化學(xué)發(fā)光免疫分析法、免疫磁分離法、血吸蟲病精確診斷試紙(DDIA)檢測(cè)分析IgG、IgM病毒抗體。剛地弓形蟲特異性抗體IgG和IgM診斷技術(shù)研發(fā):該技術(shù)基于化學(xué)發(fā)光和磁顆粒結(jié)合抗原,能夠快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)剛地弓形蟲特異性抗體。艾琳,陳韶紅,陳家旭(2011)研究提出免疫磁性分離技術(shù),它是用針對(duì)卵囊壁的單克隆抗體藥物(3G4和4B6)建立起的精準(zhǔn)診斷技術(shù)該核心技術(shù)能集中回收弓形蟲卵囊,廣泛用于水生樣品的弓形蟲檢測(cè)分析,對(duì)檢測(cè)弓形蟲循環(huán)抗原具有早期臨床應(yīng)用價(jià)值[3]。DdiaIgG和IgM抗體技術(shù)檢測(cè):該技術(shù)采用膠體染料D-1標(biāo)記羊抗人IgG和兔抗人IgM為裸眼診斷試劑,以剛地弓形蟲速殖子酶標(biāo)記抗體為檢測(cè)試劑。該方法操作簡(jiǎn)單,成本低,不需要任何設(shè)備,特別適合現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用。2.1.2PCR診斷方法當(dāng)臨床癥狀難以界定或血清學(xué)檢查診斷失敗時(shí),PCR具有綜合優(yōu)勢(shì),可以完全避免血清學(xué)診斷造成的誤診漏診,從而大力避免了弓形蟲B1基因序列和血清學(xué)特異性基因(SAG-1、MOC-1)。2.2弓形蟲病的防治2.2.1弓形蟲病的預(yù)防預(yù)防弓形蟲病的側(cè)重點(diǎn)是環(huán)境衛(wèi)生整治,重點(diǎn)加強(qiáng)人畜糞便管理,有效遏制水和食品污染嚴(yán)重。特殊群體應(yīng)避免與貓、狗等動(dòng)物近距離接觸,定期提取分析血液進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)。在疫苗預(yù)防領(lǐng)域,剛地弓形蟲疫苗已研制成功。其中,調(diào)查公司研制的剛地弓形蟲DNA疫苗可采用鼻內(nèi)法免疫,可達(dá)到預(yù)防綿羊體內(nèi)剛地弓形蟲的效果。弓形蟲核酸疫苗的研究仍在進(jìn)行中。同時(shí),有報(bào)道稱使用豬弓形蟲原蛋白結(jié)合免疫刺激復(fù)合物作為疫苗可以部分保護(hù)豬免受組織囊腫的形成,并使用減毒沙門氏菌載體SAG1和SAG2免疫霍亂。2.2.2弓形蟲病的治療在弓形蟲病治療方面,目前有效的藥物包括:乙胺嘧啶、磺胺嘧啶或磺胺二甲基嘧啶。3豬帶絳蟲病豬帶絳蟲病是一種在世界范圍內(nèi)廣泛分布的人畜共患寄生蟲病,主要發(fā)生在亞洲、非洲、拉丁美洲等大陸的一些國家和地區(qū)。豬帶絳蟲成蟲寄生于人體小腸中。當(dāng)懷孕部位隨糞便排出時(shí),發(fā)育2-3天后,卵子成熟率明顯提高。中間宿主經(jīng)口感染蟲卵后,會(huì)在肌肉等組織中發(fā)育成幼蟲,即包囊。囊蟲病及其分泌物/代謝物也可抑制宿主的免疫反應(yīng)。之后,幼蟲可以通過分泌某些物質(zhì)來逃避補(bǔ)充劑的損害。3.1豬帶絳蟲病的診斷ELISA法通常用于囊尾拗病的診斷和流行病學(xué)研究。實(shí)驗(yàn)表明,用硝酸纖維素膜(NC)代替聚苯乙烯反應(yīng)板,可大大提高免疫診斷的靈敏度和特異性,駱學(xué)農(nóng),鄭亞東,景志忠,才學(xué)鵬(2005)研究說明國產(chǎn)研制的囊蟲病IgG膠體金(層析法)診斷試劑盒具有較高的靈敏度和特異性。點(diǎn)免疫針濾過試驗(yàn)(digo-fa)用于檢測(cè)患者循環(huán)抗原,簡(jiǎn)單、快速、無交叉反應(yīng)。基于重組抗原的酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒和金標(biāo)記試劑盒正在研制中[4]。3.2豬帶絳蟲病的治療囊尾拗病的治療方案通常包括:高危地區(qū)豬的疫苗接種和帶狀皰疹患者的藥物治療。傳統(tǒng)疫苗使用的抗原包括全新世抗原、分泌/代謝(E/S)抗原、異質(zhì)抗原和六鏈抗原,但這些抗原的來源非常有限。隨著基因工程技術(shù)的不斷發(fā)展,羊帶絳蟲45w重組抗原疫苗應(yīng)運(yùn)而生,開啟了豬囊尾拗病免疫預(yù)防的新篇章。結(jié)果表明,豬囊尾拗病DNA疫苗能有效地減輕寄生蟲負(fù)擔(dān),減少豬囊尾拗病數(shù)量。目前,預(yù)防囊蟲病的基因工程重組疫苗已經(jīng)得到成功的研究。該疫苗具有良好的保護(hù)作用,并具有重要的種間保護(hù)特性。未來,多抗原、多表位、多基因組合將是豬囊蟲病高效疫苗的發(fā)展方向。
參考文獻(xiàn):[1]張漫,李志榮,王輝.人畜共患寄生蟲病的研究進(jìn)展[J].中國豬業(yè),2012,7(11):43-45.[2]劉孝剛.食源性人畜共患寄生
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