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第1節(jié)重組DNA技術的基本工具必備學問基礎練進階訓練第一層學問點1限制性內(nèi)切核酸酶——“分子手術刀”1.限制性內(nèi)切核酸酶的作用事實上就是把DNA上某些化學鍵斷開,斷開的化學鍵是下圖中的()A.①B.②C.③D.④2.下列有關基因工程中限制性內(nèi)切核酸酶的描述,錯誤的是()A.每一種限制性內(nèi)切核酸酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列B.限制性內(nèi)切核酸酶的活性受溫度影響C.限制性內(nèi)切核酸酶能識別和切割RNAD.限制性內(nèi)切核酸酶可從原核生物中提取3.下列關于限制性內(nèi)切核酸酶的敘述中,錯誤的是()A.它能在特定位點切割DNA分子B.同一種限制性內(nèi)切核酸酶切割不同的DNA分子產(chǎn)生的黏性末端能夠很好地進行堿基配對C.它能隨意切割DNA,從而產(chǎn)生大量DNA片段D.每一種限制性內(nèi)切核酸酶只能識別特定的核苷酸序列4.如圖表示某種酶切割目的基因的過程,相關敘述不正確的是()A.圖示用到的酶為限制性內(nèi)切核酸酶,這類酶主要從原核生物中分別純化出來B.圖示限制性內(nèi)切核酸酶切割后形成的末端是黏性末端,有的限制性內(nèi)切核酸酶可切割形成平末端C.該限制性內(nèi)切核酸酶能識別的堿基序列是GAATTC,切點在G和A之間D.限制性內(nèi)切核酸酶的名稱往往是依據(jù)發(fā)覺者姓名來命制的5.下列黏性末端屬于同一種限制性內(nèi)切核酸酶切割而成的是()A.①②B.①③C.①④D.②③學問點2DNA連接酶——“分子縫合針”6.基因工程是在DNA分子水平上進行的操作,該操作過程中科學家所用的“分子縫合針”縫合的部位是()A.堿基對之間的氫鍵B.堿基與脫氧核糖之間C.核苷酸中的磷酸與脫氧核糖之間D.DNA雙鏈上的磷酸二酯鍵7.以下有關DNA連接酶的敘述,正確的是()A.能連接氫鍵B.能連接單個脫氧核苷酸C.T4DNA連接酶只能連接黏性末端D.T4DNA連接酶可以連接平末端8.下列關于DNA連接酶的理解正確的是()A.其化學本質是蛋白質B.DNA連接酶可以復原DNA分子中的氫鍵C.它不能被反復運用D.在基因工程操作中可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶9.下列關于DNA連接酶的敘述,正確的是()A.DNA連接酶不須要識別特定的脫氧核苷酸序列B.一種DNA連接酶只能連接一種黏性末端C.將單個脫氧核苷酸加到某DNA片段末端,形成磷酸二酯鍵D.連接兩條DNA鏈上堿基之間的氫鍵學問點3基因進入受體細胞的載體——“分子運輸車”10.[2024·浙江杭州高二??计谥衇下列關于質粒的存在及本質的敘述,錯誤的是()A.一個大腸桿菌可含有多個質粒B.質粒是一種小型環(huán)狀分子C.質粒存在于擬核區(qū)D.質粒的化學本質是DNA11.質粒作為“分子運輸車”的條件是()①能夠自我復制②雙鏈環(huán)狀RNA分子③有一個至多個限制酶切點④有標記基因⑤真核細胞中沒有A.①②③④⑤B.①②③④C.①③④D.②③⑤12.基因工程中可用作載體的是()①質粒②噬菌體③病毒④動物細胞核A.②③④B.①②④C.①②③D.①③④13.下列關于質粒的敘述,正確的是()A.質粒是廣泛存在于細菌細胞中的一種顆粒狀細胞器B.質粒是細菌細胞質中能夠自主復制的小型環(huán)狀DNA分子C.質粒只有在導入宿主細胞后才能在宿主細胞內(nèi)復制D.細菌質粒的復制過程確定是在宿主細胞外獨立進行的14.作為基因的運輸工具——載體,必需具備的條件之一及理由是()A.必需是細菌質粒,這樣對受體細胞無害B.必需具有一個或多個限制酶切割位點,以便于目的基因插入C.必需具有抗生素抗性基因,以便受體細胞能更好的存活D.必需是環(huán)狀DNA分子,這樣更簡潔進入受體細胞15.下列關于細菌質粒的敘述,正確的是()A.全部的質粒都可以作為基因工程中的載體B.是獨立于細菌擬核DNA之外的雙鏈DNA分子,不與蛋白質結合C.質粒對侵入的宿主細胞都是無害的D.細菌質粒的復制過程都是在宿主細胞內(nèi)獨立進行的實力素養(yǎng)綜合練進階訓練其次層1.[2024·新疆兵團二中??糫下列與核酸相關酶的敘述,正確的是()A.RNA聚合酶和解旋酶的功能完全相同B.RNA復制酶和逆轉錄酶的產(chǎn)物相同C.DNA酶和限制性內(nèi)切核酸酶作用的化學鍵一樣D.DNA連接酶和DNA聚合酶的底物相同2.下列關于基因工程的基本工具的說法中,正確的是()A.基因工程中的工具酶有限制性內(nèi)切核酸酶、DNA連接酶和載體B.DNA連接酶可將隨意的DNA片段通過形成磷酸二酯鍵而連接起來C.質粒上必需有標記基因才可作為載體D.限制性內(nèi)切核酸酶不僅僅能切割外源DNA,也能切割自身的DNA分子3.下列有關限制性內(nèi)切核酸酶的敘述中正確的是()A.用限制酶切割一個DNA分子中部,獲得一個目的基因時,被水解的磷酸二酯鍵有2個B.限制性內(nèi)切核酸酶識別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大C.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性內(nèi)切核酸酶切出的黏性末端堿基數(shù)不同D.只有用相同的限制性內(nèi)切核酸酶處理含目的基因的片段和質粒,才能形成重組質粒4.[2024·河南南陽中學??糫下列關于幾種酶作用的敘述,不正確的是()A.E.coliDNA連接酶既可以連接平末端,又可以連接黏性末端B.RNA聚合酶能與基因的特定區(qū)段結合,催化遺傳信息的轉錄C.DNA連接酶能將兩個DNA片段連接為一個DNA分子D.限制酶不是一種酶,而是一類酶5.甲DNA分子用三種方式酶切時得到的片段長度如圖所示,下列敘述錯誤的是()A.甲DNA分子上沒有HindⅢ的酶切位點B.甲有2個BamHⅠ的酶切位點C.甲是環(huán)狀DNA分子D.HindⅢ和BamHⅠ所切斷的化學鍵類型相同6.如圖表示三種酶分別作用于DNA分子的不同部位,①②③這三種酶依次是()A.DNA連接酶、限制酶、解旋酶B.限制酶、解旋酶、DNA連接酶C.解旋酶、限制酶、DNA連接酶D.限制酶、DNA連接酶、解旋酶7.某線性DNA分子含有3000個堿基對(bp),先用限制酶a切割,再把得到的產(chǎn)物用限制酶b切割,得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的識別序列和切割位點如圖所示。下列有關說法錯誤的是()a酶切割產(chǎn)物(bp)b酶再次切割產(chǎn)物(bp)1600;1100;300800;300A.在該DNA分子中,a酶與b酶的識別序列分別有3個和2個B.a(chǎn)酶與b酶切出的黏性末端可相互連接C.a(chǎn)酶與b酶切斷的化學鍵均為磷酸二酯鍵D.a(chǎn)酶與b酶識別切割的序列不同體現(xiàn)了酶的專一性

8.[2024·江蘇連云港中學??糫(不定項)下列關于限制酶和DNA連接酶的理解,錯誤的是()A.限制酶能在特定部位的兩個核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵B.DNA連接酶可以復原DNA分子中的氫鍵,將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來C.在基因工程操作中,可以用DNA聚合酶代替DNA連接酶D.限制酶廣泛存在于動植物體內(nèi),微生物內(nèi)很少分布9.如圖為體外對DNA分子進行切割和連接的示意圖,請據(jù)圖回答下列問題:(1)EcoRⅠ是一種酶,其識別序列是,切割位點是與之間的鍵,切割產(chǎn)生的DNA片段末端形式為。(2)將不同來源的DNA片段“縫合”起來,須要酶或酶,它們均屬于酶,作用是,其中能“縫合”兩個雙鏈DNA片段的平末端的酶是。10.依據(jù)基因工程的有關學問,回答下列問題:(1)限制酶切割DNA分子后產(chǎn)生的DNA片段,其末端類型通常有和。(2)質粒載體用限制酶X(識別的序列由6個核苷酸組成)切割后產(chǎn)生的片段如下:eq\a\vs4\al(AATTC……G,G……CTTAA)該酶識別的序列為,切割的部位是之間的磷酸二酯鍵。(3)為使切割后的載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用限制酶X切割外,還可用限制酶Y切割,兩種酶共同的特點是。(4)按其來源不同,基因工程中所運用的DNA連接酶有兩類,即DNA連接酶和DNA連接酶,其中后者只能連接一種末端。(5)基因工程中除質粒外,和也可作為載體。11.下圖中的圖1和圖2分別表示的是EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的作用示意圖。請思索回答問題:(1)EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的化學本質是,其單體是。(2)EcoRⅠ限制酶識別的堿基序列是,EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的識別序列不相同,說明限制酶具有性。(3)由圖2可知,當限制酶在它識別序列的切開時,產(chǎn)生的末端是平末端;要將圖1中的末端再連接起來,須要用。(4)1970年,阿爾伯(W.Arber)等在細菌中發(fā)覺了第一個限制酶,而在該細菌中沒有此限制酶的識別序列,推想該限制酶在細菌細胞中的作用可能是。探究·實踐DNA的粗提取與鑒定1.某同學用洋蔥進行“DNA的粗提取與鑒定”試驗,下列操作錯誤的是()A.加入研磨液后用力進行快速、充分的研磨B.用蛋白酶純化過濾后的研磨液中的DNAC.加入酒精后用玻璃棒輕緩攪拌D.加二苯胺試劑混勻后沸水浴加熱2.[2024·廣東一模]下列有關“DNA的粗提取與鑒定”試驗的敘述,正確的是()A.簇新豬血、菜花等動植物材料均可用于DNA的粗提取B.DNA不溶于體積分數(shù)為95%的冷酒精而溶于2mol/L的NaCl溶液C.在研磨植物細胞時加入研磨液是為了溶解細胞壁D.溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺試劑后即呈藍色3.[2024·遼寧錦州高二??糫下列關于“DNA的粗提取與鑒定”試驗的敘述,正確的是()A.預冷的酒精溶液(體積分數(shù)為99.5%的乙醇)可用來進一步純化粗提取的DNAB.DNA析出過程中,玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物C.用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量相近D.用二苯胺試劑鑒定DNA須要進行50~65℃水浴加熱4.[2024·遼寧朝陽北票市高級中學高二??糫下列關于“DNA的粗提取與鑒定”試驗的敘述,錯誤的是()A.利用DNA和蛋白質在不同濃度NaCl溶液中的溶解度差異提取DNAB.DNA不溶于酒精,在2mol/L的NaCl溶液中不能溶解C.提取DNA時,在切碎的洋蔥中加入適量洗滌劑有利于DNA的釋放D.用二苯胺試劑鑒定DNA時,溶液藍色深淺反映DNA含量多少5.[2024·河南南陽中學校考]下列關于“DNA的粗提取與鑒定”試驗的敘述,錯誤的是()A.羊的成熟紅細胞可作為提取DNA的材料B.提取植物細胞的DNA時,須要加入確定量的研磨液C.預冷的酒精溶液能抑制核酸水解酶活性,防止DNA水解D.在沸水浴條件下,DNA與二苯胺試劑反應呈現(xiàn)藍色6.下列關于“DNA的粗提取與鑒定”試驗的敘述,正確的是()A.把香蕉果肉放入研缽中,倒入95%的酒精進行充分研磨B.在漏斗中墊上濾紙,將研磨液過濾入離心管中C.將預冷的95%的酒精溶液加入離心獲得的上清液中,靜置可見絲狀物D.在含有絮狀物的試管中加入亞甲基藍,進行水浴加熱顯藍色7.在“DNA的粗提取與鑒定”試驗中,假如試驗材料是植物細胞,須要進行研磨并攪拌。下列相關說法正確的是()A.在切碎的植物材料中加入確定量的洗滌劑和蒸餾水,充分研磨后過濾獲得濾液B.加入洗滌劑是為了瓦解細胞膜和核膜C.要快速攪拌產(chǎn)生泡沫以加速細胞膜的溶解D.先加入洗滌劑,攪拌和研磨后再加入食鹽8.利用簇新洋蔥作為試驗材料提取DNA時,下列操作正確的是()A.向DNA溶液中加入50%的冰酒精后DNA會與蛋白質分別并析出B.利用DNA在低溫下遇二苯胺試劑反應呈藍色的特性對其進行鑒定C.研磨前向研缽中加入適量無水乙醇可以提取到更多的DNAD.將晾干的絲狀物置于2mol/L的NaCl溶液中會發(fā)生溶解現(xiàn)象9.如圖是某同學在“DNA的粗提取與鑒定”試驗中的兩個操作步驟示意圖,下列敘述錯誤的是()A.圖1中用玻璃棒卷起的絲狀物為粗提取的DNAB.圖1所示操作的原理是DNA不溶于酒精,而蛋白質等雜質溶于酒精C.圖2試管1的作用是證明2mol·L-1NaCl溶液遇二苯胺出現(xiàn)藍色D.圖2試管2中未將DNA溶于2mol·L-1NaCl溶液中,可能導致藍色變更不明顯10.(不定項)如圖為“DNA粗提取與鑒定”試驗的部分操作流程。下列相關敘述錯誤的是()A.將圖1中的研磨液過濾后保留沉淀B.圖2過程,用玻璃棒進行交叉攪拌會使DNA析出更快C.圖2析出得到的白色絲狀物只能溶于2mol·L-1的NaCl溶液中D.圖3對提取后的DNA進行鑒定,兩支試管中均要加入二苯胺試劑11.DNA在NaCl溶液中的溶解度是隨著NaCl溶液濃度的變更而變更的。(1)下列NaCl溶液中能使DNA析出最徹底的一種是;溶解度最高的一種是。A.質量濃度為0.14mol·L-1B.質量濃度為2mol·L-1C.質量濃度為0.15mol·L-1D.質量濃度為0.3mol·L-1(2)DNA不溶于酒精溶液,但細胞中的某些物質卻可以溶于酒精溶液,利用這一原理可以,可以推想溶于酒精中的物質可能有。(3)利用DNA遇變藍色的特性,將該物質作為鑒定DNA的試劑。其試驗過程要點是向盛有DNA的試管中加入4mL的?;旌蟿蛘?,將試管置于5min,待試管后,視察試管中溶液顏色的變更,這個試驗也說明DNA耐溫。12.關于DNA粗提取的試驗材料的選擇,經(jīng)過了多次試驗效果的比較,最終選擇雞血作為試驗材料。請據(jù)圖完成下列問題:(1)雞血細胞中紅細胞(“含”或“不含”)細胞核,家雞屬于鳥類,新陳代謝旺盛,因而血液中細胞的數(shù)目較多,可以為試驗供應豐富的。(2)試驗前由老師制備血細胞液供應應同學們作試驗材料,而不用雞全血,主要緣由是。(3)生活在牧區(qū)的人們,實行牛、羊和馬血較便利,若他們按試驗要求完成試驗步驟后,結果是很難提取到DNA。這是因為這些動物和人類一樣________________________________________________________________________。(4)若選用動物肝臟作為試驗材料,在提取之前,最好增加程序,使組織細胞更易分別。13.下圖為“DNA的粗提取與鑒定”試驗的相關操作。據(jù)圖請回答:(1)圖中試驗材料A可以是等。(2)通過上述所示步驟得到濾液C后,再向濾液中加入2mol·L-1的NaCl溶液的目的是,再過濾得到濾液D,向濾液D中加入蒸餾水的目的是。(3)在“DNA的粗提取與鑒定”試驗中,將含有確定雜質的DNA絲狀物分別放入體積為2mL的4種溶液中,經(jīng)攪拌后過濾,獲得下表所示的4種濾液,含DNA最少的是濾液。1研磨液中攪拌研磨后過濾濾液E22mol·L-1的NaCl溶液中攪拌后過濾濾液F30.14mol·L-1的NaCl溶液中攪拌后過濾濾液G4預冷的95%的酒精溶液中攪拌后過濾濾液H(4)DNA鑒定的原理是_______________________________________。第1節(jié)重組DNA技術的基本工具必備學問基礎練1.答案:B解析:限制性內(nèi)切核酸酶能識別特定的序列,并在特定位點切割,斷裂的化學鍵是磷酸與脫氧核糖之間的磷酸二酯鍵,且DNA的結構有方向性,因此斷裂的磷酸二酯鍵是脫氧核糖3號位上碳與下一個脫氧核糖5號位上的磷酸形成的磷酸二酯鍵,即圖中②,B正確,A、C、D錯誤。2.答案:C解析:限制性內(nèi)切核酸酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,故每一種限制性內(nèi)切核酸酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,A正確;酶的作用條件和順,酶的活性易受溫度、pH等條件的影響,故限制性內(nèi)切核酸酶的活性受溫度的影響,B正確;限制性內(nèi)切核酸酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂,不能識別和切割RNA,C錯誤;限制性內(nèi)切核酸酶主要從原核生物中提取,D正確。3.答案:C解析:限制性內(nèi)切核酸酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列,并能在特定位點切割DNA分子,A正確;同一種限制性內(nèi)切核酸酶切割不同的DNA分子時,由于識別位點相同,所產(chǎn)生的末端相同,能夠進行堿基互補配對,B正確;每種限制性內(nèi)切核酸酶只能識別特定的核苷酸序列,并在特定的位點上切割DNA分子,而不能隨意切割DNA分子,C錯誤;酶具有專一性,一種限制性內(nèi)切核酸酶只能識別一種特定的核苷酸序列,D正確。4.答案:D解析:依據(jù)圖示,該酶切割目的基因后形成黏性末端,則該酶為限制性內(nèi)切核酸酶,這類酶主要從原核生物中分別純化出來,A正確;圖示限制性內(nèi)切核酸酶切割后形成的末端是黏性末端,有的限制酶可切割形成平末端,B正確;由題圖可知,該限制性內(nèi)切核酸酶能識別的堿基序列是GAATTC,切點在G和A之間,C正確;限制性內(nèi)切核酸酶的名稱往往是用生物屬名的頭一個字母與種加詞的頭兩個字母組成,表示這個酶是從哪個生物中分別出來的,D錯誤。5.答案:B解析:限制性內(nèi)切核酸酶識別的核苷酸序列往往具有回文結構,切割后形成的黏性末端能夠互補配對,圖中①③能夠互補,其他的不能互補,所以①③屬于同一種限制性內(nèi)切核酸酶切割而成的。B正確,A、C、D錯誤。6.答案:D解析:在基因工程的操作中,“分子縫合針”是DNA連接酶,DNA連接酶能夠催化DNA雙鏈上的磷酸二酯鍵形成。7.答案:D解析:DNA連接酶是將兩個DNA片段連接形成磷酸二酯鍵,A錯誤;能連接單個脫氧核苷酸的是DNA聚合酶,DNA連接酶能連接的是兩個DNA片段,B錯誤;E.coliDNA連接酶來源于大腸桿菌,只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來;而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體,可用于連接黏性末端和平末端,但連接平末端效率相對較低,C錯誤,D正確。8.答案:A解析:DNA連接酶的化學本質是蛋白質,A正確;DNA連接酶可以復原DNA分子中的磷酸二酯鍵,B錯誤;酶只變更反應速率,反應前后自身的物質的量不發(fā)生變更,能被反復運用,C錯誤;DNA連接酶是同時連接雙鏈的切口,而DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸加到已有的脫氧核苷酸片段的末端,因此在基因工程操作中不行以用DNA聚合酶代替DNA連接酶,D錯誤。9.答案:A解析:DNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和脫氧核糖,不須要識別特定的脫氧核苷酸序列,A正確;DNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和脫氧核糖,所以一種DNA連接酶可以連接多種黏性末端,B錯誤;DNA連接酶連接的是兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵,DNA聚合酶是將單個脫氧核苷酸加到某DNA片段末端,形成磷酸二酯鍵,C錯誤;DNA連接酶連接的是黏性末端兩條鏈主鏈上的磷酸和脫氧核糖,形成磷酸二酯鍵,D錯誤。10.答案:C解析:質粒存在于細菌擬核DNA之外,一個大腸桿菌可含有多個質粒,A正確,C錯誤;質粒是一種小型雙鏈環(huán)狀DNA分子,其本質是DNA,B、D正確。11.答案:C解析:質粒作為“分子運輸車”的條件是能夠自我復制、有一個至多個限制酶切點、有標記基因、對受體細胞無害,質粒是雙鏈DNA分子,真核細胞也有質粒,故選C。12.答案:C解析:常用的基因工程載體為質粒,另外噬菌體、動植物病毒也可作為基因工程載體,即C正確,A、B、D錯誤。13.答案:B解析:質粒是存在于細菌中的一種環(huán)狀DNA分子,不是細胞器,A錯誤;質粒是一種袒露的、結構簡潔、獨立于細菌擬核DNA之外并具有自我復制實力的雙鏈環(huán)狀DNA分子,B正確;在體外,若賜予適宜的條件,質粒也可能進行復制,C錯誤;有的質??梢哉系剿拗骷毎娜旧wDNA上,如大腸桿菌的Ti質粒的T-DNA,D錯誤。14.答案:B解析:常用的載體有質粒、噬菌體、動植物病毒,但必需對受體細胞無害,A錯誤;載體具有一個或多個限制酶切割位點,以便于目的基因插入,B正確;載體必需具有標記基因,以便于進行目的基因的鑒定和篩選,C錯誤;質粒是環(huán)狀DNA分子,而噬菌體和動植物病毒不是環(huán)狀DNA,D錯誤。15.答案:B解析:自然的質粒不能干脆作為載體,基因工程中用到的質粒都是在自然質粒的基礎上進行過人工改造的,A錯誤;質粒是獨立于細菌擬核DNA之外的雙鏈DNA分子,不與蛋白質結合,B正確;作為載體的質粒必需是平安的,對受體細胞無害,但并不是全部的質粒均具有該條件,C錯誤;在體外,若賜予適宜的條件,質粒也可能進行復制,D錯誤。實力素養(yǎng)綜合練1.答案:C解析:RNA聚合酶用于轉錄,催化核糖核苷酸之間磷酸二酯鍵的形成,解旋酶用于DNA的復制,解旋,破壞氫鍵,A錯誤;RNA復制酶用于RNA的復制,催化子鏈RNA的合成,逆轉錄酶用于以RNA為模板合成DNA的逆轉錄過程中,B錯誤;DNA酶水解DNA,破壞磷酸二酯鍵,限制性內(nèi)切核酸酶用于切割DNA,破壞磷酸二酯鍵,作用的化學鍵一樣,C正確;DNA連接酶用于連接兩個DNA片段之間的磷酸二酯鍵,DNA聚合酶用于連接單個的脫氧核苷酸,D錯誤。2.答案:C解析:限制酶和DNA連接酶才是基因工程的工具酶,載體不是酶,A錯誤;DNA連接酶只能催化具有互補黏性末端或平末端的DNA片段之間形成磷酸二酯鍵,B錯誤;質粒作為載體的必備條件之一就是要有標記基因,C正確;限制酶不切割自身DNA分子,只切割外源DNA,以疼惜自身DNA的平安,D錯誤。3.答案:B解析:用限制酶切割一個DNA分子中部,獲得一個目的基因時,須要切割目的基因的兩側,因此要斷裂4個磷酸二酯鍵,A錯誤;限制性內(nèi)切核酸酶識別序列越短,則該序列在DNA中出現(xiàn)的幾率就越大,B正確;—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制性內(nèi)切核酸酶切出的黏性末端堿基數(shù)均為四個,C錯誤;不同的限制酶切割也可能形成相同的末端序列,因此用不同限制酶處理含目的基因的片段和質粒,也能形成重組質粒,D錯誤。4.答案:A解析:E.coliDNA連接酶只能連接黏性末端,A錯誤;RNA聚合酶能與基因的特定位點(啟動子)結合,催化遺傳信息的轉錄,形成RNA,B正確;DNA連接酶能使不同脫氧核苷酸的磷酸與脫氧核糖連接,形成磷酸二酯鍵,即將兩個DNA片段連接為一個DNA分子,C正確;限制酶是一類酶,包含多種類型,一種限制酶只能識別一種特定核苷酸序列,且使該序列特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂,D正確。5.答案:A解析:分析題圖,甲DNA分子中,HindⅢ單獨運用時,DNA長度不變;BamHⅠ單獨運用時切割為兩個片段,說明該酶在甲DNA分子上至少有一個酶切位點;BamHⅠ和HindⅢ聯(lián)合切割甲DNA分子時,被切割形成3個片段,說明甲DNA分子為環(huán)狀DNA分子,并且其上含有一個HindⅢ的酶切位點,有兩個BamHⅠ的酶切位點,A錯誤,B、C正確;HindⅢ和BamHⅠ所切斷的化學鍵類型相同,都是磷酸二酯鍵,D正確。6.答案:C解析:①作用的部位是氫鍵,因此①是解旋酶;②作用的部位是磷酸二酯鍵,因此②是限制酶;③作用的部位是兩個DNA片段的缺口,因此③是DNA連接酶。7.答案:A解析:分析題表可知,a酶可以把原有DNA切成3段,說明a酶的識別序列有2個;b酶把1600的DNA切成大小均為800的兩個片段,把1100的DNA切成大小分別為800和300兩個片段,且a酶和b酶的識別位點不同,說明b酶的識別序列有2個,A錯誤;a酶與b酶切出的黏性末端相同,用DNA連接酶可以將它們連接起來,B正確;a酶和b酶屬于限制酶,限制酶切割的化學鍵都是磷酸二酯鍵,C正確;a酶與b酶切割后產(chǎn)生的黏性末端相同,但是兩者識別切割的脫氧核苷酸序列不同,說明兩種酶的底物不同,體現(xiàn)了酶的專一性,D正確。8.答案:BCD解析:限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列,并且在特定部位的兩個核苷酸之間切斷磷酸二酯鍵,A正確;DNA連接酶可以復原DNA分子中的磷酸二酯鍵,將兩條DNA片段的黏性末端之間的縫隙連接起來,B錯誤;DNA聚合酶將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯鍵,DNA連接酶是連接兩個DNA的片段,形成磷酸二酯鍵。在基因工程操作中,不行以用DNA聚合酶代替DNA連接酶,C錯誤;限制酶主要來源于微生物,D錯誤。9.答案:(1)限制5′—GAATTC—3′鳥嘌呤脫氧核苷酸(或G)腺嘌呤脫氧核苷酸(或A)磷酸二酯黏性末端(2)E.coliDNA連接T4DNA連接DNA連接催化兩個脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵,將兩個雙鏈DNA片段“縫合”起來T4DNA連接酶解析:(1)EcoRⅠ是一種限制酶,限制酶能夠識別特定的脫氧核苷酸序列,并在特定位點進行切割,據(jù)圖可知,EcoRⅠ識別序列是5′—GAATTC—3′,切割位點是G與A之間的磷酸二酯鍵;由于該酶的切割位點在識別序列的中軸線兩側,故切割形成的末端是黏性末端。(2)將不同來源的DNA片段“縫合”起來,須要DNA連接酶,具體包括E.coliDNA連接酶和T4DNA連接酶;DNA連接酶的作用是催化兩個脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵,將兩個雙鏈DNA片段“縫合”起來;其中能“縫合”兩個雙鏈DNA片段的平末端的酶是T4DNA連接酶。10.答案:(1)平末端黏性末端(2)5′—GAATTC—3′G和A(3)兩種限制酶切割后形成的黏性末端相同(4)T4E.coli(5)噬菌體動植物病毒解析:(1)限制酶切割DNA分子后產(chǎn)生的DNA片段,其末端類型通常有黏性末端或平末端。(2)將圖中片段兩端的黏性末端對接后可以看出限制酶X識別的序列為6個核苷酸組成的—GAATTC—,互補鏈是—CTTAAG—,切割的位點為G和A之間的磷酸二酯鍵。(3)為使切割后的載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用限制酶X切割外,還可用限制酶Y切割,則兩種限制酶切割后形成的黏性末端必需相同。(4)按其來源不同,基因工程中所運用的DNA連接酶有兩類,即T4DNA連接酶和E.coliDNA連接酶,E.coliDNA連接酶,來源于大腸桿菌,可用于連接黏性末端;T4DNA連接酶,來源于T4噬菌體,可用于連接黏性末端和平末端。(5)基因工程中常用的載體有質粒、噬菌體和動植物病毒。11.答案:(1)蛋白質氨基酸(2)5′—GAATTC—3′專一性(3)中軸線E.coliDNA連接酶或T4DNA連接酶(4)切割外來DNA,起到防衛(wèi)作用解析:(1)EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的化學本質是蛋白質,蛋白質是生物大分子,其單體是氨基酸。(2)分析題圖1可知,EcoRⅠ限制酶識別的堿基序列是5′—GAATTC—3′,SmaⅠ限制酶的識別序列是5′—CCCGGG—3′,EcoRⅠ限制酶和SmaⅠ限制酶的識別序列不相同,說明限制酶具有專一性。(3)由圖2可知,當限制酶在它識別序列的中軸線切開時,產(chǎn)生的末端是平末端;DNA連接酶可以連接兩個DNA片段,要將圖1中的末端再連接起來,須要用E.coliDNA連接酶或T4DNA連接酶。(4)1970年,阿爾伯(W.Arber)等在細菌中發(fā)覺了第一個限制酶,而在該細菌中沒有此限制酶的識別序列,推想該限制酶在細菌細胞中的作用可能是切割外來DNA,起到防衛(wèi)作用。探究·實踐DNA的粗提取與鑒定1.答案:A解析:加入研磨液后研磨動作要輕緩、松軟,A錯誤;蛋白酶能夠分解蛋白質,因此能起到純化DNA的目的,B正確;加入酒精后用玻璃棒攪拌時,動作要輕緩,以免引起DNA分子的斷裂,C正確;DNA可與二苯胺試劑在沸水浴條件下作用顯藍色,D正確。2.答案:B解析:豬是哺乳動物,其成熟的紅細胞中無細胞核,不含DNA,因此簇新豬血不能用于提取DNA,A錯誤;DNA不溶于體積分數(shù)為95%的冷酒精,但能溶于2mol/L的NaCl溶液中,因此可用酒精進一步純化DNA,B正確;在研磨植物細胞時加入研磨液(洗滌劑和食鹽),洗滌劑的作用是溶解細胞膜和核膜,而食鹽的作用是提高DNA的溶解度,C錯誤;溶有DNA的NaCl溶液中加入二苯胺試劑,沸水浴加熱后,顏色呈藍色,D錯誤。3.答案:B解析:預冷的酒精溶液(體積分數(shù)為95%的乙醇)可用來進一步純化粗提取的DNA,A錯誤;DNA析出過程中,用玻璃棒沿一個方向攪拌,卷起絲狀物,攪拌操作要和順,以防DNA斷裂,B正確;兔是哺乳動物,其成熟的紅細胞中沒有DNA,因此用同樣方法從等體積兔血和雞血中提取的DNA量不行能相近,C錯誤;在沸水浴的條件下,DNA遇二苯胺會呈現(xiàn)藍色,D錯誤。4.答案:B解析:DNA和蛋白質在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,據(jù)此可以提取DNA,A正確;DNA可以在2mol/L的NaCl溶液中溶解,B錯誤;在提取洋蔥細胞的DNA時,在切碎的洋蔥中加入確定量的洗滌劑,作用是溶解細胞膜和核膜,有利于DNA的釋放,C正確;用二苯胺試劑鑒定DNA時,溶液藍色深淺反映DNA含量多少,D正確。5.答案:A解析:羊的成熟紅細胞沒有細胞核,因此不行作為提取DNA的材料,A錯誤;提取植物細胞的DNA時,須要加入確定量的研磨液(洗滌劑和食鹽),洗滌劑的作用是溶解細胞膜和核膜,而食鹽的作用是提高DNA的溶解度,B正確;預冷的酒精溶液具有兩個功能:第一,能抑制核酸水解酶活性,防止DNA水解;其次,DNA不溶于酒精溶液,而細胞中的某些蛋白質溶于酒精溶液,因此利用酒精溶液可以將DNA析出,C正確;二苯胺是鑒定DNA的試劑,在沸水浴條件下,DNA與二苯胺反應呈現(xiàn)藍色,D正確。6.答案:C解析:把香蕉果肉放入研缽中,倒入研磨液進行充分研磨,A錯誤;在漏斗中墊上紗布,將研磨液過濾入離心管中,B錯誤;DNA不溶于酒精,因此可用體積分數(shù)為95%冷酒精析出DNA,靜置2~3分鐘,可見絲狀物,C正確;在含有絮狀物的試管中加入二苯胺,在沸水浴條件下顯藍色,D錯誤。7.答案:B解析:在切碎的植物材料中加入確定量的洗滌劑和食鹽,充分研磨后過濾獲得濾液,這是因為洗滌劑能溶解細胞膜和核膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解,A錯誤;加入洗滌劑是為了溶解細胞膜和核膜,有利于DNA的釋放,B正確;加入洗滌劑后,動作要輕緩、松軟,否則簡潔產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟的操作,C錯誤;洗滌劑和食鹽同時加入后攪拌研磨,D錯誤。8.答案:D解析:冷卻的95%的酒精,能溶解濾液中包括蛋白質在內(nèi)的大部分有機物,但并不溶解DNA,從而可以析出并提取DNA,A錯誤;在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑,B錯誤;研磨前向研缽中添加的液體是洗滌劑,目的是溶解細胞膜和核膜,使DNA更易釋放,C錯誤;在2mol/L的NaCl溶液中DNA易溶解,故將晾干的絲狀物置于2mol/L的NaCl溶液中會發(fā)生溶解現(xiàn)象,D正確。9.答案:C解析:DNA不溶于酒精溶液,但是細胞中的某些蛋白質則溶于酒精,所以圖1中溶液a為酒精溶液,其中用玻璃棒卷起的絲狀物為粗提取的DNA,A、B正確;圖2試管1的作用是證明2mol·L-1NaCl溶液遇二苯胺不會出現(xiàn)藍色,C錯誤;DNA易

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