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15I本文件按照GB/T1.1—2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分:標(biāo)準(zhǔn)化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定相比,除了結(jié)構(gòu)調(diào)整和編輯性改動(dòng)外,主要技術(shù)變化1綿羊肺腺瘤病毒雙抗體夾心ELISA檢測(cè)技術(shù)本文件規(guī)定綿羊肺腺瘤病毒雙抗體夾心ELISA檢測(cè)技術(shù)的試劑、材料與設(shè)備、樣品前處理、操作方GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格NY/T541獸醫(yī)診斷樣品采集、保存與運(yùn)輸技術(shù)規(guī)范3.13.23.3跨膜蛋白胞質(zhì)尾區(qū)transmembraneproteincytoplasmicta3.42洗滌后再加酶標(biāo)抗體,與免疫復(fù)合物中抗原結(jié)合形成酶標(biāo)抗體—抗原—固相抗體復(fù)合物顯色來檢測(cè)抗HRP:辣根過氧化物酶(Hydrogen-peroxidPBS:磷酸鹽緩沖液(PhosphateBufferedSaliPBST:Tween-20磷酸鹽緩沖液洗滌液(PhosphateBufferedSalinewithTween-20)pH:酸堿度(PondusHydroge5.9TMB顯色液。工作濃度參照所購(gòu)產(chǎn)品說明書。5.10終止液。工作濃度參照所購(gòu)產(chǎn)品說明書。3行檢測(cè)。96孔酶標(biāo)板每孔加100μL包被抗體(按照附錄A.44℃,過夜。8.2洗滌8.3封閉8.4洗滌96孔酶標(biāo)板每孔加待檢樣品100μL,37℃,孵育60min。加入陽性對(duì)照、陰性對(duì)照和PBS空白對(duì)注:陽性對(duì)照是經(jīng)核酸檢測(cè)鑒定為感染JSRV病毒的綿羊肺腺8.6洗滌8.9顯色48.10終止8.11讀值9.3陰性判定標(biāo)準(zhǔn)5試劑配制A.1紅細(xì)胞裂解液A.2抗體樣品稀釋液
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