有機(jī)磷農(nóng)藥檢測(cè)方法研究及進(jìn)展

背景介紹有機(jī)磷農(nóng)藥種類繁多，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中應(yīng)用廣泛，因其高效廣譜、價(jià)格低廉等特點(diǎn)成為世界上使用最廣泛的農(nóng)藥之一，也是農(nóng)產(chǎn)品中檢出率最高的危害物之一，世界各國(guó)對(duì)其殘留限量都做了嚴(yán)格的規(guī)定。農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)是食品安全監(jiān)管的重要手段，目前有機(jī)磷農(nóng)殘常用的色譜法檢測(cè)存在檢測(cè)成本高、難以推廣等缺點(diǎn)；樣品處理簡(jiǎn)單、高效快速的有機(jī)磷農(nóng)殘快速檢測(cè)技術(shù)是當(dāng)前該領(lǐng)域的急需技術(shù)。本文綜述了目前報(bào)道的主要有機(jī)磷快速檢測(cè)方法，討論了尚需解決的主要問(wèn)題，展望了有機(jī)磷農(nóng)殘快速檢測(cè)方法的發(fā)展方向和前景。文章亮點(diǎn)01.介紹了有機(jī)磷農(nóng)藥的危害，簡(jiǎn)述了其進(jìn)入人體后的中毒機(jī)理；舉例展示了常見(jiàn)有機(jī)磷農(nóng)藥在不同產(chǎn)品中的最大殘留限量。02.介紹了目前常見(jiàn)的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法，分析了它們的主要特點(diǎn)和適用領(lǐng)域，討論了還需要解決的主要問(wèn)題。03.展望了能同時(shí)識(shí)別一類有機(jī)磷分子的多殘留免疫分析方法的優(yōu)勢(shì)、原理、發(fā)展方向和前景。內(nèi)容介紹1有機(jī)磷農(nóng)藥中毒機(jī)理OPPs是一種不可逆的乙酰膽堿酯酶（Acetylcholinesterase，AChE）抑制劑，AChE是生物神經(jīng)傳導(dǎo)中有重要作用的酶，中毒的作用機(jī)制是有機(jī)磷與AChE結(jié)合，形成磷酸化的AChE導(dǎo)致其催化作用喪失。因此，有機(jī)磷農(nóng)藥對(duì)哺乳動(dòng)物有很強(qiáng)的毒性。2OPPs殘留檢測(cè)方法OPPs殘留嚴(yán)重影響著食品安全和身體健康，是世界各國(guó)高度關(guān)注的檢測(cè)項(xiàng)目，我國(guó)對(duì)有機(jī)磷農(nóng)藥殘留也規(guī)定了嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)[20]，GB2763-2021規(guī)定了546種農(nóng)藥10092項(xiàng)最大殘留限量，表1羅列了常見(jiàn)的有機(jī)磷農(nóng)藥在不同農(nóng)作物中的最大殘留限量，蔬菜在0.01～0.1mg/kg范圍不等；水果在0.05～5mg/kg范圍不等，有機(jī)磷農(nóng)藥的毒性越高殘留限量越低。檢測(cè)手段是進(jìn)行市場(chǎng)監(jiān)管的主要依據(jù)，目前有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的檢測(cè)方法主要包括色譜法、酶抑制法、毛細(xì)管電泳法、免疫測(cè)定法、電化學(xué)傳感器法等。2.1

色譜檢測(cè)法我國(guó)現(xiàn)行的OPPs檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)大多數(shù)采用的是色譜法，色譜法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確性高，假陰性和假陽(yáng)性出現(xiàn)的情況比較少，在樣品前處理、數(shù)據(jù)分析等方面也在不斷改進(jìn)。2.2

酶抑制法酶抑制法是利用酶的功能基團(tuán)受到某種物質(zhì)（酶抑制劑）的影響，導(dǎo)致酶活力降低或喪失作用的現(xiàn)象而進(jìn)行檢測(cè)的方法。2.3

毛細(xì)管電泳法毛細(xì)管電泳法（CE）具有試劑消耗量低、分析時(shí)間短、操作簡(jiǎn)單和分離效率高等優(yōu)點(diǎn)，是一種頗有實(shí)用價(jià)值的OPPs檢測(cè)方法。毛細(xì)管電泳還具有很大的小型化潛力，便于進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)分析。2.4

免疫檢測(cè)法免疫檢測(cè)法是利用抗原和抗體之間的特異性親和反應(yīng)來(lái)檢測(cè)和分析被檢物的一種高靈敏度、高選擇性的方法。免疫分析檢測(cè)方法擁有特異性和抗干擾能力強(qiáng)的特點(diǎn)，因此樣品前處理簡(jiǎn)單。2.5

電化學(xué)生物傳感器法生物傳感器是在分子水平上進(jìn)行快速檢測(cè)的分析工具。目前使用最多的識(shí)別元件是抗體和抗原，近年來(lái)適配體的出現(xiàn)給生物傳感器領(lǐng)域帶來(lái)了新的發(fā)展機(jī)遇。3展望對(duì)于大量的檢測(cè)樣品來(lái)說(shuō)，先通過(guò)快速檢測(cè)方法進(jìn)行初篩，再對(duì)陽(yáng)性樣品按照國(guó)標(biāo)方法進(jìn)行確認(rèn)，是檢測(cè)領(lǐng)域常用的策略。目前，以色譜法主導(dǎo)的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留的標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法成熟穩(wěn)定、準(zhǔn)確度和靈敏度高，是我國(guó)有機(jī)磷檢測(cè)領(lǐng)域賴以進(jìn)行的主流方法。但色譜法檢測(cè)成本高、檢測(cè)速度慢、不適合快速初篩是其主要缺點(diǎn)。因此，OPPs殘留檢測(cè)領(lǐng)域的主要痛點(diǎn)還是具有實(shí)用價(jià)值的快速檢測(cè)方法的技術(shù)創(chuàng)新。有機(jī)磷農(nóng)殘的快速檢測(cè)雖然種類多，但其研究大都尚處于基礎(chǔ)研究階段，真正能在實(shí)際檢測(cè)領(lǐng)域推廣應(yīng)用的幾乎沒(méi)有，這些研究離實(shí)際應(yīng)用還有距離。但是隨著實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中問(wèn)題的不斷解決，現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)也逐漸向?qū)嶋H應(yīng)用靠近，綜合現(xiàn)有檢測(cè)方法的優(yōu)勢(shì)，完全有可能建立一種甚至多種有機(jī)磷農(nóng)殘快速初篩的檢測(cè)方法。目前抗干擾能力和準(zhǔn)確性是實(shí)際樣品檢測(cè)的兩大關(guān)鍵因素，由于免疫法的特異性或者群選性特點(diǎn)，使其具備很強(qiáng)的抗干擾能力，能大大簡(jiǎn)化樣品前處理難度，準(zhǔn)確度高，在臨床和獸藥檢測(cè)等領(lǐng)域已經(jīng)被大量實(shí)踐證明是一種優(yōu)異的檢測(cè)方法，完全有可能解決實(shí)際樣品檢測(cè)的兩個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié)。另一方面，由于有機(jī)磷農(nóng)藥種類繁多，傳統(tǒng)免疫法的特異性決定了每次只能檢測(cè)一種有機(jī)磷農(nóng)藥，對(duì)于快速初篩檢測(cè)來(lái)說(shuō)很難提高效率、降低成本。近年來(lái)逐漸受到廣大學(xué)者關(guān)注的群選性免疫分析，也就是同時(shí)識(shí)別一類化合物的多殘留免疫分析技術(shù)，能解決這一問(wèn)題?；谌哼x性抗體或生物分子的多殘留免疫分析技術(shù)，