2025屆吉林省公主嶺市范家屯鎮(zhèn)一中高考仿真卷生物試題含解析

2025屆吉林省公主嶺市范家屯鎮(zhèn)一中高考仿真卷生物試題注意事項：1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號填寫清楚，將條形碼準確粘貼在考生信息條形碼粘貼區(qū)。2．選擇題必須使用2B鉛筆填涂；非選擇題必須使用0．5毫米黑色字跡的簽字筆書寫，字體工整、筆跡清楚。3．請按照題號順序在各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試題卷上答題無效。4．保持卡面清潔，不要折疊，不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于種群和群落的描述中，正確的是（）A．樣方法能調(diào)查植物的種群密度，不能調(diào)查動物的種群密度B．群落的垂直結(jié)構(gòu)有利于群落中生物充分利用環(huán)境資源C．調(diào)查群落的邊界不屬于群落水平研究的問題D．調(diào)查某種植物的種群密度能反映該植物種群數(shù)量變化的趨勢2．《莊子·人間世》中莊子對弟子說：“山木自寇也，膏火自煎也，桂可食，故伐之；漆可用，故割之。人皆知有用之用，而莫知無用之用也”。語句中相關(guān)生態(tài)學原理錯誤的是（）A．“寇”“煎”“伐”“割”有利于能量流向?qū)θ祟愑幸娴牟糠諦．“膏火自煎”使得生態(tài)系統(tǒng)能量利用率降低C．“伐之”、“割之”均不利于生物多樣性的保護D．“無用之用”指生物多樣性的間接價值和潛在價值3．對正常二倍體生物而言，以下哪種性狀肯定能穩(wěn)定遺傳（不考慮變異）A．優(yōu)良性狀 B．隱性性狀 C．顯性性狀 D．相對性狀4．對圖曲線模型分析不正確的是（）A．若表示酶促反應(yīng)速率與反應(yīng)底物濃度的關(guān)系，則AB段限制因素可能是酶濃度B．若表示葡萄糖進入成熟哺乳動物紅細胞速率與膜內(nèi)外濃度差關(guān)系．則AB段限制因素可能是載體數(shù)量C．此曲線可表示動物骨骼肌細胞內(nèi)ATP生成量與O2供給量之間的關(guān)系D．若表示環(huán)境溫度與生物體內(nèi)酶活性的關(guān)系，則該曲線不能表示恒溫動物5．中國賽罕壩林場建設(shè)者榮獲2017年聯(lián)合國環(huán)保最高榮譽—“地球衛(wèi)士獎”。塞罕壩曾被稱作“千里松林”，但由于過度采伐，成為荒原。經(jīng)林場建設(shè)者們的設(shè)計和努力創(chuàng)造了荒原變林海的奇跡。2019年，中國“螞蟻森林”項目再獲此殊榮。下列說法錯誤的是（）A．生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力是有一定限度的B．對森林采用科學合理的間伐，可提高其恢復力穩(wěn)定性C．生態(tài)環(huán)境問題具有全球性，需要全人類的關(guān)注和合作D．人類活動往往會使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向進行6．DNA分子中堿基上連接一個“-CH3”，稱為DNA甲基化，基因甲基化可以導致其不能轉(zhuǎn)錄。這種變化可以在細胞間遺傳。下列敘述正確的是（）A．基因型相同的生物表現(xiàn)型可能不同B．基因甲基化引起的變異屬于基因突變C．基因甲基化一定屬于不利于生物的變異D．原癌、抑癌基因甲基化不會導致細胞癌變7．下表是一位患者甲狀腺功能檢測報告單，請分析報告單數(shù)據(jù)，判斷該患者的癥狀是（）檢驗項目結(jié)果參考區(qū)間單位總甲狀腺素（T8）8．52．7-5．7mmol/L總?cè)饧紫僭彼幔═5）8．258．5-5．8mmol/L促甲狀腺素（TSH）82．857．27-8．27mmol/LA．甲狀腺功能正常 B．機體產(chǎn)能增加C．機體代謝偏低 D．神經(jīng)系統(tǒng)興奮性提高8．（10分）材料的選取與處理以及檢測試劑的選用是實驗成功的關(guān)鍵性因素。下列敘述中正確的是（）A．用黑藻葉片進行探究植物細胞的吸水和失水的實驗時，葉綠體會干擾實驗現(xiàn)象的觀察B．在探究淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用的實驗中，可選用碘液對實驗結(jié)果進行檢測C．在檢測生物組織中的還原糖和檢測生物組織中的蛋白質(zhì)的實驗中，均要使用CuSO4溶液且作用相同D．在探究酵母細胞呼吸方式的實驗中，可根據(jù)溴麝香草酚藍水溶液變黃的時間長短，來檢測CO2的產(chǎn)生情況二、非選擇題9．（10分）森林中的枯枝落葉是森林土壤有機質(zhì)的主要來源，枯枝落葉的分解，對于提高森林生產(chǎn)力有著極其重要的作用?；卮鹣铝袉栴}：（1）枯枝落葉分解后為森林樹木提供了__________（至少兩項）等物質(zhì)。促進了植物的光合作用，從而提高了森林的生產(chǎn)力?？葜β淙~的分解過程體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)的_________功能。參與枯枝落葉分解的土壤生物包括營腐生生活的_________和微生物。（2）微生物種類、環(huán)境溫度、濕度及pH等均會對枯葉的分解速率產(chǎn)生影響，不同地塊的微生物種類存在差異?，F(xiàn)欲證明不同地塊微生物對淀粉的分解速率不同，請以碘液作為檢驗試劑設(shè)計實驗，并寫出實驗思路及預(yù)期結(jié)果。實驗思路__________________________________________________預(yù)期結(jié)果___________________________________________________10．（14分）γ-氨基丁酸和某種局部麻醉藥在神經(jīng)興奮傳遞過程中的作用機理如下圖所示。此種局麻藥單獨使用時不能通過細胞膜，如與辣椒素同時注射才會發(fā)生如圖所示效果。據(jù)圖回答下列問題：（1）由圖1可知，γ-氨基丁酸是一種_____________可作用于突觸后膜，引起_____________，抑制了下一個神經(jīng)元的興奮。（2）γ-氨基丁酸發(fā)揮完作用后，會立即被_____________，是一種可逆的神經(jīng)抑制效應(yīng)。（3）局麻藥和γ-氨基丁酸的作用效果___________（填“相似”或“相反”）。據(jù)圖分析該局部麻醉藥的機理是___________________________________。11．（14分）乙烯具有促進果實成熟的作用，ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細胞合成乙烯的兩個關(guān)鍵酶。利用反義DNA技術(shù)（原理如圖1），可以抑制這兩個基因的表達，從而使番茄具有耐儲存、宜運輸?shù)膬?yōu)點。圖2為融合ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因的反義表達載體的結(jié)構(gòu)示意圖。（1）圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應(yīng)在番茄的____________（器官）中表達。（2）從番茄成熟果實中提取___________為模板，利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進行拼接構(gòu)成融合基因并擴增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點，用限制酶____________對上述兩個基因進行酶切，再串聯(lián)成融合基因，相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶_______________進行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）為了實現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因_______（正向/反向）插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達載體與農(nóng)桿菌菌液混合后，接種在含有___的培養(yǎng)基中，可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。（5）在檢測番茄細胞中是否存在反義融合基因時，____________（填“能”/“不能”）用放射性物質(zhì)標記的ACC氧化（合成）酶基因片段做探針進行檢測，理由是____________。12．科學工作者欲培育能產(chǎn)生含鐵量較高的轉(zhuǎn)基因花生新品種，Ti質(zhì)粒中含有潮霉素抗性基因，具體步驟如圖：（1）完整的Ti質(zhì)粒除了圖示結(jié)構(gòu)外，還應(yīng)該包括啟動子、終止子等，其中啟動子位于基因的首段，它的作用是_____________________________________________________________________。（2）若鐵結(jié)合蛋白基因來自菜豆，獲取該目的基因需要用到的工具酶的特點是_______________________________________________________________________________________。（3）圖中將目的基因（鐵結(jié)合蛋白基因）導入受體細胞的方法為______________；為確定轉(zhuǎn)基因花生是否培育成功，首先應(yīng)檢測___________，這是目的基因能否在受體細胞內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵；其次，利用___________檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA；最后，利用抗原—抗體雜交法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。（4）圖中用到的植物細胞工程技術(shù)是_______________________________，培養(yǎng)基1中經(jīng)過脫分化得到愈傷組織，培養(yǎng)基2中篩選的方法是在培養(yǎng)基中加入一定量的_________________，培養(yǎng)基3的作用是______________________________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、B【解析】

1、群落指生活在一定的自然區(qū)域內(nèi)，相互之間具有直接或間接關(guān)系的各種生物的總和。群落的空間結(jié)構(gòu)包括垂直結(jié)構(gòu)和水平結(jié)構(gòu)。2、種群數(shù)量特征包括種群密度、出生率和死亡率、遷入率和遷出率、年齡組成和性別比例；出生率和死亡率都會影響種群數(shù)量的變化，但年齡組成是通過影響出生率和死亡率影響數(shù)量變化的，性別比例通過影響出生率影響數(shù)量變化的。【詳解】A、對于像昆蟲卵、跳蝻等活動范圍比較小的動物，調(diào)查動物種群密度可以采用樣方法，A錯誤；B、在群落的垂直結(jié)構(gòu)中，不同種類的生物分布于垂直空間的不同位置，有利于充分利用環(huán)境資源，B正確；C、調(diào)查群落的邊界屬于群落水平研究的問題，C錯誤；D、年齡組成預(yù)測種群數(shù)量的變化趨勢，D錯誤。故選B。2、C【解析】

莊子的話意思是“山上的樹木，因長成有用之材，而被人砍伐；膏能燃燒照明而受煎熬；桂樹因為可以吃，所以被人砍伐；漆樹因為可以用，所以被人割皮。人們只知道有用的好處，哪里知道無用的好處。”【詳解】A、“寇”“煎”“伐”“割”都是為人類所用，其能量流向?qū)θ祟愑幸娴牟糠?，A正確；B、“膏火自煎”使得生態(tài)系統(tǒng)能量利用率降低，B正確；C、“伐之”不利于生物多樣性的保護，“割之”只是在樹上割開口子，漆樹依然可以生長，對生物多樣性保護無影響，C錯誤；D、“無用之用”指生物多樣性的間接價值和潛在價值，D正確。故選C。3、B【解析】

在雜交實驗中，只有純合體自交后代不發(fā)生性狀分離，能夠穩(wěn)定遺傳，優(yōu)良性狀不一定是純合體，A錯誤；隱性性狀都為純合體，可以穩(wěn)定遺傳，B正確；顯性性狀不一定是純合體，C錯誤；相對性狀的基因型不一定是純合子，D錯誤。故選：B。4、C【解析】

1、酶促反應(yīng)的速率受反應(yīng)物濃度、酶活性的影響，在一定的范圍內(nèi)，隨著反應(yīng)物濃度升高，酶促反應(yīng)速率增大，當超過一定的濃度后，反應(yīng)物濃度升高，酶促反應(yīng)的速率不再增大，此時限制酶促反應(yīng)速率的因素可能是酶的濃度、酶活性等，溫度、PH等可以通過影響酶活性而影響酶促反應(yīng)速率．2、哺乳動物成熟的紅細胞吸收葡萄糖的方式是協(xié)助擴散，影響協(xié)助擴散的因素主要是膜內(nèi)外濃度差．載體數(shù)量等．3、骨骼肌細胞可以進行有氧呼吸，也可以進行無氧呼吸，有氧呼吸和無氧呼吸都能合成ATP，在氧氣濃度為0時，骨骼肌通過無氧呼吸產(chǎn)生ATP．4、溫度影響酶活性，酶有最適宜溫度，小于最適宜溫度時，隨溫度升高，酶活性升高，超過最適宜溫度后，隨著溫度升高，酶活性降低甚至失去活性．【詳解】A、在一定的范圍內(nèi)，隨著反應(yīng)物濃度升高，酶促反應(yīng)速率增大，當超過一定的濃度后，反應(yīng)物濃度升高，酶促反應(yīng)的速率不再增大，因此題圖曲線可以表示酶促反應(yīng)速率與反應(yīng)底物濃度的關(guān)系，AB段限制因素可能是酶濃度，A正確；B、葡萄糖進入哺乳動物成熟的紅細胞是協(xié)助擴散，如果該圖表示葡萄糖進入成熟哺乳動物紅細胞速率與膜內(nèi)外濃度差關(guān)系，則AB段限制因素可能是載體數(shù)量，B正確；C、氧氣濃度為0時，骨骼肌細胞可以通過無氧呼吸產(chǎn)生ATP，該曲線不能表示動物骨骼肌細胞內(nèi)ATP生成量與O2供給量之間的關(guān)系，C錯誤；D、正常情況下恒溫動物的體溫不會隨環(huán)境溫度變化而發(fā)生較大變化，因此該圖不能表示恒溫動物的酶活性與環(huán)境溫度之間的關(guān)系，D正確．故選C．5、B【解析】

生態(tài)環(huán)境面臨的問題有：1.全球變曖與海平面上升，大氣中的二氧化碳等氣體增加，將出現(xiàn)更嚴重的溫室效應(yīng)，旱澇災(zāi)害可能增加；2.土地流失失與人均耕地面積不斷減少；3.森林資源日益減少，世界森林每年幾乎減少1%；4.淡水供給不足將構(gòu)成經(jīng)濟發(fā)展和糧食生產(chǎn)的制約因素；5.臭氧層的損耗將大影響水生生態(tài)系統(tǒng)；6、生物物種加速滅絕，動植物資源急劇減少?！驹斀狻緼、罕壩曾被稱作“千里松林”，但由于過度采伐，成為荒原，這一事實說明生態(tài)系統(tǒng)的自我調(diào)節(jié)能力是有一定限度的，A正確；B、對森林采用科學合理的間伐，可提高其自我調(diào)節(jié)能力，B錯誤；C、生態(tài)環(huán)境是人類賴以生存的物質(zhì)基礎(chǔ)，故生態(tài)環(huán)境問題具有全球性，需要全人類的關(guān)注和合作，C正確；D、人類活動能夠改變?nèi)郝溲萏娴姆较蚝退俣?，因此可知人類活動往往會使群落演替按照不同于自然演替的速度和方向進行，D正確。故選B。6、A【解析】

1、基因、蛋白質(zhì)和性狀的關(guān)系：是控制生物性狀的基本單位，特定的基因控制特定的性狀。

2、基因?qū)π誀畹目刂品绞剑?/p>

①基因通過控制酶的合成來影響細胞代謝，進而間接控制生物的性狀，如白化病、豌豆的粒形；

②基因通過控制蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)來直接控制性狀，如鐮刀形細胞貧血癥、囊性纖維病?！驹斀狻緼、基因型相同的生物表現(xiàn)型可能不同，生物的性狀還受環(huán)境的影響，A正確；B、基因甲基化引起的變異是影響的轉(zhuǎn)錄過程，不屬于基因突變，B錯誤；C、若被甲基化的基因是有害的，則有害基因不能表達，基因甲基化后不一定屬于有害生物的變異，C錯誤；D、原癌、抑癌基因甲基化后，則不能正?？刂萍毎芷?，會導致細胞癌變，D錯誤。故選A。7、C【解析】

檢測出來的值在參考區(qū)間內(nèi)說明正常，如表中的總甲狀腺素（T8）和總?cè)饧紫僭彼幔═5）均低于參考區(qū)間內(nèi)，均異常。促甲狀腺素（TSH）結(jié)果為82．85，遠遠超出參考區(qū)間，說明也異常。T5和T8合稱為甲狀腺激素?！驹斀狻緼、甲狀腺激素含量下降，說明甲狀腺功能不正常，A錯誤；B、甲狀腺激素可以促進產(chǎn)熱增多，而表中甲狀腺激素含量偏低，機體產(chǎn)能減少，B錯誤；C、甲狀腺激素可以促進機體的新陳代謝，表中甲狀腺激素含量偏低，代謝減慢，C正確；D、甲狀腺激素含量偏低，興奮性減弱，D錯誤。故選C?！军c睛】本題通過表格的信息考查學生對激素調(diào)節(jié)的掌握，學習時應(yīng)清楚甲狀腺激素以及促甲狀腺激素等的功能及調(diào)節(jié)特點。8、D【解析】

本題考查高中生物課本上的基礎(chǔ)實驗，包括探究植物細胞的吸水和失水實驗、探究淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用的實驗、檢測生物組織中的還原糖和蛋白質(zhì)的實驗、探究酵母細胞的呼吸方式實驗，回憶這些實驗的選材、處理、試劑的選擇、實驗結(jié)果與結(jié)論等，據(jù)此答題。【詳解】A、在運用黑藻葉片探究植物細胞的吸水和失水的實驗中，葉綠體的存在使原生質(zhì)層呈現(xiàn)綠色，可以通過綠色部分（即原生質(zhì)層）的變化觀察質(zhì)壁分離或質(zhì)壁分離復原現(xiàn)象，因此葉綠體的存在有利于實驗現(xiàn)象的觀察，A錯誤；B、在探究淀粉酶對淀粉和蔗糖的水解作用的實驗中，蔗糖不管是否發(fā)生水解都不能使碘液變藍，因此不可選用碘液對實驗結(jié)果進行檢測，而應(yīng)該選用斐林試劑進行檢測，B錯誤；C、在檢測生物組織中的還原糖和檢測生物組織中的蛋白質(zhì)的實驗中，均要使用CuSO4溶液，但作用不相同，前者CuSO4與NaOH反應(yīng)生成Cu（OH）2，Cu（OH）2可與還原糖發(fā)生氧化還原反應(yīng)，生成磚紅色沉淀，而后者Cu2+在堿性條件下與蛋白質(zhì)結(jié)合形成紫紅色絡(luò)合物，C錯誤；D、在探究酵母菌細胞呼吸方式的實驗中，有氧條件下酵母菌產(chǎn)生CO2的速率較快，溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃所需時間短，無氧條件下產(chǎn)生CO2的速率較慢，溴麝香草酚藍水溶液由藍變綠再變黃所需時間長，因此可根據(jù)溴麝香草酚藍水溶液變黃的時間長短，來檢測CO2的產(chǎn)生情況，D正確。故選D。二、非選擇題9、無機鹽、CO2物質(zhì)循環(huán)和能量流動動物用不同地塊的土制成的等量土壤浸出液分別與等量淀粉溶液混合，在相同并適宜的溫度、濕度及pH下作用相同時間，用碘液檢測并觀察變藍的程度可見不同的組別變藍的程度存在差異【解析】

該題主要考察了生態(tài)系統(tǒng)的功能，生態(tài)系統(tǒng)的功能可分為物質(zhì)循環(huán)、能量流動和信息傳遞，而在這些功能的實現(xiàn)中，離不開生產(chǎn)者和分解者的重要作用，其中枯枝敗葉等有機物的分解就是依靠分解者來實現(xiàn)的，而分解者是生態(tài)系統(tǒng)中營腐生生活的動物和微生物等?！驹斀狻浚?）枯枝落葉分解后可形成CO2、H2O及無機鹽等物質(zhì)，CO2、H2O可作為光合作用的原料，而無機鹽與光合作用的酶、ATP、NADPH及葉綠素等合成有關(guān)；枯枝落葉分解后將物質(zhì)歸還無機環(huán)境再度被植物利用，這體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)的物質(zhì)循環(huán)功能，同時伴隨能量流動；腐生動物和微生物對枯枝落葉都有分解作用；（2）實驗?zāi)康臑樽C明不同地塊微生物對淀粉的分解速率不同，因此，要注意排除無關(guān)變量干擾，使實驗結(jié)果是由不同地塊的微生物不同導致；用碘液檢測并觀察變藍的程度可檢驗實驗結(jié)果，體現(xiàn)在不同組別變藍的程度存在差異?！军c睛】該題的難點為第二小問的實驗設(shè)計，一般在設(shè)計實驗的時候，首先是通過實驗?zāi)康拇_定該實驗的自變量設(shè)置情況、因變量的檢測手段和無關(guān)變量的控制等因素，然后將各個變量聯(lián)系起來，這是解決實驗問題的常規(guī)方法。10、神經(jīng)遞質(zhì)內(nèi)流降解（滅活或清除）相似該局部麻醉藥在辣椒素的協(xié)助下進入細胞內(nèi)，作用于突觸后膜的通道，阻礙內(nèi)流，從而抑制突觸后膜產(chǎn)生興奮。【解析】

神經(jīng)纖維未受刺激時電位狀態(tài)為靜息電位，表現(xiàn)為外正內(nèi)負，是由于鉀離子外流形成的。通常情況下鈉離子在細胞外液中含量高，是維持細胞外液滲透壓的主要離子。當神經(jīng)纖維接受刺激后會使細胞膜上的鈉離子通道打開，導致鈉離子大量內(nèi)流使得膜電位發(fā)生逆轉(zhuǎn)表現(xiàn)為外負內(nèi)正，為動作電位狀態(tài)?！驹斀狻浚?）圖1顯示，γ-氨基丁酸是一種神經(jīng)遞質(zhì)可作用于突觸后膜，當與突觸后膜上的受體結(jié)合后，引起內(nèi)流，進而導致突觸后膜的膜電位差變得更大，且依然保持外正內(nèi)負的狀態(tài)，因此該神經(jīng)遞質(zhì)的作用效果為抑制下一個神經(jīng)元的興奮。（2）根據(jù)神經(jīng)遞質(zhì)的作用特點可知，γ-氨基丁酸發(fā)揮完作用后，會立即被降解（滅活或清除），以免持續(xù)發(fā)生作用。（3）圖中顯示，該局部麻醉藥在辣椒素的協(xié)助下進入細胞內(nèi)，作用于突觸后膜的通道，阻礙內(nèi)流，從而抑制突觸后膜產(chǎn)生興奮，因此局麻藥和γ-氨基丁酸的作用效果相似?！军c睛】熟知興奮的產(chǎn)生過程是解答本題的關(guān)鍵，能通過圖示辨別抑制性神經(jīng)遞質(zhì)的作用機理和局麻藥的作用機理是解答本題的另一關(guān)鍵！11、果實RNAXbalBamHl和Sacl反向卡那霉素不能番茄細胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因，能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交【解析】

分析題意和題圖：番茄細胞中原有靶基因控制合成的ACC氧化酶和ACC合成酶是番茄細胞合成乙烯的兩個關(guān)鍵酶。圖1所示為反義基因轉(zhuǎn)錄成的RNA可與靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA形成RNA雙鏈，使靶mRNA不能與核糖體結(jié)合或被RNA酶降解，從而阻止了ACC氧化酶和ACC合成酶的合成，影響細胞中乙烯的合成，使番茄具有耐儲存、宜運輸?shù)膬?yōu)點。圖2所示的基因表達載體的組成包括復制原點、啟動子、終止子、標記基因和目的基因，目的基因插入點在啟動子和終止子之間。【詳解】（1）乙烯具有促進果實成熟的作用，因此圖2中的2A11為特異性啟動子，則2A11應(yīng)在番茄的果實中表達。（2）從番茄成熟果實中提取RNA為模板，利用反轉(zhuǎn)錄法合成ACC氧化酶基因和ACC合成酶基因，以進行拼接構(gòu)成融合基因并擴增。（3）合成出的ACC氧化酶基因兩端分別含限制酶BamHⅠ和XbaⅠ的酶切位點，ACC合成酶基因兩端含SacⅠ和XbaⅠ的酶切位點，要將兩個基因融合，需用同一種限制酶即XbaⅠ酶對上述兩個基因進行酶切，再用DNA連接酶串聯(lián)成融合基因，這樣融合基因上有三個限制酶切點：BamHⅠ、XbaⅠ、SacⅠ，其中限制酶BamHⅠ、SacⅠ分別位于融合基因的兩端，因此相應(yīng)的Ti質(zhì)粒應(yīng)用限制酶BamHl和Sacl進行切割，確保融合基因能夠插入載體中。（4）反義融合基因是由番茄果實細胞中的靶基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA反轉(zhuǎn)錄形成的，因此為了實現(xiàn)圖1中反義基因的效果，應(yīng)將融合基因反向插入在啟動子2A11的下游即可構(gòu)成反義融合基因。將表達載體與農(nóng)桿菌菌液混合后，接種在含有卡那霉素的培養(yǎng)基中，可篩選出含有反義融合基因的農(nóng)桿菌，再利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得轉(zhuǎn)基因番茄。（5）在檢測番茄細胞中是否存在反義融合基因時，因為番茄細胞內(nèi)本來存在ACC合成酶基因，能與ACC合成酶基因探針發(fā)生分子雜交，所以不能用放射性物質(zhì)標記的ACC氧化