臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試輔導(dǎo)《微生物檢驗(yàn)》腸桿菌科及檢驗(yàn)講義

腸桿菌科及檢驗(yàn)

?考點(diǎn)

＞概述

概念；命名與分類原則；共同特點(diǎn)；自然與人體內(nèi)的分布；微生物學(xué)檢查方法；臨床意義。

＞埃希菌屬、沙門菌屬、志賀菌屬、變形桿菌屬、耶爾森菌屬及其他腸桿菌科細(xì)菌。

生物學(xué)性狀；微生物學(xué)檢驗(yàn)；臨床意義。

【內(nèi)容講解】

一、概述（共性）

腸桿菌科是由多個(gè)菌屬組成，G桿菌，牛.物學(xué)性狀相似。

大多數(shù)腸道桿菌屬于正常菌群。當(dāng)機(jī)體免疫力降低或侵入腸道外組織時(shí)成為條件致病菌而引起疾病。

部分為致病性細(xì)菌。

（-）分類

腸桿菌科細(xì)菌的種類繁多。主要根據(jù)細(xì)菌的形態(tài)、生化反應(yīng)、抗原性質(zhì)以及核酸相關(guān)性進(jìn)行分類。根

據(jù)《伯杰系統(tǒng)細(xì)菌學(xué)手冊(cè)》（1984年）將腸桿菌科的細(xì)菌分為20個(gè)屬即埃希菌屬、志賀菌屬、沙門菌屬、

枸椽酸桿菌屬、克雷伯菌屬、腸桿菌屬、沙雷菌屬、哈夫尼亞菌屬、愛德華菌屬、普羅威登斯菌屬、變形

桿菌屬、摩根菌屬、耶爾森菌屬等。

（-）生物學(xué)特性

1.形態(tài)與染色

G）桿菌,大小為（1.0?6.0）ymX（0.3~1.0）ym?

多數(shù)有周鞭毛（除志賀菌屬、克雷伯菌屬、鼠疫耶爾森菌和EIEC）,無芽胞，少數(shù)菌屬細(xì)菌可形成莢

膜。

2.培養(yǎng)

需氧或兼性厭氧；營(yíng)養(yǎng)要求不高；

普皿和麥康凱培養(yǎng)基：中等大小、表面光滑的菌落；

液體培養(yǎng)基：混濁生長(zhǎng)。

3.生化反應(yīng)

發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸、或產(chǎn)酸產(chǎn)氣；

乳糖發(fā)酵試驗(yàn)：非致病菌+,致病菌-（除外變形桿菌）。觸酶陽性；氧化酣陰性：硝酸鹽還原為亞

硝酸鹽。

4.抗原構(gòu)造

＞菌體（0）抗原］

＞｝腸桿菌科血清學(xué)分群和分型的依據(jù)

＞鞭毛（H）抗原J

＞表面抗原（如Vi抗原、K抗原）：包繞在0抗原外的不耐熱的多糖抗原，可阻斷0抗原與相應(yīng)抗體

之間的反應(yīng)，加熱處理能破壞其阻斷作用。

5.變異

＞菌落S?R變異

A鞭毛H?。變異

＞耐藥性變異

＞生化反應(yīng)性質(zhì)的改變

6.抵抗力

不強(qiáng)。加熱60℃,30分鐘即被殺死。不耐干燥，對(duì)一般化學(xué)消毒劑敏感。對(duì)低溫有耐受力，能耐膽鹽。

7.腸桿菌科的初步分類

苯丙氨酸脫氨酶

變形桿菌屬葡萄糖酸鹽試驗(yàn)

普羅威登斯菌屬(+)(-)

摩根菌屬

克雷伯菌屬埃希菌屬

腸桿菌屬志賀菌屬

沙雷菌屬沙門菌屬

哈夫尼亞菌屬枸檬酸桿菌屬

愛德華菌屬

耶爾森菌屬

(三)致病性

1.致病性腸道桿菌：以腸內(nèi)感染為主，腹瀉為共顯癥狀，引起急慢性腸道感染、食物中毒、旅游者腹

瀉及腸熱癥等。

2.條件致病菌：為醫(yī)院感染主要病原菌，出現(xiàn)移位感染。大腸埃希菌、變形桿菌及克雷伯菌等條件致

病菌可引起泌尿生殖道、傷口等部位的感染。

(四)微生物檢驗(yàn)

1.分離培養(yǎng)

糞便或肛拭標(biāo)本一增菌一腸道菌選擇培養(yǎng)基

?

血、尿或膝汁等一肉湯增菌一血瓊脂培養(yǎng)基J

—?純菌(菌落)—?結(jié)合革蘭染色及氧化的反應(yīng)結(jié)果作

進(jìn)一步鑒定

2.鑒定

(1)初步鑒定：

①確定腸桿菌科的細(xì)菌，應(yīng)采用葡萄糖氧化-發(fā)酵試驗(yàn)及氧化酶試驗(yàn)與弧菌科和非發(fā)酵菌加以鑒別；

②腸桿菌科細(xì)菌的分群，多采用苯丙氨酸脫氨酶和葡萄糖酸鹽試驗(yàn)，將腸桿菌科的細(xì)菌分為三個(gè)類群;

③選擇生化反應(yīng)進(jìn)行屬種鑒別。KIA和MIU將細(xì)菌初步定屬。

(2)最后鑒定：

根據(jù)生化反應(yīng)的結(jié)果初步定屬、種，再用診斷血清做凝集反應(yīng)才能作出最后判斷。

二、埃希菌屬

5個(gè)種：大腸埃希菌、蟒螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫爾曼埃希菌和傷口埃希菌。

臨床最常見的是大腸埃希菌。

（-）生物學(xué)性狀

1.形態(tài)與染色

G,短桿菌，（1.0~3.0）umX（0.4-0.7）u多數(shù)有周鞭毛，有菌毛，有莢膜或微莢膜。

2.培養(yǎng)特性

＞兼性厭氧菌；營(yíng)養(yǎng)要求不高。

＞普通營(yíng)養(yǎng)肉湯：渾濁生長(zhǎng)。

＞普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂：圓形，凸起，邊緣整齊，灰白色的S型菌落,直徑2?3mm。

＞血瓊脂平板：少數(shù)菌株產(chǎn)生溶血環(huán)。

＞伊紅亞甲藍(lán)瓊脂：菌落呈藍(lán)紫色并有金屬光澤（發(fā)酵乳糖）。

＞麥康凱和SS瓊脂：粉紅色菌落。

3.生化反應(yīng)

＞發(fā)酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖和甘露醇產(chǎn)酸產(chǎn)氣，分解蔗糖因菌株而異，尿素酶試驗(yàn)陰性。

＞口弓I口朵、甲基紅、V-P、枸檬酸鹽試驗(yàn)（IMViC試驗(yàn)）為++--。

＞克氏雙糖鐵瓊脂（KIA）：斜面和底層均產(chǎn)酸產(chǎn)氣，H2s（-）。

＞動(dòng)力-口引噪-尿素（MIU）培養(yǎng)基為++

4.抗原結(jié)構(gòu)

＞菌體抗原（0）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三種構(gòu)成。

＞現(xiàn)已知有171種?？乖?，1抗種K抗原和56種H抗原。

＞一個(gè)菌株的抗原類型由特殊的0、K和H抗原的代碼表示，其血清型別的方式是按0：K：H排列，例

如0111：K58：H2?

（二）致病性

致病物質(zhì)：主要是侵襲力、內(nèi)毒素、腸毒素等。

所致疾病：

1.腸道外感染以泌尿系統(tǒng)感染常見，還有菌血癥，膽囊炎，腹腔膿腫。

2.腸道感染（致病性大腸埃希菌）

腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌（魚區(qū)）：引起霍亂樣腸毒素腹瀉（蟲遑）。

腸致病型大腸埃希菌（些）：主要引起嬰兒腹瀉。

腸侵襲型大腸埃希菌（魚二）：可侵入結(jié)腸黏膜上皮，引起痢疾樣腹瀉（黏液膿血便）。

腸出血型大腸埃希菌（奧匹）：又稱產(chǎn)志賀樣毒素（這）大腸埃希菌（SLTEC或UTEC）,其中0157：

H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征（曄）。

臨床特征為嚴(yán)重的腹痛、痙攣，反復(fù)出血性腹瀉，伴發(fā)熱、嘔吐等。嚴(yán)重者可發(fā)展為急性腎衰竭。

腸黏附型大腸埃希菌（EAggEC）：新近報(bào)道能引起腹瀉。

3.CDC將大腸埃希菌0157：H7列為常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目

＞在北美許多地區(qū)，0157；H7占腸道分離病原菌的第二或第三位，是從血便中分離到的最常見的病原

菌。

＞6、7、8三個(gè)月0157：H7感染的發(fā)生率最高。

＞0157是4歲以下兒童急性腎衰的主要病原菌。

（三）微生物檢驗(yàn)

1.標(biāo)本采集

＞腸道感染可采集糞便；

A腸道外感染可根據(jù)臨床感染情況采集中段尿液、血液、膿汁、膽汁、腦脊液、痰、分泌液等。

2.檢驗(yàn)方法及鑒定

膿液增菌培養(yǎng)物糞便

"血平板弱選擇培養(yǎng)基

仞報(bào)：[]

形態(tài)、染色、性狀J

純培養(yǎng)（菌落）

初步鑒定：

KIA：A/A或K/A、產(chǎn)氣或不

鑒定為大腸埃希菌＜—產(chǎn)氣、H2s一

JMIU：T-或一、十、一,

IMViC：+、十、一、一

最后鑒定

最后鑒定：

＞補(bǔ)充系列生化試驗(yàn)

＞致病性大腸埃希菌

□無動(dòng)力的不發(fā)酵乳糖株，應(yīng)與志賀菌相鑒別

.鑒別試驗(yàn)：醋酸鈉、葡萄糖鉉、粘質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸試驗(yàn)“

?大腸埃希菌均為陽性，而志賀菌均為陰性。

□血清學(xué)試驗(yàn)

三、志賀菌屬

人類細(xì)菌性痢疾最常見的病原菌，通稱痢疾桿菌。

＞根據(jù)生化反應(yīng)與血清學(xué)試驗(yàn)該屬細(xì)菌分為痢疾、福氏、鮑氏和宋內(nèi)志賀菌四群。

＞我國(guó)以福氏和宋內(nèi)志賀菌引起的菌痢最為常見。

（-）生物學(xué)特性

1.形態(tài)與染色

G,短小桿菌，（2?3）UmX（0.5?0.7）um,無莢膜，無芽胞，無鞭毛，有菌毛。

2.培養(yǎng)特性

需氧或兼性厭氧；

液體培養(yǎng)基：呈混濁生長(zhǎng)；

普通瓊脂平板和SS培養(yǎng)基：中等大小、半透明的光滑型菌落（宋內(nèi)志賀菌可形成扁平、粗糙的菌落）。

3.生化反應(yīng)

氧化酶試驗(yàn)陰性，動(dòng)力陰性，不產(chǎn)生賴氨酸脫竣酶；

KIA：K/A,H2S（-）；

IMViC：-、+、-、

志賀菌屬的細(xì)菌分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不分解乳糖（宋內(nèi)志賀菌可遲緩分解乳糖），口弓I味試驗(yàn)陰性,

H*陰性，MR試驗(yàn)陽性，VP試驗(yàn)陰性，不產(chǎn)生賴氨酸脫竣酶，不能利用檸檬酸鹽，氧化酶試驗(yàn)陰性，動(dòng)力

陰性。

4.抗原結(jié)構(gòu)

＞只有0抗原而無鞭毛抗原，個(gè)別菌型及新分離菌株有K抗原。

＞?？乖秩禾禺愋钥乖托吞禺愋钥乖瓋深?。

＞根據(jù)抗原構(gòu)造可將志賀菌分為四個(gè)血清群，40余種血清型（包括亞型）。K抗原存在時(shí)能阻斷?？?/p>

原與相應(yīng)抗血清的凝集作用。加熱100C、60分鐘可消除K抗原對(duì)0抗原的阻斷作用，在一定條件下可產(chǎn)

生S-R變異及耐藥性變異。

（二）臨床意義

致病物質(zhì)：

侵襲力：菌毛粘附于腸粘膜上皮細(xì)胞，誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)吞。

內(nèi)毒素：破壞腸粘膜；腸壁通透性：腸壁植物神經(jīng)——腹痛，腹瀉，里急后重，粘液膿血便。

外毒素（志賀毒素，ST）：腸毒素活性；細(xì)胞毒活性；神經(jīng)毒性。

所致疾病：細(xì)菌性痢疾，簡(jiǎn)稱菌痢。

1.急性菌痢。

2.中毒性菌痢。

3.慢性菌痢。

傳染源為病人和帶菌者，經(jīng)糞口傳播。

（三）微生物檢驗(yàn)

1.標(biāo)本采集

盡可能在發(fā)病早期及治療前采集新鮮糞便，選擇膿血便或黏液便，必要時(shí)可用肛拭子采集。

2.檢驗(yàn)方法及鑒定

糞便肛拭標(biāo)本

I

SS平板中國(guó)藍(lán)。r麥康凱平板

||

初步鑒定：

多價(jià)血清凝集試驗(yàn)

KIA：K/A^產(chǎn)氣-/+、用S--志賀菌屬

MIU：-、+/-、-

氧化酶（一）

最后鑒定

最后鑒定:

增加生化反應(yīng)

志賀菌屬的診斷血清作群型鑒定

1

鑒別

鑒別:

動(dòng)力乳糖靛基質(zhì)賴氨酸黏液酸、醋酸鹽、枸檬酸鹽

志賀菌----+

大腸埃希菌++++-

動(dòng)力氧化酶試驗(yàn)

志賀菌--

類志賀鄰單胞菌++

動(dòng)力硫化氫A-F0診斷血清

志賀菌---

傷寒沙門菌+++

（四）防治原則

＞人工主動(dòng)免疫用于預(yù)防目前尚不理想。

＞預(yù)防的主要措施是防止進(jìn)食被污染的食品、飲料及水，及早發(fā)現(xiàn)及早積極治療攜帶者。

＞治療細(xì)菌性痢疾一般首選氟嗓諾酮類抗生素。

（五）臨床意義

致病因素為侵襲力、內(nèi)毒素及外毒素（志賀菌A群/I型和n型產(chǎn)生志賀毒素，具有細(xì)胞毒、腸毒素、

神經(jīng)毒）?？梢鹑祟惣?xì)菌性痢疾，其中可分急性、慢性兩種，小兒易引起急性中毒性痢疾。慢性菌痢可

人-人傳播，污染水和食物可引起暴發(fā)流行。

四、沙門菌屬

（-）生物學(xué)性狀

1.形態(tài)與染色

G,直桿菌，（0.7~1.5）umX（2.0-5.0）um,無芽胞，無莢膜，周鞭毛（除雞沙門菌），多數(shù)有

菌毛。

2.培養(yǎng)特性

營(yíng)養(yǎng)要求不高；

液體培養(yǎng)基：均勻混濁生長(zhǎng)；

SS瓊脂和麥康凱瓊脂培養(yǎng)基：約2?4mm的透明或半透明菌落，對(duì)膽鹽耐受。產(chǎn)112s者在SS瓊脂上形

成黑色中心菌落。

3.生化反應(yīng)

不能發(fā)酵乳糖（除亞利桑那菌），不產(chǎn)生靛基質(zhì)，不分解尿素，甲基紅反應(yīng)陽性，V-P試驗(yàn)陰性。大多

數(shù)菌株產(chǎn)生H/S,發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣（傷寒沙門菌產(chǎn)酸不產(chǎn)氣）。

4.抗原結(jié)構(gòu)

>0抗原：有58種，以阿拉伯?dāng)?shù)字依次標(biāo)記。

>H抗原：H抗原是定型的依據(jù)。H抗原有兩相，第一相為特異性抗原，用a、b、c...表示；第二相

為共同抗原，用1、2、3...表示。

>表面抗原：已證實(shí)沙門菌屬有Vi、M和5抗原三種。

5.變異性

>S?R變異

>H?0變異

>相位變異：具有雙相H抗原（第I相為特異相，第n相為非特異相）的沙門菌變成只有其中某一相

H抗原的單相菌，稱相位變異。

>V?w變異：失去全部Vi抗原的變異。

（二）致病性

致病因素：侵襲力、內(nèi)毒素和腸毒素。

所致疾?。?/p>

1.腸熱癥即傷寒與副傷寒病。由傷寒與副傷寒沙門菌所引起的慢性發(fā)熱癥狀。為法定傳染病之一。

2.食物中毒

3.慢性腸炎

4.敗血癥

5.沙門菌的局部感染如頸部、腰部等。

全身疼痛、不適、

發(fā)熱澗I驅(qū)沖

胸導(dǎo)管

｛湃長(zhǎng)期）

肝、脾、腎

及膽囊等

腸熱癥吞噬細(xì)胞吞噬

:瑟裁|用腐壁淋巴組織|

膽囊

W.

菌血衣

,V2-3W

1（典型病例病程為3YW）搏陵高熱、肝脾腫

大、全身中毒、攻境

：并發(fā)癥：胸穿孔、血栓性靜腺炎、膽重炎:落

F省病的第1N）

（三）微生物檢驗(yàn)

1.標(biāo)本采集

根據(jù)不同疾病采取不同的標(biāo)本進(jìn)行分離與培養(yǎng)。

腸熱癥的第一、二周采血液，第二、三周采糞便與尿液。整個(gè)病程中骨髓分離細(xì)菌陽性率較高。

食物中毒采集食物與糞便。

2.檢查方法及鑒定

糞便血液骨髓尿液

I

SSor麥康凱平板含0.5%膽鹽肉湯硫磺酸鹽肉湯

或葡萄糠肉湯|

血平板和腸道鑒別培養(yǎng)基

_____________）

初步鑒定:

KIA：K/A、產(chǎn)氣+/-、H2S+

/-，MIU：+、-、+,

上鑒定為沙門菌屬

氧化酶、觸酶+,硝酸鹽還原

十,沙門菌多價(jià)血清陽性

最后鑒定:

沙門菌血清學(xué)鑒定主要借助于沙門菌0抗原多價(jià)血清與0、H、Vi抗原的單價(jià)因子血清。

（三）微生物檢驗(yàn)

2.檢查方法及鑒定

血清學(xué)診斷一一肥達(dá)試驗(yàn)

用已知的傷寒沙門菌0、H抗原，副傷寒甲、乙H抗原稀釋后與被檢血清作定量凝集試驗(yàn)，以檢測(cè)患者

血清中抗體的含量，來判斷機(jī)體是否受沙門菌感染而導(dǎo)致腸熱癥并判別沙門菌的種類。

（四）防治原則

預(yù)防沙門菌屬細(xì)菌主要措施：

加強(qiáng)飲食衛(wèi)生，防止污染食品及水源經(jīng)口感染，攜帶者的積極治療，皮下注射死菌苗或口服減毒活菌

苗。

臨床治療：

可選擇的抗生素有氯霉素、氟瞳諾酮類、氨茉西林、復(fù)方磺胺甲惡哩、三代頭抱等。

五、變形桿菌屬、普羅威登斯菌屬及摩根菌屬

這三個(gè)屬的細(xì)菌為腸道寄居的正常菌群，在一定條件下能引起各種感染，也是醫(yī)源性感染的重要條件

致病菌。

（-）生物學(xué)特性

1.形態(tài)與染色

G,桿菌，兩端鈍圓，有明顯的多形性，呈球狀或絲狀；周身鞭毛（摩根菌屬的部分菌株在30℃以上

培養(yǎng)條件下不形成鞭毛），無芽胞，無莢膜。

2.培養(yǎng)特性

需氧或兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高，生長(zhǎng)溫度10?43℃。

營(yíng)養(yǎng)瓊脂和血瓊脂平板：普通變形桿菌和奇異變形桿菌的大多數(shù)菌株呈遷徙擴(kuò)散生長(zhǎng)現(xiàn)象。產(chǎn)黏變形

桿菌具有產(chǎn)生黏液狀薄膜層的能力及溶血性質(zhì)。

普羅威登斯菌和摩根菌無遷徙生長(zhǎng)現(xiàn)象。

含有膽鹽的培養(yǎng)基：菌落呈扁平、圓形、半透明。

含有鐵或鉛離子的培養(yǎng)基:產(chǎn)硫化氫菌株菌落中心呈黑色0

SS培養(yǎng)基：與沙門菌、志賀菌相似的菌落特征。

液體培養(yǎng)基：迅速生長(zhǎng)，早期培養(yǎng)物呈混濁，有部分沉淀。

3.生化反應(yīng)三屬菌共同特點(diǎn)是氧化酶陰性，苯內(nèi)氨酸脫氨酶陽性的革蘭陰性桿菌。

屬間鑒別：

變形桿菌屬普羅威登斯菌屬摩根菌屬

遷徙生長(zhǎng)+--

硫化氫產(chǎn)生+--

液化明膠+--

脂酶+--

鳥氨酸脫竣酶--+

枸椽酸鹽利用-+-

變形桿菌屬的種鑒別:

普通變形桿菌奇異變形桿菌產(chǎn)黏變形桿菌

靛基質(zhì)+--

麥芽糖+一+

鳥氨酸脫竣酶-+一

普羅威登斯菌屬的種鑒別:

產(chǎn)堿普羅威登斯菌斯氏普羅威登斯菌雷氏普羅威登斯菌

胭酶--/++

草糖-+-

側(cè)金盞花醇+-+

(二)致病性

1.變形桿菌屬

普通變形桿菌和奇異變形桿菌引起尿道、創(chuàng)傷、燒傷的感染。普通變形桿菌還可引起多種感染及食物

中毒；奇異變形桿菌還可引起嬰幼兒腸炎。產(chǎn)黏變形桿菌尚無引起人類感染的報(bào)道。

外-斐(Weil-Felix)反應(yīng)：普通變形桿菌0X19、0X2、0兄的菌體抗原與某些立克次體有共同抗原，是

用以診斷某些立克次體病的依據(jù)。

2.普羅威登斯菌屬本屬菌可引起燒傷、創(chuàng)傷與尿道感染。

3.摩根菌屬本屬細(xì)菌為醫(yī)源性感染的重要病原菌之一。

(三)微生物檢驗(yàn)

1.標(biāo)本采集采集尿液、膿汁、傷口分泌物及嬰兒糞便等。

2.檢驗(yàn)方法及鑒定

(1)直接涂片

(2)分離培養(yǎng)：接種于血瓊脂平板和麥康凱或伊紅亞甲藍(lán)(EMB)瓊脂平板；或SS瓊脂和麥康凱或EMB

瓊脂平板上。

變形桿菌屬在血瓊脂上呈遷徙生長(zhǎng)，在腸道菌選擇培養(yǎng)基上形成不發(fā)酵乳糖菌落，在SS瓊脂上常為有

黑色中心的菌落。

(3)鑒定

六、耶爾森菌屬

耶爾森菌屬包括11個(gè)種；

其中鼠疫耶爾森菌、假結(jié)核耶爾森菌和小腸結(jié)腸炎耶爾森菌與人類致病有關(guān)。

(-)鼠疫耶爾森菌

(-)小腸結(jié)腸炎耶爾森菌

(三)假結(jié)核耶爾森菌

(-)鼠疫耶爾森菌

俗稱鼠疫桿菌，是烈性傳染病鼠疫的病原菌。

鼠疫是自然疫源性傳染病，通過直接接觸染疫動(dòng)物或節(jié)肢動(dòng)物叮咬而感染。

1.生物學(xué)特性

(1)形態(tài)與染色：

G,桿菌，短而粗，兩端鈍圓，兩極濃染，(1.0?2.0)umX(0.5?0.7)nm()

有莢膜，無鞭毛，無芽胞。

(2)培養(yǎng)特性：

＞需氧和兼性厭氧。最適生長(zhǎng)溫度是28?30℃,培養(yǎng)基最適pH為6.9?7.1。

＞培養(yǎng)16?18h,用顯微鏡觀察可見一層形狀不一，淺灰色小菌落，這是鼠疫耶爾森菌培養(yǎng)初期的菌

落特征(鑒定意義)。

＞培養(yǎng)24?48h后可形成直徑0.1?0.2mm,圓形，中心突出，透明的淺灰色小菌落。

＞液體培養(yǎng)基：形成絮狀沉淀和菌膜。底部絮狀沉淀堆積呈“鐘乳石”狀。

(3)生化反應(yīng)：

KIA：K(A)/A,H2s(-)

MIU：-、-、-

2.微生物檢驗(yàn)

標(biāo)本采集：主要采集血液、痰和淋巴結(jié)穿刺液。

檢驗(yàn)方法及鑒定：

注：鼠疫耶爾森菌為甲類病原菌，傳染性極強(qiáng)，故應(yīng)嚴(yán)格遵守檢驗(yàn)操作規(guī)程，要求實(shí)驗(yàn)室有隔離設(shè)施,

防鼠、防蚤和嚴(yán)密的個(gè)人防護(hù)措施；用過的實(shí)驗(yàn)器材及物品隨時(shí)消毒處理。

直接涂片檢查；分離培養(yǎng)；鑒定；最后鑒定(①噬菌體裂解試驗(yàn)；②動(dòng)物試驗(yàn)；③免疫學(xué)方法)。

(二)小腸結(jié)腸炎耶爾森菌

1.生物學(xué)性狀

(1)形態(tài)與染色

菌體大小為(1.0~2.0)umX(0.5-1.0)um,25℃培養(yǎng)時(shí)形成周鞭毛，呈翻滾旋轉(zhuǎn)狀運(yùn)動(dòng)，37c

培養(yǎng)無動(dòng)力,無芽胞，無莢膜的革蘭陰性球桿菌。

(2)培養(yǎng)特性

＞需氧或兼性厭氧，4?40℃均能生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度為20?28℃。

＞血瓊脂平板上，形成直徑為1?2mm,圓形光滑，凸起的菌落。

＞麥康凱培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，形成不發(fā)酵乳糖的無色、透明或半透明、扁平、較小的菌落。

＞SS瓊脂板上生長(zhǎng)不良。

＞液體培養(yǎng)基中呈混濁生長(zhǎng)，液體表面可形成白色菌膜或有沉淀生成。

(3)生化反應(yīng)：

葡萄糖和蔗糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，絕大多數(shù)菌株不發(fā)酵乳糖，硫化氫陰性，版酶陽性，靛基質(zhì)不定。VP試驗(yàn)

25℃陽性，37℃陰性，鳥氨酸脫粉酶陽性。

2.致病性

(1)致病因素：侵襲力和腸毒素。

(2)所致疾?。喝诵蠊不疾?，動(dòng)物感染后多無癥狀，通過消化道傳播引起人類腸道感染性疾病。

小腸結(jié)腸炎、末端回腸炎、胃腸炎、闌尾炎和腸系膜淋巴結(jié)炎。除腸道感染外尚可發(fā)生敗血癥，結(jié)節(jié)

性紅斑及關(guān)節(jié)炎等。

3.微生物檢驗(yàn)

(1)標(biāo)本采集：標(biāo)本來自被檢者糞便、血液、尿液、食物或臟器組織等。

(2)檢驗(yàn)方法及鑒定：

1)分離培養(yǎng)：糞便標(biāo)本可直接接種于麥康凱、NyE(耶爾森選擇性瓊脂)或SS瓊脂。

2)鑒定:

菌落形態(tài)―一G-—氧化前(-)一初步鑒定―一血清學(xué)鑒定

30℃以下動(dòng)力(+)

服酶(+)

(三)假結(jié)核耶爾森菌

＞嚙齒動(dòng)物家畜和禽類致病，并通過污染食物導(dǎo)致人類感染。人類感染少見，偶見腸道感染及腸系膜

淋巴結(jié)炎。

＞菌體呈球形或短桿形，兩端濃染。25℃培養(yǎng)有周鞭毛，有動(dòng)力，37℃培養(yǎng)無動(dòng)力。

＞兼性厭氧，最適生長(zhǎng)溫度30℃,pH6.0~8.0。

＞菌落：圓形，中心凸起，呈顆粒狀，灰黃色，半透明的菌落。

＞血瓊脂平板上不溶血，SS瓊脂上不生長(zhǎng)，能在含膽鹽培養(yǎng)基或麥康凱培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。

＞在液體培養(yǎng)基中呈均勻渾濁生長(zhǎng)者為光滑型菌株，沉淀生長(zhǎng)為粗糙型菌株。

七、腸桿菌科的其他菌屬

在臨床感染標(biāo)本中具有較高的分離率，大多屬于條件致病菌。

＞枸椽酸桿菌屬

＞克雷伯菌屬

＞腸桿菌屬

＞沙雷菌屬

枸檬酸桿菌屬

包括弗勞地枸椽酸桿菌、異型枸檬酸桿菌和無丙二酸鹽枸椽酸桿菌三個(gè)種，屬正常菌群成員。

1.生物學(xué)性狀

(1)形態(tài)與染色：G,直桿狀，無莢膜，無芽胞，具有周鞭毛。

(2)培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高。在血液瓊脂上的菌落不溶血，在腸道選擇培養(yǎng)基上

發(fā)酵乳糖，在液體培養(yǎng)基中呈混濁生長(zhǎng)。

(3)生化反應(yīng)：

靛基質(zhì)硫化氫丙二酸鹽

弗勞地枸椽酸桿菌-/++-

異型枸檬酸桿菌+-+

無丙二酸鹽枸檬酸桿菌+--

2.致病性

本菌為條件致病菌，常在一些慢性疾病如白血病、自身免疫性疾病或醫(yī)療插管術(shù)后的泌尿道、呼吸道

中檢出，可引起敗血癥、腦膜炎、骨髓炎、中耳炎和心內(nèi)膜炎等。

3.微生物檢驗(yàn)

(1)標(biāo)本采集：根據(jù)病情可取尿液、痰、血液或膿汁等。

(2)檢驗(yàn)方法及鑒定

1)屬的鑒定：

B-半乳糖甘酶賴氨酸脫粉酶枸椽酸鹽利用

枸檬酸桿菌屬+-+

沙門菌屬-/+++

愛德華菌屬-+-

2)種的鑒別：根據(jù)產(chǎn)生靛基質(zhì)、硫化氫、丙二酸鹽與否鑒別。

(二)克雷伯菌屬

本屬細(xì)菌共有7個(gè)種，引起的醫(yī)院感染日見增多，其中以肺炎克雷伯菌最為多見。產(chǎn)酸(催娩)克雷

伯菌次之。

1.生物學(xué)特性

(1)形態(tài)與染色：G,卵圓形或球桿狀，成雙排列，菌體外有明顯莢膜，無鞭毛，無芽胞。

(2)培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧，營(yíng)養(yǎng)要求不高。

在血瓊脂上形成圓形，凸起，灰白色，不溶血的粘液性菌落。有時(shí)菌落呈現(xiàn)黏液型，用接種環(huán)挑取時(shí)

呈長(zhǎng)絲狀。

在腸道菌選擇培養(yǎng)基中為乳糖發(fā)酵型菌落。

在液體培養(yǎng)基中呈混濁生長(zhǎng)，可形成菌膜與黏性沉淀物。

(3)生化反應(yīng)：

觸醐陽性、胭酶陽性、氧化酶陰性、鳥氨酸脫竣酶陰性。

其中動(dòng)力和鳥氨酸脫竣酶陰性是本菌的最大特點(diǎn)。

2.致病性

＞肺炎克雷伯菌肺炎亞種引起嬰兒腸炎、肺炎、腦膜炎、腹膜炎、外傷感染、敗血癥和成人醫(yī)源性尿

道感染。

＞臭鼻克雷伯菌引起臭鼻癥。

＞鼻硬節(jié)克雷伯菌引起鼻腔、咽喉和其他呼吸道的硬節(jié)病。

＞催娩克雷伯菌可引起呼吸道和泌尿道感染、創(chuàng)傷感染與敗血癥等。

(三)腸桿菌屬

1.生物學(xué)特性

(1)形態(tài)與染色：G,短而粗的桿菌，有周鞭毛，部分菌株有莢膜，無芽胞。

(2)培養(yǎng)特性：需氧或兼性厭氧，最適溫度為30℃,營(yíng)養(yǎng)要求不高。在普通瓊脂上形成大而濕潤(rùn)的超

液狀菌落;在血瓊脂板上不溶血；腸道菌選擇培養(yǎng)基上多數(shù)形成乳糖發(fā)酵菌落；在液體培養(yǎng)基中呈均勻混

濁，表面有薄膜，管底有黏稠性沉淀物。

(3)生化反應(yīng)：

IMViC：-、-、+、+

2.致病性