YYT 0506.6-2009 病人、醫(yī)護人員和器械用手術單、手術衣和潔凈服 第6部分：阻濕態(tài)微生物穿透試驗方法

手術衣和潔凈服第6部分：阻濕態(tài)微生物穿透試驗方法國家食品藥品監(jiān)督管理局發(fā)布本部分為YY/T0506的第6部分。Ⅱ1手術衣和潔凈服第6部分：GB/T3917.2紡織品織物撕破性能第2部分：舌形試樣撕破強力的測定(GB/T3917.2—GB/T3923.1紡織品織物拉伸特性第1部分：斷裂強力和斷裂伸長率的測定條樣法GB/T8629紡織品試驗用家庭洗滌和干燥程序(GB/T8269—2001,eqvISO6330:2000)GB18278醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌確認和常規(guī)控制要求工業(yè)濕熱滅菌(GB18278—2000,idtYY/T0287醫(yī)療器械質(zhì)量管理體系用于法規(guī)的要求(YY/T0287—2003,ISO13485:2003,GB/T20367醫(yī)療保健產(chǎn)品滅菌醫(yī)療保健機構中濕熱滅菌的確認和常規(guī)控制要求ISO15797紡織品紡織品工作服試驗用工業(yè)清洗和清理程序2覆蓋材料coveringmaterial用于覆蓋患者、器械或特定表面的材料，如手術單，以防止病人皮膚細菌和/或其他非無菌表面的細菌到達手術創(chuàng)面。被一種已知數(shù)量的試驗細菌規(guī)定菌株繁殖體污染的材料。試驗指finger檢測濕態(tài)細菌穿透性儀器的一個部件，用于將菌片和試件與瓊脂培養(yǎng)皿表面接觸。平行試驗replicatetest對取自試樣的每個試件的完整評價，包括五個培養(yǎng)皿直接對菌片進行計數(shù)，第六個培養(yǎng)皿用于估測試件背面的殘留挑戰(zhàn)菌數(shù)。試驗材料testmaterial用于測定阻濕態(tài)細穿透性覆蓋材料的試件(25cin×25cm)。對照材料reterencematerial用于評定實驗全行濕態(tài)阻細菌穿透試驗精確度的標準化的材料。阻濕態(tài)細菌穿透性resistancetowetbacterialpenetration經(jīng)受機械磨擦時對液體攜帶細菌穿透的屏障特性。的高密度聚乙烯(HDPE)膜，用兩個錐形鋼環(huán)將三層材料卡在一起，并施加一定的拉伸力。一個耐磨試驗指置于材料上面，用于對俯片和試件施加規(guī)定的力，使試件與瓊脂接觸。試驗指通過外向輪驅(qū)動的旋轉(zhuǎn)桿在15min內(nèi)以能在整個培養(yǎng)皿表面上移動的方式作用于材料。材料組裝的繃緊度靠鋼環(huán)的自身重量來確定，確保試件在任何一個時間僅有較小的區(qū)域與瓊脂表面接觸。試驗進行15min后，更換新的瓊脂培養(yǎng)皿，用同一菌片和試件重復進行試驗，同一菌片和試件共進行5組試驗，每次均操作15min。這樣可使試驗對總時間內(nèi)的穿透性進行估測。最后采用同樣的技術估測試件上面的細菌污染情況。為觀察細菌菌落，對瓊脂培養(yǎng)皿進行培養(yǎng)，然后對菌落數(shù)進行計數(shù)。結果可以累計的形式來處理，以表征材料的屏障性能和總的時間內(nèi)的穿透性(見附錄C)。5試劑與材料5.15組瓊脂培養(yǎng)皿，每組包括6個直徑為14cm、注入營養(yǎng)瓊脂的培養(yǎng)皿(見第B.4章和7.1)。5.25片載菌材料，25cm×25cm,用于制備菌片(見7.2)。5.35片高密度聚乙烯(HDPE)膜，25cm×25cm,厚度約10μm,用于隔離試驗指，HDPE膜密度應為950kg/m3±2kg/m3,質(zhì)量流動速率(190℃、5kg)為0.027g/min。5.4金黃色葡萄球菌ATCC29213。3試驗指對材料施加的3N±0.02N的作在6個14cm直徑的培養(yǎng)皿內(nèi)注入營養(yǎng)瓊脂(見附錄B)至離皿口3mm±0.2mm處。應在試驗前的伸長率為350%±50%,橫向伸長率為400%±75%。該膜貼附在紙上。從載菌材料上剪下25cm×25cm大小的數(shù)片，將其夾在濾紙片中間放入紙質(zhì)滅菌袋中，按GB/T20367采用121℃蒸汽滅菌。金黃色葡萄球菌ATCC29213在胰酶大豆瓊脂上36℃±1℃下培養(yǎng)18h～24h,將2～3個菌落接1:10稀釋至濃度為1×104CFU/mL～4×104CFU/mL,對最終菌懸液進行計數(shù)。用雙面膠帶將載菌材料片的四角固定于盤子上。用培養(yǎng)皿蓋作為模板在4YY/T0506.6—2009/ISO22610:20068.2狀態(tài)調(diào)節(jié)8.4材料應用的菌片染菌面向下放在試件上。最后在聚氨酯膜上覆蓋一層HDPE膜，向下推緊外環(huán)，使三層8.5試驗將上述環(huán)組件輕輕搭放在第一個取下蓋子的瓊脂培養(yǎng)皿上，鋼環(huán)自由懸放于旋轉(zhuǎn)盤的外面。將試驗指置于皿口內(nèi)側(cè)的HDPE膜上，這樣試件可與瓊脂表面接觸。試驗指按上述規(guī)定施加3N壓力，使其余4片試件同樣按上述方法各運行六個培養(yǎng)皿各15min,每片試件使用一片新鮮制備的菌片。如果瓊脂表面聚有液體，將其置于潔凈臺上干燥，將各瓊脂培養(yǎng)皿加蓋置于35℃±1℃培養(yǎng)48h。如果有一個皿或多個皿的計數(shù)大于750CFU(不包括上述的培養(yǎng)皿中心15mm半徑區(qū)域內(nèi)的菌落數(shù)),可重新進行試驗。如果重新試驗仍有一個或多個皿計數(shù)大于750CFU,表明該材料不可能具有足按附錄C計算試驗結果。9試驗報告b)按10.2和10.3核查；e)覆蓋材料的識別；f)按7.3裁取的五個試件的說明；g)載菌材料符合7.2的說明；h)5片試件(平行)中每片6個試驗培養(yǎng)皿的菌落計數(shù)；5應采用5.6規(guī)定的對照材料和本部分給出的試驗方法評價實驗室的精確性，評價頻次應按06(規(guī)范性附錄)檢驗阻濕態(tài)微生物穿透性的設備4——不銹鋼試驗指；89(規(guī)范性附錄)營養(yǎng)培養(yǎng)基胰蛋白酶大豆瓊脂胰蛋白胨大豆粉木瓜酶消化物氯化鈉瓊脂蒸餾水將干粉投入水中加熱，攪拌使其溶解混合。在121℃滅菌15min,充分振搖混合均勻。胰蛋白酶大豆肉湯胰蛋白胨大豆粉木瓜酶消化物葡萄糖氯化鈉磷酸氫二鉀蛋白陳水蛋白胨蒸餾水2.5g2.5g營養(yǎng)瓊脂牛肉浸出物氯化鈉瓊脂制備方法見第B.1章，制備培養(yǎng)皿后一天內(nèi)使用。(規(guī)范性附錄)C.1估計的挑戰(zhàn)菌總數(shù)的計算估計的挑戰(zhàn)菌總數(shù)T按式(C.1)計算：T=Z+X?+X?+X?+X?+X?…………五個瓊脂培養(yǎng)皿試驗后，在第六個瓊脂培養(yǎng)皿上測得留在試件X?,…,X?——用同一試件和同一菌片進行的一次平行試驗中5個培養(yǎng)皿上各自的菌落數(shù)。C.2計算1至5號皿累積穿透率，RcuM?,…,RcUM?按式(C.2)~式(C.6)計算：C.3細菌穿透系數(shù)的計算細菌穿透系數(shù)CBp用以描述穿透與時間的關系。該計算中越是前面的數(shù)據(jù)，權越大，但與總的挑戰(zhàn)或從式(C.8)可以看出CBP與估測的挑戰(zhàn)細菌總數(shù)無關(該總數(shù)顯然比實際值要低)。同時還表明在1號～4號培養(yǎng)皿無穿透的情況下，,這與5號培養(yǎng)皿的計數(shù)無關。C.4屏障指數(shù)的計算屏障指數(shù)Ip,用以表明未穿透屏障的挑戰(zhàn)微生物的分數(shù)，但不考慮試件是早發(fā)生穿透還是遲發(fā)生隨著屏障性能的增加而增加。YY/T0506.6—2009/ISO2與估計的挑戰(zhàn)菌總數(shù)有關。或IB=6—(RcuM1+RcuM2+RcuM3+RcuM4+RcuM5)……………(C[1]RansjoU,HambraeusA,Aninstrumentformeasuringthebacterialpenetrationthroughfabricsusedforbarrierclothing.JournalofHygiene(1979)82:361-368[2]WhyteW,HambraeusA,LaurellG,HobornJsourcesofwoundcontaminationduringgeneralsurgery.I.Non-airborne.JournalofHospitalInfec-[3]WernerHP,HobornJ,Sch?nK,PetriB,Influenceofdrapepermeabilityonwoundcon-taminationduringmastectomy.EuropeanJournalofSurgery(1991)157:379-383[4]HobornJ,TheatreDrapesandGowns—HowtoDetermineWetBacterialBarrierPr[5]HobornJ,Howto