2025屆重慶市四區(qū)聯(lián)考高考生物必刷試卷含解析

2025屆重慶市四區(qū)聯(lián)考高考生物必刷試卷注意事項:1．答題前，考生先將自己的姓名、準考證號碼填寫清楚，將條形碼準確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2．答題時請按要求用筆。3．請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答，超出答題區(qū)域書寫的答案無效；在草稿紙、試卷上答題無效。4．作圖可先使用鉛筆畫出，確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5．保持卡面清潔，不要折暴、不要弄破、弄皺，不準使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列遺傳病中，屬于染色體結(jié)構(gòu)變異引起的是（）A．貓叫綜合征 B．特納氏綜合征C．苯丙酮尿癥 D．青少年型糖尿病2．下圖表示某細菌細胞中部分氨基酸的代謝過程。V至Z代表不同的酶，①至⑥代表不同的氨基酸。每一種氨基酸對該細菌都是必需的。野生型的細菌只需要從環(huán)境中攝取氨基酸①便可存活，而此細菌的某變異種只有在培養(yǎng)基中同時提供①③④氨基酸才能生存，該變異種細菌細胞內(nèi)不存在的酶是（）A．X、W B．V、W C．X、Y D．V、Z3．某人從未感染過甲型H7N9流感病毒，下列有關(guān)敘述正確的是A．流感病毒可以發(fā)生基因突變、基因重組和染色體變異B．漿細胞可以接受流感病毒的刺激，使其分泌特異性抗體C．一旦甲型H7N9流感病毒侵入該人體，記憶B細胞就會迅速增殖分化D．抗體只能作用于細胞外的流感病毒，不能直接作用于細胞內(nèi)的流感病毒4．下列有關(guān)細胞結(jié)構(gòu)與功能的敘述，不正確的是（）A．原核細胞的DNA都是游離狀態(tài)的DNAB．大分子物質(zhì)都是以胞吞或胞吐方式通過生物膜的C．細胞骨架與細胞運動、分裂、分化以及信息傳遞等生命活動有關(guān)D．細胞間進行信息交流并不都需要細胞膜上的受體蛋白參與5．任何自然種群是不可能無限增長的，種群達到一定密度后，就會因某些限制因素的作用而停止增長。下列關(guān)于種群數(shù)量特征與變化的描述正確的是（）A．樣方法可以用于調(diào)查某些活動能力強，活動范圍大的小動物種群的密度B．種群的年齡組成和性別比例，均能夠間接影響該種群的出生率和遷入率C．隨著種群密度增大，種群死亡率隨之增高，這可能與種內(nèi)斗爭加劇有關(guān)D．改善限制種群增長的環(huán)境因素，則該種群密度會增加，導(dǎo)致豐富度提高6．下列相關(guān)實驗的敘述，正確的是（）A．驗證酵母菌的無氧呼吸可用重鉻酸鉀檢測產(chǎn)物的生成B．單倍體育種常需要用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗C．低溫誘導(dǎo)洋蔥根尖細胞染色體加倍的實驗中，染色體聯(lián)會現(xiàn)象被定格在前期D．用抽樣檢測再換算出的酵母菌數(shù)目一般低于當時培養(yǎng)液活酵母菌的實際數(shù)目7．下列有關(guān)高等動物腦和脊髓的敘述錯誤的是（）A．渴覺中樞、體溫感覺中樞位于大腦皮層 B．腦干損傷可能導(dǎo)致呼吸暫停C．排尿反射的低級神經(jīng)中樞位于脊髓 D．學(xué)習(xí)、讀書等是人腦特有的高級功能8．（10分）2020年初，荷蘭某研究所利用蛇干細胞培養(yǎng)出可分泌毒液的蛇毒腺微型組織，讓毒素的獲取途徑更加安全和簡單。下列敘述正確的是（）A．培養(yǎng)蛇干細胞時O2的作用是維持培養(yǎng)液pH的穩(wěn)定B．蛇毒腺微型組織基因的表達與蛇干細胞不完全相同C．利用蛇干細胞的大量增殖即可獲得大量分泌毒液的細胞D．培養(yǎng)蛇毒腺微型組織與哺乳動物細胞培養(yǎng)的條件完全相同二、非選擇題9．（10分）圖1為某湖泊生態(tài)系統(tǒng)的能量金字塔簡圖，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ分別代表不同的營養(yǎng)級，M1、M2表示不同的能量形式。圖2表示能量流經(jīng)營養(yǎng)級Ⅱ的變化示意圖，其中a～g表示能量的值，a表示營養(yǎng)級Ⅱ攝入的總能量值。請據(jù)圖回答：（1）圖1中，營養(yǎng)級________________中的生物種類屬于次級生產(chǎn)者。M2表示的能量形式為________________。位于營養(yǎng)級Ⅳ的生物個體數(shù)量往往少于營養(yǎng)級Ⅲ，主要原因是________________。（2）圖2中，若甲表示營養(yǎng)級Ⅱ的攝入量，則乙表示________________。由圖2推測生態(tài)系統(tǒng)能量流動的特點是________________。若營養(yǎng)級Ⅲ的同化量為h，則營養(yǎng)級Ⅱ、Ⅲ之間的能量傳遞效率為________________。（3）已知營養(yǎng)級Ⅳ中有一種雜食性生物（X），它的食物中有2/5來自營養(yǎng)級Ⅲ，2/5來自營養(yǎng)級Ⅱ，1/5來自營養(yǎng)級Ⅰ。若生物（X）要增加50g體重，需要消耗植物________________g。10．（14分）已知甲病和乙病都是單基因遺傳病，其中一種病是紅綠色盲。圖1為患甲病的W家族遺傳系譜圖（顯性基因為A，隱形基因為a），圖2為患乙病的L家族系譜圖（顯性基因為B，隱形基因為b）。注意：每個家族均不攜帶另一個家族的致病基因。據(jù)圖回答。（1）W家族中甲病致病基因位于______染色體上，屬于______性遺傳。（2）W家族中4號基因型是______。（不考慮乙?。?）L家族中IV號的致病基因來自______號。（4）已知W家族不帶乙病致病基因，L家族不帶甲病致病基因，若W家族5號與L家族Ⅲ號婚配，生出一個攜帶兩種致病基因女孩的概率是______，這個女孩的基因型是______。（5）W家族中的4號與L家族中的Ⅲ號結(jié)婚后，若Ⅲ號的某個初級卵母細胞中的一條DNA分子上A基因突變成a基因，由這個初級卵母細胞形成的卵細胞與W家族中4號所產(chǎn)生的精子結(jié)合成受精卵。這個受精卵發(fā)育成患甲病孩子的概率是______。11．（14分）透明質(zhì)酸酶是一種能夠降低體內(nèi)透明質(zhì)酸的活性，從而提高組織中液體滲透能力的酶。如圖是利用重疊延伸PCR技術(shù)獲得新透明質(zhì)酸酶基因的過程，NcoⅠ和XhoⅠ為限制酶。請分析回答下列問題：（1）構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達載體時，使用的載體往往有特殊的標記基因，其作用是__________________；所用的DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的_________________，對所連接的DNA兩端堿基序列_______（有/沒有）專一性要求。早期用大腸桿菌作為受體細胞，后來發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢，最可能的原因是________________。（2）透明質(zhì)酸酶基因上的一段核苷酸序列為“—ATCTCGAGCGGG—”，則對應(yīng)該段核苷酸序列進行剪切的XhoⅠ酶識別的核苷酸序列（6個核苷酸）為____________________。（3）人體細胞間質(zhì)有基膜粘連蛋白、多糖（如透明質(zhì)酸）、蛋白多糖等成分。鏈球菌等致病菌在侵染人體時，可產(chǎn)生透明質(zhì)酸酶。試分析透明質(zhì)酸酶在鏈球菌侵染過程中的作用是_________________，其意義可能是_____________________。12．通過基因工程將抗生素基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可以增強其抗病菌的能力。據(jù)此回答下列問題。（1）抗生素能選擇性地作用于細菌體細胞DNA、RNA和_______合成系統(tǒng)的特定環(huán)節(jié)，干擾細胞的代謝作用，妨礙生命活動或使其停止生長，甚至死亡?？股匕l(fā)揮作用的主要場所是___________。（2）基因工程中常需要使用DNA連接酶，既能連接黏性末端，又能連接平末端的DNA連接酶是__________________。（3）若要使目的基因在受體細胞中表達，需要構(gòu)建基因表達載體，包含目的基因、________、啟動子、_________、復(fù)制原點。（4）將目的基因?qū)胫参矬w細胞通常用__________________，原理是利用其菌體中質(zhì)粒的T-DNA片段可_____________的特點。（5）要確認抗生素禁言是否在轉(zhuǎn)基因植株中正確表達，應(yīng)檢測轉(zhuǎn)基因植株中該基因的______是否呈陽性。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【解析】

人類遺傳病分為單基因遺傳病、多基因遺傳病和染色體異常遺傳病：（1）單基因遺傳病包括常染色體顯性遺傳?。ㄈ绮⒅福⒊Ｈ旧w隱性遺傳?。ㄈ绨谆。閄染色體隱性遺傳?。ㄈ缪巡?、色盲）、伴X染色體顯性遺傳?。ㄈ缈咕S生素D佝僂病）；（2）多基因遺傳病是由多對等位基因異常引起的，如青少年型糖尿??；（3）染色體異常遺傳病包括染色體結(jié)構(gòu)異常遺傳?。ㄈ缲埥芯C合征）和染色體數(shù)目異常遺傳?。ㄈ?1三體綜合征）?！驹斀狻緼、貓叫綜合癥起因于第五號染色體短臂上片段的缺失，是染色體結(jié)構(gòu)變異引起的，A正確；B、特納氏綜合征患者的染色體組成為XO，表現(xiàn)為女性卵巢和乳房等發(fā)育不良，是染色體數(shù)目變異引起的，B錯誤；C、苯丙酮尿癥是基因突變引起的遺傳病，C錯誤；D、青少年型糖尿病是由多對等位基因異常引起的，與染色體變異無關(guān)，D錯誤。故選A。2、A【解析】

1.基因控制性狀包括兩種方式：一是通過控制酶的合成控制代謝過程，間接控制生物體的性狀，二是通過控制蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)直接控制生物的性狀；2、題圖分析，酶V能將氨基酸①轉(zhuǎn)化成氨基酸②，酶W能將氨基酸②轉(zhuǎn)化成氨基酸④，酶Y能將氨基酸④轉(zhuǎn)化成氨基酸⑥，酶X能將氨基酸②轉(zhuǎn)化成氨基酸③，酶Z能將氨基酸④轉(zhuǎn)化成氨基酸⑤?！驹斀狻坑深}意可知“細菌的變種只有在培養(yǎng)基中提供氨基酸①③④才能生存”說明該變種細菌無合成氨基酸①③④的酶，必須直接提供氨基酸①③④；培養(yǎng)基中需提供氨基酸③④說明培養(yǎng)基中不存在將氨基酸②轉(zhuǎn)化成氨基酸③④的酶X和W，而氨基酸①是培養(yǎng)該細菌必須要提供的，根據(jù)分析可知該突變菌細胞內(nèi)不存在的酶是X和W，即A正確。故選A。3、D【解析】

1、基因突變可以發(fā)生在任何生物體內(nèi)，基因重組只能發(fā)生在真核生物的有性生殖過程中，染色體變異只能發(fā)生在真核細胞中。2、病毒只能寄生在活細胞中代謝和繁殖，人體一旦感染病毒，首先通過細胞免疫使病毒暴露，然后再利用體液免疫將病毒清除。3、抗體主要存在血清中，在組織液和外分泌液中也有少量分布?！驹斀狻緼、流感病毒可以發(fā)生基因突變，不會發(fā)生基因重組和染色體變異，因為流感病毒沒有有性生殖和染色體，A錯誤；B、漿細胞不能特異性識別抗原，B錯誤；C、甲型H7N9流感病毒初次侵入人體，刺激B細胞增殖分化漿細胞和少數(shù)記憶細胞，其中記憶細胞在受到相同抗原刺激后才會迅速增殖分化，C錯誤；D、抗體只能作用于細胞外的流感病毒，不能直接作用于細胞內(nèi)的流感病毒，D正確。故選D。4、B【解析】

1、細胞骨架是真核細胞中由蛋白質(zhì)聚合而成的三維的纖維狀網(wǎng)架體系。細胞骨架包括微絲、微管和中間纖維。細胞骨架在細胞分裂、細胞生長、細胞物質(zhì)運輸、細胞壁合成等等許多生命活動中都具有非常重要的作用。2、核孔是蛋白質(zhì)、RNA等大分子運輸?shù)耐ǖ馈?、細胞膜上的受體是絕大多數(shù)信息交流需要的結(jié)構(gòu)，但胞間連絲不需要?！驹斀狻緼、原核細胞的DNA沒有和蛋白質(zhì)結(jié)合形成染色質(zhì)，處于游離狀態(tài)，A正確；B、大分子物質(zhì)可以通過核孔進出核膜，B錯誤；C、細胞骨架與細胞運動、分裂、分化以及信息傳遞等生命活動有關(guān)，C正確；D、細胞膜上的受體是絕大多數(shù)信息交流需要的結(jié)構(gòu)，但胞間連絲不需要，D正確。故選B。5、C【解析】

1、種群密度是種群數(shù)量的最基本特征。種群密度出生率和死亡率都會影響種群數(shù)量的變化，但年齡組成是通過影響出生率和死亡率影響數(shù)量變化的，性別比例通過影響出生率影響數(shù)量變化的。2、估算種群密度時，常用樣方法和標記重捕法，其中樣方法適用于調(diào)查植物或活動能力弱，活動范圍小的動物，而標記重捕法適用于調(diào)查活動能力強，活動范圍大的動物?！驹斀狻緼、樣方法可以用于調(diào)查某些活動能力弱，活動范圍小的動物種群的密度，A錯誤；B、年齡組成是通過影響出生率和死亡率影響數(shù)量變化的，性別比例通過影響出生率影響數(shù)量變化的，B錯誤；C、隨著種群密度增大，而空間資源有限，種內(nèi)斗爭加劇，種群死亡率隨之增高，C正確；D、豐富度是群落中物種數(shù)量的多少，改善限制種群增長的環(huán)境因素，則該種群密度會增加，但不影響豐富度，D錯誤。故選C?！军c睛】本題考查種群的數(shù)量特征和數(shù)量變化，特別區(qū)分物種豐富度這個概念，物種豐富度是群落水平上的概念。6、A【解析】

酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精和二氧化碳，酒精可用酸性的重鉻酸鉀檢測，二氧化碳可用溴麝香草酚藍或澄清石灰水檢測。單倍體育種原理：采用花藥離體培養(yǎng)的方法來獲得單倍體植株，然后經(jīng)過人工誘導(dǎo)使染色體數(shù)目加倍重新恢復(fù)到正常植株的染色體的數(shù)目。低溫誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍實驗原理：低溫能抑制紡錘體的形成，使染色體不能移向兩極，從而引起細胞內(nèi)染色體數(shù)目加倍?！驹斀狻緼、酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精，橙色的酸性重鉻酸鉀溶液與酒精反應(yīng)變?yōu)榛揖G色，A正確；B、由于單倍體植株高度不育，不能形成種子，所以單倍體育種常用一定濃度的秋水仙素處理幼苗；而多倍體育種常需要用秋水仙素處理萌發(fā)的種子或幼苗，B錯誤；C、染色體聯(lián)會現(xiàn)象發(fā)生在減數(shù)第一次分裂前期，洋蔥根尖細胞只能進行有絲分裂，不會進行減數(shù)分裂，C錯誤；D、抽樣檢測計數(shù)時無論死的還是活的酵母菌都會被計算在內(nèi)，換算出的酵母菌數(shù)目一般高于當時培養(yǎng)液活酵母菌的實際數(shù)目，D錯誤。故選A。7、D【解析】

中樞神經(jīng)系統(tǒng)是由腦和脊髓組成的，腦包括大腦、小腦和腦干，大腦半球的表層是大腦皮層，大腦皮層是調(diào)節(jié)人體生理活動的最高級中樞，比較重要的中樞有：軀體運動中樞、軀體感覺中樞、語言中樞、視覺中樞、聽覺中樞等；小腦中有調(diào)節(jié)身體的平衡，使運動協(xié)調(diào)、準確的神經(jīng)中樞；腦干中含有一些調(diào)節(jié)人體基本生命活動的中樞，如心血管中樞、呼吸中樞等；脊髓是人體調(diào)節(jié)軀體運動的低級中樞，受大腦的控制?！驹斀狻緼、大腦皮層是渴覺和體溫感覺中樞，A正確；B、腦干中有呼吸中樞，腦干損傷可能導(dǎo)致呼吸暫停，B正確；C、排尿反射的低級神經(jīng)中樞在脊髓，高級神經(jīng)中樞在大腦皮層，C正確；D、大腦表層是整個神經(jīng)系統(tǒng)的最高級的部位，除了對外部世界的感知以及控制機體的反射活動外，還具有語言、學(xué)習(xí)、記憶和思維等方面的高級功能，其中語言是人腦特有的高級功能，學(xué)習(xí)是人腦的高級功能，但不是人腦特有的高級功能，D錯誤。故選D。8、B【解析】

動物細胞培養(yǎng)的流程：取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞→制成細胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)；細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達?！驹斀狻緼、培養(yǎng)蛇干細胞時，二氧化碳的作用是維持培養(yǎng)液pH穩(wěn)定，A錯誤；B、蛇毒腺微型組織已經(jīng)分化，具有特定的形態(tài)，與蛇干細胞的一些基因的表達相同，如呼吸酶基因，與一些特定基因的表達不同，如與毒素合成有關(guān)的基因的表達，B正確；C、蛇干細胞沒有分化成腺細胞，不能合成大量毒素，不能增殖得到大量分泌毒液的細胞，C錯誤；D、蛇屬于變溫動物，培養(yǎng)時需要的溫度低于哺乳動物，D錯誤。故選B。二、非選擇題9、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ熱能營養(yǎng)級高、可利用的能量少營養(yǎng)級Ⅱ的同化量單向流動、逐級遞減(h/b)×100%或(h/(a-e))×100%22100【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：圖1中，Ⅰ表示生產(chǎn)者，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ表示初級消費者、次級消費者、三級消費者，M1、M2分別代表太陽能和呼吸作用散失的能量。圖2中，a表示初級消費者的攝入量，b表示同化量，戊表示呼吸作用散失的能量，c表示用于生長、發(fā)育和繁殖的能量，e、f表示分解者利用的能量．【詳解】（1）次級生產(chǎn)者指異養(yǎng)生物，包括消費者和各種分解者，圖1中，營養(yǎng)級Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ中的生物種類屬于次級生產(chǎn)者。在能量金字塔中，處于第一營養(yǎng)級的生物是生產(chǎn)者，M1表示進入該生態(tài)系統(tǒng)的能量光能，M2是指在生態(tài)系統(tǒng)食物鏈各營養(yǎng)級散失的能量（熱能）。能量在營養(yǎng)級之間只能單向傳遞，且逐級遞減，營養(yǎng)級高、可利用的能量少，因此位于營養(yǎng)級Ⅳ的生物個體數(shù)量往往少于營養(yǎng)級Ⅲ。（2）每一營養(yǎng)級的同化量=攝入量-糞便量，若甲表示圖1中營養(yǎng)級Ⅱ所攝入的全部能量，則乙表示Ⅱ同化的能量。由圖2推測生態(tài)系統(tǒng)能量流動的特點是單向流動、逐級遞減。Ⅱ同化的能量為b=a-e，若營養(yǎng)級Ⅲ的同化量為h，則營養(yǎng)級Ⅱ、Ⅲ之間的能量傳遞效率為（Ⅱ營養(yǎng)級同化量÷Ⅰ營養(yǎng)級同化量）×100%=(h/b)×100%或(h/(a-e))×100%。（3）若生物（X）要增加50g體重，它的食物中有2/5來自營養(yǎng)級Ⅲ，則需消耗植物為50×2/5÷10%÷10%÷10%=20000g，2/5來自營養(yǎng)級Ⅱ，則需消耗植物為50×2/5÷10%÷10%=2000g，1/5來自營養(yǎng)級Ⅰ，則需消耗植物為50×1/5÷10%=100g，需要消耗植物22100g?！军c睛】學(xué)會分析圖形信息，熟悉生態(tài)系統(tǒng)的成分及能量的計算是解答本題的關(guān)鍵。10、常隱AA或AaⅡ1/8AaXBXb1/12【解析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：W家族中甲病的遺傳系譜圖，1號和2號均不患此病，但他們有一個患此病的女兒（3號），即“無中生有為隱性，隱性看女病，女病男正非伴性”，說明此病為常染色體隱性遺傳?。挥旨撞『鸵也《际菃位蜻z傳病，其中一種病是紅綠色盲，所以乙病為紅綠色盲，即伴X隱性遺傳病?！驹斀狻浚?）由以上分析可知，甲病為隱性遺傳病，致病基因位于常染色體上。

（2）W家族中3號、5號患病，故其父母的基因型都是Aa；又4號正常，故基因型是AA（1/3）或Aa（2/3）。

（3）L家族中乙病為紅綠色盲，所以IV號的致病基因來自母親，即Ⅱ號。

（4）已知W家族不帶乙病致病基因，L家族不帶甲病致病基因，所以W家族5號的基因型是aaXBY，L家族Ⅲ號的基因型是AAXBXB或AAXBXb，他們婚配后，生出一個攜帶兩種致病基因女孩的概率是1×1/2×1/4=1/8，這個女孩的基因型是AaXBXb。（5）W家族中的4號（1/3AA、2/3Aa）與L家族中的Ⅲ號結(jié)婚后，若Ⅲ號的某個初級卵母細胞中的一條DNA分子上A基因突變成a基因，由這個初級卵母細胞形成的卵細胞（含a的概率是1/4），與W家族中4號所產(chǎn)生的精子結(jié)合成受精卵，這個受精卵發(fā)育成患甲病孩子的概率是2/3×1/2×1/4=1/12?！军c睛】本題結(jié)合系譜圖，考查基因分離定律的實質(zhì)和伴性遺傳應(yīng)用，要求考生掌握基因分離定律的實質(zhì)，能運用口訣準確判斷系譜圖中遺傳病的遺傳方式，進而推斷相應(yīng)個體的基因型，并計算相關(guān)概率。11、供重組DNA的鑒定和選擇（或鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來）磷酸二酯鍵沒有（毛霉、酵母菌）是真核細胞，有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，能夠?qū)δ康幕虻谋磉_產(chǎn)物進行加工-CTCGAG-或-GAGCTC-分解宿主細胞間質(zhì)的主要成分（或分解宿主細胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸）破壞宿主的防御系統(tǒng)，利于致病菌入侵（或為細菌提供能源物質(zhì)）【解析】

基因表達載體的構(gòu)建是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等，其中標記基因的作用是為了鑒定受體細胞是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。分析圖解可知，圖中目的基因的中間存在NcoⅠ限制酶的切割位點，因此進行重疊延伸PCR是為了防止限制酶NcoI破壞目的基因?！驹斀狻浚?）構(gòu)建透明質(zhì)酸酶基因表達載體時，使用的載體往往有特殊的標記基因，標記基因的作用是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來；所用的DNA連接酶將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，對所連接的DNA兩端堿基序列沒有專一性要求。早期用大腸桿菌作為受體細胞，后來發(fā)現(xiàn)毛霉或酵母菌更具優(yōu)勢，因為毛霉和酵母菌為真核生物，有對目的基因表達產(chǎn)物進行加工的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體，產(chǎn)生的透明質(zhì)酸酶是具有生物活性的。（2）XhoI限制酶識別的序列及位點是5，-CTCGAG-3，中的C、T位點，透明質(zhì)酸酶基因上的一段核苷酸序列為“—ATCTCGAGCGGG—”，則對應(yīng)該段核苷酸序列進行剪切的XhoⅠ酶識別的核苷酸序列（6個核苷酸）為-CTCGAG-或-GAGCTC-。（3）動物細胞培養(yǎng)時先取出動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織），再剪碎，再用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理一段時間使其分散成單個細胞。鏈球菌等致病菌在侵染人體時，可產(chǎn)生多種酶，如透明質(zhì)酸酶等，能分解宿主細胞間質(zhì)的透