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病毒的基本性狀第一節(jié)病毒的大小與形態(tài)病毒體(virion)完整的成熟病毒顆粒,具有典型的形態(tài)結(jié)構(gòu),并有感染性。測(cè)量單位為納米(nm,為1/1000
m)
<50
nm小型病毒
50nm-150nm中等大小病毒(大多數(shù))
>150nm大型病毒(最大300nm)多數(shù)病毒呈球形或近似球形,桿狀,絲狀,少數(shù)可為子彈狀、磚塊狀,噬菌體可呈蝌蚪狀。微生物的大小比較葡萄球菌(1000nm)
牛痘病毒300×250nmABCDEFG立克次體450nm衣原體390nmA、大腸桿菌噬菌體
(65×95nm)B、腺病毒
(70nm)C、脊髓灰質(zhì)炎病毒
(30nm)D、乙腦病毒
(40nm)E、蛋白分子
(10nm
)F、流感病毒
(100nm)G、煙草花葉病毒病毒的結(jié)構(gòu)和組成病毒體結(jié)構(gòu)模式圖殼粒衣殼核心(核樣物)核衣殼包膜包膜病毒包膜子粒核心:核酸→基因組genome→決定病毒遺傳、變異和復(fù)制殼粒capsomere→衣殼capsid→保護(hù)、介導(dǎo)、抗原性包膜envelope,包膜子粒peplomere(刺突spike)→保護(hù)、介導(dǎo)、抗原性核衣殼的對(duì)稱形式
SymmetryofNucleocapsid螺旋對(duì)稱型(HelicalSymmetry)二十面體立體對(duì)稱型(IcosahedralSymmetry)復(fù)合對(duì)稱型(ComplexSymmetry)五鄰體六鄰體RNA殼粒EnvelopedVirusNakedVirusCubicHelical第二節(jié)病毒的核酸與蛋白質(zhì)一、病毒核酸多樣性DNAdsDNAssDNAdsRNARNAssRNA
分節(jié)段RNA線狀、環(huán)狀大小懸殊復(fù)制方式多樣存在形式多樣有內(nèi)含子,ORF間有重疊克隆和表達(dá)較大的遺傳不穩(wěn)定性感染性二、病毒蛋白質(zhì)
由病毒核酸編碼結(jié)構(gòu)蛋白組成病毒體的成分
衣殼蛋白包膜蛋白基質(zhì)蛋白——連接衣殼蛋白與包膜蛋白的部分,有跨膜及錨定功能區(qū)非結(jié)構(gòu)蛋白病毒內(nèi)——酶感染細(xì)胞內(nèi)——特殊作用蛋白第三節(jié)病毒的培養(yǎng)和增殖
(CultureandReplicationofViruses)一、病毒的培養(yǎng)動(dòng)物(Animals)雞胚(Embryonatedeggs)組織培養(yǎng)(Organandtissueculture)
Organculture
胚胎Embryoculture Cellculture:原代細(xì)胞傳代細(xì)胞 雙倍體細(xì)胞常用的細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞病變(Cytopathiceffect,CPE)包涵體(InclusionBodies)正常細(xì)胞CPE狂犬病毒包涵體(Negribody)巨細(xì)胞病毒包涵體病毒數(shù)量和感染性測(cè)定1、蝕斑試驗(yàn)2、ID50
或TCID50
病毒感染雞胚、動(dòng)物或細(xì)胞后,引起50%發(fā)生死亡或病變的最小量。
病毒感染單層細(xì)胞后,產(chǎn)生的局限性病灶,稱蝕斑,蝕斑是由一個(gè)感染性病毒體復(fù)制形成的,稱蝕斑形成單位,病毒懸液中的感染性病毒量以每毫升的蝕斑形成單位PFU來表示。病毒的增殖活細(xì)胞敏感細(xì)胞復(fù)制(replication)病毒復(fù)制周期病毒基因?yàn)槟0?,籍DNA多聚酶或RNA多聚酶等,使細(xì)胞轉(zhuǎn)為復(fù)制病毒的基因組,轉(zhuǎn)錄、轉(zhuǎn)譯出相應(yīng)的病毒蛋白,最終釋放出子代病毒。吸附和穿入adsorptionandpenetration脫殼uncoating生物合成biosynthesis組裝成熟與釋放assemblyandrelease病毒的復(fù)制過程病毒的復(fù)制過程ADSORPTIONbuddingHIV復(fù)制過程接觸→結(jié)合→特異性吸附(病毒配體位點(diǎn)與細(xì)胞膜特異受體結(jié)合)穿入AdsorptionandPenetration
融合---有包膜病毒胞飲---無包膜病毒HIV
influenzavirus
uncoatingBiosynthesis隱蔽期6大類型:雙鏈DNA病毒單鏈DNA病毒單正鏈RNA病毒單負(fù)鏈RNA病毒雙鏈RNA病毒逆轉(zhuǎn)錄病毒區(qū)域:DNA病毒核內(nèi)(除痘病毒)
RNA病毒胞質(zhì)(除流感病毒及部分副粘病毒)
assemblyandrelease
裝配(assembly)Thestageofreplicationduringwhichallthestructuralcomponentscometogetheratonesiteinthecellandthebasicstructureofthevirusparticleisformed.裝配(assembly)釋放(release)裂解(Disintegration):nakedviruscausethehostcelllysis出芽(Budding):envelopedviruses皰疹病毒的復(fù)制過程三、病毒增殖的細(xì)胞效應(yīng)干擾現(xiàn)象interference
當(dāng)兩種病毒同時(shí)感染同一細(xì)胞時(shí),可發(fā)生一種病毒的增殖抑制了另一種病毒增殖的現(xiàn)象。產(chǎn)生原因
——干擾素interferon,IFN——第一種病毒改變了細(xì)胞表面受體結(jié)構(gòu)或細(xì)胞代謝途徑;或抑制第二種病毒mRNA的轉(zhuǎn)譯四、病毒的異常增殖
缺陷病毒(defectivevirus
):基因組不完整的病毒體缺陷干擾顆粒(defectiveinterferingparticles,DIP)
缺陷病毒不能復(fù)制,但卻能干擾同種成熟病毒體進(jìn)入細(xì)胞。天然缺陷病毒腺病毒伴隨病毒
頓挫感染(流產(chǎn)性感染)(abortiveinfection):細(xì)胞條件不合適,病毒進(jìn)入細(xì)胞但不能復(fù)制容許性細(xì)胞非容許性細(xì)胞第四節(jié)病毒的遺傳與變異傳統(tǒng)遺傳學(xué)分子遺傳學(xué)突變株mutant溫度敏感突變株(temperaturesensitive,ts)
28~35℃可以復(fù)制,37~40℃不能復(fù)制脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗宿主范圍突變株,抗原性突變株等變異株variant
突變株能穩(wěn)定地存在,可在相應(yīng)的宿主或細(xì)胞中傳代與存活。重組與重配(基因間相互作用)重組recombination重配reassortment基因復(fù)活交叉復(fù)活多重復(fù)活表型混合(基因產(chǎn)物間相互作用)兩株病毒混合感染時(shí),裝配過程發(fā)生錯(cuò)誤形成主要表現(xiàn)為耐藥性,抗原性等改變,基因并未改變,改變的生物學(xué)性狀不能遺傳virusAvirusBphenotypemixingvirusAvirusB分子遺傳學(xué)病毒基因組分析病毒保護(hù)性表位的確定病毒抗原高變區(qū)分析毒力相關(guān)基因編碼區(qū)分析耐藥性變異分析作用于病毒蛋白質(zhì)的某些細(xì)胞蛋白的研究第五節(jié)病毒的分類
(ClassificationofViruses)分類原則
BasisofClassification核酸類型和結(jié)構(gòu)(RNA/DNA,ds/ss,linear/circular,fragment/no-fragment))病毒體形狀和大小病毒體形態(tài)結(jié)構(gòu)對(duì)脂溶劑敏感性DNA病毒RNA病毒DNA和RNA逆轉(zhuǎn)錄病毒DNAvirusesdsDNA,Presenceofanenvelope
Poxviridae(痘病毒科)dsDNA,Presenceofanenvelope
Herpesviridae(皰疹病毒科)dsDNA,absenceofanenvelope
Adenoviridae(腺病毒科)
Paproavairidae(乳多空病毒科)ssDNA,absenceofanenvelope
Paraoviridae(細(xì)小病毒科)
dsRNA,fragments,absenceenvelope
Reoviridae(呼腸病毒科)
Birnaviridae(雙RNA病毒科)-ssRNA,nofragment,Presenceenvelope
Paramyxoviridae(副粘病毒科)
Rhabdoviridae(彈狀病毒科)-ssRNA,fragments,Presenceenvelope
Orthomyxoviridae(正粘病毒科)
Bunyaviridae(布尼亞病毒科)
Arenaviridae(沙粒病毒科)+ssRNA,nofragments,absenceenvelope
Picornaviridae(小RNA病毒科)
Caliciviridae(杯狀病毒科)
Astroviridae(星狀病毒科)+ssRNA,nofragments,presenceenvelope
Coronaviridae(冠狀病毒科)
Flaviviridae(黃病毒科)Togaviridae
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