動物繁殖學(xué)：生殖激素的測定

生殖激素第8講生殖激素的測定生物測定法免疫測定法受體測定法其它理化測定法生物測定法（bioassay）主要根據(jù)生殖激素的生物學(xué)作用而設(shè)計的方法，是研究某種新的激素及其制劑最基本的檢測手段。該方法雖然靈敏度不高，但其結(jié)果能直接體現(xiàn)生殖激素的生物學(xué)活性，因此是其他任何方法都不可替代的方法。一、生物測定法生殖激素生殖激素

常規(guī)生物測定法

按一定比例稀釋，注射到某種實驗動物體內(nèi)，觀察靶器官的反應(yīng)。能使實驗動物產(chǎn)生生物學(xué)效應(yīng)的最低激素用量，規(guī)定為一個生物學(xué)單位。子宮增重反應(yīng)適于雌激素測定

雞冠發(fā)育反應(yīng)適于雄激素測定

卵巢增重反應(yīng)適于PMSG測定一、生物測定法生殖激素

微量生物測定法(細(xì)胞培養(yǎng)生物測定法)在添加待測激素條件下，體外培養(yǎng)待測激素的靶細(xì)胞，測定激素作用后靶細(xì)胞的分泌物含量，可以間接計算激素的生物活性。生殖激素測定條件靶細(xì)胞可以分泌某種可以測定的物質(zhì)。測定靶細(xì)胞分泌物的方法靈敏度高，操作簡便、快速，一般為RIA或ELISA法。激素作用的靶細(xì)胞容易分離，而且分離培養(yǎng)后在一定時期內(nèi)具有分泌功能。

生殖激素二、免疫測定法

用同位素、酶、熒光素或化學(xué)發(fā)光物質(zhì)標(biāo)記抗原（半抗原）/抗體，通過檢測免疫反應(yīng)產(chǎn)物中結(jié)合（即抗原或半抗原-抗體結(jié)合物）物的活性，間接計算激素含量。放射免疫測定技術(shù)（radio-immunoassay，RIA）酶免疫測定技術(shù)（enzymeimmunoassay，EIA）熒光免疫測定技術(shù)（fluorescenceimmunoassay，F(xiàn)IA）結(jié)合相游離相RIA洗滌洗滌A.抗原吸附EB.加酶標(biāo)抗體EC.加底物顯色直接法EIA間接法EIA夾心法EIA競爭法EIA生殖激素三、受體測定法激素與其靶細(xì)胞上的受體特異性結(jié)合的親和力很高，因此可用激素的受體代替免疫測定方法中的抗體對激素進(jìn)行測定。與免疫測定法相比，用受體測定法得到的結(jié)果更接近于生物測定，因為激素只有與其受體結(jié)合后，才能表現(xiàn)其生物學(xué)活性。生殖激素四、其他理化測定方法早期用有機(jī)溶劑將待測物進(jìn)行提取和純化，然后將激素分子中某些特定基團(tuán)與化學(xué)試劑進(jìn)行顏色反應(yīng)，利用分光光度法測定激素含量。該法靈敏度較低，只能檢出mg/ml水平的樣本。色譜法：激素的定量測定、提取與純化。靈敏度較低（約達(dá)

g/ml水平），操作繁鎖，所以一般用于大規(guī)模提取或人工合成激素的檢測，如激素生產(chǎn)廠家的質(zhì)量控制。電泳法：蛋白質(zhì)、肽類等可在惰性支持介質(zhì)中，在電場的作用下，向其對應(yīng)的電極方向泳動，使組分分離成狹窄的區(qū)帶，用適宜的檢測方法記錄其電泳區(qū)帶圖譜或計算其含量（%）的方法，還可用于測定蛋白質(zhì)激素的分子量。生殖激素雌性動物生殖激素生殖激素雄性動物生殖激素中樞神經(jīng)遞質(zhì)（內(nèi)源性阿片肽、兒茶酚胺、5-羥色胺等）內(nèi)皮素：血管收縮、類固醇激素（黃體）瘦素：白色脂肪細(xì)胞、胎盤促生長因子（IGFs,EGF,TGF,PAF,IL,IFN）生殖激素生殖激素本單元小結(jié)重點各種生殖激素的化學(xué)特性、生理作用及其應(yīng)用難點激素分泌的調(diào)節(jié)及激素間的相互關(guān)系生殖激素思考題生殖激素的作用特點是什么？GnRH的生理作用是什么？其分泌受到哪些因素的調(diào)節(jié)？在動物生產(chǎn)中有何具體應(yīng)用？促性腺激素有哪些？其